一种大肠杆菌压力响应型启动子及其制备方法与流程

技术特征：

1.一种大肠杆菌压力响应型启动子，其特征在于，所述启动子的核酸序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.21任一所示。

2.一种构建权利要求1所述压力响应启动子的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

(1)串联保守序列；将大肠杆菌σ因子的σ²⁴|、σ³²、σ³⁸、σ⁷⁰识别的-35区及-10区组合，构建σ^38-70、σ^32-70、σ^24-70、σ^32-38、σ^24-38、σ^32-24、σ^70-24-32、σ^32-38-24、σ^24-38-32-709种启动子；

(2)兼并突变：对构建的9种启动子的间隔序列设计兼并引物随机突变，构建启动子文库；

(3)高通量筛选：对构建的9种启动子文库，以绿色荧光蛋白作为指示蛋白，筛选指标为相对荧光强度。

3.携带权利要求1所述启动子的载体。

4.根据权利要求3所述的载体，其特征在于，所述载体包括pColaDuet-1、pRSFDuet-1、pACYCdUET-1、pCDFDuet-1、pETDuet-1、pET28a、pET20b、pET32a、pET22b、pUC18等载体。

5.携带权利要求1所述启动子的大肠杆菌。

6.权利要求1所述大肠杆菌压力响应型启动子在大肠杆菌中表达蛋白中的应用。

7.权利要求3所述载体在大肠杆菌中表达蛋白中的应用。

8.权利要求5所述大肠杆菌在表达蛋白中的应用。