本发明涉及中药技术领域，尤其是涉及一种芦荟大黄素的提取方法。
技术背景
芦荟为百合科芦荟属多年生常绿草本植物，习称“老芦荟”。原产于非洲热带干旱地区，分布几乎遍及世界各地。20世纪90年代以来，芦荟的栽培和应用开发受到国内外的广泛关注。目前，在我国南方普遍种植，是一种药用价值很高的植物，其味苦性寒，归肝、胃、大肠经，具有泻热、导积、杀虫、凉肝之功效。近年来随着对芦荟植物研究的深入，芦荟的应用价值逐渐被人们认识。应用现代科学的手段对芦荟中主要有效成分进行提取分离，已逐步发现芦荟植物中含有蒽醌类、酮类等十几类化合物，其中芦荟大黄素为芦荟的主要有效成分之一，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫抑制、抗衰老、降血糖血脂及调节血压等药理作用，在保健品、美容护肤、药物中间体制备等方面得到广泛应用。
目前市场上的芦荟产品均以芦荟去皮后的叶肉为原料加工而成，95%以上的芦荟皮被丢弃而未得到充分利用，不仅造成了资源的极度浪费，还容易引起严重的环境污染。芦荟皮具有很强的药理保健功能，其抗氧化活性明显高于芦荟凝胶，主要活性成分总蒽醌的含量比叶肉组织中高出2.28倍之多。芦荟大黄素属于含有酚羟基的蒽醌类化合物，易随温度的升高和提取时间的延长发生分解，传统的热提取、溶剂提取方法均严重降低了芦荟大黄素的生物活性。因此，寻找一种高效的芦荟大黄素提取方法具有积极深远的影响。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种操作简便，节能高效，副产物少，提取率高，便于工业化推广的芦荟大黄素的提取方法，所提取的芦荟大黄素纯度高、生物活性好。
本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：
一种芦荟大黄素的提取方法，包括：芦荟皮预处理、芦荟大黄素粗提物的制备及粗提物的纯化，具体包括以下步骤：
芦荟皮预处理：将芦荟皮清洗干净，真空冷冻干燥，粉碎，过60-80目筛，然后加入芦荟皮重量的5-7倍的含有乳糖醇和甘草酸的去离子水浸泡30-40min，过滤后收集滤渣，并低温保存备用；
芦荟大黄素粗提物的制备：先在芦荟渣中加入冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物，在200-400rpm转速下搅拌10-20min，然后添加芦荟渣重量8-10倍的乙醇，在微波辐射辅助浸提2-3h，结束后趁热过滤，滤纸用乙醇洗涤3-4次，合并滤液，减压旋转蒸发浓缩后，冷冻干燥即得芦荟大黄素粗提物；
粗提物的纯化：将所得芦荟大黄素粗提物溶解于甲醇中，使用sephadexlh-20凝胶柱层析，以甲醇不断冲洗，分段收集，收集前段，结晶即得到芦荟大黄素。
作为优选，去离子水中含有0.4-0.6%的乳糖醇和0.02-0.03%的甘草酸，使用含有乳糖醇和甘草酸的去离子水浸泡芦荟皮，乳糖醇和甘草酸搭配使用，发挥协同作用，可使芦荟皮的组织润胀，能够有效破坏芦荟皮细胞壁中胞间层结构，加速细胞壁的破裂，有利于溶剂穿透细胞组织的速度增大，使得被提取物的分子运动速度加快，进而提高提取率。
作为优选，乙醇的浓度为90-95%。
作为优选，冰醋酸和尿苷三磷酸的重量比为1:0.3-0.5，冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物的添加量为芦荟渣重量的2-4倍，芦荟皮中的芦荟大黄素为蒽醌类衍生物，在芦荟体内通过羟基结合成镁、钾、钠、钙盐等形式存在，在尿苷三磷酸的配合下，冰醋酸对芦荟中镁、钾、钠、钙盐具有较强的酸化作用，使得蒽醌类衍生物快速的游离出来，可大大提高提取效率。
作为优选，微波功率为300-400w，微波辅助操作安全节能，快速高效，副产物少，可克服一般加热过程的热传导、热辐射造成的热量损失，加热效率高，升温快速均匀大大缩短了提取时间，进而提高了提取效率。
作为优选，甲醇的浓度为70-80%。
作为优选，使用sephadexlh-20凝胶柱对芦荟大黄素粗提物进行纯化，sephadexlh-20凝胶柱是经羟内基化的葡萄糖凝胶，是一种具有三维网状结构的高分子化合物，具有分离范围广、流速快的特点，使用其对芦荟大黄素粗提物进行纯化可得到纯度高、生物活性好的芦荟大黄素。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明一种芦荟大黄素的提取方法采用了微波辅助溶剂浸提，操作过程简便，节能高效，副产物少，提取效率高，便于工业化推广；2）本发明一种芦荟大黄素的浸提前使用含有乳糖醇和甘草酸的去离子水预浸泡，加速了细胞壁的破裂，有利于溶剂穿透细胞组织的速度增大，使得被提取物的分子运动速度加快，进而提高芦荟大黄素的提取率；3）本发明一种芦荟大黄素的提取方法中使用sephadexlh-20凝胶柱对芦荟大黄素粗提物进行纯化，最终所得到的芦荟大黄素纯度高、生物活性好。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
一种芦荟大黄素的提取方法，包括：芦荟皮预处理、芦荟大黄素粗提物的制备及粗提物的纯化，具体包括以下步骤：
1）芦荟皮预处理：将芦荟皮清洗干净，真空冷冻干燥，粉碎，过60目筛，然后加入芦荟皮重量的5倍的含有乳糖醇和甘草酸的去离子水浸泡30min，过滤后收集滤渣，并低温保存备用；
2）芦荟大黄素粗提物的制备：先在芦荟渣中加入冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物，在200rpm转速下搅拌10min，然后添加芦荟渣重量8倍的乙醇，在微波辐射辅助浸提2h，结束后趁热过滤，滤纸用乙醇洗涤3次，合并滤液，减压旋转蒸发浓缩后，冷冻干燥即得芦荟大黄素粗提物；
3）粗提物的纯化：将所得芦荟大黄素粗提物溶解于甲醇中，使用sephadexlh-20凝胶柱层析，以甲醇不断冲洗，分段收集，收集前段，结晶即得到芦荟大黄素。
上述去离子水中含有0.4%的乳糖醇和0.02%的甘草酸，使用含有乳糖醇和甘草酸的去离子水浸泡芦荟皮，乳糖醇和甘草酸搭配使用，发挥协同作用，可使芦荟皮的组织润胀，能够有效破坏芦荟皮细胞壁中胞间层结构，加速细胞壁的破裂，有利于溶剂穿透细胞组织的速度增大，使得被提取物的分子运动速度加快，进而提高提取率。
上述乙醇的浓度为90%。
上述冰醋酸和尿苷三磷酸的重量比为1:0.3，冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物的添加量为芦荟渣重量的2倍，芦荟皮中的芦荟大黄素为蒽醌类衍生物，在芦荟体内通过羟基结合成镁、钾、钠、钙盐等形式存在，在尿苷三磷酸的配合下，冰醋酸对芦荟中镁、钾、钠、钙盐具有较强的酸化作用，使得蒽醌类衍生物快速的游离出来，可大大提高提取效率。
上述微波功率为300w，微波辅助操作安全节能，快速高效，副产物少，可克服一般加热过程的热传导、热辐射造成的热量损失，加热效率高，升温快速均匀大大缩短了提取时间，进而提高了提取效率。
上述甲醇的浓度为70%。
本实施例所得到的芦荟大黄素的提取率为1.503%。
实施例2：
一种芦荟大黄素的提取方法，包括：芦荟皮预处理、芦荟大黄素粗提物的制备及粗提物的纯化，具体包括以下步骤：
1）芦荟皮预处理：将芦荟皮清洗干净，真空冷冻干燥，粉碎，过60目筛，然后加入芦荟皮重量的7倍的含有乳糖醇和甘草酸的去离子水浸泡40min，过滤后收集滤渣，并低温保存备用；
2）芦荟大黄素粗提物的制备：先在芦荟渣中加入冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物，在300rpm转速下搅拌10min，然后添加芦荟渣重量10倍的乙醇，在微波辐射辅助浸提3h，结束后趁热过滤，滤纸用乙醇洗涤4次，合并滤液，减压旋转蒸发浓缩后，冷冻干燥即得芦荟大黄素粗提物；
3）粗提物的纯化：将所得芦荟大黄素粗提物溶解于甲醇中，使用sephadexlh-20凝胶柱层析，以甲醇不断冲洗，分段收集，收集前段，结晶即得到芦荟大黄素。
上述去离子水中含有0.6%的乳糖醇和0.03%的甘草酸。
上述乙醇的浓度为95%。
上述冰醋酸和尿苷三磷酸的重量比为1:0.5，冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物的添加量为芦荟渣重量的3倍。
上述微波功率为400w。
上述甲醇的浓度为80%。
本实施例所得到的芦荟大黄素的提取率为1.566%。
实施例3：
一种芦荟大黄素的提取方法，包括：芦荟皮预处理、芦荟大黄素粗提物的制备及粗提物的纯化，具体包括以下步骤：
1）芦荟皮预处理：将芦荟皮清洗干净，真空冷冻干燥，粉碎，过60目筛，然后加入芦荟皮重量的6倍的含有乳糖醇和甘草酸的去离子水浸泡30min，过滤后收集滤渣，并低温保存备用；
2）芦荟大黄素粗提物的制备：先在芦荟渣中加入冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物，在400rpm转速下搅拌20min，然后添加芦荟渣重量8倍的乙醇，在微波辐射辅助浸提2.5h，结束后趁热过滤，滤纸用乙醇洗涤3次，合并滤液，减压旋转蒸发浓缩后，冷冻干燥即得芦荟大黄素粗提物；
3）粗提物的纯化：将所得芦荟大黄素粗提物溶解于甲醇中，使用sephadexlh-20凝胶柱层析，以甲醇不断冲洗，分段收集，收集前段，结晶即得到芦荟大黄素。
上述去离子水中含有0.5%的乳糖醇和0.02%的甘草酸。
上述乙醇的浓度为90%。
上述冰醋酸和尿苷三磷酸的重量比为1:0.4，冰醋酸和尿苷三磷酸的混合物的添加量为芦荟渣重量的3倍。
上述微波的功率为350w。
上述甲醇的浓度为80%。
本实施例所得到的芦荟大黄素的提取率为1.527%。
本发明操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。