一种香菇脚多糖的提取方法
【专利说明】
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技术领域
[0001]本发明涉及一种香菇脚多糖的提取方法。
(二)
【背景技术】
[0002]香燕是中国著名食用菌，在民间素有“山珍”之称。香燕含有一种分子量为100万的抗肿瘤成分一一香菇多糖，现代研究证明，香菇多糖可调节人休内有免疫功能的T细胞活性，可降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力。
[0003]香菇脚是香菇的柄，是香菇的菌柄切片烘干的干品。目前对香菇脚多糖的提取多采用热水浸提法或有机溶剂浸提法，前者易造成多糖活性降低，且能耗大、得率低(低于3% );后者则存在溶剂使用成本高、回收困难、产品溶剂残留等问题，因此有必要对其进行改进。
(三)
【发明内容】
[0004]本发明目的是针对现有技术中的以上不足，提供一种成本低、方法简单、提取率尚、广品质量好的香燕脚多糖的提取方法。
[0005]本发明采用的技术方案是:
[0006]—种香菇脚多糖的提取方法，所述方法包括:
[0007](1)选择无霉变、无虫蛀、无异味的香菇脚，剪去菇柄下端老化部分，洗净后置于烘箱中100?105°C干燥至含水量为3?5% (w/w)，超微粉碎至200?300目；
[0008](2)步骤⑴所得粉末加入20?25倍体积(每lg粉末加入20?25mL蒸馏水)的蒸馈水中，加入中性蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，于45?55°C、pH 5?6条件下浸提60?180分钟，间隙搅拌，过滤，收集提取液浓缩至原体积的1/3?1/2得浓缩液；所述中性蛋白酶质量用量为2?3% (酶质量占香菇脚粉末质量百分比，下同)，纤维素酶质量用量为1?2%，果胶酶质量用量为1?2% ;本发明中所用的中性蛋白酶购自上海蓝季科技发展有限公司，单位酶活40U/mg ;纤维素酶购自上海伯奥生物科技有限公司，单位酶活15U/mg ;果胶酶购自上海蓝季科技发展有限公司，单位酶活30U/mg。
[0009](3)步骤⑵所得浓缩液加入4?5倍体积的90?95 %乙醇溶液沉淀12?24小时，离心分离沉淀，滤液真空干燥，得香菇脚粗多糖。
[0010]本发明首先在超微粉碎机械作用下，破坏香菇脚的细胞壁，释放胞内多糖，然后采用复合酶协同作用于提取过程复合酶将多糖结合的蛋白质酶解，在提高多糖的提取得率的同时降低了蛋白质的含量。该方法不仅提高了产率，同时提高了多糖的纯度，简化了多糖的纯化工作，大大增大了经济效益。
[0011]优选的，步骤(2)中各酶用量为:中性蛋白酶质量用量为2%，纤维素酶质量用量为1 %，果胶酶质量用量为1%。
[0012]优选的，步骤(2)中喷雾干燥参数如下:进风温度控制在180°C?220°C，通过控制加热器来调节；出风温度控制在80°C?120°C，通过物料的进料速度来调节。
[0013]本发明的有益效果主要体现在:采用本发明方法，提高了多糖的溶出率，条件温和、操作简单、成本低，目标产物活性高，多糖的提取得率高、质量好。
(四)
【具体实施方式】
[0014]下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此:
[0015]实施例中所用的中性蛋白酶购自上海蓝季科技发展有限公司，单位酶活40U/mg ;纤维素酶购自上海伯奥生物科技有限公司，单位酶活15U/mg ;果胶酶购自上海蓝季科技发展有限公司，单位酶活30U/mg。
[0016]实施例1:
[0017]选择无霉变、无虫蛀、无异味的香菇脚，剪去菇柄下端老化部分，取100kg香菇脚，烘干至其水分含量为2 %，先粗粉碎(过20目)，再超微粉碎(过300目)，所得粉末加入25倍体积蒸馏水中加入由中性蛋白酶2%，纤维素酶1.0%、果胶酶1.0%组成的复合酶，温度55°C、pH 6条件下浸提60分钟。间隙搅拌，过滤，收集提取液浓缩(-0.06Mpa?-0.08Mpa减压浓缩)至相对密度为1.03，取浓缩液加入4倍体积的90%乙醇沉淀18h，离心分离沉淀，滤液喷雾干燥(进风温度控制在180°C?200°C，出风温度控制在100°C?120°C )后得香菇脚粗多糖8.5公斤，提取率为8.5%。
[0018]实施例2:
[0019]选择无霉变、无虫蛀、无异味的香菇脚，剪去菇柄下端老化部分，取100kg香菇脚，烘干至其水分含量为3 %，先粗粉碎(过20目)，再超微粉碎(过300目)，所得粉末加入20倍体积蒸馏水中加入由中性蛋白酶2%，纤维素酶1.0%、果胶酶1.0%组成的复合酶，温度55°C、pH 5条件下浸提120分钟。间隙搅拌，过滤，收集提取液浓缩(-0.06Mpa?-0.08Mpa减压浓缩)至相对密度为1.03，取浓缩液加入4倍体积的95%乙醇沉淀18h，离心分离沉淀，滤液喷雾干燥(进风温度控制在180°C?200°C，出风温度控制在80°C?100°C )后得香菇脚粗多糖9.3公斤，提取率为9.0%。
[0020]实施例3:
[0021]选择无霉变、无虫蛀、无异味的香菇脚，剪去菇柄下端老化部分，取100kg香菇脚，烘干至其水分含量为3 %，先粗粉碎(过20目)，再超微粉碎(过300目)，所得粉末加入20倍体积蒸馏水中加入由中性蛋白酶2%，纤维素酶1.0%、果胶酶1.0%组成的复合酶，温度50°C、pH 5条件下浸提180分钟。间隙搅拌，过滤，收集提取液浓缩(-0.06Mpa?-0.08Mpa减压浓缩)至相对密度为1.04，取浓缩液加入4倍体积的95%乙醇沉淀24h，离心分离沉淀，滤液喷雾干燥(进风温度控制在200°C?220°C，出风温度控制在120°C?120°C )后得香菇脚粗多糖9.8公斤，提取率为9.8%。
【主权项】
1.一种香菇脚多糖的提取方法，所述方法包括: (1)选择无霉变、无虫蛀、无异味的香菇脚，剪去菇柄下端老化部分，洗净后置于烘箱中100?105°C干燥至含水量为3?5%，粉碎至200?300目； (2)步骤(1)所得粉末加入20?25倍体积的蒸馏水中，加入中性蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，于45?55°C、pH 5?6条件下浸提60?180分钟，间隙搅拌，过滤，收集提取液浓缩至相对密度为1.03?1.05，得浓缩液；所述中性蛋白酶质量用量为2?3%，纤维素酶质量用量为1?2%，果胶酶质量用量为1?2% ; (3)步骤(2)所得浓缩液加入4?5倍体积的90?95%乙醇溶液沉淀12?24小时，离心分离沉淀，滤液喷雾干燥，得香菇脚粗多糖。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)中各酶用量为:中性蛋白酶质量用量为2%，纤维素酶质量用量为1%，果胶酶质量用量为1%。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(3)中喷雾干燥参数如下:进风温度控制在180°C?220°C，出风温度控制在80°C?120°C。
【专利摘要】本发明涉及一种香菇脚多糖的提取方法，所述方法为：选择无霉变、无虫蛀、无异味的香菇脚，剪去菇柄下端老化部分，洗净后置于烘箱中100～105℃干燥至含水量为3～5％，粉碎至200～300目；所得粉末加入20～25倍体积的蒸馏水中，加入中性蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，于45～55℃、pH5～6条件下浸提60～180分钟，间隙搅拌，过滤，收集提取液浓缩至原体积的1/3～1/2得浓缩液；所得浓缩液加入4～5倍体积的90～95％乙醇溶液沉淀12～24小时，离心分离沉淀，滤液真空干燥，得香菇脚粗多糖。本发明的有益效果主要体现在：采用本发明方法，提高了多糖的溶出率，条件温和、操作简单、成本低，目标产物活性高，多糖的提取得率高、纯度高。
【IPC分类】C08B37/00
【公开号】CN105384840
【申请号】CN201510976711
【发明人】胡传久, 魏海龙, 程俊文, 李海波, 贺亮
【申请人】浙江省林业科学研究院
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年12月22日