本发明涉及中药提取领域，具体涉及一种从芸香科植物的籽中提纯吴茱萸内酯的方法。
背景技术：
吴茱萸内酯又名柠檬苦素，在桔籽等芸香科植物中属于含量较大的一类化合物，是一种含呋喃环且高度氧化的四环三萜类化合物。柠檬苦素类化合物种类繁多、来源广泛、化学成分复杂、应用多元化，具有很高的研究和实用价值，尤其具有镇痛、抗炎、抗肿瘤等方面的活性，所以吴茱萸内酯是一种具很好开发前景的化合物。
中国专利cn101550141公开了一种吴茱萸内酯对照品的制备方法，步骤为：取吴茱萸药材粉碎成粗粉，用乙醇回流提取，回收溶剂，得流浸膏，依次用石油醚、氯仿萃取，取氯仿层过硅胶柱，收集含吴茱萸内酯的流份，回收溶剂，凝胶柱层析分离，得吴茱萸内酯对照品。该方法采用柱层析技术，操作复杂，成本高。
中国专利cn1279242a公开的提取吴茱萸内酯的方法需要反复进行脱脂和结晶，工艺效率低，有机溶剂用量大。
中国专利cn102586004a公开的从柑桔核中提取吴茱萸内酯的方法需要使用超临界二氧化碳提取方法，设备要求高，不利于放大生产。
中国专利cn104004051a采用榨汁及盐析方法提取吴茱萸内酯，中国专利cn105153270a采用碱溶酸沉的方法制备吴茱萸内酯，上述专利中的提纯方法操作繁琐，有机溶剂用量大。
技术实现要素：
为了克服现有技术中吴茱萸内酯提取工艺存在的缺点，本发明的目的是提供一种工艺简单、环保、且适合工业化大生产的从芸香科植物的籽中提取吴茱萸内酯的方法。
本发明提出了一种新的绿色高效提取纯化吴茱萸内酯的方法，该方法所用原料来源广泛、易得，制备方法绿色高效，适用于吴茱萸内酯的大规模工业生产。
为达到以上目的，本发明的主要技术方案为：乙醇回流提取、萃取、过滤、结晶等步骤得到高纯度的吴茱萸内酯。
一种快速高效制备吴茱萸内酯的方法，其特征在于主要包括以下步骤：
(1)乙醇回流提取：将芸香科植物的籽药材粉碎成粗粉，乙醇溶液回流提取，合并醇提液，浓缩；
(2)萃取：将上述浓缩液加石油醚萃取，脱脂；
(3)过滤：合并萃取后水相，抽滤，取滤饼，烘干；
(4)结晶：将上述所得粗品用有机溶剂结晶，得吴茱萸内酯纯品。
优选地，所述的芸香科植物的籽为柠檬籽、柑橘籽、桔籽、橙子籽或柚子籽。
优选地，步骤(1)使用的乙醇溶液浓度为20％～80％，桔籽粗粉与乙醇溶液的料液比(m/v)为1:1～1:10，提取次数为1～3次，浓缩液的含醇量为0～10％。
优选地，步骤(2)中石油醚的萃取次数为1～4次，每次萃取用量相当于浓缩液的1～3倍。
优选地，步骤(3)中抽滤后所得滤饼，用1～2倍量的纯化水水洗。
优选地，步骤(4)中结晶所用有机溶剂为二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、乙腈、异丙醇中的一种或几种，烘干物与结晶溶剂的比例(m/v)为10～40。
本发明步骤简单，容易操作，所用有机溶剂种类及用量少，重现性高，通过本方法所得吴茱萸内酯纯度达到95％以上。
与现有技术中吴茱萸内酯的提纯方法相比，本发明的优点在于：
(1)本发明提纯过程中萃取脱脂这一步骤，与其他专利和文献报道的吴茱萸提取纯化相比较，萃取脱脂的方法所用溶剂量极少，同时对目标物进行了富集，不需要使用大孔树脂柱等除杂步骤，而且不需使用特殊设备，不需用多种有机溶剂，简便可行，缩短了纯化步骤，大大提高了制备吴茱萸内酯的效率和经济性。
(2)本发明步骤少，耗时短，得率高，操作简便，易于工业化生产。
(3)本发明溶剂用量少，并且所用溶剂毒性较小，绿色环保。
具体实施方式
下面将结合具体实施案例进一步说明本发明，本发明要求保护的范围并不局限于以下实施方式。
实施案例1
取桔籽0.5kg，加0.5l体积分数20％的乙醇，加热回流提取三次，每次提取1小时，合并两次提取液，浓缩至提取液含醇量为3％加等量体积的石油醚萃取4次，合并萃取水相，抽滤，并用等体积的纯化水洗涤滤饼，最终得滤饼，抽真空干燥，得吴茱萸内酯粗品7.032g。上述该粗品加入10倍量二氯甲烷-丙酮混合溶剂，加热回流溶解，不溶物趁热过滤，滤液降至室温，静置析晶，过滤干燥，得吴茱萸内酯1.26g，含量为96.32％。
实施案例2
取柠檬籽0.5kg，加3l体积分数50％的乙醇，加热回流提取两次，每次提取2小时，合并提取液，浓缩至提取液乙醇含量为5％，加3倍量体积的石油醚萃取1次，抽滤萃取水相，并用2倍体积的纯化水洗涤滤饼，最终得滤饼，抽真空干燥，得吴茱萸内酯粗品8.261g。上述该粗品加入30倍量二氯甲烷-乙酸乙酯混合溶剂，加热回流溶解，不溶物趁热过滤，滤液降至室温，静置析晶，过滤干燥，得吴茱萸内酯1.35g，含量为97.13％。
实施案例3
取柑橘籽1kg，加10l体积分数70％的乙醇，加热回流提取一次，每次提取3小时，合并两次提取液，浓缩至提取液乙醇含量为8％，加等量体积的石油醚萃取2次，合并萃取水相，抽滤，并用等体积的纯化水洗涤滤饼，最终得滤饼，抽真空干燥，得吴茱萸内酯粗品14.737g。
上述该粗品加入40倍量二氯甲烷-异丙醇混合溶剂，加热回流溶解，不溶物趁热过滤，滤液降至室温，静置析晶，过滤干燥，得吴茱萸内酯2.58g，含量为95.86％。
实施案例4
取橙子籽2kg，加20l体积分数80％的乙醇，加热回流提取两次，每次提取4小时，合并两次提取液，浓缩至提取液乙醇含量为10％，加等体积的石油醚萃取2次，合并萃取水相，抽滤，并用2倍量的纯化水洗涤滤饼，最终得滤饼，抽真空干燥，得吴茱萸内酯粗品22.004g。
上述该粗品加入20倍量乙腈-异丙醇混合溶剂，加热回流溶解，不溶物趁热过滤，滤液降至室温，静置析晶，过滤干燥，继续用二氯甲烷重结晶，得吴茱萸内酯4.339g，含量为96.86％。
实施案例5
取桔籽3kg，加25l体积分数60％的乙醇，加热回流提取两次，每次提取2小时，合并两次提取液，浓缩至提取液乙醇含量为3％，加等量体积的石油醚萃取3次，合并萃取水相，抽滤，并用等体积的纯化水洗涤滤饼，最终得滤饼，抽真空干燥，得吴茱萸内酯粗品41.371g。上述该粗品加入40倍量二氯甲烷-乙腈混合溶剂，加热回流溶解，不溶物趁热过滤，滤液降至室温，静置析晶，过滤干燥，继续用二氯甲烷重结晶，得吴茱萸内酯7.482g，含量为98.31％。
实施案例6
取柚子籽2.5kg，加20l体积分数50％的乙醇，加热回流提取两次，每次提取4小时，合并两次提取液，浓缩至提取液乙醇含量为5％，加等体积的石油醚萃取2次，合并萃取水相，抽滤，并用2倍量的纯化水洗涤滤饼，最终得滤饼，抽真空干燥，得吴茱萸内酯粗品30.118g。
上述该粗品加入10倍量乙腈-异丙醇混合溶剂，加热回流溶解，不溶物趁热过滤，滤液降至室温，静置析晶，过滤干燥，继续用二氯甲烷重结晶，得吴茱萸内酯5.128g，含量为96.99％。