本发明涉及生物技术领域，具体是一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂。
本发明还涉及一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂的制备方法及应用。
背景技术：
生姜青枯病俗称“姜瘟病”，是由茄科劳尔氏菌(ralstoniasolanacearum)引起的一种细菌性病害。这种土传病原菌主要分布于热带亚热带，其寄主范围十分广泛，可以侵染50多个科300多种作物。该病原菌主要由土壤传播，根部侵染后在维管束中大量繁殖造成维管束的堵塞，影响寄主作物的水分运输，从而造成萎蔫死亡。这种病害由于地理分布范围广，寄主范围广，所以一旦侵染非常容易造成毁灭性打击，到目前为止还没有有效的防治手段。
生姜是我国重要的经济作物，姜瘟病在20世纪50年代既有报道，近年来发病趋势逐渐严重，据调查,田间一般发病株率为10％～20％，重病田高达30％～40％，局部地块甚至绝产失收。而且由于发病降低品质，造成了严重的经济损失。
长期以来,国内外对姜瘟病的防治多从农业防治和化学防治出发,防治效果不明显,而且造成了一定程度的环境污染。因此，生物防治由于其自身的优点开始受到越来越多的重视。综上所述，开发新的、更为高效和安全的微生物杀菌剂控制姜瘟病的发生是提高社会生产总量的需要，同时更是农业安全可持续发展的需要，符号社会发展需求。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供了一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂。
为解决以上技术问题，本发明现提出以下技术方案：一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂，由以下重量份的原料组成：摩加夫芽胞杆菌0.8-1.2份、层出镰刀菌0.6-1.0份、具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-70.3-0.5份及蒸馏水5.0-10.0份。
进一步的，由以下重量份的原料组成：摩加夫芽胞杆菌1.0份、层出镰刀菌0.8份、具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-70.4份及蒸馏水7份。
进一步的，所述摩加夫芽胞杆菌的培养方法为：先将摩加夫芽孢杆菌在种子培养基中培养至菌密度od600值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的摩加夫芽孢杆菌的菌株，37℃培养，直至摩加夫芽孢杆菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基。
进一步的，所述种子培养基的配方为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂15-20g，蒸馏水1000ml，ph值7.0-7.2，121℃灭菌30min；所述100重量份培养基的配方为:葡萄糖15g，淀粉1g，豆饼粉25g，硫酸锰1g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.5g，酵母膏0.2g，氯化铁0.1g，碳酸钙0.1g，ph7.0-7.2。
进一步的，所述层出镰刀菌的培养方法为：先将层出镰刀菌在pda培养基中培养至菌密度od600值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的层出镰刀菌的菌株，37℃培养，直至层出镰刀菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基；该菌在pda培养基上的平均生长速度为7mm/d，12天长满整个平板。培养基基质反面为深黄色，菌落呈白色，蓬松凸起，棉絮状，密集。菌丝显微形态(400×)：菌丝分隔清楚且多，直径3-5μm，其分生孢子梗较直，顶端呈腊肠形，未见明显孢子。发酵液中菌体形态：菌液略浑浊，发酵液中菌丝为白色云雾状，液面未见气泡。产生真菌毒素抑制某些植物生长；发酵产生抗肿瘤活性药物苦马豆素(swainsonine)，其发酵产物乙酸乙酯极性段拥有良好的抑菌活性。
进一步的，所述pda培养基的成分为：蒸馏水1000ml、马铃薯200g、琼脂粉20g、葡萄糖20g，121℃气压2.4×105pa下灭菌20min；所述100重量份培养基的配方为:葡萄糖15g，淀粉1g，豆饼粉25g，硫酸锰1g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.5g，酵母膏0.2g，氯化铁0.1g，碳酸钙0.1g，ph7.0-7.2。
进一步的，所述具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-7的培养方法为：将斜面培养的菌丝接至pda固体平板25-35℃培养72-120小时，再转接至pda液体培养基25-35℃活化48-72小时，按体积比3-10％接种量，转接入液体产酶培养基中，ph至6-9，25-35℃下，培养72小时至120小时。
进一步的，所述pda固体和液体培养基的成分为：蒸馏水1000ml、马铃薯200g、琼脂粉20g、葡萄糖20g，121℃气压2.4×105pa下灭菌20min；所述液体产酶培养基为：含量50％栀子苷20g/l，nano33g/l，kh2po440g/l其余为水,用naoh调ph至7.5。
本发明的另一目的是还提供了一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂的制备方法，，包括以下步骤：(1)将摩加夫芽孢杆菌在种子培养基中培养至菌密度od600值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的摩加夫芽孢杆菌的菌株，37℃培养，直至摩加夫芽孢杆菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基；(2)将层出镰刀菌在pda培养基中培养至菌密度od600值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的层出镰刀菌的菌株，37℃培养，直至层出镰刀菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基；(3)将斜面培养的具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-7接至pda固体平板25-35℃培养72-120小时，再转接至pda液体培养基25-35℃活化48-72小时，按体积比3-10％接种量，转接入液体产酶培养基中，ph至6-9，25-35℃下，培养72小时至120小时；(4)向容器中按配比添加蒸馏水，在室温下密封一段时间；(5)室温下，然后依次按配比添加摩加夫芽孢杆菌、层出镰刀菌和具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-7，震荡均匀，即可。
本发明的再一目的是促生制剂在防治姜青枯病中的应用。
与现有技术相比较，本发明的有益效果在于：1、本发明是专门针对生姜青枯病开发的生防制剂。由于是生物制剂，完全没有因化学农药的使用所带来的一系列问题，因而有利于蔬菜的无公害生产，农民可以不用或减少其他化学农药的用量，这不仅可为农民节省开支，而且有利于蔬菜的出口，同时，降低了生姜的发病株率，由原来的20-40％降到10％以下，可为农民增加收入，降低了成本，提高了经济价值；
2、本发明的促生制剂制作方法简单，实用性强。
具体实施方式
为使对本发明的结构特征及所达成的功效有更进一步的了解和认识，用以较佳的实施例详细的说明，具体说明如下：
实施例1
一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂，由以下重量份的原料组成：摩加夫芽胞杆菌0.8份、层出镰刀菌0.6份、具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-70.3份及蒸馏水5.0份。
实施例2
一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂，由以下重量份的原料组成：摩加夫芽胞杆菌1.0份、层出镰刀菌0.8份、具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-70.4份及蒸馏水7份。
实施例3
一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂，由以下重量份的原料组成：摩加夫芽胞杆菌1.2份、层出镰刀菌1.0份、具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-70.5份及蒸馏水10.0份。
实施例4
一种防治姜青枯病的银杏源促生制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)将摩加夫芽孢杆菌在种子培养基中培养至菌密度od600值为0.7，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的摩加夫芽孢杆菌的菌株，37℃培养，直至摩加夫芽孢杆菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基；(2)将层出镰刀菌在pda培养基中培养至菌密度od600值为0.7，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的层出镰刀菌的菌株，37℃培养，直至层出镰刀菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基；(3)将斜面培养的具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-7接至pda固体平板30℃培养90小时，再转接至pda液体培养基30℃活化60小时，按体积比7％接种量，转接入液体产酶培养基中，ph至8，30℃下，培养100小时；(4)向容器中按配比添加蒸馏水，在室温下密封一段时间；(5)室温下，然后依次按配比添加摩加夫芽孢杆菌、层出镰刀菌和具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-7，震荡均匀，即可。
进一步的，本实施例中，摩加夫芽胞杆菌的培养方法为：先将摩加夫芽孢杆菌在种子培养基中培养至菌密度od600值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的摩加夫芽孢杆菌的菌株，37℃培养，直至摩加夫芽孢杆菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基；其中，种子培养基的配方为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂15-20g，蒸馏水1000ml，ph值7.0-7.2，121℃灭菌30min；100重量份培养基的配方为:葡萄糖15g，淀粉1g，豆饼粉25g，硫酸锰1g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.5g，酵母膏0.2g，氯化铁0.1g，碳酸钙0.1g，ph7.1。
进一步的，本实施例中，层出镰刀菌的培养方法为：先将层出镰刀菌在pda培养基中培养至菌密度od600值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的层出镰刀菌的菌株，37℃培养，直至层出镰刀菌的活菌数为2-20×207个/克的培养基；其中，pda培养基的成分为：蒸馏水1000ml、马铃薯200g、琼脂粉20g、葡萄糖20g，121℃气压2.4×105pa下灭菌20min；100重量份培养基的配方为:葡萄糖15g，淀粉1g，豆饼粉25g，硫酸锰1g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.5g，酵母膏0.2g，氯化铁0.1g，碳酸钙0.1g，ph7.0-7.2。
进一步的，本实施例中，具有广谱抗菌活性的银杏内生真菌腐皮镰孢菌t-7的培养方法为：将斜面培养的菌丝接至pda固体平板30℃培养90小时，再转接至pda液体培养基30℃活化60小时，按体积比6.5％接种量，转接入液体产酶培养基中，ph至8，30℃下，培养100小时。
试验例
通过试验例可以看出，本发明的促生制剂的每种成分均对防治姜青枯病有促进作用，但是组合在一起组成本发明的促进制剂后，生姜发病株率更低，成活率更高，效果更好，而且可以得出实施例2的各成分的配比促进作用最好，生姜发病株率仅为7％。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非用以对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的技术人员应当理解，其依然可以对前述实施例记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神与范围。