一种高度近视易感基因的检测方法及检测试剂盒与流程

本发明涉及生物医学领域，尤其是涉及一种高度近视易感基因的检测方法及检测试剂盒。

背景技术

在调节放松的状态下，平行光线经眼球屈光系统后聚焦在视网膜之前，称为近视。近视眼也称短视眼，因为这种眼只能看近不能看远。高度近视是指近视度数大于600度(儿童>400度)的屈光不正的近视程度。病理性近视的发生与遗传关系较大。

因此检测可导致早发性高度近视的基因并开发成检测试剂盒，将对早发性高度近视的精准诊疗具有重要意义。

技术实现要素：

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种高度近视易感基因的检测方法和检测试剂盒。

本发明的目的采用以下技术方案实现：

一种高度近视易感基因的检测方法，包括以下步骤：提取样本dna；设计用于扩增高度近视易感基因片段的特异性引物；利用单管多重pcr扩增反应得到目标片段；设计用于高度近视易感基因片段的单碱基延伸引物；高度近视易感基因片段单碱基延伸；核酸质谱分析测量目标dna序列。

进一步地，所述高度近视易感基因片段包括c14orf39片段、lama2片段。

进一步地，所述用于扩增高度近视易感基因片段的特异性引物包括：用于扩增所述c14orf39片段的特异性引物，正向引物为：seqidnos：1，反向引物为seqidnos：2；用于扩增所述lama2片段的特异性引物，正向引物为：seqidnos：3，反向引物为seqidnos：4。

进一步地，所述用于高度近视易感基因片段的单碱基延伸引物包括：用于所述c14orf39片段的单碱基延伸引物，序列为seqidnos：61；用于所述lama2片段的单碱基延伸引物，序列为seqidnos：62。

进一步地，所述利用单管多重pcr扩增反应包括以下步骤：taq酶激活，dna变性。

进一步地，taq酶激活时温度为95℃。

进一步地，taq酶激活时间为15分钟。

进一步地，dna变性时温度为95℃。

进一步地，dna变性时间为15秒。

一种高度近视易感基因检测试剂盒，包括：用于扩增高度近视易感基因片段的特异性引物，特异性引物包括seqidnos：1、seqidnos：2、seqidnos：3、seqidnos：4；用于高度近视易感基因片段的单碱基延伸引物，单碱基延伸引物包括seqidnos：61、seqidnos：62。

相比现有技术，本发明通过设计特异性引物扩增高度近视易感基因片段，设计单碱基延伸引物使高度近视易感基因片段的单碱基延伸，再通过核酸质谱分析测量目标dna序列，能够有效地对高度近视易感基因筛查，帮助个体充分了解自己的遗传状况，提前采取相应的健康管理措施，能有效预防或延缓近视的发生。

附图说明

图1为本发明一种高度近视易感基因的检测方法的流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

需要说明的是，当组件被称为“固定于”另一个组件，它可以直接在另一个组件上或者也可以存在居中的组件。当一个组件被认为是“连接”另一个组件，它可以是直接连接到另一个组件或者可能同时存在居中组件。当一个组件被认为是“设置于”另一个组件，它可以是直接设置在另一个组件上或者可能同时存在居中组件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

请参阅图1，本发明涉及一种高度近视易感基因的检测方法，包括以下步骤：提取样本dna；设计用于扩增高度近视易感基因片段的特异性引物；利用单管多重pcr扩增反应得到目标片段；设计用于高度近视易感基因片段的单碱基延伸引物；高度近视易感基因片段单碱基延伸；核酸质谱分析测量所述目标dna序列。

高度近视易感基因片段包括c14orf39片段、lama2片段。

用于扩增高度近视易感基因片段的特异性引物包括：用于扩增所述c14orf39片段的特异性引物，正向引物为：seqidnos：1，反向引物为seqidnos：2；用于扩增所述lama2片段的特异性引物，正向引物为：seqidnos：3，反向引物为seqidnos：4。

c14orf39基因的正向引物seqidnos：1的序列为：ttgaacgtgtgattggcagaaac，

c14orf39基因的反向引物seqidnos：2的序列为：ggaatgagatagtttctg，

lama2基因的正向引物seqidnos：3的序列为：tctccctcatgacgctgcggaa，

lama2基因的反向引物seqidnos：4的序列为：atatggagtagggtcacccaccc。

用于高度近视易感基因片段的单碱基延伸引物包括：用于所述c14orf39片段的单碱基延伸引物，序列为seqidnos：61；用于所述lama2片段的单碱基延伸引物，序列为seqidnos：62。

c14orf39基因的单碱基延伸引物seqidnos：61的序列为：acgttggatgtcttcatgaagacctcacag，

lama2基因的单碱基延伸引物seqidnos：62的序列为：acgttggatgccactaaatcgagatttcac。

利用单管多重pcr扩增反应包括以下步骤：95℃taq酶激活15分钟，95℃dna变性15秒。

下表为高度近视易感基因片段的引物序列表

本发明还涉及上述高度近视易感基因的检测方法中使用的一种高度近视易感基因检测试剂盒，包括：用于扩增高度近视易感基因片段的特异性引物，所述特异性引物包括seqidnos：1、seqidnos：2、seqidnos：3、seqidnos：4；用于高度近视易感基因片段的单碱基延伸引物，所述单碱基延伸引物包括seqidnos：61、seqidnos：62。

本发明通过设计特异性引物扩增高度近视易感基因片段，设计单碱基延伸引物使高度近视易感基因片段的单碱基延伸，再通过核酸质谱分析测量目标dna序列，能够有效地对高度近视易感基因筛查，帮助个体充分了解自己的遗传状况，提前采取相应的健康管理措施，能有效预防或延缓近视的发生。

对本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及形变，而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。