本发明涉及一种大鲵黏液的采集方法。
背景技术：
大鲵自古以来就是传统的药用动物，在《本草纲目》、《草本拾遗》等药典中均有描述。中医认为大鲵性甘平，有补气、养血、益智、滋补、强壮等功效。主治神经衰弱，病后体虚，贫血，痢疾等。大鲵的皮肤、肌肉、脏器、骨骼、黏液等均可入药，可见其在中药学中的地位。
大鲵皮肤黏液腺细胞释放的黏糖蛋白与水结合形成黏液，覆盖在上皮游离面，形成了一道天然的保护屏障。黏液含有黏糖蛋白、低聚糖肽、无机盐以及“蛙皮素”等活性物质，与其它动物体表黏液相比，大鲵体表黏液多糖含量达27.5％。黏液糖蛋白不仅是细胞膜和细胞间基质的重要组成成分，也是生物体进行信号转导的重要活性物质。在生物进化过程中，大鲵体表黏液具有抵御环境变化、抗菌、抗疲劳、抗氧化等丰富的生物活性。
糖蛋白是一类结合蛋白，同时具有多糖和蛋白质的某些性质，大多可溶于水及稀酸、稀碱和酶解液中，因此可根据需求采用不同的溶剂提取分离糖蛋白。但在所有提取分离的这些步骤中应注意，必须保证糖蛋白生物大分子的完整性，防止高温、过酸、过碱及剧烈机械作用等破坏糖蛋白的分子结构而导致所得产物的生物活性丧失。目前大多采用碱提法、水提法、酸提法及酶解法对大鲵皮肤黏液中糖蛋白进行提取，这些方法中或有高温、或有过酸、过碱的可能，均有破坏糖蛋白活性的可能，因此发明一种无高温，无酸、无碱参与的提取方法就非常必要了，既可保证大鲵黏液中生物活性物质的浸出，又可保证生物活性物质在提取过程中不氧化失活，提高大鲵黏液提取物的品质及产量。
技术实现要素：
为克服现有技术的不足之处，本发明提供一种大鲵黏液的采集方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种大鲵黏液的采集方法，其特征在于，包括步骤如下：
(1)将大鲵黏液在低温条件下机械剪碎，所述低温条件为18℃以下；
(2)将大鲵黏液碎料经胶体磨研磨成均匀的浆体；
(3)将充分分散的大鲵黏液浆加入提取介质中，所述提取介质为纯净水，重量比为1：10－30，放入低温循环超声萃取仪中进行裂解提取，将大鲵黏液的活性物质充分释放出来，完全溶于提取介质中；所述裂解提取为采取超声裂解技术，使大鲵黏液中大分子蛋白裂解成小分子活性糖蛋白肽，提取温度为10℃以下，超声频度为20khz，强度为100－1000w，处理时间为10－60分钟；
(4)将所述步骤(3)中的大鲵黏液提取液采用高速低温离心处理技术，保证提取液中的不溶物全部被沉淀出来，以将新鲜的大鲵黏液制备成黏液浆体，保证浸提过程中生物活性物质的稳定性；所述高速低温离心处理技术是在10℃以下低温环境下，转速10000rpm以上离心处理10－30min；
(5)取所述步骤(4)中的离心上清液，于冷冻干燥机内冷冻干燥成型；所述冷冻干燥成型是最大限度地保证大鲵黏液中的生物活性物质与提取介质分离时不发生氧化，避免活性物质失活。
本发明的有益效果是：本发明可以最大限度的保持大鲵黏液的活性营养成分，克服了传统碱提法、水提法、酸提法及酶解法等高温、过酸、过碱等的影响，造成活性物质失活等问题；本发明提取过程所需时间短，仅需几十分钟即可完成提取，而普通的提取工艺至少几个小时的时间，避免了长时间受热、受其他刺激等对于活性成分的破坏；本发明提取出来的大鲵黏液无杂质、无沉淀，因为采用超速低温离心处理技术，保证提取液中的不溶物全部被沉淀出来，有效保证了大鲵黏液有效成分的质量。
具体实施方式
下面将结合具体实施例来详细说明本发明，在此本发明的示意性实施例以及说明用来解释本发明，但并不作为对本发明的限定。
实施例1
一种大鲵黏液的采集方法，包括步骤如下：
(1)将大鲵黏液在低温条件下机械剪碎，所述低温条件为18℃以下；
(2)将大鲵黏液碎料经胶体磨研磨成均匀的浆体；
(3)将充分分散的大鲵黏液浆加入提取介质中，所述提取介质为纯净水，重量比为1：30，放入低温循环超声萃取仪中进行裂解提取，将大鲵黏液的活性物质充分释放出来，完全溶于提取介质中；所述裂解提取为采取超声裂解技术，使大鲵黏液中大分子蛋白裂解成小分子活性糖蛋白肽，提取温度为10℃以下，超声频度为20khz，强度为1000w，处理时间为60分钟；
(4)将所述步骤(3)中的大鲵黏液提取液采用高速低温离心处理技术，保证提取液中的不溶物全部被沉淀出来，以将新鲜的大鲵黏液制备成黏液浆体，保证浸提过程中生物活性物质的稳定性；所述高速低温离心处理技术是在10℃以下低温环境下，转速10000rpm以上离心处理30min；
(5)取所述步骤(4)中的离心上清液，于冷冻干燥机内冷冻干燥成型；所述冷冻干燥成型是最大限度地保证大鲵黏液中的生物活性物质与提取介质分离时不发生氧化，避免活性物质失活。
实施例2
一种大鲵黏液的采集方法，包括步骤如下：
(1)将大鲵黏液在低温条件下机械剪碎，所述低温条件为18℃以下；
(2)将大鲵黏液碎料经胶体磨研磨成均匀的浆体；
(3)将充分分散的大鲵黏液浆加入提取介质中，所述提取介质为纯净水，重量比为1：10，放入低温循环超声萃取仪中进行裂解提取，将大鲵黏液的活性物质充分释放出来，完全溶于提取介质中；所述裂解提取为采取超声裂解技术，使大鲵黏液中大分子蛋白裂解成小分子活性糖蛋白肽，提取温度为10℃以下，超声频度为20khz，强度为100w，处理时间为10分钟；
(4)将所述步骤(3)中的大鲵黏液提取液采用高速低温离心处理技术，保证提取液中的不溶物全部被沉淀出来，以将新鲜的大鲵黏液制备成黏液浆体，保证浸提过程中生物活性物质的稳定性；所述高速低温离心处理技术是在10℃以下低温环境下，转速10000rpm以上离心处理10min；
(5)取所述步骤(4)中的离心上清液，于冷冻干燥机内冷冻干燥成型；所述冷冻干燥成型是最大限度地保证大鲵黏液中的生物活性物质与提取介质分离时不发生氧化，避免活性物质失活。
实施例3
一种大鲵黏液的采集方法，包括步骤如下：
(1)将大鲵黏液在低温条件下机械剪碎，所述低温条件为18℃以下；
(2)将大鲵黏液碎料经胶体磨研磨成均匀的浆体；
(3)将充分分散的大鲵黏液浆加入提取介质中，所述提取介质为纯净水，重量比为1：20，放入低温循环超声萃取仪中进行裂解提取，将大鲵黏液的活性物质充分释放出来，完全溶于提取介质中；所述裂解提取为采取超声裂解技术，使大鲵黏液中大分子蛋白裂解成小分子活性糖蛋白肽，提取温度为10℃以下，超声频度为20khz，强度为500w，处理时间为40分钟；
(4)将所述步骤(3)中的大鲵黏液提取液采用高速低温离心处理技术，保证提取液中的不溶物全部被沉淀出来，以将新鲜的大鲵黏液制备成黏液浆体，保证浸提过程中生物活性物质的稳定性；所述高速低温离心处理技术是在10℃以下低温环境下，转速10000rpm以上离心处理20min；
(5)取所述步骤(4)中的离心上清液，于冷冻干燥机内冷冻干燥成型；所述冷冻干燥成型是最大限度地保证大鲵黏液中的生物活性物质与提取介质分离时不发生氧化，避免活性物质失活。