本发明涉及大蒜蒜酶的分离提取技术领域，尤其是一种用于谷物饮料的大蒜蒜酶的分离提取方法。
背景技术
大蒜为百合科葱属植物生蒜的鳞茎，是一种具有药食两用功能的植物，有“天然药用植物黄金”的美誉。研究表明，大蒜具有杀菌、抗病毒、降血脂、抗血栓、抗肿瘤、调节人体免疫等多种功效。因此对大蒜的活性成分的研究成为国内外多年研究的热点。
在大蒜中，蒜氨酸和蒜酶分别处于大蒜细胞的不同部位。蒜氨酸以稳定的形式存在于细胞质中，蒜酶则存在于细胞液泡中。当大蒜受外力作用使其细胞被破坏后，蒜酶与蒜氨酸接触后，即会发生酶解反应，生成大蒜辣素，产生蒜味，所以想提取分离出蒜酶是一件非常棘手的问题。
长期以来，大蒜却有一股让人讨厌的气味，因此推广到饮料中也使得人们难以接受,而现有的大蒜蒜酶提取无法很好的避免蒜酶与蒜氨酸的反应，使得要采用多余的步骤对蒜味进行中和，浪费资源，增加生产成本。
技术实现要素：
本发明针对现有的用于谷物饮料的大蒜蒜酶提取无法很好的避免蒜酶与蒜氨酸的反应，使得要采用多余的步骤对蒜味进行中和，浪费资源，增加生产成本的问题，提供了一种用于谷物饮料的大蒜蒜酶的分离提取方法。
本发明为解决上述技术不足，采用改性的技术方案，采用以下步骤：
一种用于谷物饮料的大蒜蒜酶的分离提取方法，其特征在于采用以下步骤：
(1)步骤一：选取完整新鲜的蒜瓣去皮后放入容器，加入蒜酶提取液，将容器密封，采用超声波将蒜瓣皮充分破碎，调节ph至7-9，温度调节至30-40摄氏度，抽出容器内部的空气，对混合后的液体进行低速搅拌15-20min；
(2)步骤二：将步骤一中取得的混合物进行10000-12000转/分钟进行离心，去上层清液和下层沉淀物，取中层沉淀物质，迅速向中层沉淀物质中注入清水，取得粗蒜酶液；
(3)步骤三：取粗蒜酶液，再次加入蒜酶提取液，调节ph至7-9，调节温度至30-40摄氏度，进行低速搅拌8-10分钟，进行1000-2000转/分钟的离心操作，去上清液取底层沉淀物，迅速注入清水，取得蒜酶液；
(4)步骤四：将蒜酶液体经过分子超滤膜进行过滤分离，再经过浓缩液进行结晶；
(5)步骤五：向结晶加入引发剂和交联剂，然后用冻干机真空低温抽干，成为凝胶状态；
(6)步骤六：将取上述取得的凝胶状态的进行冷冻干燥或者热风干燥。
作为本发明的一种优选实施方式，蒜酶提取液为无水乙醇和抗氧化剂的混合物，且步骤一中的蒜瓣质量与蒜酶提取液质量比为1：5，且步骤三中的粗蒜酶液与蒜酶提取液质量比为1：4，且步骤三可重复多次进行，同时取得的蒜酶液与蒜酶提取液混合的比例逐渐减小。
作为本发明的一种优选实施方式，超声波破碎频率为30～50kh，破碎时间为10-15分钟，且是在密封容器外对内部的蒜瓣进行破碎。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤二中的离心机为高速立式离心机，步骤三中的离心机为低速离心机。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤四使用的分子超滤膜的分子量为20000～4000。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤四中浓缩液在-4～-0摄氏度条件下冷冻析晶。
本发明所达到的有益效果是：本发明中大蒜蒜酶提取过程中是在一个密闭的容器中进行，尽量避免对蒜瓣进行破碎后使得蒜酶与蒜氨酸发生反应，因为一般蒜酶与蒜氨酸的反应时间为15分钟以上，利用超声波破碎可以减少破碎时间，同时在破碎之后将容器内的空气抽出，真空环境下对蒜酶进行沉淀，蒜酶提取液中含有抗氧化剂也可减少蒜酶与蒜氨酸的反应；步骤三中通过多次分离与提取使得蒜酶的含量逐渐变高，也有利于将蒜氨酸清除，同时逐渐减少提取液有利于减少资源的浪费。第五步骤中，加入引发剂和交联剂，然后用冻干机真空低温抽干，成为凝胶状态，减少蒜酶与外界的反应。
具体实施方式
一种用于谷物饮料的大蒜蒜酶的分离提取方法，其特征在于采用以下步骤：
(1)步骤一：选取完整新鲜的蒜瓣去皮后放入容器，加入蒜酶提取液，将容器密封，采用超声波将蒜瓣皮充分破碎，调节ph至7-9，温度调节至30-40摄氏度，抽出容器内部的空气，对混合后的液体进行低速搅拌15-20min；
(2)步骤二：将步骤一中取得的混合物进行10000-12000转/分钟进行离心，去上层清液和下层沉淀物，取中层沉淀物质，迅速向中层沉淀物质中注入清水，取得粗蒜酶液；
(3)步骤三：取粗蒜酶液，再次加入蒜酶提取液，调节ph至7-9，调节温度至30-40摄氏度，进行低速搅拌8-10分钟，进行1000-2000转/分钟的离心操作，去上清液取底层沉淀物，迅速注入清水，取得蒜酶液；
(4)步骤四：将蒜酶液体经过分子超滤膜进行过滤分离，再经过浓缩液进行结晶；
(5)步骤五：向结晶加入食用引发剂和交联剂，然后用冻干机真空低温抽干，成为凝胶状态；
(6)步骤六：将取上述取得的凝胶状态的进行冷冻干燥或者热风干燥。
作为本发明的一种优选实施方式，蒜酶提取液为无水乙醇和抗氧化剂的混合物，且步骤一中的蒜瓣质量与蒜酶提取液质量比为1：5，且步骤三中的粗蒜酶液与蒜酶提取液质量比为1：4，且步骤三可重复多次进行，同时取得的蒜酶液与蒜酶提取液混合的比例逐渐减小。
本实施例中蒜酶提取液中的无水乙醇可以减少色素以及油脂的产生，同时抗氧化剂减少蒜酶与蒜氨酸之间的氧化反应，避免蒜味的产生、影响饮料的口感，同时后面多次提取时蒜酶提取液的量是逐渐减少的，这样也避免了蒜酶提取液的浪费，同时多次提取、离心也可以增加蒜酶的纯度，避免里面混合有蒜氨酸，防止后续产生反应。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤二中的离心机为高速立式离心机，步骤三中的离心机为低速离心机。
本实施例中步骤二中需要离心的的物质较多，采用高速离心机有利于较好的分层，便于分离处沉淀后的蒜酶，步骤三中因为是简单的分离所以采用低速离心机，既可以达到效果，也可以尽量减少对蒜酶的损伤。
作为本发明的一种优选实施方式超声波破碎频率为30～50kh，破碎时间为10-15分钟，且是在密封容器外对内部的蒜瓣进行破碎。
本实施例中超声波破碎可以对处在密封容器中的蒜瓣进行破碎，避免蒜瓣破碎后直接暴露在空气中，减少蒜酶与蒜氨酸的反应，同时超声波破碎效果较好，速度较快，可以更好的分离出细胞液中的蒜酶。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤四使用的分子超滤膜的分子量为20000～4000。
本实施例中破壁后的蒜液物料经固液分离后，再由分子超滤膜过滤分离，可以使破壁后被溶于溶剂中蒜氨酸与其它不需要的成分分离而得到纯化。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤四中浓缩液在-4～-0摄氏度条件下冷冻析晶。
对冷冻析晶加入微量引发剂和交联剂(现有技术中常见的引发剂和交联剂即可，本实施例中采用过氧化二碳酸二异丙酯、或过氧化二碳酸二环己酯，交联剂采用聚乙二醇)形成得到的凝胶置于大量的水溶液中以去除聚合中多余的单体，其中，引发剂和交联剂的含量低于总质量的0.1％；然后对冷冻析晶进行液氮速冻，具体为：用液氮速冻5分钟。
再通过真空低温抽干：用冻干机真空低温抽干，成为凝胶状态。如此，减少蒜酶与外界的反应。
本实施例中有利于析出蒜酶凝胶状，提高蒜酶的产量。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。