一种用于神经干细胞原代培养前胎脑组织的切碎装置的制作方法

本实用新型属于一种实验设备，具体的是一种分离切碎细胞组织的切碎装置。

背景技术：

神经干细胞(neuralstemcell，NSCs)是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞，它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。目前国内用于临床研究的神经干细胞来源主要是胚胎组织的神经干细胞，其标本采集的主要来源是胚胎脑组织。

用于培养的原代神经干细胞要先将胎脑组织制备成一定浓度的单细胞悬液。首先分离出要培养的胎脑组织，将其剥离冲洗干净；然后将该组织放置在培养皿中，用眼科剪反复剪，直至所剥离切下的组织变成1mm³的小组织块；接着将剪碎的小组织块用适当孔径的细胞筛过滤，得到单细胞悬液；最后离心重悬计数，将该细胞调整到所需浓度。此外，在剪碎过程中为保持神经干细胞的活性，会在培养皿中创造生理盐水或培养基等适合此类细胞不失活的液体环境。神经干单细胞悬液的制备影响原代细胞的质量，决定神经干细胞经原代、传代培养是否能生长到理想的状态。原代神经干细胞的培养对接种到培养瓶上的原代细胞密度有严格要求，为更多的获得神经干细胞，不仅需要一个合适的培养条件，也需要更多的制备原代细胞。适宜神经干细胞培养的孕期胚胎脑组织体积较小，这对处理原代细胞造成很大难度。

目前技术缺陷：目前广泛使用的处理胎脑组织方法是剪刀手动剪碎，将待培养的胎脑组织剪碎为1mm³大小的组织块，用细胞筛过滤成单细胞悬液。但以上操作过程全部需要手动反复剪切，需要很长的一段时间才能处理好胎脑组织，这样极易造成原代细胞活性的下降，长时间暴露的剪切环境，容易使细胞收到污染。此外，胎脑组织中用于原代培养的组织体积小，虽然脑组织比较松散，无结缔组织易被剪碎，但在液体中剪切，目标浮动不好控制，眼科剪剪切显得难以把握，尤其是组织越剪体积越小，眼科剪越不好控制，剪碎的程度越低。另外，剪碎后再收集细胞过筛也相对繁琐。本发明针对上述两点，设计了一款可以不用眼科剪反复剪的装置，且使组织更充分更容易被切碎的装置，大大提高了神经干原代细胞的数量和质量，过程中组织块不用长时间暴露，减少被污染几率。

技术实现要素：

本实用新型的目的是为了解决上述问题，提出一种用于神经干细胞原代培养前胎脑组织的切碎装置。

本实用新型的目的是通过以下技术方案来实现的：用于神经干细胞原代培养前胎脑组织的切碎装置，其特征在于：设有离心管，所述离心管在管口处的侧壁上设有第一排气管，所述第一排气管内装有第一排气管塞，所述离心管在管口上装有一细胞筛，所述细胞筛上装有一收集管，所述收集管在管口处的侧壁上设有第二排气管，所述第二排气管内装有第二排气管塞，所述收集管上装有一切割管，所述切割管在管底设有一层网格刀，所述切割管内可装入一推动研碎杆，所述推动研碎杆可与网格刀配合切割细胞组织。

所述推动研碎杆在底部的弧度与网格刀的弧度保持一致。

所述网格刀采用不锈钢刀片制备的网格刀，网格刀上的网格有效孔径 1mm左右，刀片宽度1mm左右。

所述细胞筛为100目细胞筛。

本实用新型可以不用眼科剪反复剪的装置，且使组织更充分更容易被切碎的装置，大大提高了神经干原代细胞的数量和质量，过程中组织块不用长时间暴露，减少被污染几率；本发明网格刀为不锈钢刀片，圆弧状，增大了被切割组织与刀片的接触面积；本发明的刀片宽度为1mm左右，可减少堵塞的发生；本发明中刀片网格有效孔径1mm左右，可确保经反复切割得到的小组织块符合1mm³的要求；本发明中刀网两端均有利刃，可实现双面切割；本发明中的推进装置头部同时具备研碎功能；本发明整体除细胞筛和排气管塞部分均为不锈钢材质，可灭菌反复使用；本发明可依据所处理组织的大小设计分别与多种离心管孔径一致的多套方案；本发明中设有两个排气管，可通过两个排气管口的开关控制液体流动；胎脑组织处于密闭状态下切割，避免组织长时间暴露下剪切，不易污染。

附图说明

图1是本实用新型的整体分解结构示意图；

图2是本实用新型的整体使用结构示意图；

图3是本实用新型的切割管的底部结构图；

图4是本实用新型的网格刀结构图；

图5是本实用新型的第一、第二排气管结构图；

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步的说明：

实施例：参见附图1、2、3、4、5，用于神经干细胞原代培养前胎脑组织的切碎装置，设有离心管8，所述离心管在管口处的侧壁上设有第一排气管10，所述第一排气管内装有第一排气管塞9，所述离心管在管口上装有一细胞筛7，所述细胞筛上装有一收集管6，所述收集管在管口处的侧壁上设有第二排气管5，所述第二排气管内装有第二排气管塞4，所述收集管上装有一切割管2，所述切割管在管底设有一层网格刀3，所述切割管内可装入一推动研碎杆1，所述推动研碎杆可与网格刀配合切割细胞组织；所述推动研碎杆在底部的弧度与网格刀的弧度保持一致；所述网格刀采用不锈钢刀片制备的网格刀，网格刀上的网格有效孔径1mm左右，刀片宽度1mm左右；所述细胞筛为100目细胞筛。

使用方法以海马组织为例：使用前先将整个装置各部分密闭连接好，装置，打开4，取下1，然后将洗净分离好的海马组织及其所需液体倒入2中，随后用1向下推压，使组织通过3，被切碎的组织块和液体进入6；此时关闭4，倒拿整个装置，打开9，拉1，使液体可组织块再次通过3，进入2，此时关闭9。一次推拉回合，可使海马组织被两次切割。如此，通过反复推拉1，直至绝大多数海马组织被切成符合要求的小组织块悬液，将悬液收集在6中。打开9，拉1，让2充进一部分空气，关闭4，推1，借助2中空气的推力，使悬液通过7过滤，液体流入8中。最后7上会留有一层小组织块，拆下2，用1研磨7上的剩余小组织，直至最大程度利用，吸取适量液体冲洗7，8中收集到的即为单细胞悬液。

最后应说明的是：显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明本实用新型所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本实用新型的保护范围之中。