一种螺旋藻多糖的微波提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及多糖类的制备，尤其是一种螺旋藻多糖的微波提取方法。
【背景技术】
[0002]我们知道，螺旋藻(Spirulina)是一类低等植物，属于蓝藻门，颤藻科，因其营养均衡、全面而风行世界，成为最佳的健康保养食品。螺旋藻多糖是螺旋藻中极为重要的生理活性成分，在抗肿瘤、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗辐射、抗凝血以及提高免疫力等方面具有独特的功效，已成为当前螺旋藻开发研究领域的热点。目前，关于螺旋藻多糖的提取多采用热水法、冷碱法等，这些方法均存在耗时、耗能、得率低等缺点。
[0003]微波提取技术是物质由于吸收了微波能，细胞内部的温度将迅速上升，从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的能力，结果细胞破裂，其内的有效成分自由流出，并在较低的温度下溶解于提取介质中。近年来，微波技术在天然产物成分提取领域得到了很大的发展和应用。
【发明内容】
[0004]为了现有技术中采用热水法、冷碱法提取螺旋藻多糖存在耗时、耗能、得率低的不足，本发明提供一种工艺合理、提取条件温和、有效成分不易破坏、提取效率高、得率理想的螺旋藻多糖的微波提取方法。
[0005]本发明解决其技术问题所采取的技术方案为:一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其特征在于:其经过下列工艺步骤:
(1)微波提取:称取螺旋藻粉以1:10?30的料液比加入蒸馏水，超声处理后采用间歇微波提取法进行微波提取；提取液离心，取上清液，得螺旋藻多糖粗提液；
(2)TCA法除蛋白:将步骤(1)中得到的螺旋藻多糖粗提液中加入等体积的、浓度为5?10%的三氯乙酸溶液，振摇10?15min ;静止2?4h，离心，取上清液；静置2?4h，离心，取上清液；如此重复2?3次，得去蛋白的螺旋藻多糖提取液；
(3)脱色:将步骤(2)中得到的去蛋白的螺旋藻多糖提取液加入活性炭TS4，使其终浓度为5?10g/L，调节pH值3.0?6.0，脱色温度为75?80°C，脱色时间30?60min，得螺旋藻多糖提取液；
(4)真空冷冻干燥:将步骤(3)中得到的螺旋藻多糖提取液进行真空冷冻干燥，得螺旋藻多糖；其中，冻干制品温度_25±5°C，解析温度35±5°C，解析时间10?15h。
[0006]进一步，本发明的一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其还经过下列工艺步骤:
(5)红外光谱分析:称取步骤⑷中得到的干燥的螺旋藻多糖2?5mg，溴化钾压片后，采用红外光谱仪于4000CHT1?1000cm ―1的红外区进行扫描，得到其红外光谱图，进一步鉴定螺旋藻多糖。
[0007]所述的超声处理是超声波处理器额定功率100?200W，超声波处理时间2?5min0
[0008]所述的间歇微波提取法是控制微波功率450?570W，每个循环微波辐射时间20±5S，间歇时间2?5min，反复进行5?7个循环。
[0009]所述的提取液离心是提取液送入离心机中，控制离心机转速4000?6000r/min，离心时间10?15min。
[0010]本发明采用微波提取、TCA法除蛋白、脱色、冷冻干燥一系列方法得到螺旋藻多糖。本发明采用微波方提取的方法从螺旋藻中提取多糖，其微波辐射加剧了螺旋藻中分子的碰撞频率，使多糖分子容易从内部扩散到溶剂中，大大缩短了加热时间，提高了提取效率，螺旋藻多糖得率理想；采用三氯乙酸沉淀蛋白和活性炭吸附脱色的方法，可以有效地去除杂质。本发明的提取方法工艺合理、提取多糖条件温和、不破坏有效成分、提取效率高、除杂彻底、得率理想，适合规模化工厂生产。
【具体实施方式】
[0011]下面结合实施例对本发明做进一步说明。
[0012]实施例1
一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其经过下列工艺步骤:
(1)微波提取:称取螺旋藻粉以1:20的料液比加入蒸馏水，采用额定功率150W的超声波处理器，超声波处理时间3min，再采用间歇微波提取法进行微波提取；提取液送入离心机中，控制离心机转速5000r/min，离心时间12min，取上清液，得螺旋藻多糖粗提液；其中，间歇微波提取法是控制微波功率500W，每个循环微波辐射时间20S，间歇时间3min，反复进行6个循环；
(2)TCA法除蛋白:将步骤⑴中得到的螺旋藻多糖粗提液中加入等体积的、浓度为8%的三氯乙酸溶液，振摇12min ;静止3h，离心，取上清液；再静置3h，离心，取上清液；如此重复3次，得去蛋白的螺旋藻多糖提取液；
(3)脱色:将步骤(2)中得到的去蛋白的螺旋藻多糖提取液加入活性炭TS4，使其终浓度为8g/L，调节pH值5.0，脱色温度为78V，脱色时间45min，得螺旋藻多糖提取液；
(4)真空冷冻干燥:将步骤(3)中得到的螺旋藻多糖提取液进行真空冷冻干燥，其中，冻干制品温度_25°C，解析温度35°C，解析时间12h，得螺旋藻多糖。
[0013]实施例2
一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其经过下列工艺步骤:
(1)微波提取:称取螺旋藻粉以1:10的料液比加入蒸馏水，超声波处理器额定功率100W，超声波处理时间5min，再采用间歇微波提取法进行微波提取；提取液送入离心机中，控制离心机转速4000r/min，离心时间15min，取上清液，得螺旋藻多糖粗提液；其中，间歇微波提取法是控制微波功率450W，每个循环微波辐射时间25S，间歇时间2min，反复进行7个循环；
(2)TCA法除蛋白:将步骤(1)中得到的螺旋藻多糖粗提液中加入等体积的、浓度为5%的三氯乙酸溶液，振摇15min ;静止4h，离心，取上清液；再静置4h，离心，取上清液；如此重复2次，得去蛋白的螺旋藻多糖提取液；
(3)脱色:将步骤(2)中得到的去蛋白的螺旋藻多糖提取液加入活性炭TS4，使其终浓度为10g/L，调节pH值3.0，脱色温度为75°C，脱色时间60min，得螺旋藻多糖提取液； (4)真空冷冻干燥:将步骤(3)中得到的螺旋藻多糖提取液进行真空冷冻干燥，得螺旋藻多糖；其中，冻干制品温度_20°C，解析温度30°C，解析时间015h ;
(5)红外光谱分析:称取步骤⑷中得到的干燥的螺旋藻多糖3mg，溴化钾压片后，采用红外光谱仪于3000CHT1的红外区进行扫描，得到其红外光谱图，进一步鉴定螺旋藻多糖。
[0014]实施例3
一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其经过下列工艺步骤:
(1)微波提取:称取螺旋藻粉以1:30的料液比加入蒸馏水，超声波处理器额定功率200W，超声波处理时间2min ;再采用间歇微波提取法进行微波提取；提取液送入离心机中，控制离心机转速6000r/min，离心时间lOmin，取上清液，得螺旋藻多糖粗提液；其中，间歇微波提取法是控制微波功率570W，每个循环微波辐射时间15S，间歇时间15min，反复进行5个循环；
(2)TCA法除蛋白:将步骤(1)中得到的螺旋藻多糖粗提液中加入等体积的、浓度为10%的三氯乙酸溶液，振摇lOmin ;静止2h，离心，取上清液；再静置2h，离心，取上清液；如此重复3次，得去蛋白的螺旋藻多糖提取液；
(3)脱色:将步骤(2)中得到的去蛋白的螺旋藻多糖提取液加入活性炭TS4，使其终浓度为5g/L，调节pH值6.0，脱色温度为80°C，脱色时间30min，得螺旋藻多糖提取液；
(4)真空冷冻干燥:将步骤(3)中得到的螺旋藻多糖提取液进行真空冷冻干燥，得螺旋藻多糖；其中，冻干制品温度_30°C，解析温度40°C，解析时间10h ;
(5)红外光谱分析:称取步骤⑷中得到的干燥的螺旋藻多糖5mg，溴化钾压片后，采用红外光谱仪于4000CHT1的红外区进行扫描，得到其红外光谱图，进一步鉴定螺旋藻多糖。
[0015]实施例4
一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其经过下列工艺步骤:
(1)微波提取:称取螺旋藻粉以1:25的料液比加入蒸馏水，超声波处理器额定功率140W，超声波处理时间3min ;再采用间歇微波提取法进行微波提取；提取液送入离心机，控制离心机转速4500r/min，离心时间15min，取上清液，得螺旋藻多糖粗提液；其中，间歇微波提取法是控制微波功率500W，每个循环微波辐射时间22S，间歇时间3min，反复进行7个循环；
(2)TCA法除蛋白:将步骤(1)中得到的螺旋藻多糖粗提液中加入等体积的、浓度为6%的三氯乙酸溶液，振摇15min ;静止4h，离心，取上清液；再静置4h，离心，取上清液；如此重复2次，得去蛋白的螺旋藻多糖提取液；
(3)脱色:将步骤(2)中得到的去蛋白的螺旋藻多糖提取液加入活性炭TS4，使其终浓度为6g/L，调节pH值4.5，脱色温度为80°C，脱色时间45min，得螺旋藻多糖提取液；
(4)真空冷冻干燥:将步骤(3)中得到的螺旋藻多糖提取液进行真空冷冻干燥，得螺旋藻多糖；其中，冻干制品温度_25°C，解析温度35°C，解析时间15h ;
(5)红外光谱分析:称取步骤⑷中得到的干燥的螺旋藻多糖4mg，溴化钾压片后，采用红外光谱仪于lOOOcnf1的红外区进行扫描，得到其红外光谱图，进一步鉴定螺旋藻多糖。
【主权项】
1.一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其特征在于:其经过下列工艺步骤: (1)微波提取:称取螺旋藻粉以1:10?30的料液比加入蒸馏水，超声处理后采用间歇微波提取法进行微波提取；提取液离心，取上清液，得螺旋藻多糖粗提液； (2)TCA法除蛋白:将步骤(1)中得到的螺旋藻多糖粗提液中加入等体积的、浓度为5?10%的三氯乙酸溶液，振摇10?15min ;静止2?4h，离心，取上清液；静置2?4h，离心，取上清液；如此重复2?3次，得去蛋白的螺旋藻多糖提取液； (3)脱色:将步骤(2)中得到的去蛋白的螺旋藻多糖提取液加入活性炭TS4，使其终浓度为5?10g/L，调节pH值3.0?6.0，脱色温度为75?80°C，脱色时间30?60min，得螺旋藻多糖提取液； (4)真空冷冻干燥:将步骤(3)中得到的螺旋藻多糖提取液进行真空冷冻干燥，得螺旋藻多糖；其中，冻干制品温度_25±5°C，解析温度35±5°C，解析时间10?15h。2.根据权利要求1所述的一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其特征在于:其还经过下列工艺步骤: (5)红外光谱分析:称取步骤⑷中得到的干燥的螺旋藻多糖2?5mg，溴化钾压片后，采用红外光谱仪于4000CHT1?1000cm ―1的红外区进行扫描，得到其红外光谱图，进一步鉴定螺旋藻多糖。3.根据权利要求1或2所述的一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其特征在于:所述的超声处理是超声波处理器额定功率100?200W，超声波处理时间2?5min。4.根据权利要求1或2所述的一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其特征在于:所述的间歇微波提取法是控制微波功率450?570W，每个循环微波辐射时间20±5S，间歇时间2?5min，反复进行5?7个循环。5.根据权利要求1或2所述的一种螺旋藻多糖的微波提取方法，其特征在于:所述的提取液离心是提取液送入离心机中，控制离心机转速4000?6000r/min，离心时间10?15min0
【专利摘要】本发明公开了一种螺旋藻多糖的微波提取方法。其主要解决现有热水法、冷碱法提取螺旋藻多糖存在耗时、耗能、得率低的问题。其是将螺旋藻粉按料液比加入蒸馏水，超声处理后采用间歇微波提取法进行微波提取，离心，得螺旋藻多糖粗提液；粗提液中加入三氯乙酸溶液去蛋白；再加入活性炭TS4进行脱色，再经真空冷冻干燥，得螺旋藻多糖。本发明的提取方法工艺合理、提取多糖条件温和、不破坏有效成分、提取效率高、除杂彻底、得率理想，适合规模化工厂生产。
【IPC分类】C08B37/00
【公开号】CN105348405
【申请号】CN201510824953
【发明人】杨劲峰, 吴文惠, 傅诗情
【申请人】荣成广润水产食品有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月24日