本发明涉及医药
技术领域：
，具体涉及苄烯叉苯肽类化合物，以它们为活性成分的药物组合物，以及它们在制备单胺氧化酶b(monoamineoxidaseb，mao-b)抑制剂中的应用，和它们在制备治疗帕金森症(parkinson’sdisease，pd)的药物中的应用。
背景技术：
帕金森病(parkinson’sdisease，pd)是一种常见的神经系统退行性性疾病，平均发病年龄为60岁左右，严重危及老年人的健康，对社会和经济造成巨大的影响。帕金森病最主要的病理改变是基底神经节黑质多巴胺(dopamine,da)能神经元的变性死亡，由此而引起纹状体da含量显著性减少而致病。单胺氧化酶(monoamineoxidase，mao)是人体内催化单胺类物质氧化脱氨反应的酶，其氧化脱氨的产物为相应的醛、胺以及过氧化氢。根据底物的不同，单胺氧化酶分为mao-a和mao-b两种。mao-b在脑组织的基底神经节部位有大量分布，并且活性随年龄增长而增加。由于mao-b可以代谢da，加重了pd患者脑部相关部位的da缺失。另外，由于mao-b催化反应产生的醛和过氧化氢均有神经细胞毒性，而pd患者黑质部位醛脱氢酶不足强化了由mao-b催化反应导致的神经毒性。因此抑制mao-b可以通过升高脑中da等单氨神经递质和降低神经毒性两种途径治疗pd。早期桎梏mao抑制剂应用的主要原因在于患者使用不可逆和非选择性mao抑制剂时需要严格遵守低酪饮食方针，防止由于摄入酪胺触发致命性高血压。但是随着研究深入发现mao-b在人体内比例和分布特点，现在一般均认为可逆和选择性mao-b抑制剂在pd治疗是安全和可接受的。因此本发明的目的是提供符合上述标准的、具有不同于以往的新型结构骨架的化合物。本发明的式(i)化合物具有成为选择性mao-b抑制剂的潜力，至今未见该化合物在治疗pd的相关报道。技术实现要素：本发明的目的是提供苄烯叉苯肽类化合物，开发具有同类骨架的先导化合物。提供苄烯叉苯肽类化合物在制备治疗帕金森症的药物中的应用，可作为治疗帕金森症的药物，而且本发明化合物易合成，成本廉价和副作用小。为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：如下结构式(i)所示的苄烯叉苯肽类衍生物，式(i)中，x为如下基团之一：y为如下基团之一：r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9相互独立的选自：-h、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-ch2oh、-oh、-och3、-och2ch3、-cf3、-cn、-f、-cl、-br、-i、-no2、-n(ch3)2、-nh2、-nhac、如下结构式所示的苄烯叉苯肽化合物32、33、35、36、37、40、42、47、48、49、50、51、53、56、57、58、59、62、44、43、39，药物组合物，其包含所述的苄烯叉苯肽类化合物和至少一种药学上可接受的载体。所述的苄烯叉苯肽类化合物在制备单胺氧化酶b抑制剂的应用。所述的苄烯叉苯肽类化合物用作为单胺氧化酶b抑制剂。所述的苄烯叉苯肽类化合物在制备治疗帕金森症的药物中的应用。所述的苄烯叉苯肽类化合物的制备方法，其化学反应方程式如下：将相应取代邻苯二甲酸酐1mmol、相应取代苯乙酸1mmol和碱0.1mmol加入密封管，100-200℃加热，反应完成后，冷至室温，加入50ml二氯甲烷溶解，用饱和食盐水洗涤，收集有机相柱层析分离，即可得到相应苯肽化合物32、33、35、36、37、40、42、47、48、49、50、51、53、56、57、58、59、62，苄烯叉苯肽类化合物44的制备方法，其化学反应方程式如下：将化合物33溶于甲醇，加入10％重量比pd/c，在室温下用氢气还原，反应完成后，过滤除去pd/c，柱层析分离化合物44。苄烯叉苯肽类化合物43的制备方法，其化学反应方程式如下：将化合物specs-115、cui、cs2co3、nh4oac在氩气保护下下反应，反应结束后，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗涤，合并有机相，无水mgso4干燥，过滤浓缩后柱层析分离得到化合物43。苄烯叉苯肽类化合物39的制备方法，其化学反应方程式如下：中间体a的制备：邻碘苯甲酸、socl2和催化量的dmf在dcm中室温反应4h后，减压蒸馏除去溶剂，在冰盐浴下加入dcm、n,o-二甲羟胺盐酸盐和吡啶，随后转移至室温反应至转化完毕，用二氯甲烷和饱和食盐水萃取，合并有机相用无水mgso4干燥，过滤浓缩柱层析分离得到中间体a；中间体b的制备：中间体a、pd(pph3)4、对氯苯乙炔和n-bunh2溶于thf，于室温下至反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭，二氯甲烷萃取，合并有机相后用mgso4干燥，过滤浓缩后柱层析分离得到中间体b；化合物39的制备：中间体b、cucl2和ncs溶于乙腈，加热反应至结束，加水淬灭，二氯甲烷萃取，合并有机相用无水mgso4干燥，过滤浓缩后柱层析分离得到化合物39。本发明通过长期研究首次发现并通过活性测试，验证了本发明式(i)的苄烯叉苯肽类化合物具有单氨氧化酶b(mao-b)抑制活性。该类化合物结构新颖，化学上易于合成。同时本发明还提供了式(i)中苄烯叉苯肽类化合物作为单氨氧化酶b(mao-b)靶标抑制剂的新用途。本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有0.1–99％，优选为0.5–90％的本发明化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的可药用载体或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、超填料以及药物制品辅剂。将所述的有效提取物或有效部位以单位体重服用量的形式使用。本发明的药物可经口服和口腔喷雾两种形式给药。口服可用其固体或液体制剂，如粉剂、片剂、糖衣片剂、胶囊、酊剂、糖浆、滴丸剂等。口腔喷雾可用其固体或液体制剂。本发明药物可用于治疗帕金森症。附图说明附图1和附图2为本发明苄烯叉苯肽类化合物specs-87和specs-115对单氨氧化酶b(mao-b)的体外抑制曲线图。具体实施方式下面结合附图，用本发明的下述实施例对本发明的实质性内容进行详细叙述，但并不以此来限定本发明。实施例1：本发明化合物部分购自荷兰specs公司(网址：http：//www.specs.com)，这一部分的化合物在库中相应的编号如下：化合物编号化合物编号specs-87aj-030/12105309specs-115ae-641/05032029实施例2：将相应取代邻苯二甲酸酐(1mmol)、相应取代苯乙酸(1mmol)和碱(0.1mmol)加入密封管，100-200℃加热。反应完成后，冷至室温，加入50ml二氯甲烷溶解，用饱和食盐水洗涤，收集有机相柱层析分离，即可得到相应苯肽化合物。该方法适用于实施例3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20。实施例3：化合物32(z)-3-(4-methoxybenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.93(d,j＝7.6hz,1h),7.82(d,j＝8.8hz,2h),7.72(m,2h),7.52(t,j＝7.2hz,1h),6.95(d,j＝8.8hz,2h),6.39(s,1h),3.86(s,3h).实施例4：化合物33(z)-3-(4-fluorobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(d,j＝8.0hz,1h),7.84(dd,j＝8.4,5.6hz,2h),7.77–7.71(m,2h),7.56(t,j＝7.1hz,1h),7.10(t,j＝8.4hz,2h),6.39(s,1h).实施例5：化合物35(z)-3-(4-chlorobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(d,j＝7.6hz,1h),7.84–7.67(m,3h),7.61–7.52(m,1h),7.38(d,j＝8.4hz,2h),6.38(s,1h).实施例6：化合物36(z)-3-(3-chlorobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.96(d,j＝7.6hz,1h),7.83(s,1h),7.77–7.73(m,2h),7.63–7.56(m,1h),7.35(t,j＝8.0hz,1h),7.29(d,j＝8.4hz,1h),7.20–7.09(m,1h),6.36(s,1h).实施例7：化合物37(z)-3-(4-methylbenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.94(d,j＝7.6hz,1h),7.81–7.66(m,3h),7.54(t,j＝7.6hz,1h),7.23(d,j＝8.0hz,2h),6.41(s,1h),2.39(s,3h).实施例8：化合物40(z)-3-(3-methoxybenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(d,j＝7.6hz,1h),7.82–7.68(m,2h),7.55(t,j＝7.2hz,1h),7.43(dd,j＝3.6,1.6hz,2h),7.32(dd,j＝12.0,8.0hz,1h),6.89(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),6.40(s,1h),3.88(s,3h).实施例9：化合物42(z)-3-(4-bromobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(d,j＝7.6hz,1h),7.81–7.68(m,4h),7.62–7.49(m,3h),6.36(s,1h).实施例10：化合物47(z)-3-(4-nitrobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.27(d,j＝8.8hz,1h),8.00(d,j＝8.8hz,1h),7.81(dt,j＝12.8,7.6hz,1h),7.64(t,j＝6.8hz,1h),6.47(s,1h).实施例11：化合物48(z)-3-(3,4-dichlorobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.97(d,j＝7.6hz,1h),7.92(d,j＝2.0hz,1h),7.79–7.73(m,2h),7.71(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),7.60(ddd,j＝8.8,6.0,2.2hz,1h),7.48(d,j＝8.8hz,1h),6.32(s,1h).实施例12：化合物49(z)-3-(3,4-difluorobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(d,j＝7.6hz,1h),7.81–7.70(m,3h),7.62–7.55(m,1h),7.54–7.46(m,1h),7.19(dd,j＝18.4,8.4hz,1h),6.33(s,1h).实施例13：化合物50(z)-3-((5-bromopyridin-2-yl)methylene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.96(d,j＝7.76hz,1h),7.82–7.68(m,3h),7.62–7.56(m,1h),7.56–7.48(m,1h),7.19(dd,j＝18.4,8.4hz,1h),6.33(s,1h).实施例14：化合物51(z)-6-chloro-3-(4-fluorobenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.91(s,1h),7.87–7.79(m,2h),7.70(s,2h),7.11(t,j＝8.8hz,2h),6.38(s,1h).实施例15：化合物53(z)-3-(4-(trifluoromethyl)benzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.97(t,j＝8.8hz,2h),7.81(t,j＝8.0hz,1h),7.76(d,j＝7.6hz,1h),7.66(d,j＝8.4hz,2h),7.61(t,j＝7.2hz,1h),6.45(s,1h).实施例16：化合物56(z)-3-(naphthalen-2-ylmethylene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.26(s,1h),8.04(d,j＝1.2hz,1h),7.97(d,j＝7.6hz,1h),7.91-7.88(m,2h),7.86-7.81(m,2h),7.75(t,j＝7.3hz,1h),7.57(t,j＝7.4hz,1h),7.53–7.44(m,2h),6.60(s,1h).实施例17：化合物57(z)-3-(4-fluorobenzylidene)naphtho[2,3-c]furan-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.51(d,j＝4.0hz,1h),8.20(s,1h),8.02(dd,j＝18.0,8.0hz,2h),7.86(t,j＝6.0hz,2h),7.68(t,j＝7.2hz,1h),7.61(t,j＝7.6hz,1h),7.11(t,j＝8.4hz,2h),6.52(d,j＝3.2hz,1h).实施例18：化合物58(z)-3-(4-(tert-butyl)benzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.94(d,j＝7.6hz,1h),7.84–7.75(m,3h),7.72(t,j＝7.2hz,1h),7.53(d,j＝7.2hz,1h),7.44(d,j＝8.4hz,2h),6.43(s,1h),1.35(s,9h).实施例19：化合物59(z)-3-(4-pentylbenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.96(t,j＝7.2hz,1h),7.77(d,j＝8.0hz,1h),7.72(t,j＝7.4hz,1h),7.54(t,j＝7.6hz,1h),7.23(d,j＝8.0hz,1h),6.42(s,1h),2.73–2.50(m,2h),1.65(dd,j＝14.8,7.2hz,2h),1.34(d,j＝3.2hz,5h),0.90(t,j＝7.2hz,3h).实施例20：化合物62(z)-3-(3-methylbenzylidene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.08(d,j＝7.6hz,1h),7.76(s,1h),7.67–7.62(m,2h),7.54(t,j＝7.6hz,1h),7.23(d,j＝8.0hz,2h),6.23(s,1h),2.43(s,3h).实施例21：将化合物33溶于甲醇，加入10wt％的pd/c，在室温下用氢气还原，反应完成后，过滤除去pd/c，柱层析分离化合物44。化合物443-(4-fluorobenzyl)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.84(d,j＝7.6hz,1h),7.63(t,j＝7.2hz,1h),7.50(t,j＝7.6hz,1h),7.24(d,j＝4.4hz,1h),7.16(dd,j＝8.4,5.6hz,2h),6.96(t,j＝8.6hz,2h),3.21(d,j＝6.4hz,1h).实施例22：将按照实施例1得到的化合物specs-115、cui、cs2co3、nh4oac在氩气保护下反应，反应结束后，加水淬灭，用二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗涤，合并有机相，无水mgso4干燥，过滤浓缩后柱层析分离得到化合物43。化合物43(z)-3-benzylideneisoindolin-1-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.13(bs,1h),7.88(d,j＝7.2hz,1h),7.80(d,j＝8.0hz,1h),7.68–7.62(m,1h),7.53(t,j＝7.6hz,1h),7.45(d,j＝4.8hz,4h),7.36–7.28(m,1h),6.56(s,1h).实施例23：中间体a的制备：邻碘苯甲酸、socl2和催化量的dmf在dcm中室温反应4h后，减压蒸馏除去溶剂，在冰盐浴下加入dcm、n,o-二甲羟胺盐酸盐和吡啶，随后转移至室温反应至转化完毕，用二氯甲烷和饱和食盐水萃取，合并有机相用无水mgso4干燥，过滤浓缩柱层析分离得到中间体a。中间体b的制备：中间体a、pd(pph3)4、对氯苯乙炔和n-bunh2溶于thf，于室温下至反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭，二氯甲烷萃取，合并有机相后用mgso4干燥，过滤浓缩后柱层析分离得到中间体b。化合物39的制备：中间体b、cucl2和ncs溶于乙腈，加热反应至结束，加水淬灭，二氯甲烷萃取，合并有机相用无水mgso4干燥，过滤浓缩后柱层析分离得到化合物39。化合物39(e)-3-(chloro(4-chlorophenyl)methylene)isobenzofuran-1(3h)-one1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.49(d,j＝8.0hz,1h),8.00(d,j＝7.6hz,1h),7.81(dd,j＝15.6,8.4hz,1h),7.65(t,j＝7.6hz,1h),7.43(d,j＝8.8hz,1h).实施例24：本发明化合物在500nm浓度对对单胺氧化酶b(mao-b)的抑制作用：1、实验原理单胺氧化酶b能够催化其底物类似物犬尿胺降解，生成4-喹啉醇。可以通过320nm激发波长/400nm发射波长检测反应生成的4-喹啉醇。化合物与单胺氧化酶b的混合液在37℃反应，如果化合物对单胺氧化酶b有抑制作用，那么单胺氧化酶b催化底物类似物犬尿胺降解的量就会减少，相应的反应产物4-喹啉醇减少，即在320nm激发波长/400nm发射波长的信号值变小，以此来筛选具有抑制活性的化合物。2、实验操作过程1)准备缓冲溶液；2)准备2x的化合物溶液，取50μl到96孔板每孔中。最终dmso浓度位2％；3)准备4x的酶溶液；4)准备4x底物溶液；5)转移25μl的酶溶液到96孔板每孔中；在空白对照空中加入25μl的缓冲溶液；6)在室温孵育15分钟；7)加入25μl的底物溶液到96孔板每孔中启动酶反应；8)在37℃反应30分钟；9)加入20μl的2mnaoh溶液终止反应。10)在320nm激发波长/400nm发射波长读取数据。3、数据处理：在excel中按如下公式计算得到化合物对单胺氧化酶b的抑制率。公式(1)：抑制率％＝(最大值-实验值)/(最大值-空白值)*1004、实验结果表1化合物对单胺氧化酶b的抑制率化合物抑制率％化合物抑制率％化合物抑制率％56975793589859676287specs-8794specs-111584实施例25：本发明化合物在1.00μm浓度对对单胺氧化酶b(mao-b)的抑制作用：1、实验原理(同实施例24)。2、实验操作过程(同实施例24)。3、数据处理(同实施例24)。：4、实验结果表1化合物对单胺氧化酶b的抑制率实施例26：本发明化合物对单胺氧化酶b(mao-b)抑制活性ic50的测定：1、实验原理(同实施例24)。2、实验操作过程(同实施例24)。3、数据处理：在excel中按如下公式(1)计算得到化合物对单胺氧化酶b的抑制率。公式(1):抑制率％＝(最大值-实验值)/(最大值-空白值)*100在graphpadprism5按如下公式(2)计算得到化合物对单胺氧化酶b抑制的ic50值。公式(2):y＝bottom+(top-bottom)/(1+10^((logic50-x)*hillslope))y是抑制率，x是化合物浓度。4、实验结果表3化合物对单胺氧化酶b抑制的ic50值化合物ic50μm化合物ic50μm化合物ic50μm330.015360.048470.015480.024510.038570.026specs-870.057specs-1150.086实施例27∶本发明化合物对单胺氧化酶a(mao-a)抑制活性ic50的测定：1、实验原理(同实施例24)。2、实验操作过程(同实施例24)。3、数据处理(同实施例26)。：4、实验结果表3化合物对单胺氧化酶a(mao-a)抑制活性ic50实施例28：按实施例2-23制得本发明化合物，按其与赋形剂重量比1∶1的比例加入赋形剂，制粒压片。实施例29：按实施例2-23制得本发明化合物，按其与赋形剂重量比1:2的比例加入赋形剂，制粒压片。实施例30：按实施例2-23制得本发明化合物，按常规胶囊制剂方法制成胶囊。实施例31：按实施例2-23制得本发明化合物，再按下述方法制成片剂：实施例32：胶囊剂：本发明化合物100mg淀粉适量硬脂酸镁适量制备方法：将化合物与助剂混合，过筛，在合适的容器中均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊。实施例33：制备方法：搅拌下于适当体积的重蒸馏水中每次加入一种成分，直至完全深解，然后再加入另一种成分。加水至2ml后，将该溶液在无菌过滤器上过滤，装入瓶中并按照适当的剂量分隔。实施例34：滴丸：本发明化合物1g聚乙二醇60009g制法：化合物与聚乙二醇6000熔融液的制备：按上述处方量称取本发明化合物，加入适量无水乙醇，微热溶解后，加入处方量的聚乙二醇熔融液中(60℃水浴保温)，搅拌混合均匀，直至乙醇挥尽为止，静置于60℃水浴中保温30分钟，待气泡除尽，然后将除尽气泡的上述混匀熔融液转入贮液筒内，在保温80-85℃的条件下，控制滴速，一滴滴地滴入冷凝液中，等冷凝完全，倾去冷凝液，收集滴丸，沥净和用滤纸除去丸上的冷凝液，放置硅胶干燥器中或自然干燥即可。当前第1页12