本发明涉及作为布鲁顿酪氨酸激酶(btk)的抑制剂的异喹啉基三唑酮复合物以及用于制备这些复合物的材料和方法。本发明还涉及包含异喹啉基三唑酮复合物的药物组合物，以及这些复合物治疗与btk相关的疾病、病症和病状的用途。
背景技术：
：btk是非受体蛋白酪氨酸激酶的tec家族的成员，并且其通过b细胞抗原受体(bcr)信号传导参与b细胞发育、活化、以及存活的调控。参见w.n.khan等人,immunity[免疫]3:283-299(1995)；以及a.b.satterthwaite和o.n.witte,immunol.rev.[免疫学综述]175:120-127(2000)。在人体中编码btk的基因的突变导致被称为x连锁无丙种球蛋白血症(xla)的病状，其特征在于免疫功能减少，包括b细胞成熟受损、免疫球蛋白和外周b细胞水平减小、t细胞独立性免疫应答减少、以及在bcr刺激后钙迁移衰减。参见f.s.rosen等人,n.engl.j.med.[新英格兰医学杂志]333(7):431-440(1995)；以及j.m.lindvall等人,[免疫学综述]203:200-215(2005)。btk在b细胞发育和bcr信号传导途径中的关键作用表明，btk的抑制可以为淋巴瘤、炎症性病症、以及自身免疫疾病等等提供治疗益处。包括通过用利妥昔单抗进行治疗来实现成熟b细胞消减的临床研究表明，类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(sle)和多发性硬化症可由b细胞的过表达造成。参见j.c.edwards等人,[新英格兰医学杂志]350:2572-81(2004)；c.favas和d.a.isenbergnat.rev.rheumatol.[自然综述：风湿病学]5:711-16(2009)；以及s.l.hauser等人,[新英格兰医学杂志]358:676-88(2008)。其他研究表明，bcr途径可涉及非霍奇金淋巴瘤和弥漫性大b细胞淋巴瘤中肿瘤细胞的存活。参见r.küeppers,nat.rev.cancer[自然综述：癌症]5:251-62(2005)；以及r.e.davis等人,nature[自然]463:88-92(2010)。在临床前研究中，btk缺陷型小鼠已经展示出在sle的鼠模型中疾病进展的减小和对胶原蛋白诱发的关节炎的抗性。参见m.j.shlomchik等人,j.exp.med.[实验医学杂志]180:1295-1306(1994)；以及l.jansson和r.holmdahl,clin.exp.immunol.[临床实验免疫学]94(3):459-65(1993)。此外，选择性不可逆的btk抑制剂已经显示出在小鼠中完全遏制胶原蛋白诱发的关节炎、在sle的小鼠模型中抑制自身抗体的产生和肾病的发展，并且在患有自发性b细胞非霍奇金淋巴瘤的狗中诱导客观临床应答。参见l.a.honigberg等人,proc.natl.acad.sci.usa[美国科学院院报]107(29):13075-80(2010)。布鲁顿酪氨酸激酶的某些抑制剂描述于wo99/54286a2、wo2002/50071a1、wo2007/087068a2、wo2008/039218a2、wo2008/121742a2、wo2007/147771a2、wo2009/077334a1、wo2009/098144a1、wo2009/156284a1、wo2010/000633a1、wo2010/006947a1、wo2008/033834a1、wo2010/056875a1、wo2010/068788a1、以及wo2010/068810a2中。已公开的国际申请wo2014/164558a1(’558申请)描述了作为btk的抑制剂的各种吡啶基和稠合吡啶基三唑酮的制备、表征和使用。’558申请中的化合物包括异喹啉基三唑酮、(s)-3-(1-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮。参见’558申请的实例5。虽然是btk的有效抑制剂，但是在’558申请中的实例5中制备的结晶化合物具有低水溶性，这可能限制其在口服给药后的吸收和生物利用率。技术实现要素：本发明提供了异喹啉基三唑酮和环糊精的固体复合物。这些复合物是相比于化合物的对应结晶形式表现出改善的水溶性和生物利用率的无定形固体。本发明还提供了用于制备这些复合物的材料和方法，包含这些复合物的药物组合物，以及这些复合物治疗与btk相关的疾病、病症和病状的用途。本发明的一方面提供了一种复合物，该复合物包括式1的化合物，其立体异构体或式1的化合物的互变异构体或其立体异构体、以及环糊精，其中该复合物为无定形固体。本发明的另一方面提供了一种药物组合物，其包括如上文定义的复合物；以及药学上可接受的赋形剂。本发明的又一方面提供了一种制备如上文定义的复合物的方法，该方法包括将液体溶液雾化成液滴，液体溶液包括如上文定义的化合物、立体异构体或互变异构体，环糊精衍生物，以及水，并且将至少一部分水从液滴中移除以形成复合物。本发明的另一方面提供了如上文定义的复合物，用作药品。本发明的另一方面提供了如上文定义的复合物，用于制造用于治疗与btk相关的病状的药品。本发明的又一方面提供了一种用于在受试者中抑制btk的方法，该方法包括向受试者施用如上文定义的复合物。本发明的另一方面提供了一种在受试者中治疗与btk相关的疾病、病症或病状的方法，该方法包括向受试者施用有效量的如上文定义的复合物。本发明的另一方面提供了一种在受试者中治疗疾病、病症或病状的方法，该方法包括向受试者施用有效量的如上文定义的复合物，其中疾病、病症或病状选自i型超敏反应、自身免疫疾病、炎症性病症、癌症、以及非恶性增生性病症。本发明的又一方面提供了一种在受试者中治疗疾病、病症或病状的方法，该方法包括向受试者施用有效量的如上文定义的复合物，其中疾病、病症或病状选自过敏性鼻炎、哮喘、特应性皮炎、类风湿性关节炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、狼疮肾炎、银屑病、免疫性血小板减少性紫癜、炎症性肠病、慢性阻塞性肺病、休格伦氏综合征(syndrome)、强直性脊柱炎、贝切特氏病(behcet’sdisease)、寻常型天疱疮、特发性浆细胞性淋巴结病、动脉粥样硬化、心肌梗塞、以及血栓形成。本发明的另一方面提供了一种在受试者中治疗疾病、病症或病状的方法，该方法包括向受试者施用有效量的如上文定义的复合物，其中疾病、病症或病状选自b细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、以及多发性骨髓瘤。本发明的另一方面提供了有效量的如上文定义的复合物和至少一种另外的药学活性剂的一种组合。附图说明图1示出在狗口服给药制剂a、b、c、d、e和f之后作为时间的函数的血液中实例1化合物的平均浓度。图2示出在日本药典溶解测试(japanesepharmacopoeiadissolutiontest)中所评估的对于制剂a、b、c和e，作为时间的函数的实例1化合物的平均洗脱液浓度。具体实施方式除非另外指出，否则本披露使用下文提供的定义。当与可测量的数字变量联合使用时，“约”或“大约”是指变量的指示值，也指在指示值的实验误差内或在指示值的±10％内(无论哪一个更大)的变量的所有值。“与btk相关的病状”和类似短语是指btk的抑制可提供治疗或预防益处的受试者的疾病、病症或病状。“药物”、“药物物质”、“活性药物成分”等是指可用于治疗需要治疗的受试者的化合物(例如，式1的化合物)。“药物产品”、“药物剂型”、“剂型”、“最终剂型”等是指适用于治疗需要治疗的受试者且通常可以为片剂、胶囊、包含粉末或颗粒的袋剂、贴剂、膜剂等形式的药物组合物。药物的“有效量”、药物的“治疗有效量”等是指可用于治疗受试者且可依赖于受试者的重量和年龄以及施用途径等等的药物的量。“赋形剂”是指用于药物的任何稀释剂或媒介物。“相反对映异构体”是指为参考分子的不可重叠镜像的分子，其可通过翻转参考分子的所有立体中心获得。例如，如果参考分子具有s绝对立体化学构型，那么相反对映异构体具有r绝对立体化学构型。类似地，如果参考分子具有s,s绝对立体化学构型，那么相反对映异构体具有r,r立体化学构型，以此类推。“药物组合物”是指一种或多种药物物质和一种或多种赋形剂的组合。“药学上可接受的”物质是指适用于施用于受试者的那些物质。“纯立体异构体”及其变体是指包含这样的化合物的样品，该化合物具有特定的立体化学构型且包括样品的至少约99.5％。具有给定立体化学构型的化合物的“立体异构体(stereoisomer和stereoisomers)”是指该化合物的相反对映异构体并且指包括该化合物的几何异构体(z/e)的任何非对映异构体。例如，如果化合物具有s,r,z立体化学构型，那么其立体异构体将包括具有r,s,z构型的其相反对映异构体，以及具有s,s,z构型、r,r,z构型、s,r,e构型、r,s,e构型、s,s,e构型、以及r,r,e构型的其非对映异构体。如果化合物的立体化学构型未指定，那么“立体异构体”是指该化合物的可能的立体化学构型中的任一种。“基本上纯的立体异构体”及其变体是指包含这样的化合物的样品，该化合物具有特定的立体化学构型且包括样品的至少约95％。“受试者”是指哺乳动物，包括人。当与化学取代基或部分(例如，c1-6烷基基团)结合使用时，“取代的”意指该取代基或部分的一个或多个氢原子已经被一个或多个非氢原子或基团替代，前提条件是满足化合价要求并且由该取代产生化学上稳定的化合物。“治疗”是指逆转、缓解、抑制这一术语所应用的疾病、病症或病状的进展，或预防该疾病、病症或病状，或者是指逆转、缓解、抑制这一病症、疾病或病状的一个或多个症状的进展，或预防该一个或多个症状。“治疗(treatment)”是指如上文刚刚定义的“治疗(treating)”的行为。以下缩写可用于本说明书：ac(乙酰基)；acn(乙腈)；aibn(偶氮-双-异丁腈)；api(活性药物成分)；aq(水溶液)；boc(叔丁氧羰基)；cbz(苄氧羰基)；cdi(1,1’-羰基二咪唑)；dba(二亚苄基丙酮)；dbu(1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-1(7)-烯)；dcc(1,3-二环己基碳二亚胺)；dcm(二氯甲烷)；dipea(n,n-二异丙基乙胺，hünig碱)；dma(n,n-二甲基乙酰胺)；dmap(4-二甲基氨基吡啶)；dmard(病情改善抗风湿药)；dme(1,2-二甲氧基乙烷)；dmf(n,n-二甲基甲酰胺)；dmso(二甲亚砜)；dppa(二苯基磷酰基叠氮化物)；dppf(1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)；dtt(二硫苏糖醇)；eda(乙氧基化的十二烷基醇，35)；edc(n-(3-二甲基氨基丙基)-n’-乙基碳二亚胺)；edta(乙二胺四乙酸)；ee(对映体过量)；eq(当量)；et(乙基)；et3n(三乙胺)；etoac(乙酸乙酯)；etoh(乙醇)；5-fam(5-羧基荧光素)；hatu(2-(3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(v))；hepes(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙磺酸)；hoac(乙酸)；hobt(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇)；ic50(50％抑制时的浓度)；ipa(异丙醇)；ipac(乙酸异丙酯)；ipe(异丙醚)；lda(二异丙基酰胺锂)；lihmds(双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂)；mcpba(m-氯过氧苯甲酸)；me(甲基)；meoh(甲醇)；mtbe(甲基叔丁基醚)；mp(熔点)；naot-bu(叔丁醇钠)；nmm(n-甲基吗啉)；nmp(1-甲基-2-吡咯烷酮)；pe(石油醚)；ph(苯基)；pic50(-log10(ic50)，其中ic50以摩尔(m)单位给出)；pr(丙基)；i-pr(异丙基)；ptfe(聚四氟乙烯)；rt(室温，大约为20℃至25℃)；tcep(三(2-羧基乙基)膦)；tf(三氟甲基磺酰基)；tfa(三氟乙酸)；tfaa(2,2,2-三氟乙酸酐)；thf(四氢呋喃)；tms(三甲基甲硅烷基)；以及tris缓冲液(2-氨基-2-羟甲基-丙烷-1,3-二醇缓冲液)。本披露描述了式1的化合物、其立体异构体、或式1的化合物的互变异构体或其立体异构体、以及环糊精的复合物。该复合物是相比于化合物的对应结晶形式表现出改善的水溶性和生物利用率的无定形固体。本披露还涉及用于制备该复合物的材料和方法、包含该复合物的药物组合物、以及该复合物治疗与btk相关的疾病、病症和病状的用途，这些疾病、病症和病状包括i型超敏反应、自身免疫疾病、炎症性病症、癌症、非恶性增生性病症、以及与btk相关的其他疾病、病症或病状。如本披露所用，“环糊精”是指由(α-1,4)-连接的α-d-吡喃葡萄糖单元组成的环状低聚糖。天然存在的(未改性的或母体)环糊精的每个亚单元具有在2-和3-位上的仲羟基基团和在6-位上的伯羟基基团。环糊精可以被认为是环形体或空心截锥，其由于羟基基团的位置而具有亲水性外部表面和亲脂性相对较低的内腔。内腔可捕获至少一部分药物分子，诸如式1的化合物，这导致包合复合物的形成。在药物-环糊精复合物的形成过程中，既不形成共价键，也不破坏共价键。在水溶液中，复合物解离，从而产生与结合在环糊精腔中的药物分子平衡的游离药物分子。除非另外指出，否则环糊精是指未改性的环糊精和经化学改性的环糊精，即，“环糊精衍生物”。“环糊精衍生物”是指母体环糊精的结构类似物，其中α-d-吡喃葡萄糖亚单元中的2-羟基、3-羟基和6-羟基基团中的一个或多个进行了化学改性，对于天然存在的环糊精，式a中的每个r为氢，而对于环糊精衍生物，至少一个r不是h。对于天然存在和经化学改性的环糊精两者，α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精分别对应于n在式a中为6、7和8。表1列出示例性环糊精和式a中r的对应值。示例性环糊精包括天然存在的α-、β-和γ-环糊精，以及α-、β-和γ-环糊精衍生物，诸如(2-羟丙基)-β-环糊精、随机甲基化的β-环糊精、磺丁基醚β-环糊精、以及(2-羟丙基)-γ-环糊精。其他可用的环糊精衍生物包括甲基-、二甲基-、以及三甲基-β-环糊精(三-o-甲基-β-环糊精)；随机二甲基化的-β-环糊精；乙基-、二乙基-、以及三乙基-β-环糊精(三-o-乙基-β-环糊精)；(2-羟乙基)-β-环糊精和(3-羟丙基)-β-环糊精；(2,3-二羟丙基)-β-环糊精和(2-羟基异丁基)-β-环糊精；羧甲基-β-环糊精和羧甲基乙基-β-环糊精；三丁酰基-β-环糊精(三-o-丁酰基-β-环糊精)、三戊酰基-β-环糊精(三-o-戊酰基-β-环糊精)、以及二己酰基-β-环糊精(二-o-己酰基-β-环糊精)；葡糖基-β-环糊精(6-o-α-d-葡糖基-β-环糊精)和麦芽糖基-β-环糊精(6-o-α-麦芽糖基-β-环糊精)。对于药物产品中环糊精的讨论，参见m.e.davis和m.e.brewster,nat.rev.drugdisc.[自然综述：药物发现]3(12):1023-1035(2004)；另外参见r.c.等人,aapspharmscitech6(2):329-357(2005)。表1.环糊精名称式a中的r(2,3-二羟丙基)-β-环糊精-ch2chohch2oh或-h(2-羟基异丁基)-β-环糊精-ch2c(ch3)2oh或-h羧甲基-β-环糊精-ch2c(o)o-m+或-h羧甲基乙基-β-环糊精-oη2c(o)o-μ+、-ch2ch3或-h三丁酰基-β-环糊精-c(o)(ch2)2ch3三戊酰基-β-环糊精-c(o)(ch2)3ch3二己酰基-β-环糊精-c(o)(ch2)4ch3或-h磺丁基醚-β-环糊精-(ch2)4so3-m+或-h葡糖基-β-环糊精-葡糖基或-h麦芽糖基-β-环糊精-麦芽糖基或-h在表1中，m+代表药学上可接受的阳离子物类，包括h+、li+、na+、k+和nh4+等等。因此，例如，羧甲基-β-环糊精和羧甲基乙基-β-环糊精可包括为-ch2c(o)o-na+的至少一个r，并且磺丁基醚β-环糊精可包括为-(ch2)4so3-na+的至少一个r。式1的化合物、其立体异构体、或式1化合物的互变异构体或其立体异构体可与表1中列出的任一种环糊精形成包合复合物，这些环糊精包括，例如，天然存在的β-环糊精和γ-环糊精、经化学改性的β-环糊精衍生物(2-羟丙基)-β-环糊精、甲基-β-环糊精和磺丁基醚β-环糊精，以及经化学改性的γ-环糊精衍生物(2-羟丙基)-γ-环糊精。天然存在的(未改性的)β-环糊精和γ-环糊精可以商品名w7pharma和w8pharma从威凯化学品公司(wackerchemieag)商购获得。类似的经化学改性的环糊精衍生物(2-羟丙基)-β-环糊精、(2-羟丙基)-γ-环糊精和甲基β-环糊精是分别可以商品名w7hppharma、w8hppharma和w7mpharma购得的。w7hppharma具有根据式a的化学结构，其中n为7并且r为(-ch2chohch3)t或(-h)21-t并且t为约4.1至约5.1；w8hppharma具有根据式a的化学结构，其中n为8并且r为(-ch2chohch3)t或(-h)24-t并且t为约4至约5.6；并且w7mpharma具有化学结构，其中n为7并且r为(-ch3)t或(-h)21-t并且t为约11至约14。可用的磺丁基醚β-环糊精可以商品名从cydexpharmaceuticals公司商购获得，其具有根据式a的化学结构，其中n为7并且r为(-(ch2)4so3-na+)t或(-h)21-t并且t为约6至约7.1。复合物为无定形固体。术语“无定形”是指这样一种状态，其中材料在分子水平上缺乏长范围有序性，并且取决于温度，可能表现出固体或液体的物理特性。典型地，此类材料不产生特有的x射线衍射图，并且在表现出固体特性的同时，更正式地被描述为液体。在加热时，发生以状态变化为特征的自固体至液体特性的变化，通常是二级的(“玻璃化转变”)。术语“结晶”是指这样一种固相，其中该材料在分子水平上具有规则有序的内部结构并且产生具有限定峰的特有的x射线衍射图。此类材料在充分加热时也将表现出液体的特性，但是从固体到液体的变化是以相变为特征的，通常是一级的(“熔点”)。式1的化合物可作为多晶型物、立体异构体、互变异构体、或它们的某种组合存在，并且可以是同位素标记的。式1的化合物可以作为立体异构体(s)-3-(1-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮存在，或作为立体异构体(r)-3-(1-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮存在，这些立体异构体(即，对映异构体及其相反对映异构体)可以是纯的、基本上纯的、或混合物。式1的化合物或其立体异构体可以作为互变异构体存在，这些互变异构体是由互变异构化产生的异构体，包括亚胺-烯胺、酮-烯醇、肟-亚硝基、以及酰胺-亚胺酸互变异构。式1的三唑酮部分可以例如以以下互变异构形式存在：式1的化合物可表现出多于一种类型的异构现象。式1的化合物、其立体异构体、或式1化合物的互变异构体或其立体异构体可具有同位素变型，其中至少一个原子被具有相同原子数、而原子量不同于通常在自然界中发现的原子量的原子取代。适于包括在式1的化合物中的同位素包括，例如，氢的同位素，诸如2h和3h；碳的同位素，诸如11c、13c和14c；氮的同位素，诸如13n和15n；以及氧的同位素，诸如15o、17o和18o。同位素变型(例如，氘2h)的使用可提供导致更大的代谢稳定性的某些治疗优点，例如，增大的体内半衰期或减小的剂量需求。另外，所披露化合物的某些同位素变型可掺入可用于药物和/或底物组织分布研究的放射性同位素(例如，氚3h或14c)。使用正电子发射性同位素，诸如11c、15o、和13n进行取代可以用于检验底物受体占有率的正电子发射断层扫描(pet)研究。同位素标记的化合物可以通过与在本披露其他地方描述的那些类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂替代非标记试剂来制备。复合物可以通过喷雾干燥、冻干、以及其他方法，由式1的化合物或由其立体异构体、或由式1的化合物的互变异构体或其立体异构体制备。喷雾干燥包括将化合物和环糊精溶解于一种或多种相容的溶剂中，将所得溶液雾化，并且将一种或多种溶剂蒸发以形成复合物。冻干或冷冻干燥还包括将化合物和环糊精溶解于相容溶剂(通常是水)中，快速冷冻溶液，并且通过升华(通常在真空下)和解吸移除溶剂。对于冻干的更详细描述，参见georg-wilhelmoetjen,“freeze-drying[冷冻干燥],”ullmann‘sencyclopediaofindustrialchemistry[乌尔曼工业化学百科全书](2004)。对于这些方法中的每一种，为无定形的药物物质的级分基于式1的化合物的总质量计在约50％重量/重量至约100％重量/重量、从约75％重量/重量至约100％重量/重量、从约90％重量/重量至约100％重量/重量、或从约95％重量/重量至约100％重量/重量的范围内。理想的是，为无定形的药物的级分基于式1的化合物的总质量计在约99％重量/重量至约100％重量/重量的范围内。如上文所指出，复合物可通过喷雾干燥制备，其包括将式1的化合物溶解于一种或多种相容溶剂中以形成溶液。一般而言，相容溶剂是将溶解式1的化合物和环糊精的任何液体。在实践过程中，相容溶剂包括在室温下将以约0.5％重量/重量或更大、约1％重量/重量或更大的相应浓度，或更典型地，以约5％重量/重量或更大的浓度完全溶解式1的化合物和环糊精的任何液体。可用的溶剂包括是挥发性的，具有约150℃或更低的标准沸点，表现出相对低的毒性，并且可以从所得复合物中移除，以使药物产品中的溶剂水平满足国际协调委员会(internationalcommitteeonharmonization，ich)关于残余溶剂的指导原则的那些溶剂。可能需要另外的处理，诸如托盘式干燥，以满足ich残余溶剂水平。有利地使用水作为溶剂来制备复合物。尽管式1的化合物在中性ph和低于中性ph的水中溶解性很差，但是其水溶性随着碱度的增加而增加，因此将水的ph调节至约10或以上、约11或以上、约12或以上、或约13或以上改善水溶性。因此，可以首先将式1的化合物溶解于碱水溶液诸如naoh、koh等中，然后将其与环糊精水溶液混合。碱的浓度可在约10-4m至约1m、约10-3m至约1m、约10-2m至约1m、或约10-1m至约1n的范围内。可通过在同时或随后混合的情况下将式1的化合物添加到碱水溶液中，然后在同时或随后混合的情况下添加环糊精来制备溶液。环糊精通常作为具有约1％-60％重量/体积、约10％-50％重量/体积、约20％-40％重量/体积、或约40％重量/体积的浓度的水溶液添加)。混合可以使用机械装置进行，例如，通过使用顶置式混合器、机械驱动的混合器或搅拌棒、行星式混合器、或匀化器。可将所得溶液的ph调节至约7的ph并且将水溶液喷雾干燥(例如，冻干)。可以将式1的化合物和环糊精添加到碱水溶液中，最多至它们相应的溶解度极限，但是确保完全溶解，所添加的量通常少于在溶解温度下溶解度极限的约80％。式1的化合物的浓度通常在约0.1％重量/重量至约10％重量/重量的范围内，取决于其溶解度，并且环糊精的浓度通常在约0.1％重量/重量至约20％重量/重量的范围内。式1的化合物在溶液中的浓度通常为至少约0.1％重量/重量、0.5％重量/重量、1％重量/重量、或5％重量/重量，并且环糊精的量通常为活性化合物的量的约1至约20倍，基于摩尔浓度计。尽管增大活性化合物和环糊精的浓度减小溶剂的体积，但是较高的活性剂和环糊精浓度可能过于粘稠而不能有效地雾化成小的液滴。约0.5cp至约50,000cp或约10cp至约2,000cp的溶液粘度通常产生令人满意的雾化。将包括式1的化合物、环糊精和溶剂(通常是水)的溶液输送至雾化器，该雾化器将溶液分解成小的液滴。可用的雾化器包括“压力”或单流体喷嘴；双流体喷嘴；离心或涡流盘雾化器；超声喷嘴；以及机械振动喷嘴。雾化方法的详细描述可见于lefebvre,atomizationandsprays[雾化与喷雾](1989)和perry’schemicalengineers’handbook[佩里化学工程师手册](第7版1997)。一般而言，通过雾化器产生的液滴在它们离开雾化器时的直径小于约500μm。一旦被雾化，即从溶液中移除至少一部分溶剂(例如，水)，以产生包括复合物的多个固体颗粒。被移除以形成固体颗粒的溶剂的量取决于复合物在溶剂中的溶解度和在雾化之前复合物在溶液中的浓度。一般而言，初始存在于溶液中的溶剂的至少约60％重量/重量被移除，以形成固体颗粒。从溶液中移除的溶剂的量越大，形成结晶化合物的可能性就越小。因此，从溶液中移除以形成无定形复合物的溶剂的量通常为至少70％重量/重量、至少80％重量/重量、或至少90％重量/重量。雾化和溶剂移除发生在其中可以控制工艺条件的腔室中。用于溶剂移除的驱动力通常通过将溶剂在腔室中的分压维持低于溶剂在干燥液滴的温度下的蒸气压力来提供。这可以通过在腔室中维持部分真空(例如，约0.01个大气压至约0.50个大气压的总压力)、通过将液滴与温热的干燥气体混合、或两者来实现。溶剂蒸发所需的一些能量可以通过在雾化之前加热溶液来提供，但是一般而言，能量主要来自干燥气体。溶液温度可以在刚好高于溶剂的凝固点至比其标准沸点高约20℃或更多的范围内，这通过对溶液加压实现。通过雾化器的溶液流速可以根据喷嘴的类型、腔室的尺寸、以及干燥条件(包括入口温度和干燥气体通过腔室的流速)变化。原则上，干燥气体可以基本上是任何气体，但是出于安全原因并且为了使不期望的复合物氧化最少，该过程可采用惰性气体，诸如氮气、富含氮气的空气或氩气。通常将干燥气体引入约60℃至约240℃的温度的腔室中。液滴的大表面与体积比和用于溶剂蒸发的大驱动力导致液滴的快速固化时间。约20秒或更少、约10秒或更少、或约1秒或更少的固化时间是典型的。快速固化有助于保持无定形复合物在颗粒内和颗粒间的均匀度和同质性。固体颗粒可以在固化后在腔室中保持约5秒至约60秒，在此期间另外的溶剂从颗粒中蒸发出来。一般而言，当复合物离开腔室时其溶剂水平少于约10％重量/重量且通常少于2％重量/重量。在形成之后，可以使用合适的工艺干燥复合物以移除残余溶剂，该工艺包括托盘式干燥、流化床干燥、微波干燥、带干燥、旋转干燥、或真空干燥。干燥之后，残余溶剂水平通常少于约1％重量/重量且通常少于约0.1％重量/重量。所得的喷雾干燥的复合物通常为小颗粒的形式。颗粒的平均(体积)直径可以小于约1000μm、小于约500μm、小于约100μm、小于约50μm、或小于约25μm。颗粒的尺寸可以通过筛分分析、显微镜术、光散射、或沉降进行确定。用于测量颗粒尺寸的可用设备包括coultercounters、malvernparticlesizeanalyzers等。参见，例如，a.r.gennaro(编辑),remington:thescienceandpracticeofpharmacy[雷明顿：制药科学与实践](第20版,2000)。对于喷雾干燥工艺和喷雾干燥设备的一般描述，参见佩里化学工程师手册,第20-54页至20-57页(第6版,1984)。喷雾干燥工艺和设备的另外细节可见于marshall,“atomizationandspray-drying[雾化和喷雾干燥]”chem.eng.prog.monogr.series2[化学工程进展专论系列2],50(1954)；还参见masters,spraydryinghandbook[喷雾干燥手册](第4版,1985)和美国专利6,763,607。式1的化合物、其立体异构体、或式1化合物的互变异构体或其立体异构体的复合物可以单独施用或与一种或多种药学活性化合物组合施用。一般而言，一种或多种这些化合物以与一种或多种药学上可接受的赋形剂结合的药物组合物(制剂)的形式施用。赋形剂的选择取决于具体的施用模式、赋形剂对溶解度和稳定性的影响、以及剂型的性质等等。可用的药物组合物及其制备方法可见于，例如，a.r.gennaro(编辑),雷明顿：制药科学与实践(第20版,2000)。复合物可以经口施用。口服施用可涉及吞咽，在这种情况下，化合物通过胃肠道进入血流。或者或另外，口服施用可包括粘膜施用(例如，经颊、舌下、舌上施用)，以使化合物通过口腔粘膜进入血流。适用于口服施用的制剂包括固体和半固体体系，诸如片剂；包含多或纳米微粒或粉末的软或硬胶囊；锭剂；咀嚼剂；凝胶剂；快速分散剂型；膜剂；以及口腔贴剂或粘膜粘附贴剂。复合物还可以用于速溶、速崩剂型，诸如liang和chen,expertopinionintherapeuticpatents[治疗术专利专家评论](2001)11(6):981-986中描述的那些。对于片剂剂型，根据剂量，活性药物成分(api)可包括剂型的从约1重量％至约80重量％或更典型地剂型的从约5重量％至约60重量％。除api之外，片剂可包括一种或多种崩解剂、粘结剂、稀释剂、表面活性剂、助流剂、润滑剂、抗氧化剂、着色剂、矫味剂、防腐剂、以及遮味剂。崩解剂的示例包括羟基乙酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、c1-6烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶凝淀粉、以及藻酸钠。一般而言，崩解剂将包括剂型的从约1重量％至约25重量％或从约5重量％至约20重量％。粘结剂通常用于赋予片剂制剂粘着品质。合适的粘结剂包括微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然和合成树胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶凝淀粉、羟丙基纤维素以及羟丙基甲基纤维素。片剂还可包含稀释剂，诸如乳糖(一水合物、喷雾干燥的一水合物、无水物)、甘露糖醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纤维素、淀粉以及磷酸氢钙二水合物。片剂还可包括表面活性剂，诸如月桂基硫酸钠和聚山梨酸酯80，以及助流剂诸如二氧化硅和滑石。当存在时，表面活性剂可包括片剂的从约0.2重量％至约5重量％，并且助流剂可包括片剂的从约0.2重量％至约1重量％。片剂还可包含润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂基富马酸钠、以及硬脂酸镁与月桂基硫酸钠的混合物。润滑剂可以包括片剂的从约0.25重量％至约10重量％或从约0.5重量％至约3重量％。片剂共混物可被直接压制或通过碾压以形成片剂。可以另选地在制片之前，对片剂共混物或共混物的部分进行湿法、干法或熔融制粒、熔融凝结或挤出。如果期望，在共混之前，可以通过筛选或研磨或两者对一种或多种组分的尺寸进行调整。最终剂型可包括一个或多个层并且可以是带包衣的、不带包衣的或胶囊包封的。示例性片剂可包含最多约80重量％的api、从约10重量％至约90重量％的粘结剂、从约0重量％至约85重量％的稀释剂、从约2重量％至约10重量％的崩解剂、以及从约0.25重量％至约10重量％的润滑剂。对于共混、制粒、研磨、筛选、制片、包衣的论述，以及用于制备药物产品的另选技术的描述，参见a.r.gennaro(编辑),雷明顿：制药科学与实践(第20版,2000)；h.a.lieberman等人(编辑),pharmaceuticaldosageforms:tablets[药物剂型：片剂],第1-3卷(第2版,1990)；以及d.k.parikh&c.k.parikh,handbookofpharmaceuticalgranulationtechnology[药物制粒技术手册],第81卷(1997)。人用或兽用的可消耗口腔膜剂是可以快速溶解或粘附粘膜的柔韧水溶性或水溶胀性的薄膜剂型。除api之外，典型的膜剂包括一种或多种成膜聚合物、粘结剂、湿润剂、增塑剂、稳定剂或乳化剂、粘度改进剂、以及溶剂。其他膜剂成分可包括抗氧化剂、着色剂、风味剂和风味增强剂、防腐剂、唾液刺激剂、冷却剂、共溶剂(包括油)、软化剂、膨胀剂、消泡剂、表面活性剂、以及遮味剂。制剂的一些组分可以执行多于一种功能。除了给药需求之外，膜剂中api的量可取决于其溶解度。如果是水溶性的，那么api将典型地包括膜剂中非溶剂组分(溶质)的从约1重量％至约80重量％或膜剂中溶质的从约20重量％至约50重量％。溶解度较小的api可以包括组合物的更大比例，典型地最多至膜剂中非溶剂组分的约88重量％。成膜聚合物可选自天然多糖、蛋白质、或合成水解胶体，并且典型地包括膜剂的从约0.01重量％至约99重量％或从约30重量％至约80重量％。膜剂剂型典型地通过对涂布到可剥离背衬载体或纸上的水性薄膜进行蒸发干燥来制备，所述干燥可在干燥烘箱或烘道(例如在组合的涂布-干燥设备中)中、在冻干设备中、或在真空烘箱中进行。用于口服施用的可用固体制剂可包括即时释放制剂和调整释放制剂。调整释放制剂包括延迟、持续、脉冲、受控、靶向、以及编程释放(programmed-release)。对于适宜的调整释放制剂的一般描述，参见美国专利6,106,864。对于其他可用的释放技术(诸如高能量分散以及渗透和涂覆的颗粒)的细节，参见verma等人,pharmaceuticaltechnologyon-line[药学技术在线](2001)25(2):1-14。如上文所指出，复合物可以与一种或多种其他药学活性化合物组合以治疗各种疾病、病症或病状。在此类情况下，活性化合物可以组合在如上所述的单一剂型中或者可以适于组合物的共同施用的试剂盒的形式提供。试剂盒包括(1)两种或更多种不同的药物组合物，其中的至少一种包含式1的化合物或其互变异构体的复合物；以及(2)用于单独保持两种药物组合物的装置，诸如分开的瓶或分开的箔袋。这种试剂盒的示例是用于片剂或胶囊的包装的常见泡罩包装。试剂盒适用于施用不同类型的剂型(例如，口服或肠胃外)或适用于以单独的给药间隔施用不同的药物组合物、或适用于彼此交替逐步增加不同的药物组合物的剂量。为促进患者顺从性，试剂盒典型地包括施用指导并且可以提供有服药提醒(memoryaid)。对于人患者的施用，式1的化合物、其立体异构体、或式1的化合物的互变异构体或其立体异构体的口服施用的总日剂量典型地在约1mg至约3000mg的范围内。总日剂量可以单剂量或分剂量施用，并且由医师决定，可处于以上给出的典型范围之外。尽管这些剂量是基于具有约60kg至约70kg的质量的平均人患者，但是医师将能够确定对于质量处于此重量范围之外的患者(例如，婴儿)适当的剂量。如上文所指出，复合物可用于治疗指示btk的抑制的疾病、病症或病状。此类疾病、病症或病状通常涉及btk的抑制提供治疗益处的患者的任何不健康或异常状态。更具体地讲，此类疾病、病症或病状可涉及免疫系统和炎症，包括i型超敏(过敏性)反应(过敏性鼻炎、过敏性哮喘以及特应性皮炎)；自身免疫疾病(类风湿性关节炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、银屑病、狼疮肾炎、免疫性血小板减少性紫癜、休格伦氏综合征、强直性脊柱炎、以及贝切特氏病)；炎症性肠病；肺部炎症(慢性阻塞性肺病)、动脉粥样硬化、血栓形成、以及心肌梗塞。式1的化合物还可用于治疗与异常细胞生长相关的疾病、病症或病状，包括血液学恶性肿瘤，诸如急性骨髓性白血病、b细胞慢性淋巴细胞性白血病、b细胞淋巴瘤(例如，套细胞淋巴瘤)、t细胞淋巴瘤(例如，外周t细胞淋巴瘤)和多发性骨髓瘤，以及上皮癌(癌瘤)，诸如肺癌(小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、胰腺癌以及结肠癌。除了上文指出的血液学恶性肿瘤和上皮癌之外，复合物还可用于治疗其他类型的癌症，包括白血病(慢性髓细胞性白血病和慢性淋巴细胞性白血病)；乳腺癌、泌尿生殖癌、皮肤癌、骨癌、前列腺癌、以及肝癌；脑癌；喉癌、胆囊癌、直肠癌、甲状旁腺癌、甲状腺癌、肾上腺癌、神经组织癌、膀胱癌、头癌、颈癌、胃癌、支气管癌、以及肾癌；基底细胞癌、鳞状上皮细胞癌、转移性皮肤癌、骨肉瘤、尤因氏肉瘤(ewing’ssarcoma)、网状细胞肉瘤、以及卡波济氏肉瘤(kaposi’ssarcoma)；骨髓瘤、巨细胞瘤、胰岛细胞瘤、急性和慢性淋巴细胞性和粒细胞性肿瘤、毛细胞瘤、腺瘤、髓样癌、嗜铬细胞瘤、粘膜神经瘤、肠道神经节瘤、增生性角膜神经瘤、类马方氏综合征体质肿瘤(marfanoidhabitustumor)、维尔姆斯氏肿瘤(wilms’tumor)、精原细胞瘤、卵巢肿瘤、平滑肌肿瘤、子宫颈非典型增生、成神经细胞瘤、成视网膜细胞瘤、骨髓发育不良综合征、横纹肌肉瘤、星形细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、恶性高钙血症、真性红细胞增多症、腺癌、多形性成胶质细胞瘤、神经胶质瘤、淋巴瘤以及恶性黑素瘤等等。除癌症之外，该复合物还可用于治疗与异常细胞生长相关的其他疾病、病症或病状，包括非恶性增生性疾病，诸如良性前列腺肥大、再狭窄、增生、滑膜增生病症、特发性浆细胞性淋巴结病、视网膜病或其他眼新生血管病症等等。除以上列出的那些疾病之外，该复合物还可用于治疗自身免疫疾病、病症或病状。此类疾病、病症或病状包括克罗恩氏病(crohn’sdisease)、皮肌炎、1型糖尿病、古巴士德氏综合征(goodpasture’ssyndrome)、格雷夫斯氏病(graves’disease)、格林-巴利综合征(guillain-barresyndrome)、桥本氏病(hashimoto’sdisease)、混合性结缔组织损伤、重症肌无力、发作性睡病、寻常性天疱疮、恶性贫血、多肌炎、原发性胆汁性肝硬化、颞动脉炎、溃疡性结肠炎、血管炎以及韦格纳氏肉芽肿病(wegener’sgranulomatosis)等等。复合物可用于治疗炎症性疾病、病症或病状，包括哮喘、慢性炎症、慢性前列腺炎、肾小球性肾炎、超敏反应、炎症性肠病(除克罗恩氏病之外还包括溃疡性结肠炎)、盆腔炎、再灌注损伤、移植排斥、血管炎以及全身炎症应答综合征。复合物还可用于治疗可处于上述一种或多种一般性病症(包括关节炎)内的特定疾病或病状。除类风湿性关节炎、休格伦氏综合征、系统性红斑狼疮、儿童和青少年sle之外，复合物还可用于治疗其他关节炎疾病，包括强直性脊柱炎、缺血性坏死、贝切特氏病、滑囊炎、二水合焦磷酸钙晶体沉积疾病(假性痛风)、腕管综合征、埃勒斯-当洛斯综合征(ehlers-danlossyndrome)、纤维肌痛、第五病、巨细胞动脉炎、痛风、青少年皮肌炎、青少年类风湿性关节炎、青少年脊柱关节病、莱姆病(lymedisease)、马方氏综合征(marfansyndrome)、肌炎、骨关节炎、成骨不全、骨质疏松症、佩吉特氏病(paget’sdisease)、牛皮癣性关节炎、雷诺氏现象(raynaud’sphenomenon)、反应性关节炎、反射性交感神经营养不良综合征、硬皮病、椎管狭窄、斯蒂尔氏病(still’sdisease)以及肌腱炎等等。复合物可与一种或多种药学活性化合物或疗法组合来治疗指示btk的一种或多种疾病、病症或病状，包括涉及免疫系统、炎症和异常细胞生长的那些疾病、病症或病状。例如，该复合物可与一种或多种化合物或疗法组合来同时施用、依序施用或分开施用，以用于治疗包括类风湿性关节炎和骨关节炎的关节炎，或用于治疗癌症，包括血液学恶性肿瘤，诸如急性骨髓性白血病、b细胞慢性淋巴细胞性白血病、b细胞淋巴瘤、t细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤，以及癌瘤，诸如肺癌、胰腺癌和结肠癌。此类组合可提供显著治疗优点，包括副作用较少、治疗服务不足的患者群体的能力提高，或具有协同活性。例如，当用于治疗关节炎时，该复合物可与一种或多种非类固醇消炎性药物(nsaid)、镇痛剂、皮质类固醇、生物应答调节剂和蛋白质-a免疫吸附疗法组合。或者或另外，当治疗类风湿性关节炎时，该复合物可与一种或多种病情改善抗风湿药(dmard)组合，而当治疗骨关节炎时，该复合物可与一种或多种骨质疏松剂组合。代表性nsaid包括阿扎丙宗(apazone)、阿司匹林、塞来考昔(celecoxib)、双氯芬酸(与或不与米索前列醇一起)、二氟尼柳、依托度酸、非诺洛芬(fenoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、布洛芬、吲哚美辛(indomethacin)、酮洛芬(ketoprofen)、甲氯芬那酸钠、甲芬那酸、美洛昔康(meloxicam)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生(naproxen)、奥沙普秦(oxaprozin)、保泰松(phenylbutazone)、吡罗昔康(piroxicam)、胆碱和水杨酸镁、双水杨酯和舒林酸(sulindac)。代表性镇痛剂包括对乙酰氨基酚和硫酸吗啡；以及可待因、氢可酮、羟考酮、丙氧芬(propoxyphene)和曲马多(tramadol)，所有这些都是与或不与对乙酰氨基酚一起。代表性皮质类固醇包括倍他米松(betamethasone)、醋酸可的松、地塞米松(dexamethasone)、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙(prednisolone)以及泼尼松(prednisone)。代表性生物应答调节剂包括tnf-α抑制剂，诸如阿达木单抗(adalimumab)、依那西普(etanercept)和英夫利昔单抗(infliximab)；选择性b细胞抑制剂，诸如利妥昔单抗(rituximab)；il-1抑制剂，诸如阿那白滞素(anakinra)；以及选择性共刺激调节剂，诸如阿巴西普(abatacept)。代表性dmard包括金诺芬(auranofin)(口服金)、硫唑嘌呤、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、环孢霉素、硫代苹果酸金钠(可注射金)、羟基氯喹、来氟米特(leflunomide)、甲氨蝶呤、米诺环素、吗替麦考酚酯(mycophenolatemofetil)、青霉胺、柳氮磺吡啶、以及jak3抑制剂(例如，托法替尼(tofacitinib))。代表性骨质疏松剂包括二膦酸盐，诸如阿伦膦酸盐(alendronate)、伊班膦酸盐(ibandronate)、利塞膦酸盐(risedronate)以及唑来膦酸(zoledronicacid)；选择性雌激素受体调节剂，诸如屈洛昔芬(droloxifene)、拉索昔芬(lasofoxifene)和雷洛昔芬(raloxifene)；激素，诸如降钙素、雌激素和甲状旁腺激素；以及免疫抑制剂，诸如硫唑嘌呤、环孢霉素和雷帕霉素。用于治疗类风湿性关节炎的特别有用的组合包括该复合物和甲氨蝶呤；该复合物和一种或多种生物应答调节剂，诸如来氟米特、依那西普、阿达木单抗和英夫利昔单抗；或该复合物、甲氨蝶呤、以及一种或多种生物应答调节剂，诸如来氟米特、依那西普、阿达木单抗和英夫利昔单抗。为治疗血栓和再狭窄，该复合物可与一种或多种心血管剂，诸如钙通道阻断剂、他汀类药物、贝特类药物、β-阻断剂、ace抑制剂和血小板聚集抑制剂组合。式1的化合物、其立体异构体、或式1的化合物的互变异构体或其立体异构体的复合物还可与一种或多种化合物或疗法组合以用于治疗癌症。这些包括化学治疗剂(即，细胞毒性剂或抗肿瘤剂)，诸如烷化剂、抗生素、抗代谢剂、源于植物的药剂和拓扑异构酶抑制剂、以及通过干扰肿瘤生长和进展中涉及的特定分子来阻断癌症的生长和扩散的分子靶向药物。分子靶向药物包括小分子和生物制剂两者。代表性烷化剂包括双氯乙胺(氮芥，例如苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、美法仑和尿嘧啶氮芥)；氮丙啶(例如，噻替派(thiotepa))；烷基烷烃磺酸盐(例如，白消安)；亚硝基脲(例如，卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)和链脲霉素(streptozocin))；非典型烷化剂(例如，六甲蜜胺、达卡巴嗪(dacarbazine)和丙卡巴肼(procarbazine))；以及铂化合物(例如，卡铂、顺铂、奈达铂、奥沙利铂、赛特铂和四硝酸三铂)。代表性抗生素剂包括蒽环类(例如，阿柔比星、氨柔比星、柔红霉素、阿霉素、表柔比星、伊达比星、吡柔比星、戊柔比星以及佐柔比星)；蒽二酮类(例如，米托蒽醌(mitoxantrone)和匹克生琼(pixantrone))；以及链霉菌属(例如，放线菌素、博来霉素、更生霉素、丝裂霉素c和普卡霉素)。代表性抗代谢剂包括二氢叶酸还原酶抑制剂(例如，氨基蝶呤、甲氨蝶呤和培美曲塞)；胸苷酸合酶抑制剂(例如，雷替曲塞和培美曲塞)；亚叶酸(例如，甲酰四氢叶酸)；腺苷脱氨酶抑制剂(例如，喷司他丁(pentostatin))；卤化/核糖核苷酸还原酶抑制剂(例如，克拉屈滨(cladribine)、氯法拉滨(clofarabine)和氟达拉滨(fludarabine))；硫代嘌呤类(例如，硫代鸟嘌呤和巯基嘌呤)；胸苷酸合酶抑制剂(例如，氟尿嘧啶、卡培他滨(capecitabine)、替加氟(tegafur)、卡莫氟(carmofur)和氟尿苷)；dna聚合酶抑制剂(例如，阿糖胞苷)；核糖核苷酸还原酶抑制剂(例如，吉西他滨)；降低甲基化剂(例如，阿扎胞苷和地西他滨)；和核糖核苷酸还原酶抑制剂(例如，羟基脲)；以及天冬酰胺耗尽剂(例如，天冬酰胺酶)。代表性源于植物的药剂包括长春花生物碱(例如，长春新碱、长春花碱、长春地辛、长春利定和长春瑞滨)；鬼臼毒素(例如，依托泊苷和替尼泊苷)以及紫杉烷(例如，多西他赛(docetaxel)、拉洛他赛(larotaxel)、奥他赛(ortataxel)、紫杉醇以及替司他赛(tesetaxel))。代表性i型拓扑异构酶抑制剂包括喜树碱，诸如贝洛替康(belotecan)、伊立替康(irinotecan)、鲁比替康(rubitecan)和托泊替康(topotecan)。代表性ii型拓扑异构酶抑制剂包括安吖啶、依托泊苷、磷酸依托泊苷和替尼泊苷(teniposide)，这些物质是表鬼臼毒素的衍生物。分子靶向疗法包括生物药剂，诸如细胞因子和其他免疫调控剂。可用的细胞因子包括白介素-2(il-2，阿地白介素(aldesleukin))、白介素4(il-4)、白介素12(il-12)、以及包括多于23种相关亚型的干扰素。其他细胞因子包括粒细胞集落刺激因子(csf)(例如，非格司亭(filgrastim))和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf或csf2)(例如，沙格司亭(sargramostim)、那米鲁单抗(namilumab))。其他免疫调节剂包括卡介苗、左旋咪唑和奥曲肽(octreotide)；针对肿瘤抗原的单克隆抗体，诸如曲妥珠单抗和利妥昔单抗(rituximab)；以及诱导对肿瘤的免疫应答的癌症疫苗。此外，干扰肿瘤生长和进展中涉及的特定分子的分子靶向药物包括以下各项物质的抑制剂：表皮生长因子(egf)、转化生长因子-α(tgfα)、tgfβ、调蛋白(heregulin)、胰岛素样生长因子(igf)、成纤维细胞生长因子(fgf)、角质细胞生长因子(kgf)、集落刺激因子(csf)、红细胞生成素(epo)、白介素-2(il-2)、神经生长因子(ngf)、血小板源性生长因子(pdgf)、肝细胞生长因子(hgf)、血管内皮生长因子(vegf)、血管生成素、表皮生长因子受体(egfr)、人表皮生长因子受体2(her2)、her4、胰岛素样生长因子1受体(igf1r)、igf2r、成纤维细胞生长因子1受体(fgf1r)、fgf2r、fgf3r、fgf4r、血管内皮生长因子受体(vegfr)、具有免疫球蛋白样和表皮生长因子样结构域2的酪氨酸激酶(tie-2)、血小板源性生长因子受体(pdgfr)、abl、bcr-abl、raf、fms-样酪氨酸激酶3(flt3)、c-kit、src、蛋白激酶c(pkc)、原肌球蛋白受体激酶(trk)、ret、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)、极光激酶、polo样激酶(plk)、促分裂原活化蛋白激酶(mapk)、间质-上皮转化因子(c-met)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)、akt、细胞外信号调控的激酶(erk)、聚(adp)核糖聚合酶(parp)等。特异性分子靶向药物包括选择性雌激素受体调节剂，诸如他莫西芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、氟维司群(fulvestrant)和雷洛昔芬(raloxifene)；抗雄激素，诸如比卡鲁胺(bicalutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、甲地孕酮(megestrol)和氟他胺(flutamide)；以及芳香酶抑制剂，诸如依西美坦(exemestane)、阿那曲唑(anastrozole)和来曲唑(letrozole)。其他特异性分子靶向药物包括抑制信号转导的药剂，诸如伊马替尼(imatinib)、达沙替尼(dasatinib)、尼罗替尼(nilotinib)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、吉非替尼(gefitinib)、埃罗替尼(erlotinib)、西妥昔单抗(cetuximab)、拉帕替尼(lapatinib)、帕尼单抗(panitumumab)和替西罗莫司(temsirolimus)；诱导细胞凋亡的药剂，诸如硼替佐米(bortezomib)；阻断血管生成的药剂，诸如贝伐单抗(bevacizumab)、索拉非尼(sorafenib)和舒尼替尼(sunitinib)；帮助免疫系统破坏癌细胞的药剂，诸如利妥昔单抗(rituximab)和阿仑单抗(alemtuzumab)；以及将毒性分子递送至癌细胞的单克隆抗体，诸如吉妥珠单抗奥佐米星(gemtuzumabozogamicin)、托西莫单抗(tositumomab)、131i-托西莫单抗(131i-tositumomab)和替伊莫单抗(ibritumomabtiuxetan)。生物活性作为btk抑制剂的式1的化合物、其立体异构体、或式1的化合物的互变异构体或其立体异构体的活性可通过包括体外和体内方法的多种方法来测定。以下体外测定测量测试化合物抑制fam标记的底物5-fam-eeplywsfpakkk-nh2的btk介导的磷酸化的能力。纯化btk可以如下获得(使用克隆sbvc-1603_9p)。将编码人btk的残基382至659的cdna序列克隆到载体psxb4中。此构建体工程化了具有谷胱甘肽-s-转移酶(gst)蛋白的框内翻译融合体以用于亲和纯化。来源于此构建体的融合蛋白包含蛋白酶识别序列以从gst亲和标签中释放btk。使用利用bac-to-系统(英杰公司(invitrogen))产生的高滴度杆状病毒原液在10lwave袋中在草地夜蛾(spodopterafrugiperda)sf9细胞中表达重组蛋白。通过在glutathionesepharose4b(ge医疗(gehealthcare))上通过来从细胞提取物中分离重组蛋白，并且通过用prescission蛋白酶处理从gst亲和标签中释放btk部分。在包含20mmhepes(ph7.4)、50mmnacl、10mmmgcl2、0.25mmtcep以及0.1mmedta的缓冲液中，通过尺寸排阻色谱(hiload16/60superdex200，ge医疗)进一步纯化btk重组蛋白。通过sdspage评定级分的纯度，将峰蛋白质级分汇集并使用amiconultra-15centrifugalfilterdevices(密理博公司(millipore))浓缩。相对于btk而言化合物的抑制特性在包含50mmhepes、10mmnacl、10mmmgcl2、0.2mmedta、0.01％1mmdtt以及0.1mg/mlbsa(ph7.3)的缓冲液中使用黑色384孔板形式确定。针对11个数据点，使用2倍连续稀释液在dmso中制备测试化合物，将稀释液添加到缓冲液中以使各稀释液包含3％dmso。为了开始测定，将5μl的3μμ5fam-eeplywsfpakkk-nh2(在缓冲液中)、5μl的稀释测试化合物(3％dmso，在缓冲液中)以及5μl的在缓冲液中的9nmbtk和150μμatp在每个孔中配混。将反应混合物在室温下孵育60分钟，然后通过添加25μl的50mmedta淬灭。为了对反应之后的荧光标记的底物和产物进行定量，将测试板装载在caliperlc-3000上，其通过基于微流体的分离来测量转化百分比。通过将化合物浓度和抑制百分比相对于标准ic50方程进行非线性曲线拟合来计算相对应的ic50值，并且报道为pic50，即-log(ic50)，其中ic50是在50％抑制下的摩尔浓度。实例以下实例旨在是说明性和非限制性的，并且表示本发明的特定实施例。获得以下实例中的许多化合物的1h核磁共振(nmr)谱。使用用于指示主要峰的常规缩写，以来自四甲基硅烷的低磁场的百万分率给出特征性化学位移(δ)，这些缩写包括s(单峰)、d(双重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)以及br(宽峰)。以下缩写用于常见溶剂：cdcl3(氘代氯仿)、dmso-d6(氘代二甲亚砜)、cd3od(氘代甲醇)、cd3cn(氘代乙腈)以及thf-d8(氘代四氢呋喃)。使用电喷雾电离(esi-ms)或大气压化学电离(apci-ms)来记录质谱(m+h)。当指示时，某些制备和实例的产物是通过质量触发的hplc(泵：waterstm2525；ms:zqtm；软件：masslynxtm)、快速色谱法或制备型薄层色谱法(tlc)来纯化的。反相色谱法通常是在酸性条件(“酸模式”)下，用分别包含0.035％和0.05％三氟乙酸(tfa)的acn和水流动相洗脱，或在碱性条件(“碱模式”)下，用均含有10mmnh4hco3的水和20/80(体积/体积)水/乙腈流动相洗脱，而在柱(例如，geminitm5μmc18axiatm，30x75mm，5μm)上进行的。制备型tlc通常在硅胶60f254板上进行。在通过色谱法分离之后，移除溶剂，并且通过在离心蒸发器(例如，genevactm)、旋转蒸发器、抽空的烧瓶等中干燥来获得产物。惰性(例如，氮气)或反应性(例如，h2)气氛中的反应通常在约1大气压(14.7psi)的压力下进行。实例1：(s)-3-(1-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮步骤a：(s)-叔丁基((3-氯异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯向0℃的在nmp(10ml)中的(s)-叔丁基3-羟基吡咯烷-1-甲酸酯(1.134g，6.06mmol)中添加nah(60％)(202mg，5.05mmol)。将混合物搅拌5分钟，并添加1,3-二氯异喹啉(1.000g，5.05mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5分钟，并且然后在微波反应器中在135℃下加热30分钟。将混合物用水(400ml)稀释并用etoac(3x125ml)提取。将有机层合并，用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗产物，用在己烷中的25％-50％etoac的梯度洗脱，以给出标题化合物(5.29g，75％)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm1.40(d,j＝14.16hz,9h),2.12-2.34(m,2h),3.42-3.58(m,3h),3.69(td,j＝12.33,4.64hz,1h),5.63-5.76(m,1h),7.59(s,1h),7.64(ddd,j＝8.30,7.08,1.22hz,1h),7.81(td,j＝7.57,1.46hz,1h),7.87-7.92(m,1h),8.11-8.19(m,1h)；esi-msm/z[m+h-叔丁基]+293.5。步骤b：(s)叔丁基3-((3-氰基异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯将(s)-叔丁基3-((3-氯异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯(4.430g，12.70mmol)、氰化锌(2.980g，25.40mmol)和pd(pph3)4(1.468g，1.27mmol)在dmf(36.3ml)中的溶液在微波反应器中在160℃下加热20分钟。将反应混合物过滤，用水(400ml)稀释并用etoac(2x100ml)提取。将有机层合并，用盐水洗涤，经na2so4干燥，并在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱纯化粗产物，以给出为白色至淡黄色固体的标题化合物(3.570g，83％)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm1.40(d,j＝13.18hz,9h),2.23(d,j＝11.23hz,2h),3.42-3.59(m,3h),3.65-3.75(m,1h),5.68-5.80(m,1h),7.82-7.89(m,1h),7.91-7.98(m,1h),8.06(d,j＝8.79hz,1h),8.21-8.30(m,2h)；esi-msm/z[m+h-叔丁基]+284.6。步骤c：(s)-叔丁基3-((3-(5-氧代-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯将(s)-叔丁基3-((3-氰基异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯(4.670g，13.76mmol)、肼基甲酸乙酯(7.160g，68.80mmol)、dbu(1.037ml，6.88mmol)以及nmp(34.6ml)混合于200ml高压反应容器中。将所得悬浮液在170℃下加热过夜，并且然后冷却至室温。添加碎冰并搅拌混合物。通过真空过滤收集黄色沉淀，用另外的水洗涤，并且在真空烘箱中在45℃下干燥过夜，以给出标题化合物，其不进一步纯化即用于下一步骤(5.47g)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm1.33-1.51(m,9h),2.09-2.38(m,2h),3.39-3.60(m,3h),3.75(dd,j＝12.20,4.88hz,1h),6.03-6.22(m,1h),7.62-7.71(m,1h),7.81(td,j＝7.57,1.46hz,1h),7.95-8.05(m,1h),8.11-8.29(m,2h),11.78(s,1h),12.03(brs,1h)。步骤d：(s)-3-(1-(吡咯烷-3-基氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮向装有粗(s)-叔丁基3-((3-(5-氧代-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯(5.47g)和二噁烷(27.5ml)的200ml圆底烧瓶中添加在二噁烷(13.76ml，55.1mmol)中的4mhcl。将悬浮液在室温下搅拌，通过hplc进行周期性监测。在完成时，将反应混合物在真空中浓缩，以给出为浅棕色粉末的标题化合物的hcl盐，将其干燥并不进一步纯化使用。esi-msm/z[m+h]+298.6。步骤e：(s)-3-(1-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮向(s)-3-(1-(吡咯烷-3-基氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮盐酸盐(4.29g)在dcm(48.1ml)中的悬浮液中添加2,6-二甲基吡啶(3.19ml，27.4mmol)。在将悬浮液冷却至0℃时，逐滴添加丙烯酰氯(1.3ml，15.9mmol)。将反应混合物搅拌15分钟并经90分钟的时间段升温至室温。添加另外的2,6-二甲基吡啶(1.68ml，14.43mmol)和丙烯酰氯(0.469ml，5.77mmol)，并且搅拌混合物，直到hplc指示反应完成。通过真空过滤收集产物，用dcm洗涤，并干燥，以给出为淡黄色固体的标题化合物(1.929g，39.9％，经3个步骤)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm2.16-2.43(m,2h),3.58-3.73(m,1h),3.74-3.91(m,2h),4.10(dd,j＝11.72,4.88hz,1h),5.60-5.74(m,1h),6.10-6.25(m,2h),6.53-6.73(m,1h),7.62-7.69(m,1h),7.77-7.85(m,1h),7.95-8.05(m,2h),8.17(d,j＝8.30hz,1h),11.78(s,1h),12.03(d,j＝13.18hz,1h)；esi-msm/z[m+h]+352.6。实例2：(r)-3-(1-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮步骤a：(r)-叔丁基3-((3-氰基异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯将处于0℃的(r)-叔丁基3-羟基吡咯烷-1-甲酸酯(496mg，2.65mmol)在nmp(4ml)中的混合物用nah(106mg，2.65mmol)处理并搅拌1小时。接着，添加l-氯异喹啉-3-腈(500mg，2.65mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后在微波反应器中在140℃下加热15分钟。包含标题化合物的粗反应混合物直接用于下一步骤。步骤b：(r)-叔丁基3-((3-(5-氧代-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯向粗(r)-叔丁基3-((3-氰基异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯中添加肼基甲酸乙酯(1.104g，10.60mmol)。将反应混合物在175℃下加热过夜，随后冷却并用etoac稀释。将有机相用盐水洗涤，经na2so4干燥，并浓缩，以给出标题化合物，其直接用于下一步骤。步骤c：(r)-3-(1-(吡咯烷-3-基氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮向粗(r)-叔丁基3-((3-(5-氧代-4,5-二氢-1h-1,2,4-三唑-3-基)异喹啉-1-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸酯中添加最少量的nmp和tfa(2ml)。将溶液在室温下搅拌10分钟并浓缩。通过制备型hplc纯化粗产物，用在水(酸模式)中的15％-22％acn的梯度洗脱，以给出标题化合物(229mg，29％，经3个步骤)。步骤d：(r)-3-(1-((1-丙烯酰基吡咯烷-3-基)氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮在0℃下向(r)-3-(1-(吡咯烷-3-基氧基)异喹啉-3-基)-1h-1,2,4-三唑-5(4h)-酮(11mg，0.037mmol)在dcm(3ml)中的溶液中添加2,6-二甲基吡啶(5.80μl，0.050mmol)，之后添加丙烯酰氯(8.08μl，0.100mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，从而形成白色固体。将固体过滤并干燥，以给出标题化合物(4mg，23％)。1hnmr(400mhz,cd3cn)δppm2.22-2.51(m,2h),3.09-3.17(m,1h),3.68-3.91(m,2h),3.94(brs,1h),4.06(d,j＝12.13hz,1h),5.60-5.76(m,1h),5.98(brs,1h),6.06(brs,1h),7.47-7.62(m,1h),7.62-7.74(m,1h),7.79(d,j＝7.58hz,1h),7.92(d,j＝3.79hz,1h),8.15(d,j＝8.08hz,1h)；esi-msm/z[m+h]+352.0。以下表2列出实例中所述的许多化合物的btk抑制数据，其中pic50值越大表示效力越高。根据本说明书所述的测定来测试化合物。表2.实例化合物的btk抑制(pic50)实例编号pic501>8.727.1实例3：狗中的药代动力学研究在口服施用与复合(制剂a和e)或以各种固体剂型配制(制剂b、c和f)的实例1化合物之后的雄性比格犬中进行药代动力学分析。制剂d是包含实例1的化合物的共晶体的胶囊。在以下制剂中，表3-7中列出的实例1的化合物的量与相应制剂中化合物的期望量(即，没有杂质)相对应。a.制剂a(水溶液)表3列出制剂a的组分。将实例1的化合物溶解于0.25mnaoh水溶液中之后，添加40％重量/体积的水溶液以获得1:25(重量/重量)的活性化合物:比率。使用10％磷酸将ph调节至7，得到具有大约7.5mg/ml的活性化合物浓度的水溶液。剂量设定为100mg，向每个测试受试者经口施用大约13.3ml。表3.制剂a的组成1没有杂质的实例1化合物的量制剂b(即时释放片剂)表4列出制剂b的组分。向实例1的化合物、粘结剂和崩解剂的干燥混合物中添加水。使用研钵和研杵将湿润的混合物制粒，然后干燥以获得颗粒状粉末。将润滑剂与颗粒状粉末混合并且使用台式片剂模制机(handtab-200，ichihashiseiki公司)由所得的粉末混合物制备片剂。每颗片剂包含300mg的实例1的化合物并且在10kn的制片力下形成(总重量～400mg，12mm长径×7mm短径)。剂量设定为300mg，向每个测试受试者经口施用一颗片剂。表4.制剂b的组成1没有杂质的实例1化合物的量2粘结剂的标准量；实际量考虑到api中的杂质3加工期间移除的水制剂c(实例1化合物和的物理混合物)：表5列出式c的组分。使用研钵和研杵将1:25(重量/重量)比率的实例1化合物和微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混合。使用台式片剂模制机(handtab-200，ichihashiseiki公司)由所得的粉末混合物制备片剂。每颗片剂包含25mg的实例1的化合物并且在12kn的制片力下形成(总重量～700mg，18.5mm长径×9mm短径)。剂量设定为100mg，向每个测试受试者经口施用四颗片剂。表5.制剂c的组成1没有杂质的实例1化合物的量2标准量；实际量考虑到api中的杂质制剂d(共晶体胶囊)制备包含实例1的化合物的共晶体的明胶胶囊。每粒胶囊包含100mg的实例1的化合物(144mg的共晶体)。向每个测试受试者经口施用一粒胶囊。制剂e(喷雾干燥的分散片)表6列出式e的组分。使用psd-1喷雾干燥器(geaniro公司)将以上含水制剂a喷雾干燥，以获得实例1的化合物和的固体复合物。使用研钵和研杵将复合物与轻质无水硅酸和硬脂酸镁混合。使用台式片剂模制机(handtab-200，ichihashiseiki公司)由所得的粉末混合物制备片剂。每颗片剂包含25mg的实例1的化合物并且在12kn的制片力下形成(总重量～711mg，18.5mm长径×9mm短径)。剂量设定为100mg，向每个测试受试者经口施用四颗片剂。表6.制剂e的组成1喷雾干燥的粉末中没有杂质的实例1化合物的量制剂f(固体分散片)表7列出式f的组分。将实例1的化合物和羟丙甲纤维素邻苯二甲酸酯以1:40(重量/重量)的比率溶解于二甲亚砜中。使用冷冻干燥器(fdu-2100，东京理化(eyela))将所得溶液冻干，获得固体分散粉，使用研钵和研杵将其制粒。将颗粒状的粉末与d-甘露糖醇、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、轻质无水硅酸以及硬脂酸镁混合。使用台式片剂模制机(handtab-200，ichihashiseiki公司)由所得的粉末混合物制备片剂。每颗片剂包含25mg的实例1的化合物并且在15kn的制片力下形成(片剂总重量～600mg，16mm长径×9mm短径)。剂量设定为100mg，向每个测试受试者经口施用四颗片剂。表7.制剂f的组成1没有杂质的实例1化合物的量将上述每种制剂经口施用至正在禁食的比格犬(一岁雄性，每种制剂五个测试受试者)。在药物施用15分钟前，将五肽胃液素溶液施用至每个测试受试者。在药物施用后15和30分钟，以及1、2、4、6、8、12和24小时获取血液样品。使用离心获得血浆。血浆中实例1化合物的浓度分别使用lc和ms/ms在表8和9列出的条件下测量。表8.lc条件分析柱kinetexc18，50mmx2.0mmi.d.，2.6μm(phenomenex)柱箱温度40℃流动相纯化水/乙腈/甲酸(600:200:0.1，体积/体积/体积)流速0.2ml/分钟上样体积20μl自动采样器温度10℃冲洗溶液乙腈/纯化水/甲酸(600:400:0.1，体积/体积/体积)运行时间5.0分钟通过阀门操作将从2.0至5.0分钟的流出物转移至ms/ms。表9.ms/ms条件1解簇电势，2入口电势，3碰撞能量，4碰撞室出口电势图1示出在狗口服给药制剂a、b、c、d、e和f之后作为时间的函数的血浆中实例1化合物的平均浓度。血液活性化合物的最大浓度(cmax)和达到血液最大药物浓度的时间(tmax)使用浓度相对时间曲线进行测量。从0至24小时的血液药物浓度和浓度-相对-时间曲线下面积(auc0-24h)使用线性梯形方法计算。表10列出药代动力学数据(平均值(s.d.))。表10.狗的药代动力学实例4：溶解测试图2示出使用桨法在日本药典溶解测试中评估的对于制剂a、b、c和e，作为时间的函数的实例1化合物的平均洗脱液浓度。使用具有100rpm的桨旋转速度的ntr6200at溶解测试设备(富山集团有限公司(toyamaco.,ltd.))，在900ml的用于溶解测试的2号日本药典测试流体(ph＝6.8)中进行测试。对于每种制剂，在规定的时间点收集测试样品，通过0.45μm聚丙烯膜过滤器(ghpacrodiscglassfiberpre-filter，pall)过滤，并且稀释于二甲亚砜中。实例1的化合物的洗脱液浓度使用uplc在表11所述的条件下测量。表11.uplc条件分析柱watersacquitybehc18，100mmx2.1mm，1.7μm柱温50℃检测uv，在250nm处流动相在水中的0.025％tfa/在乙腈中的0.02％tfa(7/3，体积/体积)流速0.3ml/分钟上样体积1μl自动采样器温度25℃冲洗溶液乙腈/纯化水(1/1，体积/体积)运行时间4.0分钟除非上下文另外明确指示，否则如在本说明书和随附权利要求书中所用，诸如“一个”、“一种”和“该”的单数冠词可指单一对象或多个对象。因此，例如，提及包含“一化合物”的组合物可包括单一化合物或两种或更多种化合物。应当了解，以上描述旨在是说明性的而非限制性的。许多实施例在本领域技术人员阅读了以上描述时将显而易见。因此，本发明的范围应参照随附权利要求书来确定，并且包括此类权利要求赋以权利的等效物的全部范围。将所有文章和参考文献(包括专利、专利申请和公开物)的披露内容通过引用且出于所有目的全文结合在此。当前第1页12当前第1页12