一种海带多糖的提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及海带深加工技术，具体是公开了一种制备较强的胆酸盐吸附活性的海 带多糖的方法。
【背景技术】
[0002] 海带因生长在海底的岩石上，形状像带子而得名，又称 纶布、江白菜，药用称昆布，是一种营养非常丰富的海洋性蔬菜，含有多种对人体健康具有 积极贡献作用的物质，在古书《本草纲目》、《神农本草经》、《食疗本草》等中均有记载，具 有重要的食用和药用价值，因此，常被称为"长寿菜"、"健康食品"，深受人们的喜爱。海 带多糖是存在于海带细胞间和细胞内的一类天然生物大分子物质，具有多种生物功能， 如抗氧化、抗肿瘤、抗凝血、调节免疫功能等作用，与海带的多种保健功效密切相关，因此 是近年来的研究热点之一。如，福州大学（中国专利申请号201210017025. 3)公开一种 具有抗氧化和抗肿瘤活性的海带多糖及提取分离方法；合肥工业大学（中国专利申请号 201210217169. 3)公开一种抗动脉粥硬化活性海带多糖的制备方法；南通大学（中国专利申 请号201110202149. 4)公开一种具有调节血脂的海带多糖胶囊及其制备方法等。多糖的结 构与活性的构效关系研究表明，多糖的结构决定了其理化性质，影响着其生物活性的发挥。 因此，采用合适的提取分离手段，对获得具有生物活性的多糖具有重要作用。
[0003] 申请人先前已公开一种低分子量的海带多糖提取分离方法及其在卷烟制品中 的应用（中国专利号ZL201110437814. 8)，一种海带多糖及其制备方法和应用（中国专 利号ZL201110 3 21909. 3)，一种海带多糖乙醇提取液的制备方法及其应用（中国专利号 ZL201110321907. 4)，一种海带抗氧化多糖的提取方法（中国专利申请号201310208891. 5)。 在此研究基础上，本发明进一步公开了有机酸提取制备具有较强的胆酸盐吸附活性海带多 糖的工艺方法。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种具有较强的胆酸盐吸附活性的海带多糖的提取方法。
[0005] 本发明的目的通过如下技术方案予以实现。
[0006] -种海带多糖的提取方法，其包括如下步骤： (1) 海带除沙洗净，晾干，粉碎，得提取原料； (2)在提取原料中加入20-40倍重量蒸馏水，在100-121°C下提取2-5小时，过滤去除 上清液，分离得到海带渣； (3)将步骤（2)所得的海带渣用有机酸溶剂提取多糖，即于110-12rC下提取2-4小时， 过滤，分离固液，得多糖提取液，用氢氧化钠调节多糖提取液pH值至6. 5-8.0 ; (4) 将步骤（3)所得的多糖提取液过超滤膜，取截留液； (5)在截留液中加入三聚磷酸钠，30-40°C保温l_3h后，加入乙醇，混合均匀，在0-10°C 下静置1-4小时，过滤，除去上层清液部分，得多糖沉淀； (6)收集沉淀物，冷冻干燥，获得海带多糖。
[0007] 进一步优化实施地，步骤（1)所述海带粉碎为粉碎至20-80目。
[0008] 进一步优化实施地，步骤（3)所述有机酸溶剂为柠檬酸、苹果酸或醋酸中任意一 种，且溶液的pH值为1.5-3。
[0009] 进一步优化实施地，步骤（3)所述有机酸溶液的用量按海带提取原料干重的 20-40倍加入。
[0010] 进一步优化实施地，步骤（4)所述超滤膜的截留分子量为5000_10000Da。
[0011] 进一步优化实施地，步骤（5)所述乙醇添加量满足混合均匀后乙醇最终浓度为 70-85% (v/v)。
[0012] 进一步优化实施地，步骤（5)所述三聚磷酸钠的添加量为步骤（1)得到的提取原 料重量的〇. 01%-0. 5%。
[0013] 本发明采用了以上技术方案，具有如下的优点和有益效果： 有机酸提取得到的海带多糖具有一定的胆酸盐吸附活性，发明研究得出，通过三聚磷 酸钠改性后，海带多糖的胆酸盐吸附活性显著增强。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合实施例对本发明的具体实施作进一步说明。
[0015] 多糖胆酸盐吸附率的测定： (1)胆酸盐标准液：分别准确称取胆酸盐0、20、40、60、80、100、200、400 mg各置于 5〇mL容量瓶中，均以蒸馏水溶解并加至刻度，配置成浓度为0、0. 4、0. 8、1. 2、1. 6、2mg/mL 的标准溶液。移取样液（或各不同质量浓度的胆酸盐标准液）lmL于具塞试管中，加入 6mL45%硫酸，混匀，加入lmLO. 3%糠醛，混匀，置65°C恒温水浴中反应30min，冷却至室温 后，于620nm波长处测吸光度，绘制标准曲线。
[0016] (2)多糖胆酸盐吸附率的测定： 配制4mg/mL牛磺胆酸钠溶液，加入2mg/mL的多糖样品，以蒸馏水作为空白对照，于 37°C恒温下反应lh后，5000r/min离心分离lOmin。准确移取lmL上清液，进行胆酸盐含 量的测定，于620nm波长处测吸光度，由标准曲线确定其胆酸盐的质量浓度。再根据添加多 糖样品及空白溶液中胆酸盐的浓度差计算海带多糖对胆酸盐的吸附量。
[0017] 实施例1 (1) 海带除沙洗净，晾干，粉碎至20目，得提取原料； (2) 在提取原料中加入20倍重量蒸馏水，在121°C下提取2小时，过滤去除上清液，分 离得到海带渣； (3) 将步骤（2)所得的海带渣与占海带提取原料重量30倍重量且pH值为1. 5的柠檬 酸溶液混合，121°C下提取2小时，过滤，分离固液，得多糖提取液，用氢氧化钠调节多糖提 取液pH值至8. 0 ; (4) 将步骤（3)所得的多糖提取液过截留分子量为lOOOODa的超滤膜，取截留液； (5) 在截留液中加入三聚磷酸钠，三聚磷酸钠的添加量为海带干物质重量的0. 5%，30°C 保温3h后，加入乙醇使溶液的乙醇浓度为70% (v/v)，混合均匀，在10°C下静置4小时，过 滤，除去上层清液部分，得多糖沉淀； (6)收集沉淀物，冷冻干燥，获得海带多糖。
[0018] 对比实施例1 (1) 海带除沙洗净，晾干，粉碎至20目，得提取原料； (2) 在提取原料中加入20倍重量蒸馏水，在121°C下提取2小时，过滤去除上清液，分 离得到海带渣； (3) 将步骤（2)所得的海带渣与海带原料重量30倍重量pH值为1. 5的柠檬酸溶液混 合，121°C下提取2小时，过滤，分离固液，得多糖提取液，用氢氧化钠调节多糖提取液pH值 至 8.0; (4) 将步骤（3)所得的多糖提取液过截