本发明涉及生物技术领域，具体是一种海带活性多糖及其制备方法。
背景技术
活性多糖是指具有某种特殊生理活性的多糖化合物，具有双向调节人体生理节奏的功能，广泛存在于植物和微生物细胞壁中，毒性小、安全性高、功能广泛，具有非常重要与特殊的生理活性，是由醛基和羰基通过苷键连接的高分子聚合物，也是构成生命的四大基本物质之一。
海带，是一种在低温海水中生长的大型海生褐藻植物，属海藻类植物，富含褐藻胶和碘质，可以适用于拌、烧、炖、焖等烹饪方法。海带多糖是指从海带中提纯的多糖成分，具有降血脂、降血糖、调节免疫、抗凝血、抗肿瘤、排铅解毒和抗氧化等多种生物功能。但是，由于人体内缺乏相应的分解酶，通过食用海带，人体无法直接吸收海带多糖，因此需要从海带中提取海带多糖。但是，现在的提取方法，不能保证提取的纯度和效果，得到的产品不能满足社会的需求，存在产品质量差的问题，同时也不能使得被人体很好的吸收，最后海带多糖的保健效果不能很好的保证。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种海带活性多糖及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种海带活性多糖，包括以下按照重量份的原料：新鲜海带17-25份、无水乙醇140-160份、纤维素酶0.038‰-0.05‰份、果胶酶0.01‰-0.03‰份、木聚糖酶0.012‰-0.016‰份、以及适量的去离子水。
作为本发明进一步的方案：包括以下按照重量份的原料：新鲜海带20份、无水乙醇150份、纤维素酶0.045‰份、果胶酶0.02‰份、木聚糖酶0.015‰份、以及适量的去离子水。
所述海带活性多糖的制备方法，步骤如下：
1)按照重量份称取新鲜海带，切成长宽均为1cm的片状，然后按照重量份称取无水乙醇与前述切成片状的新鲜海带混合，再进行超声处理，20目过滤得滤液a和滤渣b；
2)将步骤1)中得到的滤渣b加入10倍体积的去离子水，在42℃下搅拌200min，40目过滤得滤液c和滤渣d；
3)将步骤2)中得到的滤渣d加入8倍体积的去离子水，在38℃下以100r/min的搅拌速率进行搅拌100min，80目过滤得滤液e和滤渣f；
4)将步骤1)中得到的滤液a与步骤2)中得到的滤液c以及步骤3)中得到的滤液f混合均匀，得混合液g；通过多次提取，有效提高了提取效果；
5)将步骤3)中得到的滤渣f中加入9倍重量的去离子水，浸泡40min后升温至70℃继续浸泡50min，然后降温至48℃，加入纤维素酶反应40min，再升温至55℃，加入木聚糖酶反应40min，然后降温至50℃，加入果胶酶反应30min，得混合料h；通过多次酶解，有效提高了提取效果；
6)将步骤5)中得到的混合料h升温至105℃，保持3分钟进行灭酶处理，然后加入12倍重量的去离子水浸泡140min，100目过滤，得到滤液i；
7)将步骤6)中得到的滤液i与步骤4)中得到的混合液g进行混合均匀，进行浓缩至原体积的10％，以5000rpm的速率进行离心15min，取上清液采用超滤膜进行超滤并留取超滤液，得混合料j；
8)将步骤7)中得到的混合料j减压浓缩至1/3体积，然后加入等体积的氯仿-正丁醇混合液进行混合均匀，再进行超声处理5min，静置2h后以5000rpm的速率进行离心15min，取上层离心液，在前述上层离心液中加3.5倍体积的浓度为98％的乙醇水溶液，降温至4℃进行静置12h，然后以4000rpm的速率进行离心15min得沉淀物，用无水丙酮和无水乙醚交替洗涤沉淀物6次，再进行真空冷冻干燥，即得；通过加入氯仿-正丁醇混合液进行超声和离心处理，还通过多次洗涤，有效提高了提取效果，进而有利于提高产品的纯度。
作为本发明再进一步的方案：步骤1)中，所述超声处理的超声功率为200w；所述超声处理的时间为20min。
作为本发明再进一步的方案：步骤2)中，所述搅拌的搅拌速率为400r/min。
作为本发明再进一步的方案：步骤7)中，所述超滤膜的截留分子量为20000-40000。
作为本发明再进一步的方案：步骤8)中，所述氯仿-正丁醇混合液为氯仿与正丁醇按照体积比为4:1的比例混合而成；所述超声处理的超声功率为180w。
作为本发明再进一步的方案：步骤8)中，所述真空冷冻干燥的温度为-18℃，压力为10pa，时间为12h。
所述的海带活性多糖的制备方法在制备活性多糖产品中的用途。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明制备的海带活性多糖具有降血脂、降血糖、调节免疫、抗凝血、抗肿瘤、排铅解毒和抗氧化等多种生物功能，通过多次提取与多次酶解，相比较单一的提取方式，提取的效果大大提高，经过实验验证，可以保证提取的质量，而且多次酶解，能够获得好的效果，同时通过超声、离心和多次洗涤，有利于提高产品的纯度，可用于解决由于人体内缺乏相应的分解酶而无法通过食用海带直接吸收海带多糖的问题，具有广阔的市场前景。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种海带活性多糖，包括以下按照重量份的原料：新鲜海带17份、无水乙醇140份、纤维素酶0.038‰份、果胶酶0.01‰份、木聚糖酶0.012‰份、以及适量的去离子水。
本实施例中，所述海带活性多糖的制备方法，步骤如下：
1)按照重量份称取新鲜海带，切成长宽均为1cm的片状，然后按照重量份称取无水乙醇与前述切成片状的新鲜海带混合，再进行超声处理，20目过滤得滤液a和滤渣b；
其中，所述超声处理的超声功率为200w；所述超声处理的时间为20min；
2)将步骤1)中得到的滤渣b加入10倍体积的去离子水，在42℃下以400r/min的搅拌速率进行搅拌200min，40目过滤得滤液c和滤渣d；
3)将步骤2)中得到的滤渣d加入8倍体积的去离子水，在38℃下以100r/min的搅拌速率进行搅拌100min，80目过滤得滤液e和滤渣f；
4)将步骤1)中得到的滤液a与步骤2)中得到的滤液c以及步骤3)中得到的滤液f混合均匀，得混合液g；通过多次提取，有效提高了提取效果；
5)将步骤3)中得到的滤渣f中加入9倍重量的去离子水，浸泡40min后升温至70℃继续浸泡50min，然后降温至48℃，加入纤维素酶反应40min，再升温至55℃，加入木聚糖酶反应40min，然后降温至50℃，加入果胶酶反应30min，得混合料h；通过多次酶解，有效提高了提取效果；
6)将步骤5)中得到的混合料h升温至105℃，保持3分钟进行灭酶处理，然后加入12倍重量的去离子水浸泡140min，100目过滤，得到滤液i；
7)将步骤6)中得到的滤液i与步骤4)中得到的混合液g进行混合均匀，进行浓缩至原体积的10％，以5000rpm的速率进行离心15min，取上清液采用超滤膜进行超滤并留取超滤液，得混合料j；所述超滤膜的截留分子量为30000；
8)将步骤7)中得到的混合料j减压浓缩至1/3体积，然后加入等体积的氯仿-正丁醇混合液进行混合均匀，再进行超声处理5min，静置2h后以5000rpm的速率进行离心15min，取上层离心液，在前述上层离心液中加3.5倍体积的浓度为98％的乙醇水溶液，降温至4℃进行静置12h，然后以4000rpm的速率进行离心15min得沉淀物，用无水丙酮和无水乙醚交替洗涤沉淀物6次，再进行真空冷冻干燥，即得；
其中，所述氯仿-正丁醇混合液为氯仿与正丁醇按照体积比为4:1的比例混合而成；所述超声处理的超声功率为180w；所述真空冷冻干燥的温度为-18℃，压力为10pa，时间为12h；通过加入氯仿-正丁醇混合液进行超声和离心处理，还通过多次洗涤，有效提高了提取效果，进而有利于提高产品的纯度。
实施例2
一种海带活性多糖，包括以下按照重量份的原料：新鲜海带25份、无水乙醇160份、纤维素酶0.05‰份、果胶酶0.03‰份、木聚糖酶0.016‰份、以及适量的去离子水。
本实施例中，所述海带活性多糖的制备方法，步骤如下：
1)按照重量份称取新鲜海带，切成长宽均为1cm的片状，然后按照重量份称取无水乙醇与前述切成片状的新鲜海带混合，再进行超声处理，20目过滤得滤液a和滤渣b；
其中，所述超声处理的超声功率为200w；所述超声处理的时间为20min；
2)将步骤1)中得到的滤渣b加入10倍体积的去离子水，在42℃下以400r/min的搅拌速率进行搅拌200min，40目过滤得滤液c和滤渣d；
3)将步骤2)中得到的滤渣d加入8倍体积的去离子水，在38℃下以100r/min的搅拌速率进行搅拌100min，80目过滤得滤液e和滤渣f；
4)将步骤1)中得到的滤液a与步骤2)中得到的滤液c以及步骤3)中得到的滤液f混合均匀，得混合液g；通过多次提取，有效提高了提取效果；
5)将步骤3)中得到的滤渣f中加入9倍重量的去离子水，浸泡40min后升温至70℃继续浸泡50min，然后降温至48℃，加入纤维素酶反应40min，再升温至55℃，加入木聚糖酶反应40min，然后降温至50℃，加入果胶酶反应30min，得混合料h；通过多次酶解，有效提高了提取效果；
6)将步骤5)中得到的混合料h升温至105℃，保持3分钟进行灭酶处理，然后加入12倍重量的去离子水浸泡140min，100目过滤，得到滤液i；
7)将步骤6)中得到的滤液i与步骤4)中得到的混合液g进行混合均匀，进行浓缩至原体积的10％，以5000rpm的速率进行离心15min，取上清液采用超滤膜进行超滤并留取超滤液，得混合料j；所述超滤膜的截留分子量为30000；
8)将步骤7)中得到的混合料j减压浓缩至1/3体积，然后加入等体积的氯仿-正丁醇混合液进行混合均匀，再进行超声处理5min，静置2h后以5000rpm的速率进行离心15min，取上层离心液，在前述上层离心液中加3.5倍体积的浓度为98％的乙醇水溶液，降温至4℃进行静置12h，然后以4000rpm的速率进行离心15min得沉淀物，用无水丙酮和无水乙醚交替洗涤沉淀物6次，再进行真空冷冻干燥，即得；
其中，所述氯仿-正丁醇混合液为氯仿与正丁醇按照体积比为4:1的比例混合而成；所述超声处理的超声功率为180w；所述真空冷冻干燥的温度为-18℃，压力为10pa，时间为12h；通过加入氯仿-正丁醇混合液进行超声和离心处理，还通过多次洗涤，有效提高了提取效果，进而有利于提高产品的纯度。
实施例3
一种海带活性多糖，包括以下按照重量份的原料：新鲜海带21份、无水乙醇150份、纤维素酶0.044‰份、果胶酶0.02‰份、木聚糖酶0.014‰份、以及适量的去离子水。
本实施例中，所述海带活性多糖的制备方法，步骤如下：
1)按照重量份称取新鲜海带，切成长宽均为1cm的片状，然后按照重量份称取无水乙醇与前述切成片状的新鲜海带混合，再进行超声处理，20目过滤得滤液a和滤渣b；
其中，所述超声处理的超声功率为200w；所述超声处理的时间为20min；
2)将步骤1)中得到的滤渣b加入10倍体积的去离子水，在42℃下以400r/min的搅拌速率进行搅拌200min，40目过滤得滤液c和滤渣d；
3)将步骤2)中得到的滤渣d加入8倍体积的去离子水，在38℃下以100r/min的搅拌速率进行搅拌100min，80目过滤得滤液e和滤渣f；
4)将步骤1)中得到的滤液a与步骤2)中得到的滤液c以及步骤3)中得到的滤液f混合均匀，得混合液g；通过多次提取，有效提高了提取效果；
5)将步骤3)中得到的滤渣f中加入9倍重量的去离子水，浸泡40min后升温至70℃继续浸泡50min，然后降温至48℃，加入纤维素酶反应40min，再升温至55℃，加入木聚糖酶反应40min，然后降温至50℃，加入果胶酶反应30min，得混合料h；通过多次酶解，有效提高了提取效果；
6)将步骤5)中得到的混合料h升温至105℃，保持3分钟进行灭酶处理，然后加入12倍重量的去离子水浸泡140min，100目过滤，得到滤液i；
7)将步骤6)中得到的滤液i与步骤4)中得到的混合液g进行混合均匀，进行浓缩至原体积的10％，以5000rpm的速率进行离心15min，取上清液采用超滤膜进行超滤并留取超滤液，得混合料j；所述超滤膜的截留分子量为30000；
8)将步骤7)中得到的混合料j减压浓缩至1/3体积，然后加入等体积的氯仿-正丁醇混合液进行混合均匀，再进行超声处理5min，静置2h后以5000rpm的速率进行离心15min，取上层离心液，在前述上层离心液中加3.5倍体积的浓度为98％的乙醇水溶液，降温至4℃进行静置12h，然后以4000rpm的速率进行离心15min得沉淀物，用无水丙酮和无水乙醚交替洗涤沉淀物6次，再进行真空冷冻干燥，即得；
其中，所述氯仿-正丁醇混合液为氯仿与正丁醇按照体积比为4:1的比例混合而成；所述超声处理的超声功率为180w；所述真空冷冻干燥的温度为-18℃，压力为10pa，时间为12h；通过加入氯仿-正丁醇混合液进行超声和离心处理，还通过多次洗涤，有效提高了提取效果，进而有利于提高产品的纯度。
实施例4
一种海带活性多糖，包括以下按照重量份的原料：新鲜海带20份、无水乙醇150份、纤维素酶0.045‰份、果胶酶0.02‰份、木聚糖酶0.015‰份、以及适量的去离子水。
本实施例中，所述海带活性多糖的制备方法，步骤如下：
1)按照重量份称取新鲜海带，切成长宽均为1cm的片状，然后按照重量份称取无水乙醇与前述切成片状的新鲜海带混合，再进行超声处理，20目过滤得滤液a和滤渣b；
其中，所述超声处理的超声功率为200w；所述超声处理的时间为20min；
2)将步骤1)中得到的滤渣b加入10倍体积的去离子水，在42℃下以400r/min的搅拌速率进行搅拌200min，40目过滤得滤液c和滤渣d；
3)将步骤2)中得到的滤渣d加入8倍体积的去离子水，在38℃下以100r/min的搅拌速率进行搅拌100min，80目过滤得滤液e和滤渣f；
4)将步骤1)中得到的滤液a与步骤2)中得到的滤液c以及步骤3)中得到的滤液f混合均匀，得混合液g；通过多次提取，有效提高了提取效果；
5)将步骤3)中得到的滤渣f中加入9倍重量的去离子水，浸泡40min后升温至70℃继续浸泡50min，然后降温至48℃，加入纤维素酶反应40min，再升温至55℃，加入木聚糖酶反应40min，然后降温至50℃，加入果胶酶反应30min，得混合料h；通过多次酶解，有效提高了提取效果；
6)将步骤5)中得到的混合料h升温至105℃，保持3分钟进行灭酶处理，然后加入12倍重量的去离子水浸泡140min，100目过滤，得到滤液i；
7)将步骤6)中得到的滤液i与步骤4)中得到的混合液g进行混合均匀，进行浓缩至原体积的10％，以5000rpm的速率进行离心15min，取上清液采用超滤膜进行超滤并留取超滤液，得混合料j；所述超滤膜的截留分子量为30000；
8)将步骤7)中得到的混合料j减压浓缩至1/3体积，然后加入等体积的氯仿-正丁醇混合液进行混合均匀，再进行超声处理5min，静置2h后以5000rpm的速率进行离心15min，取上层离心液，在前述上层离心液中加3.5倍体积的浓度为98％的乙醇水溶液，降温至4℃进行静置12h，然后以4000rpm的速率进行离心15min得沉淀物，用无水丙酮和无水乙醚交替洗涤沉淀物6次，再进行真空冷冻干燥，即得；
其中，所述氯仿-正丁醇混合液为氯仿与正丁醇按照体积比为4:1的比例混合而成；所述超声处理的超声功率为180w；所述真空冷冻干燥的温度为-18℃，压力为10pa，时间为12h；通过加入氯仿-正丁醇混合液进行超声和离心处理，还通过多次洗涤，有效提高了提取效果，进而有利于提高产品的纯度。
实施例5
一种海带活性多糖，包括以下按照重量份的原料：新鲜海带20份、无水乙醇150份、纤维素酶0.045‰份、果胶酶0.02‰份、木聚糖酶0.015‰份、以及适量的去离子水。
本实施例中，所述海带活性多糖的制备方法，步骤如下：
1)按照重量份称取新鲜海带，切成长宽均为1cm的片状，然后按照重量份称取无水乙醇与前述切成片状的新鲜海带混合，再进行超声处理，20目过滤得滤液a和滤渣b；
其中，所述超声处理的超声功率为200w；所述超声处理的时间为20min；
2)将步骤1)中得到的滤渣b加入10倍体积的去离子水，在42℃下以400r/min的搅拌速率进行搅拌200min，40目过滤得滤液c和滤渣d；
3)将步骤2)中得到的滤渣d加入8倍体积的去离子水，在38℃下以100r/min的搅拌速率进行搅拌100min，80目过滤得滤液e和滤渣f；
4)将步骤1)中得到的滤液a与步骤2)中得到的滤液c以及步骤3)中得到的滤液f混合均匀，得混合液g；通过多次提取，有效提高了提取效果；
5)将步骤3)中得到的滤渣f中加入9倍重量的去离子水，浸泡40min后升温至70℃继续浸泡50min，然后降温至48℃，加入纤维素酶反应40min，再升温至55℃，加入木聚糖酶反应40min，然后降温至50℃，加入果胶酶反应30min，得混合料h；通过多次酶解，有效提高了提取效果；
6)将步骤5)中得到的混合料h升温至105℃，保持3分钟进行灭酶处理，然后加入12倍重量的去离子水浸泡140min，100目过滤，得到滤液i；
7)将步骤6)中得到的滤液i与步骤4)中得到的混合液g进行混合均匀，进行浓缩至原体积的10％，以5000rpm的速率进行离心15min，取上清液采用超滤膜进行超滤并留取超滤液，得混合料j；所述超滤膜的截留分子量为20000；
8)将步骤7)中得到的混合料j减压浓缩至1/3体积，然后加入等体积的氯仿-正丁醇混合液进行混合均匀，再进行超声处理5min，静置2h后以5000rpm的速率进行离心15min，取上层离心液，在前述上层离心液中加3.5倍体积的浓度为98％的乙醇水溶液，降温至4℃进行静置12h，然后以4000rpm的速率进行离心15min得沉淀物，用无水丙酮和无水乙醚交替洗涤沉淀物6次，再进行真空冷冻干燥，即得；
其中，所述氯仿-正丁醇混合液为氯仿与正丁醇按照体积比为4:1的比例混合而成；所述超声处理的超声功率为180w；所述真空冷冻干燥的温度为-18℃，压力为10pa，时间为12h；通过加入氯仿-正丁醇混合液进行超声和离心处理，还通过多次洗涤，有效提高了提取效果，进而有利于提高产品的纯度。
实施例6
一种海带活性多糖，包括以下按照重量份的原料：新鲜海带20份、无水乙醇150份、纤维素酶0.045‰份、果胶酶0.02‰份、木聚糖酶0.015‰份、以及适量的去离子水。
本实施例中，所述海带活性多糖的制备方法，步骤如下：
1)按照重量份称取新鲜海带，切成长宽均为1cm的片状，然后按照重量份称取无水乙醇与前述切成片状的新鲜海带混合，再进行超声处理，20目过滤得滤液a和滤渣b；
其中，所述超声处理的超声功率为200w；所述超声处理的时间为20min；
2)将步骤1)中得到的滤渣b加入10倍体积的去离子水，在42℃下以400r/min的搅拌速率进行搅拌200min，40目过滤得滤液c和滤渣d；
3)将步骤2)中得到的滤渣d加入8倍体积的去离子水，在38℃下以100r/min的搅拌速率进行搅拌100min，80目过滤得滤液e和滤渣f；
4)将步骤1)中得到的滤液a与步骤2)中得到的滤液c以及步骤3)中得到的滤液f混合均匀，得混合液g；通过多次提取，有效提高了提取效果；
5)将步骤3)中得到的滤渣f中加入9倍重量的去离子水，浸泡40min后升温至70℃继续浸泡50min，然后降温至48℃，加入纤维素酶反应40min，再升温至55℃，加入木聚糖酶反应40min，然后降温至50℃，加入果胶酶反应30min，得混合料h；通过多次酶解，有效提高了提取效果；
6)将步骤5)中得到的混合料h升温至105℃，保持3分钟进行灭酶处理，然后加入12倍重量的去离子水浸泡140min，100目过滤，得到滤液i；
7)将步骤6)中得到的滤液i与步骤4)中得到的混合液g进行混合均匀，进行浓缩至原体积的10％，以5000rpm的速率进行离心15min，取上清液采用超滤膜进行超滤并留取超滤液，得混合料j；所述超滤膜的截留分子量为40000；
8)将步骤7)中得到的混合料j减压浓缩至1/3体积，然后加入等体积的氯仿-正丁醇混合液进行混合均匀，再进行超声处理5min，静置2h后以5000rpm的速率进行离心15min，取上层离心液，在前述上层离心液中加3.5倍体积的浓度为98％的乙醇水溶液，降温至4℃进行静置12h，然后以4000rpm的速率进行离心15min得沉淀物，用无水丙酮和无水乙醚交替洗涤沉淀物6次，再进行真空冷冻干燥，即得；
其中，所述氯仿-正丁醇混合液为氯仿与正丁醇按照体积比为4:1的比例混合而成；所述超声处理的超声功率为180w；所述真空冷冻干燥的温度为-18℃，压力为10pa，时间为12h；通过加入氯仿-正丁醇混合液进行超声和离心处理，还通过多次洗涤，有效提高了提取效果，进而有利于提高产品的纯度。
本发明制备的海带活性多糖具有降血脂、降血糖、调节免疫、抗凝血、抗肿瘤、排铅解毒和抗氧化等多种生物功能，通过多次提取与多次酶解，有效提高了提取效果，同时通过超声、离心和多次洗涤，有利于提高产品的纯度，可用于解决由于人体内缺乏相应的分解酶而无法通过食用海带直接吸收海带多糖的问题，具有广阔的市场前景。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。