本发明涉及饲料添加剂
技术领域：
，具体涉及一种显著降低畜禽体脂率的微生态制剂及其制备方法。
背景技术：
：脂肪的过度沉积不仅影响动物体质而且影响食用者的身体健康，会提高肥胖、脂肪肝、冠心病等发病率。脂肪代谢对畜禽胴体品质影响至关重要。目前通常采用遗传选育、使用激素、营养调控等手段改善畜禽胴体品质，增加瘦肉比例和畜禽产品的商品化率，降低总胆固醇含量，提高不饱和脂肪酸含量，改善畜禽产品品质。但效果均不够理想，且成本高。技术实现要素：针对现有技术中的缺陷，本发明目的在于提供一种显著降低畜禽体脂率的微生态制剂及其制备方法，该微生态制剂具有很好的降低畜禽的体脂率，促进脂肪酸氧化，抑制饱和脂肪酸合成，提高畜禽脂肪代谢功能的效果；并且可以改善畜禽的抗氧化活性，从而达到增强动物机体的免疫机能、减少发病率的功效。为实现上述目的，本发明提供的技术方案为：本发明提供了一种微生态制剂，微生态制剂是将复合菌剂干燥后粉化制备而得；复合菌剂是将米曲霉、产朊假丝酵母、凝结芽孢杆菌和乳酸片球菌进行混合发酵，获得含有有益菌菌体及其代谢产物的复合菌剂。微生态制剂中，米曲霉的活菌数为0.5～2.0亿cfu/g，产朊假丝酵母的活菌数为5～15亿cfu/g，凝结芽孢杆菌的活菌数为10～30亿cfu/g，乳酸片球菌的活菌数为10～20亿cfu/g。微生态制剂中，米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129或cctccab204055。本发明还保护上述微生态制剂在制备饲料添加剂中的应用。本发明提供了一种微生态制剂的制备方法，包括步骤：s1：将米曲霉、产朊假丝酵母、凝结芽孢杆菌和乳酸片球菌分别发酵培养获得各液体菌种；s2：在固体发酵培养基中，先接种米曲霉菌液体菌种，培养第一预设时间；然后接种产朊假丝酵母菌液体菌种，培养第二预设时间；再接种凝结芽孢杆菌液体菌种和乳酸片球菌液体菌种，培养第三预设时间，获得富含有益菌及其代谢产物的复合菌剂；s3：将复合菌剂干燥后粉化，得到微生态制剂。需要说明的是，采用的米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129或cctccab204055。步骤s1具体包括：将米曲霉使用发酵培养基在28～40℃培养10～20h，得到米曲霉菌液体菌种；将产朊假丝酵母菌使用发酵培养基在22～32℃培养24～48h，得到产朊假丝酵母菌液体菌种；将凝结芽孢杆菌使用液体培养基在28～42℃培养24～48h，得到凝结芽孢杆菌液体菌种；将乳酸片球菌使用发酵培养基在37～50℃培养18～24h，得到乳酸片球菌液体菌种。需要说明的是，步骤s1中，发酵培养基采用的均是对应菌种的常见的发酵培养基。步骤s2中：米曲霉菌液体菌种的接种量为2～5％，第一预设时间为7～10h；产朊假丝酵母菌液体菌种的接种量为3～5％，第二预设时间为24h；凝结芽孢杆菌液体菌种的接种量为5～7％，乳酸片球菌液体菌种的接种量为10～15％，第三预设时间为24～48h；固体发酵培养的温度为22～42℃。步骤s2中，固体发酵培养基的原料组分按重量百分比计，包括：壳聚糖5～12％、黄芪多糖1.5～5％、木聚糖2～3.5％、玉米粉30～50％、麸皮25～35％、豆粕粉3.5～5％、棉籽粕1.5～2.5％、糖蜜5～7％和无机盐0.85％。其中，无机盐包括(nh4)2so40.6％、kh2po40.21％和mgso40.04％。步骤s3中，干燥的温度为50℃，粉化后的微生态制剂的颗粒粒径不超过60目。本发明提供的微生态制剂，可直接作为饲料添加剂，添加比例为1.0～5.0kg/t。本发明提供的技术方案，具有如下的有益效果：(1)本发明提供的微生态制剂天然、安全、绿色、无污染，且产品可稳定改善畜禽的适口性，提高饲料的利用率；(2)本发明经过对凝结芽孢杆菌、米曲霉菌、产朊假丝酵母菌和乳酸片球菌四种有益微生物液体菌种进行最佳配比的优化，通过调整发酵培养基中碳源的含量和发酵培养时间，确定最佳的发酵培养条件，使各种有益微生物达到最佳状态，从而制备出含有丰富营养物质更高效的微生态制剂；益生菌产生大量脂肪酶降低畜禽中脂肪含量，提高畜禽的脂肪代谢从而降低畜禽体脂率。本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。具体实施方式下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，因此只是作为示例，而不能以此来限制本发明的保护范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，数据为三次重复实验的平均值或平均值±标准差。本发明提供一种微生态制剂，是将复合菌剂干燥后粉化制备而得；复合菌剂是将米曲霉、产朊假丝酵母、凝结芽孢杆菌和乳酸片球菌进行混合发酵，获得含有有益菌菌体及其代谢产物的复合菌剂；其中，米曲霉的活菌数为0.5～2.0亿cfu/g，产朊假丝酵母的活菌数为5～15亿cfu/g，凝结芽孢杆菌的活菌数为10～30亿cfu/g，乳酸片球菌的活菌数为10～20亿cfu/g；米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129或cctccab204055。另外，本发明还提供了一种微生态制剂的制备方法，包括步骤：s1：将米曲霉使用发酵培养基在28～40℃培养10～20h，得到米曲霉菌液体菌种；将产朊假丝酵母菌使用发酵培养基在22～32℃培养24～48h，得到产朊假丝酵母菌液体菌种；将凝结芽孢杆菌使用液体培养基在28～42℃培养24～48h，得到凝结芽孢杆菌液体菌种；将乳酸片球菌使用发酵培养基在37～50℃培养18～24h，得到乳酸片球菌液体菌种；其中，各菌种的保藏编号如上所示；s2：在固体发酵培养基中，先接种米曲霉菌液体菌种，接种量为2～5％，培养7～10h；然后接种产朊假丝酵母菌液体菌种，接种量为3～5％，培养24h；再接种凝结芽孢杆菌液体菌种和乳酸片球菌液体菌种，凝结芽孢杆菌液体菌种接种量为5～7％，乳酸片球菌液体菌种的接种量为10～15％，培养24～48h，获得富含有益菌及其代谢产物的复合菌剂；其中，整个固体发酵培养的温度为22～42℃；固体发酵培养基的原料组分按重量百分比计，包括：壳聚糖5～12％、黄芪多糖1.5～5％、木聚糖2～3.5％、玉米粉30～50％、麸皮25～35％、豆粕粉3.5～5％、棉籽粕1.5～2.5％、糖蜜5％～7％和无机盐0.85％；无机盐包括(nh4)2so40.6％、kh2po40.21％和mgso40.04％；s3：将复合菌剂50℃干燥后粉化，粉碎过60目筛，得到微生态制剂。下面结合具体实施例对本发明提供的微生态制剂及其制备方法作进一步说明。实施例一本实施例提供一种微生态制剂，是将复合菌剂干燥后粉化制备而得；复合菌剂是将米曲霉、产朊假丝酵母、凝结芽孢杆菌和乳酸片球菌进行混合发酵，获得含有有益菌菌体及其代谢产物的复合菌剂；其中，米曲霉的活菌数为1.5亿cfu/g，产朊假丝酵母的活菌数为10亿cfu/g，凝结芽孢杆菌的活菌数为20亿cfu/g，乳酸片球菌的活菌数为15亿cfu/g；米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129。实施例二本实施例提供一种微生态制剂的制备方法，包括步骤：s1：将米曲霉使用发酵培养基在34℃培养15h，得到米曲霉菌液体菌种；将产朊假丝酵母菌使用发酵培养基在27℃培养36h，得到产朊假丝酵母菌液体菌种；将凝结芽孢杆菌使用液体培养基在35℃培养36h，得到凝结芽孢杆菌液体菌种；将乳酸片球菌使用发酵培养基在42℃培养20h，得到乳酸片球菌液体菌种；其中，米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129；s2：在固体发酵培养基中，先接种米曲霉菌液体菌种，接种量为3％，培养8h；然后接种产朊假丝酵母菌液体菌种，接种量为4％，培养24h；再接种凝结芽孢杆菌液体菌种和乳酸片球菌液体菌种，凝结芽孢杆菌液体菌种接种量为6％，乳酸片球菌液体菌种的接种量为12％，培养36h，获得富含有益菌及其代谢产物的复合菌剂；其中，整个固体发酵培养的温度为32℃；固体发酵培养基的原料组分按重量百分比计，包括：壳聚糖8％、黄芪多糖3.6％、木聚糖2.5％、玉米粉40％、麸皮30％、豆粕粉4.5％、棉籽粕2.0％、糖蜜6％和无机盐0.85％；无机盐包括(nh4)2so40.6％、kh2po40.21％和mgso40.04％；s3：将复合菌剂50℃干燥后粉化，粉碎过60目筛，得到微生态制剂。实施例三本实施例提供一种微生态制剂的制备方法，包括步骤：s1：将米曲霉使用发酵培养基在28℃培养10h，得到米曲霉菌液体菌种；将产朊假丝酵母菌使用发酵培养基在22℃培养24h，得到产朊假丝酵母菌液体菌种；将凝结芽孢杆菌使用液体培养基在28℃培养24h，得到凝结芽孢杆菌液体菌种；将乳酸片球菌使用发酵培养基在37℃培养18h，得到乳酸片球菌液体菌种；其中，米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129；s2：在固体发酵培养基中，先接种米曲霉菌液体菌种，接种量为2％，培养7h；然后接种产朊假丝酵母菌液体菌种，接种量为3％，培养24h；再接种凝结芽孢杆菌液体菌种和乳酸片球菌液体菌种，凝结芽孢杆菌液体菌种接种量为5％，乳酸片球菌液体菌种的接种量为10％，培养24h，获得富含有益菌及其代谢产物的复合菌剂；其中，整个固体发酵培养的温度为22℃；固体发酵培养基的原料组分按重量百分比计，包括：壳聚糖5％、黄芪多糖1.5％、木聚糖2％、玉米粉30％、麸皮25％、豆粕粉3.5％、棉籽粕1.5％、糖蜜5％和无机盐0.85％；无机盐包括(nh4)2so40.6％、kh2po40.21％和mgso40.04％；s3：将复合菌剂50℃干燥后粉化，粉碎过60目筛，得到微生态制剂。实施例四本实施例提供一种微生态制剂的制备方法，包括步骤：s1：将米曲霉使用发酵培养基在40℃培养20h，得到米曲霉菌液体菌种；将产朊假丝酵母菌使用发酵培养基在32℃培养48h，得到产朊假丝酵母菌液体菌种；将凝结芽孢杆菌使用液体培养基在42℃培养48h，得到凝结芽孢杆菌液体菌种；将乳酸片球菌使用发酵培养基在50℃培养24h，得到乳酸片球菌液体菌种；其中，米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129；s2：在固体发酵培养基中，先接种米曲霉菌液体菌种，接种量为5％，培养10h；然后接种产朊假丝酵母菌液体菌种，接种量为5％，培养24h；再接种凝结芽孢杆菌液体菌种和乳酸片球菌液体菌种，凝结芽孢杆菌液体菌种接种量为7％，乳酸片球菌液体菌种的接种量为15％，培养48h，获得富含有益菌及其代谢产物的复合菌剂；其中，整个固体发酵培养的温度为42℃；固体发酵培养基的原料组分按重量百分比计，包括：壳聚糖12％、黄芪多糖5％、木聚糖3.5％、玉米粉50％、麸皮35％、豆粕粉5％、棉籽粕2.5％、糖蜜7％和无机盐0.85％；无机盐包括(nh4)2so40.6％、kh2po40.21％和mgso40.04％；s3：将复合菌剂50℃干燥后粉化，粉碎过60目筛，得到微生态制剂。对比例一本对比例提供一种微生态制剂的制备方法，包括步骤：s1：将米曲霉使用发酵培养基在34℃培养15h，得到米曲霉菌液体菌种；将产朊假丝酵母菌使用发酵培养基在27℃培养36h，得到产朊假丝酵母菌液体菌种；将凝结芽孢杆菌使用液体培养基在35℃培养36h，得到凝结芽孢杆菌液体菌种；将乳酸片球菌使用发酵培养基在42℃培养20h，得到乳酸片球菌液体菌种；其中，米曲霉的菌株保藏编号为cctccaf2014001，产朊假丝酵母的菌株保藏编号为cctccay91011，凝结芽孢杆菌的菌株保藏编号为cctccab92066，乳酸片球菌的菌株保藏编号为cctccab2013129；s2：在固体发酵培养基中，将米曲霉菌液体菌种、产朊假丝酵母菌液体菌种、凝结芽孢杆菌液体菌种和乳酸片球菌液体菌种同时接种，米曲霉菌液体菌种的接种量为3％，产朊假丝酵母菌液体菌种的接种量为4％，凝结芽孢杆菌液体菌种接种量为6％，乳酸片球菌液体菌种的接种量为12％，培养68h，获得富含有益菌及其代谢产物的复合菌剂；其中，整个固体发酵培养的温度为32℃；固体发酵培养基的原料组分按重量百分比计，包括：壳聚糖8％、黄芪多糖3.6％、木聚糖2.5％、玉米粉40％、麸皮30％、豆粕粉4.5％、棉籽粕2.0％、糖蜜6％和无机盐0.85％；无机盐包括(nh4)2so40.6％、kh2po40.21％和mgso40.04％；s3：将复合菌剂50℃干燥后粉化，粉碎过60目筛，得到微生态制剂。将本发明实施例二至实施例四制备得到的微生态制剂，通过功能学试验来系统评价其效果，并以对比例提供的微生态制剂作为对照。1、肉牛用微生态制剂降低畜禽体脂减脂率的效果试验动物：选择健康西门塔尔改良牛50头，随机均分为5组，即对照组和试验组。试验方法：试验期为90天，试验期间所有试验牛自由采食和饮水，按照常规免疫程序进行免疫，除饲喂的日粮中的微生态制剂不同外，其它饲养条件完全相同。其中，对照组用普通日粮进行饲喂(普通日粮组成及配比见表1)，试验组为在普通日粮中按5.0kg/t日粮的比例分别添加实施例二至实施例四、对比例一制备得到的微生态制剂进行饲喂。试验结果：饲喂90天后，测定牛的体脂减脂率，和肝脏饱和脂肪酸含量。测定方法参照gb/t9695.2-2008肉与肉制品脂肪酸测定。其中，体脂减脂率＝(实施例或对比例组的牛腹壁脂肪量-对照组的牛腹壁脂肪量)/对照组的牛腹壁脂肪量。具体结果如表2和表3所示。表1肉牛普通日粮组成及配比表2牛的体脂减脂率组别体脂减脂率对照组-实施例二50％实施例三48％实施例四49％对比例一22％表3牛的肝脏饱和脂肪酸含量组别肝脏饱和脂肪酸含量对照组57.9％实施例二56.2％实施例三56.4％实施例四56.3％对比例一57.2％2、肉鸡用微生态制剂降低畜禽体脂减脂率的效果试验动物：选择健康罗斯308肉鸡500羽，随机均分为5组，即对照组和试验组。试验方法：从雏鸡14日龄开始到44日龄出栏共试验期为30天，试验期间所有肉鸡自由采食和饮水，按照常规免疫程序进行免疫，除饲喂的日粮不同外，其它饲养条件完全相同。其中，对照组用肉鸡普通日粮(肉鸡普通日粮的组成及配比见表4)进行饲喂，试验组为在普通日粮中按1.0kg/t日粮的比例分别添加实施例二至实施例四、对比例一制备得到的微生态制剂进行饲喂。试验结果：饲喂30天后，测定鸡的体脂减脂率，和肝脏饱和脂肪酸含量。其中，体脂减脂率＝(实施例或对比例组的鸡腹壁脂肪量-对照组的鸡腹壁脂肪量)/对照组的鸡腹壁脂肪量。具体结果如表5和表6所示。表4肉鸡普通日粮组成及配比表5鸡的体脂减脂率组别体脂减脂率对照组-实施例二55％实施例三52％实施例四54％对比例一28％表6鸡的肝脏饱和脂肪酸含量组别肝脏饱和脂肪酸含量对照组39.39％实施例二37.02％实施例三37.11％实施例四37.08％对比例一38.14％3、肉猪用微生态制剂降低畜禽体脂减脂率的效果试验动物：选择健康肉猪50头，随机均分为5组，即对照组和试验组。试验方法：试验期为60天，试验期间所有试验猪自由采食和饮水，按照常规免疫程序进行免疫，除饲喂的日粮中的微生态制剂不同外，其它饲养条件完全相同。其中，对照组用普通日粮进行饲喂，试验组为在普通日粮中按3.0kg/t日粮的比例分别添加实施例二至实施例四、对比例一制备得到的微生态制剂进行饲喂。试验结果：饲喂60天后，测定猪的体脂减脂率，和肝脏饱和脂肪酸含量。其中，体脂减脂率＝(实施例或对比例组的猪腹壁脂肪量-对照组的猪腹壁脂肪量)/对照组的猪腹壁脂肪量。具体结果如表7和表5所示。表7猪的体脂减脂率组别体脂减脂率对照组-实施例二25％实施例三22％实施例四25％对比例一9％表8猪的肝脏饱和脂肪酸含量组别肝脏饱和脂肪酸含量对照组42.18％实施例二41.50％实施例三41.53％实施例四41.51％对比例一41.96％需要注意的是，本发明提供的微生态制剂中：有益活菌总数3×109-5×109cfu/g，脂肪酶活性：60u/g-90u/g。除非另有说明，本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域技术人员所理解的通常意义。除非另外具体说明，否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对步骤、数字表达式和数值并不限制本发明的范围。在这里示出和描述的所有示例中，除非另有规定，任何具体值应被解释为仅仅是示例性的，而不是作为限制，因此，示例性实施例的其他示例可以具有不同的值。在本发明的描述中，需要理解的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个以上，除非另有明确具体的限定。最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围，其均应涵盖在本发明的保护范围当中。当前第1页12