选择性孕酮受体调节剂(SPRM)(11.β.,17.β.)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮的前药的制作方法

背景选择性孕酮受体调节剂(sprm)如ep0057115a3中的ru486/米非司酮在1982年首次已知，并且自那时以来已经多次描述。ru486/米非司酮对妊娠早期中的蜕膜和绒毛组织中的前列腺素e及其代谢物的免疫组织化学分布的影响由cheng,l等人在jclinendocrinolmetab,1993;77:873-877中进行了研究。阿索立尼(j867)被鉴定为可用于妇科治疗的选择性孕酮受体调节剂(sprm)；见deborahdemanno等人(steroids68(2003)1019–1032)。本文提供的数据证明阿索立尼及其主要代谢物j912在各种动物模型中表现出部分激动剂/拮抗剂作用。阿索立尼(j867)的孕酮结合亲和力为约299％相对摩尔结合亲和力(rba)，而j912显示约165％rba的孕酮结合亲和力。其它氟化的17α-侧链孕酮受体拮抗剂类固醇发表于wo98/034947和fuhrmann等人,j.med.chem.43,5010–5016(2000)。在种马睾丸中的5(10)-雌甾烯(estrene)-3α,17β-二醇的生物转化在dumasia等人(第631次会议,guildford,第17卷,1989,第1019-1020页)中进行了讨论。概述选择性孕酮受体调节剂(sprm)描述于wo2011/009531a1中，用于预防或治疗疾病诸如妇科疾病和用于节育和紧急事后避孕。本发明现在涉及如wo2011/009531a1中公开并包括在本文中的选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药。令人惊讶地发现，如下公开的化合物1是如wo2011/009531a1中所述的sprm中的一种的有效的前药。该前药可用于预防或治疗诸如妇科疾病的疾病。本发明涉及用于预防或治疗妇科疾病的备择方法，其中活性成分是前药在体内中代谢后获得的。描述在第一方面，本发明涉及选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药。在另一个实施方案中，本发明涉及前药，其中选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如wo2011/009531a1中公开并包括在本文中的化合物中的一种。更优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)或其药学上可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明涉及前药，其中所述前药是孕酮衍生物并且前提条件是所述孕酮衍生物不是在所述孕酮衍生物的11-苯基或11-联苯处被烷基亚氨基亚磺酰基(alkylsulphonimidoyl)基团取代的化合物。优选地，所述烷基亚氨基亚磺酰基基团是在11-苯基环或11-联苯的4位处。烷基是c1-c6烷基。优选地，烷基是甲基。优选地，所述孕酮衍生物在17位被羟基和五氟乙基取代。更优选地，所述前药不是下述化合物具有下述式的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(rs-甲基亚氨基亚磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物3)和/或(11β,17β)-17-羟基-11-[4'-(rs-甲基亚氨基亚磺酰基)联苯-4-基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物4)或其药学上可接受的盐。甚至更优选地，所述前药不是化合物3。在一个优选的实施方案中，本发明涉及选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药，其中-所述sprm选自如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)或其药学上可接受的盐和/或-所述前药选自如下所述的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)或其药学上可接受的盐。因此，(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)是作为如wo2011/009531a1中所述的sprm的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)的前药。在第二方面，本发明涉及用于获得选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药的方法。优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如wo2011/009531a1中公开并且包括在本文中的化合物中的一种。更优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)或其药学上可接受的盐。在一个优选的实施方案中，本发明涉及用于获得选择性孕酮受体调节剂(sprm)的本发明前药的方法其中-所述sprm选自如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)或其药学上可接受的盐和/或-所述前药选自如下所述的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)或其药学上可接受的盐。换言之，本发明涉及用于获得(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)的方法，其包括还原步骤，其中(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)在还原剂存在下反应。还原步骤在还原剂存在下完成。还原剂在本领域中是众所周知的。优选地，还原剂选自硼氢化钠、氢化铝锂(lialh4)、硼氢化锂(libh4)、二异丁基氢化铝((i-bu)2alh)。更优选地，还原剂是硼氢化钠。在另一个实施方案中，本发明涉及用于获得选择性孕酮受体调节剂(sprm)的本发明前药的方法，其包括由醛-酮还原酶(akr)酶催化的生化反应。该反应在体外或体内进行，优选在体外进行。所述方法适用于如上所述的所有本发明前药。在第三方面，本发明涉及选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药，其可用作用于治疗和/或预防妇科疾病或用于节育和紧急事后避孕的治疗药物。优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如wo2011/009531a1中公开并且包括在本文中的化合物中的一种。更优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)或其药学上可接受的盐。在一个优选的实施方案中，本发明涉及选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药其中-所述sprm选自如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)或其药学上可接受的盐和/或-所述前药选自如下所述的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)或其药学上可接受的盐其可用作用于治疗和/或预防妇科疾病或用于节育和紧急事后避孕的治疗药物。因此，本发明涉及前药(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)，其可用作用于治疗和/或预防妇科疾病或用于节育和紧急事后避孕的治疗药物。优选地，所述妇科疾病选自子宫纤维瘤、子宫内膜异位症和激素依赖性乳腺癌。更优选地，所述妇科疾病选自子宫纤维瘤或子宫内膜异位症。甚至更优选地，所述妇科疾病是子宫纤维瘤。甚至更优选地，所述妇科疾病是子宫内膜异位症。换言之，本发明涉及(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)作为前药的用途。更优选地，所述妇科疾病选自子宫纤维瘤和子宫内膜异位症及其症状。与子宫纤维瘤相关的最常见症状是骨盆疼痛、不孕症、月经过多(hmb)和在月经期之间的出血或点滴出血。优选地，治疗的症状是月经过多(hmb)。与子宫内膜异位症相关的最常见症状是骨盆疼痛和痛经(即月经期间的过度疼痛)、性交困难(即性交疼痛)和不孕症。优选地，治疗的症状是痛经。本发明前药在十二(12)周至最多二十四(24)周的时期期间施用给患者，然后是中断时期，其中停止化合物1的施用，直至发生一(1)或两(2)次经血事件；任选地，施用和中断时期重复至少一(1)次。按需要重复治疗，如两(2)至四(4)次。如果在治疗中断后没有发生经血事件，那么在对应于两(2)次经血事件之间的标准时间的中断时期(21-45天)之后，由于症状的恢复或被肯定地诊断的疾病的缘故而根据需要重新开始治疗。经血事件是至少一天的经血。将本发明前药每日施用给患者，剂量为每单位剂量约0.5至10mg，优选每单位剂量0.5至5mg。本发明前药如上所述。在第四方面，本发明涉及药物组合物，其包含选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药和药学上可接受的赋形剂或载体。优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如wo2011/009531a1中公开并且包括在本文中的化合物中的一种。更优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)，或其药学上可接受的盐。优选地，所述药物组合物包含前药，其选自如下所述的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)或其药学上可接受的盐。所述药物组合物包含剂量为每单位剂量约0.5至10mg，优选每单位剂量0.5至5mg的本发明前药。在另一个实施方案中，所述药物组合物包含任选与药学上可接受的赋形剂或载体混合的本发明前药。本发明前药如上所述。药学上可接受的赋形剂包括载体、溶剂或稳定剂。本领域技术人员熟悉基于他/她的专业知识而适合于所需的药物制剂、制品或组合物的赋形剂。根据本发明的化合物、药物组合物的施用以本领域可获得的任何普遍接受的施用方式(静脉内、口服、胃肠外、肺、鼻、舌下、舌、含服、直肠、阴道途径或如植入物或支架等)进行。口服递送是优选的。药物组合物可用于通过给需要其的患者施用而达到所需的药理学效果。出于本发明的目的，患者是哺乳动物，优选人。优选地，患者是妇女。在第五方面，本发明涉及选择性孕酮受体调节剂(sprm)的前药在制备用于治疗和/或预防妇科疾病或用于节育和紧急事后避孕的治疗药物中的用途。优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如wo2011/009531a1中公开并且包括在本文中的化合物中的一种。更优选地，选择性孕酮受体调节剂(sprm)是如下所述的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)或其药学上可接受的盐。本发明前药如上所述。优选地，所述前药选自如下所述的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)或其药学上可接受的盐。在一个优选的实施方案中，本发明涉及(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)在制备用于治疗和/或预防妇科疾病或用于节育和紧急事后避孕的治疗药物中的用途。优选地，所述妇科疾病选自子宫纤维瘤、子宫内膜异位症和激素依赖性乳腺癌。更优选地，所述妇科疾病选自子宫纤维瘤或子宫内膜异位症。甚至更优选地，所述妇科疾病是子宫纤维瘤。甚至更优选地，所述妇科疾病是子宫内膜异位症。换言之，本发明涉及用于预防或治疗疾病的方法，其包括以下步骤：-给哺乳动物施用有效量的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)。优选地，将所述前药施用给需要治疗的患者，其中所述前药的施用量引起治疗和/或预防妇科疾病，优选子宫纤维瘤、子宫内膜异位症或激素依赖性乳腺癌或用于节育和紧急事后避孕。优选地，所述妇科疾病选自子宫纤维瘤或子宫内膜异位症。在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的本发明前药，其用于治疗和/或作为预防。在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的本发明前药，其用于治疗和/或预防妇科疾病及其症状或用于节育和紧急事后避孕。优选地，所述妇科疾病选自子宫纤维瘤和子宫内膜异位症及其症状。与子宫纤维瘤相关的最常见症状是骨盆疼痛、不孕症、月经过多(hmb)和在月经期之间的出血或点滴出血。优选地，治疗的症状是月经过多(hmb)。与子宫内膜异位症相关的最常见症状是骨盆疼痛和痛经(即月经期间的过度疼痛)、性交困难(即性交疼痛)和不孕症。优选地，治疗的症状是痛经。本发明前药在十二(12)周至最多二十四(24)周的时期期间施用给患者，然后是中断时期，其中停止化合物1的施用，直至发生一(1)或两(2)次经血事件；任选地，施用和中断时期重复至少一(1)次。按需要重复治疗，如两(2)至四(4)次。如果在治疗中断后没有发生经血事件，那么在对应于两(2)次经血事件之间的标准时间的中断时期(21-45天)之后，由于症状的恢复或被肯定地诊断的疾病的缘故而根据需要重新开始治疗。经血事件是至少一天的经血。将本发明前药每日施用给患者，剂量为每单位剂量约0.5至10mg，优选每单位剂量0.5至5mg。本发明前药如上所述。在第六方面，本发明涉及用于活化如上定义的本发明前药的前药活化剂，其中所述前药活化剂是分离的细胞色素p450，优选所述分离的细胞色素p450是cyp3a4。活化是指将前药转化为活性选择性孕酮受体调节剂(sprm)，其用于治疗遭受选自子宫纤维瘤和子宫内膜异位症及其症状的妇科疾病的患者或用于实现节育和紧急事后避孕。在另一个实施方案中，本发明涉及前药活化剂，其与如上定义的本发明前药组合用于治疗和/或作为预防（如上定义的）。在第七方面，本发明涉及药物组合物，其包含-如上定义的前药活化剂，-如上定义的前药和-任选地与药学上可接受的赋形剂或载体混合。在第八方面，本发明涉及通过使所述前药与所述前药活化剂接触来活化如上定义的前药的方法。所述前药与所述前药活化剂的接触在体内或体外发生，优选在体外发生。本发明前药如上所述。定义:前药是经历酶促修饰产生生物活性药物的化学实体。实际上，化学实体在体内代谢成活性形式。前药技术是将药物作用靶向特定细胞和组织，从而降低对非靶细胞的毒性或副作用的重要策略。n.bodor等人,22ann.rep.med.chem.303-313(1987);t.krenitsky等人,81p.n.a.s.usa3209-3213(1984);j.hjelle等人,229j.pharmacol.exp.ther.372-380(1984);s.magnan等人,25j.med.chem.1018-1021(1982);m.orlowski等人,212j.pharmacol.exp.ther.167-172(1980)。前药是无活性或部分活性的化合物，其在摄入前药后通过人体或动物体内的代谢过程变得具有治疗活性。前药的活化也可以在体外发生。前药可以是载体连接的前药和生物前体。载体连接的前药由活性分子与转运基团的暂时连接产生。与母体活性药物相比，这种前药的活性较低或无活性。选择转运基团是因为其无毒性和其确保以有效动力学释放活性成分的能力。而生物前体是由活性成分本身的分子修饰（产生新分子）产生的，该新分子能够作为代谢酶的底物释放作为代谢物的活性成分。术语还原剂是指将电子给予另一物质的化合物。常用的还原剂包括金属钾、钙、钡、钠和镁，以及含有h-离子的化合物，即nah、lih、lialh4和cah2。硼氢化钠(nabh4)是优选的还原剂。术语“妇科疾病”是指选自包括子宫纤维瘤、子宫内膜异位症、过度出血、异常出血和功能异常性出血或这些疾病中的一种或多种的组合的组的雌激素依赖性病症。纤维瘤是良性非癌性肿瘤，其源自平滑肌层、子宫肌层和子宫的伴随结缔组织。子宫纤维瘤也称为肌瘤、子宫肥大、子宫平滑肌瘤、平滑肌瘤、肌瘤、纤维肌瘤、平滑纤维肌瘤、纤维平滑肌瘤、纤维瘤、子宫肌层肥大、子宫纤维变性和纤维化性子宫炎。子宫纤维瘤的治疗应当减少或缩小纤维瘤的大小或清除患者的纤维瘤。子宫内膜异位症的特征在于子宫腔外存在子宫内膜样组织，最常见于腹膜腔。子宫内膜异位症几乎仅影响绝经前妇女，并且是一种非常普遍且严重诊断不足的病症。本发明包括药物组合物，其由药学上可接受的载体和药学有效量的本发明化合物或其盐组成。药学上可接受的载体优选是在与活性成分的有效活性相符的浓度下对患者而言相对无毒且无害的载体，使得可归因于载体的任何副作用不会损害活性成分的有益效果。化合物的药学有效量优选是对所治疗的特定病症产生结果或施加影响的量。活性成分可以溶解或悬浮在药学上可接受的液体载体例如水、有机溶剂、两者的混合物中。液体载体可以含有其它合适的药物添加剂，如增溶剂、乳化剂。对于口服固体剂型(例如，粉末、片剂和胶囊)，可以酌情使用载体如淀粉、糖、稀释剂、制粒剂、润滑剂、粘合剂。本发明前药可以掺入所述的施用形式中。这可以通过与药学上合适的赋形剂混合以本身已知的方式实现。药学上合适的赋形剂尤其包括：●填充剂和载体(例如纤维素、微晶纤维素(诸如，例如，avicel®)、乳糖、甘露醇、淀粉、磷酸钙(诸如，例如，di-cafos®)，●软膏基质(例如凡士林、石蜡、甘油三酯、蜡、羊毛蜡、羊毛蜡醇、羊毛脂、亲水性软膏、聚乙二醇)，●栓剂基质(例如聚乙二醇、可可脂、硬脂)，●溶剂(例如水、乙醇、异丙醇、甘油、丙二醇、中等链长甘油三酯脂肪油、液体聚乙二醇、石蜡)，●表面活性剂、乳化剂、分散剂或湿润剂(例如十二烷基硫酸钠)、卵磷脂、磷脂、脂肪醇(诸如，例如，lanette®)、脱水山梨糖醇脂肪酸酯(诸如，例如，span®)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯(诸如，例如，tween®)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯(诸如，例如，cremophor®)、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、甘油脂肪酸酯、泊洛沙姆(诸如，例如，pluronic®)。对于胃肠外施用，载体将通常包含无菌水，尽管也可以制备有助于溶解或用作防腐剂的其它成分，而在这种情况下，将使用适当的液体载体、助悬剂等。对于胃肠外施用，载体也可以是油性酯，诸如油酸乙酯。术语前药包括互变异构体、n-氧化物、水合物、溶剂合物或其药学上可接受的盐，或其混合物。wo2011/009531a1公开了式i的选择性孕酮受体调节剂(sprm)(本文所附)和如下公开的优选化合物：(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基硫烷基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-11-[4-(乙基硫烷基)苯基]-17-羟基-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-17-羟基-11-{4-[(rs)-甲基亚磺酰基]苯基}-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-11-[4-(乙基磺酰基)苯基]-17-羟基-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-11-[4-(苄基硫烷基)苯基]-17-羟基-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,n-[{4-[(11β,17β))-17-羟基-3-氧代-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-11-基]苯基}(rs)(甲基)氧代(oxido)-λ6-亚硫烷基(sulphanylidene)]-4-甲基苯磺酰胺,(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(rs-甲基亚氨基亚磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-17-羟基-11-[4'-(甲基硫烷基)联苯-4-基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-17-羟基-11-[4'-(甲基磺酰基)联苯-4-基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,n-[{4'-[(11β,17β)-17-羟基-3-氧代-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-11-基]联苯-4-基}(rs)(甲基)氧代-λ6-亚硫烷基]-4-甲基苯磺酰胺,(11β,17β)-17-羟基-11-[4'-(rs-甲基亚氨基亚磺酰基)联苯-4-基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,(11β,17β)-17-羟基-17-(五氟乙基)-11-(4'-硫烷基联苯-4-基)雌甾-4,9-二烯-3-酮,4'-[(11β,17β)-17-羟基-3-氧代-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-11-基]-n,n-二甲基联苯-4-磺酰胺,4-[(11β,17β)-17-羟基-3-氧代-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-11-基]-n,n-二甲基苯磺酰胺，其均通过引用并入本文。实验部分提供以下实施例以解释本发明而不以任何方式限制本发明。实施例1:(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)的合成(化合物1)mw:546.60g/mol;mf:c27h31f5o4s。a)原料的制备:(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(cas-no.1262108-14-4;化合物2)的制备描述于wo2011/009531和de102009034362中并且可以与其中包含的说明类似地进行。b)(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)的制备:将50g(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)溶解于500ml甲醇中。在搅拌下，在0–5℃分批加入3.5g(1当量)硼氢化钠。在5℃下约6小时的反应时间后，缓慢加入170ml水，搅拌所得混合物1小时并过滤。将滤饼在45℃下真空干燥16小时。中间产量：46.9g(化合物1和3-β异构体以~2:1比率的混合物)。将溶解于462ml二氯甲烷和76ml甲醇中的45.9g上述非对映异构体混合物在500gkromasildiol10mym/60a上用正己烷/乙酸乙酯(55:45v/v)以78次注射进行色谱分离(柱直径80mm，流速160ml/min,22℃+/-3℃)。分别收集所需的级分，净化并在真空中浓缩至干。将残余物在高真空下干燥。产量：25.9g(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟-乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)。ms(esi,负模式):591m/z(m–h++hcooh)1h-nmr(d6-dmso;500.13mhz):7.82ppm(d,2h,芳族(aromat.)),7.46ppm(d,2h,芳族),5.76ppm(s,1h,oh),5.42ppm(bs,1h,烯烃(olefin.)4-h),4.62ppm(d,1h,oh),4.48ppm(m,1h,苄基(benzyl.)h-11),4.08ppm(m,1h,h-3),3.18ppm(s,3h,ch3-so2-),2.58双(bis)1.15ppm(若干(several)m,16h),0.44ppm(s,3h,ch3)13c-nmr(d6-dmso;125.8mhz):152.28ppm(s,四重峰(quart.)),137.73ppm(s,四重峰),134.05ppm(s,四重峰),133.13ppm(s,四重峰),130.87ppm(s,四重峰),128.03ppm(s,ch),127.86ppm(s,ch),126.78ppm(s,ch),122–114ppm(复杂(complex)m,cf3-cf2-),83.21(t,四重峰,c-17),65.20ppm(s,ch,c-3),51.46ppm(d,ch),50.09ppm(s,四重峰,c-13),43.51ppm(s,ch3-so2-),39.48ppm(s,ch,c-11),38.63ppm(d,ch2),38.22ppm(s,ch),32.48ppm(s,ch2),32.28ppm(s,ch2),29.90ppm(s,ch2),28.35ppm(s,ch2),24.60ppm(s,ch2),23.74ppm(s,ch2),16.29ppm(s,ch3)。实施例2:雌性大鼠的流产测试这里报告的流产测试(=大鼠早期妊娠中的引起流产的活性)是孕酮对于哺乳动物子宫内妊娠的各个阶段的不受干扰的妊娠至关重要的前提。因此，具有孕酮拮抗活性的化合物通过阻断子宫内膜中的孕酮受体而发挥作用。这导致妊娠终止。研究设计和方法物种和品种:wistarhan大鼠性别和年龄:雌性，9–14周龄体重:180–200g饲养者:charlesriver,97633sulzfeld,germany供应者:charlesriver,97633sulzfeld,germany室温:20-22℃相对湿度:50-70%光照期:人工光;12小时白天(从06.00a.m.至06.00p.m.),12小时夜晚循环。维持条件:常规地安置在空调动物房内笼养:将动物饲养在makrolon®iv型笼中饲料类型:ssniff®，粒化的(pelleted)喂养时间:随意水类型:经由水瓶的自来水(tabwater)喂水时间:随意。在交配后于第d2天(=妊娠第2天，=d2p.c.)直接从动物供应商处交付大鼠。然后将动物随机分配至治疗组或对照组。从妊娠第5-7天起，动物每天一次口服接受测试化合物或媒介物。在尸检当天(d9)，用co²处死动物。用不同剂量的测试化合物(化合物1)进行研究。从妊娠第5-7天开始，一组中的6只动物在早晨每天一次口服接受相同剂量的化合物1。有4个治疗组(剂量为每天0.05、0.2、0.5、2.0、5.0和10.0mg/kg的化合物1)和仅媒介物组。如下分析孕酮拮抗活性：将植入位点的缺失评估为完全流产，将退化和/或出血植入位点(于是定义为病理性着床位点)的存在评估为不全流产。总流产率指示受流产事件(通过病理性植入位点或通过完全流产)影响的每组动物的百分比。结果:在以0.5mg/kg/天、1mg/kg/天、2mg/kg/天、5mg/kg/天和10mg/kg/天的剂量口服施用化合物1后，在所有动物中都已证实有流产事件(=总流产率：100％)。在0.2mg/kg/d时，在六只中仅有一只动物显示出病理性植入位点且5只动物未受影响。见表1。表1:口服(n=6只动物/组)施用后化合物1在终止大鼠早期妊娠中的pr拮抗活性。wo2011/009531报道了化合物2的类似的流产事件。实施例3:化合物1和2的血浆浓度和药代动力学参数研究设计和方法在与实施例2中所述相同的条件下，向大鼠施用三个单剂量的化合物1(0.2、1.0和5mg/kg/天)。在几个时间点(1、2、4、7和24h，在每个时间点n=3只动物)从大鼠取血样，以允许计算化合物1和化合物2在大鼠血浆中的auc(0-24)和cmax。将血浆样品储存在-15℃直至分析。在用含有化合物1和化合物2的内标的乙腈进行蛋白质沉淀后，测定血浆中的化合物1和2。通过使用高压液相色谱和串联质谱检测的分离来分析上清液。化合物1的定量下限(lloq)为1.00μg/l，线性范围在1.00和200μg/l之间。化合物2的定量下限(lloq)为0.200μg/l，线性范围在0.200和200μg/l之间。使用0.1ml血浆的样品体积。从研究质量控制样品计算的化合物1的精密度在0.97和3.73％之间，准确度在99.8和101.3％之间，化合物2的精密度在2.01和6.19％之间，准确度在92.3和96.6％之间。结果发现在给雌性大鼠单次口服施用化合物1后，大鼠血浆中化合物2的最大浓度分别为10.5μg/l(0.2mg/kg)、66μg/l(1.0mg/kg)和235μg/l(5.0mg/kg)。auc(0-24h)为90.6μg*h/l(0.2mg/kg)、435μg*h/l(1.0mg/kg)和2060μg*h/l(5.0mg/kg)。在大鼠血浆中仅检测到非常低的量的剩余的化合物1，其最大浓度分别为<1.00µg/l(0.2mg/kg)、3.36µg/l(1.0mg/kg)和12.9µg/kg(5.0mg/kg)。不能计算化合物1的auc(见表2)。这些结果指示大鼠中化合物1向化合物2的强烈代谢转化。因此，在当前测试模型中观察到的化合物1的效力归因于在大鼠中代谢形成的化合物2的孕酮受体拮抗活性。在将其给大鼠施用后观察到的化合物1的边缘暴露指示化合物1对在大鼠的流产测试中测量的效力具有可忽略的贡献。表2:。化合物1在大鼠中几乎完全转化为化合物2。实施例4:化合物1和2的孕酮受体(pr)反式激活测定化合物1:方法反式激活测定在稳定地转染了表达人pr-a(prchpr-a-neo)和报告基因(luc)(其与激素响应性启动子(mmtv)连接)的质粒的sk-n-mc细胞(人神经母细胞瘤细胞)中进行。使预先血清饥饿的细胞在不存在(阴性对照)或存在递增浓度的化合物1(5.1pmol/l、26pmol/l、0.13nmol/l;0.64nmol/l、3.2nmol/l、16nmol/l、80nmol/l、400nmol/l、2umol/l和10μmol/l)的情况下生长16小时，以确定激动活性。作为报告基因诱导的阳性对照，用合成的孕激素普美孕酮(10pmol/l、30pmol/l、91pmol/l、0.27nmol/l、0.82nmol/l、2.5nmol/l、7.4nmol/l、22nmol/l、67nmol/l、200nmol/l)处理细胞。为了测定拮抗活性，用0.1nmol/l的普美孕酮以及用递增浓度的化合物1(5.1pmol/l、26pmol/l、0.13nmol/l;0.64nmol/l、3.2nmol/l、16nmol/l、80nmol/l、400nmol/l、2umol/land10μmol/l)处理细胞。作为抑制报告基因转录的阳性对照，用递增浓度的抗孕素米非司酮(10pmol/l、30pmol/l、91pmol/l、0.27nmol/l、0.82nmol/l、2.5nmol/l、7.4nmol/l、22nmol/l、67nmol/l、200nmol/l)培养细胞。在细胞裂解物中测定luc活性(luc=荧光素酶)，并测量为rlu(相对光单位)。表3:。化合物2:方法描述于wo2011/009531中将sk-n-mc细胞(人神经母细胞瘤细胞)(其已经用表达人孕酮受体b(prchpr-b-neo)或人孕酮受体a(prchpr-a-neo)和报告基因构建体(pmmtv-luc)的质粒稳定地转染)在不存在(阴性对照)或存在递增量的各化合物2(0.01nmol/l、0.1nmol/l、1nmol/l、10nmol/l、100nmol/l和1µmol/l)的情况下温育24小时，以确定激动效力。作为报告基因诱导的阳性对照，用合成的促孕激素普美孕酮(0.01nmol/l、0.1nmol/l、1nmol/l、10nmol/l、100nmol/l和1µmol/l)处理细胞。为了测定拮抗活性，用0.1nmol/l普美孕酮以及递增量的各测试化合物(0.01nmol/l、0.1nmol/l、1nmol/l、10nmol/l、100nmol/l和1µmol/l)处理细胞。在细胞裂解物中测定luc报告基因(luc=荧光素酶)的活性，并测量为rlu(相对光单位)。表4:。结果:化合物2对两种pr同种型pr-a和pr-b都是非常强的拮抗剂，没有激动活性，pr-a的ic50为0.096nm。化合物1显示出比化合物2显著更低的拮抗活性。pr-a的ic50为5.3±1.43nm。实施例5:14c-标记的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)在人肝微粒体中的体外代谢将人肝微粒体与(3α,11β,17β)-11-[4-(14c-甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)温育。温育缓冲剂50mm焦磷酸钾(potassiumdiphosphate)(ph7.4)nadph生成系统1.2mmnadph8mm葡萄糖-6-磷酸38mmkcl5mmmgcl溶液100u/ml葡萄糖-6-磷酸脱氢酶温度37℃振摇水浴,90rpm底物来自储备溶液（0.1mm在乙腈中）的1µm(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇蛋白浓度0.5mg/ml测量时间0、0.25、0.5、0.75h温育体积250µl将含有缓冲剂、重构系统和微粒体蛋白的温育混合物在37℃下预温育3分钟。通过加入含有(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)的溶液开始温育。将样品在37℃下在连续操作的振摇水浴中温育。通过加入160μl乙腈终止温育反应。将终止的温育物在13000rpm(4℃)下离心10分钟，并在-18℃下储存，直至它们被随后分析。通过色谱法检查并通过辐射测定法和质谱法检测50μl上清液。作为该检查的结果，与温育开始前的样品(0小时)相比，在1小时温育后，观察到(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-,17-二醇(化合物1)的比例的显著降低。在1小时后已经在温育样品中形成大量的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)。通过质谱参数(精确分子量[m-h]=543.162847，m/z543的ms/ms片段：527、487、466、448、376、349、315、236、163)和在放射色谱图以及在质谱图中的保留时间在样品中鉴定出这一点。这些参数对应于合成产生的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)的那些。见图1。图1:在人肝微粒体中温育化合物1后化合物2和化合物1的浓度-时间过程。实施例6:化合物3(wo2011/009531a2实施例8–亚砜酰亚胺(sulfoximine))及其提议的代谢物化合物2的血浆浓度，研究设计和方法在与实施例3中所述相同的条件下，将化合物3(5mg/kg/天)以5mg/kg的剂量施用给雌性大鼠。在几个时间点(0.5、1、3、6h,在每个时间点n=3只动物)从大鼠取血样，以允许计算大鼠血浆中的化合物3和化合物2的auc(0-inf)。将血浆样品储存在-15℃直至分析。在用含有化合物3和化合物2的内标的乙腈进行蛋白质沉淀后，在血浆中测定化合物3和化合物2。通过使用高压液相色谱和串联质谱检测的分离来分析上清液。auc(0-inf)表示在从0到无穷大的血浆浓度对时间曲线(0-inf)下的面积。结果发现在向雌性大鼠单次口服施用5mg/kg化合物3后，以化合物3在大鼠血浆中的auc(0-inf)表示的暴露为1235µg*h/l。发现在向雌性大鼠单次口服施用5mg/kg化合物3后，以化合物2在大鼠血浆中的auc(0-inf)表示的暴露为586µg*h/l(见表5)。这些结果指示在大鼠中化合物3代谢转化为化合物2。因此，化合物3的效力可部分归因于在大鼠中代谢形成的化合物2的孕酮受体拮抗活性。表5:。表5显示化合物3在大鼠中部分地转化为化合物2。实施例7:14c-标记的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)在重组人cyp3a4酶中的体外代谢将重组人cyp3a4与(3α,11β,17β)-11-[4-(14c-甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)温育。温育缓冲剂50mm焦磷酸钾(ph7.4)nadph生成系统1.2mmnadph8mm葡萄糖-6-磷酸38mmkcl5mmmgcl溶液100u/ml葡萄糖-6-磷酸脱氢酶温度37℃振摇水浴底物来自储备溶液（0.1mm在乙腈中）的1µm(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇蛋白浓度100pmol/ml测量时间0、0.5、2h温育体积400µl。制备含有缓冲剂、重构系统和cyp3a4蛋白的温育混合物并将其加入37℃振摇水浴。通过加入含有(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3,17-二醇(化合物1)的溶液开始温育。将样品在37℃下在连续操作的摇动水浴中温育。在温育时间后除去200μl温育混合物，并通过在冰浴上加入120μl乙腈终止反应。将终止的温育物在12000rpm(7℃)下离心10分钟。在从蛋白质沉淀中除去上清液后，将上清液储存在-20℃直至它们被随后分析。通过色谱法检查并通过辐射测定法和质谱法检测50μl上清液。作为该检查的结果，与温育开始前的样品(0小时)相比，在0.5和2小时温育后，观察到(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-,17-二醇(化合物1)的比例的显著降低。在30小时后已经在温育样品中形成大量的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)。通过质谱参数(精确分子量[m-h]=543.162847,m/z543的ms/ms片段：527、487、466、448、376、349、315、236、163)和在放射色谱图以及在质谱图中的保留时间在样品中鉴定出这一点。这些参数对应于合成产生的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)的那些。此外，在120分钟温育后，化合物2的量显著减少，并形成其氧化和还原产物的复杂图案。该结果指示从化合物1形成化合物2主要由cyp3a4酶催化。表6:rhcyp3a4酶对化合物1的体外代谢(温育样品中的化合物1和化合物2的14c-放射性的%)与rhcyp3a4的温育时间[h]化合物1(%)化合物2(%)鉴定的化合物1的其它代谢物(%)0829.15.50.552361322.71681实施例8:在有和没有共同施用的伊曲康唑的情况下化合物1在人中的血浆浓度，研究设计和方法将化合物2作为4mg的单次口服剂量施用给14名健康的绝经后妇女。此后，在14天内向同样的14名对象施用200mg每日口服剂量的伊曲康唑(cyp3a4的强抑制剂)。将化合物2作为4mg的单次口服剂量与第4剂量的伊曲康唑一起再次施用给相同的14名对象。在有和没有与伊曲康唑的联合给药的情况下，在人血浆中测定化合物2以及化合物1的药代动力学曲线。将血浆样品储存在-80℃直至分析。在用含有化合物1和化合物2的内标的乙腈进行蛋白质沉淀后，在人血浆中测定化合物1和化合物2。通过使用高压液相色谱和串联质谱检测的分离来分析上清液。结果发现在向妇女单次口服施用4mg化合物2后，以人血浆中的化合物1的auc(0-inf)表示的暴露为18.7µg*h/l(无联合给药)和409µg*h/l（在与伊曲康唑联合给药后）。数据指示，在已知作为cyp3a4活性的强抑制剂的伊曲康唑的存在下，化合物1在人中的暴露强烈增加。结果指示从化合物1开始的化合物2的形成主要由cyp3a4酶催化。表7:。实施例9:14c-标记的(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)在人肝细胞溶质中的体外代谢将人肝细胞溶质与(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)温育。温育缓冲剂50mm焦磷酸钾(ph7.4)nadph生成系统1.2mmnadph8mm葡萄糖-6-磷酸38mmkcl5mmmgcl溶液100u/ml葡萄糖-6-磷酸脱氢酶温度37℃振摇水浴,90rpm底物来自储备溶液（0.1mm在乙腈中）的10μm(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮蛋白浓度1.0mg/ml测量时间0、1和4h温育体积1000μl。将含有缓冲剂、重构系统和细胞溶质蛋白的温育混合物在37℃下预温育3分钟。通过加入含有(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)的溶液开始温育。将样品在37℃下在连续操作的振摇水浴中温育。通过加入100μl乙腈终止250μl温育混合物。将终止的温育物在13000rpm(4℃)下离心10分钟，并在-18℃下储存，直至它们被随后分析。通过色谱法检查并通过辐射测定法和质谱法检测50μl上清液。作为该检查的结果，与温育开始前的样品(0小时)相比，在1和4小时温育时间后，观察到(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物2)的比例的显著降低。在1和4小时后已经在温育样品中形成大量的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)-雌甾-4,9-二烯-,17-二醇(化合物1)。通过质谱参数(精确分子量[m-h]=545.1801,m/z545的ms/ms片段：527、463、407)和在放射色谱图以及在质谱图中的保留时间在样品中鉴定出这一点。这些参数对应于合成产生的(3α,11β,17β)-11-[4-(甲基磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)-雌甾-4,9-二烯-,17-二醇(化合物1)的那些。见图2。在不存在nadph生成系统以及在存在nad辅因子的情况下，未检测到在肝细胞溶质中化合物2与向化合物1的转换。图2:在人肝细胞溶质级分中温育化合物2后化合物1和化合物2的浓度-时间过程。在具有nadph的人肝细胞溶质级分中，化合物2的主要代谢途径是形成初级还原产物化合物1(3-α-羟基衍生物)。这些数据指示，化合物1的形成由细胞溶质的醛-酮还原酶(akr)催化，因为这些akr位于人肝细胞的细胞溶质级分中并以nadph依赖性方式起作用。实施例10:(11β,17β)-17-羟基-11-[4-(rs-甲基亚氨基亚磺酰基)苯基]-17-(五氟乙基)雌甾-4,9-二烯-3-酮(化合物3)的合成化合物3合成描述于wo2011/009531中。当前第1页12