本发明涉及一种新的氮杂环类衍生物，其制备方法，含有其的药物组合物，以及其作为smo拮抗剂的用途，特别是在治疗与hedgehog信号通路相关的疾病如癌症中的用途。
背景技术：
：hedgehog(hh)信号通路是一条重要的胚胎通路，在胚胎发育的过程中对细胞增殖和分化中起到重要的调控作用。人类已经鉴别出来的同源hedgehog蛋白有三种，分别是sonichedgehog(shh)、indianhedgehog(ihh)和deserthedgehog(dhh)。许多证据显示shh还在包括基底癌细胞等一些癌症的致癌机制上起着十分重要的作用。hh信号借助与g蛋白偶联受体相关的七次跨膜蛋白smoothened(smo)传导。在成人体中，hh信号通路一般处于关闭状态，但hh信号通路的异常激活在肿瘤的发生和发展中起到了举足轻重的作用。基底癌细胞hh信息通道的变异分析结果显示大多数的变异发生在ptch-1和smo上。ptch-1是有着12次跨膜结构的膜蛋白，它是shh的直接作用受体。在通常的情况下，人体内的hedgehog蛋白的浓度非常低，在这种情况下，ptch-1与smo相作用，抑制smo的生物活性，使该通道处于关闭状态。一旦shh与ptch-1结合，将导致ptch-1脱离smo，从而使smo摆脱受抑制的状态，smo的激活会进一步诱导下游的转录因子gli(包括gli1、gli2和gli3)的活化，从而调控基因的转录和细胞的生长。因此，smo对gli起着开关的作用。扰乱它的作用将诱发细胞的过度生长和癌变。比如大部分的基底细胞癌都是由于基因突变或其他原因导致的过高的hedgehog信息传导通道活力。因此抑制过高的hedgehog信息传导通路的活力能够抑制癌细胞的生长从而达到治疗由该机制引起的多种癌症。近年来，hedgehog通路的研究受到了科学界越来越多的重视，而靶向hh通路尤其是新型靶点g蛋白偶联受体smoothened(smo)的小分子抑制剂已成为制药公司和科研机构的研究热点。其中hedgehog通路拮抗剂vismodegib(gdc-0449)和sonidegib(lde225)分别于2012年和2015年被美国食品药物管理局(fda)批准上市，用于治疗成年基底细胞癌患者。这些拮抗剂抑制了smo的活性，也就抑制了hh信号通道活力，从而达到抗癌的作用。除了基底细胞癌和髓母细胞癌两种癌症，许多其他的癌症也和hh信息传导通路异常激活有关，包括食管癌、胃癌、胰腺癌、肺癌等。不仅如此，越来越多的研究表明hh信号通路的活性与当今困扰各种癌症治疗中的获得性耐药问题紧密相关。例如smo基因的增扩及其hh通路的活化被认为是令治疗非小细胞肺癌的细胞表皮生长因子受体(egfr)抑制剂失去疗效的主要原因之一。因此研发hedgehog抑制剂作为抗癌药物，特别是与其它抗药物联合用药来治疗各种癌症前景非常广泛。技术实现要素：本发明人经过潜心研究，设计合成了一系列含氮杂环类化合物，对其进行深入研究的结果显示该类化合物能够拮抗smo进而抑制hedgehog信号通路，并且可以被开发为治疗与hedgehog信号通路相关的疾病的药物。因此，本发明涉及一种式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中：a0、a1、a2、a3各自独立地选自cr2或n；a4和a5各自独立地选自c或n；q、v、u0各自独立地选自c或n；r、w、u1、u2、u3、u4各自独立地选自cr3或n；ar选自芳基或杂芳基，优选5至6元芳基或杂芳基，更优选苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基；所述芳基或杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、羟基、烷基、烷氧基、环烷基的一个或多个基团取代；每一个r1独立地选自氢、卤素、氧代基、烷基、环烷基、-ora；r2选自氢、卤素、氨基、硝基、氰基、巯基、氧代基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-ora、-c(o)ra、-o(o)cra、-c(o)ora、-c(o)nrarb、-nhc(o)ra、-nrarb、-s(o)ra、-s(o)2ra、-s(o)nrarb、-s(o)2nrarb、-nhs(o)ra、-nhs(o)2ra、-p(o)rarb、-b(oh)2；其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、氧代基、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；r3选自氢、卤素、氨基、硝基、氰基、巯基、氧代基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-ora、-c(o)ra、-o(o)cra、-c(o)ora、-c(o)nrarb、-nhc(o)ra、-nrarb、-s(o)ra、-s(o)2ra、-s(o)nrarb、-s(o)2nrarb、-nhs(o)ra、-nhs(o)2ra、-p(o)rarb、-b(oh)2；其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、氧代基、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；ra和rb各自独立地选自氢、卤素、羟基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、巯基、羧基、酯基、氧代基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；或者ra和rb与他们连接的氮原子一起形成含氮杂环基，所述含氮杂环基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、氧代基、羟基、巯基、羧基、酯基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；n为1至3的整数；i为1或2；j为1或2；其中，通式(i)化合物中的每一个h原子可以任选独立地被d原子替代。在本发明一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中，a4和a5各自独立地选自c。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中：a0、a1、a2、a3各自独立地选自cr2；r2如通式(i)中所定义。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中：u1、u2、u3、u4各自独立地选自cr3；r3如通式(i)中所定义。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其为通式(ii)、(iii)、(iv)或(v)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中，m为1至4的整数；q为1至4的整数；r3a和r3b各自独立地选自氢、卤素、氨基、硝基、氰基、巯基、氧代基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-ora、-c(o)ra、-o(o)cra、-c(o)ora、-c(o)nrarb、-nhc(o)ra、-nrarb、-s(o)ra、-s(o)2ra、-s(o)nrarb、-s(o)2nrarb、-nhs(o)ra、-nhs(o)2ra；其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、氧代基、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；ra和rb各自独立地选自氢、卤素、羟基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、巯基、羧基、酯基、氧代基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；或者ra和rb与他们连接的氮原子一起形成含氮杂环基，所述含氮杂环基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、氧代基、羟基、巯基、羧基、酯基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；i为1且j为2；或者i为2且j为1；ar、r1、r2、n如通式(i)中所定义。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其为通式(ii)、(iii)、(iv)或(v)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中，ar为芳基，优选苯基。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其为通式(ii)、(iii)、(iv)或(v)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中，ar为杂芳基，优选吡啶基。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其为通式(vi)、(vii)、(viii)或(ix)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中，m为1至4的整数；p为1至4的整数；q为1至4的整数；r3a和r3b各自独立地选自各自独立地选自氢、卤素、氨基、硝基、氰基、巯基、氧代基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-ora、-c(o)ra、-o(o)cra、-c(o)ora、-c(o)nrarb、-nhc(o)ra、-nrarb、-s(o)ra、-s(o)2ra、-s(o)nrarb、-s(o)2nrarb、-nhs(o)ra、-nhs(o)2ra；其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、氧代基、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；ra和rb各自独立地选自氢、卤素、羟基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、巯基、羧基、酯基、氧代基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；或者ra和rb与他们连接的氮原子一起形成含氮杂环基，所述含氮杂环基任选进一步被选自卤素、氨基、硝基、氰基、氧代基、羟基、巯基、羧基、酯基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基的一个或多个基团取代；r4选自卤素、氨基、羟基、烷基、烷氧基、环烷基；r1、r2、n如通式(i)中所定义。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其为通式(vi)、(vii)、(viii)或(ix)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中：r1选自氢、卤素、烷基、环烷基、-ora；ra选自氢、烷基、环烷基。在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其为通式(vi)、(vii)、(viii)或(ix)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中，r2选自氢、卤素、烷基、环烷基、杂环基、-ora、-c(o)ra、-c(o)nrarb、-nhc(o)ra、-nrarb、-s(o)ra、-s(o)2ra、-p(o)rarb、-b(oh)2；其中所述烷基、环烷基、杂环基任选进一步被选自卤素、羟基、巯基、氰基、羧基、烷基、烷氧基的一个或多个基团取代；ra和rb各自独立地选自氢、卤素、烷基、环烷基、杂环基，其中所述烷基、环烷基、杂环基任选进一步被选自卤素、羟基、巯基、羧基、酯基、氧代基的一个或多个基团取代；或者ra和rb与他们连接的氮原子一起形成含氮杂环基，优选含氮4～7元含氮杂环基，所述含氮杂环基任选进一步被选自卤素、羟基、巯基、羧基、酯基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基的一个或多个基团取代；优选地，r2独立地为：在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其为通式(vi)、(vii)、(viii)或(ix)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，其中：r3a和r3b各自独立地选自氢、卤素、烷基、环烷基、杂环基、-ora；优选r3a为氢和r3b为烷基；ra选自氢、烷基、环烷基。本发明典型的化合物包括但不限于以下化合物：或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐。本发明另一方面提供一种通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的制备方法，其包含以下步骤：将式(ia)化合物与式(ib)化合物在金属钯催化剂的存在下，在碱性条件下加热，经过buckwald氨基化偶联反应，得到通式(i)化合物；其中，所述金属钯催化剂优选pd2(dba)3/binap或pd(dppf)2cl2；所述碱优选cs2co3；加热温度优选100～120℃；其中，x为卤素，优选br；ar、a0、a1、a2、a3、a4、a5、q、w、v、r、u0、u1、u2、u3、u4、r1、n、i、j如通式(i)所定义。本发明另一方面提供一种通式(ii)、(iii)、(iv)或(v)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的制备方法，其包含以下步骤：将式(ia”)化合物与式(iib)、(iiib)、(ivb)、或(vb)化合物在金属钯催化剂的存在下，在碱性条件下加热，经过buckwald氨基化偶联反应，得到通式(ii)、(iii)、(iv)或(v)化合物；其中，所述金属钯催化剂优选pd2(dba)3/binap或pd(dppf)2cl2；所述碱优选cs2co3；加热温度优选100～120℃；x为卤素，优选br；ar、r1、r2、r3a、r3b、m、n、q、i、j如通式(ii)、(iii)、(iv)或(v)中所定义。本发明另一方面提供一种通式(vi)、(vii)、(viii)或(ix)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的制备方法，其包含以下步骤：将式(ia’)化合物与式(vib)、(viib)、(viiib)、或(ixb)化合物在金属钯催化剂的存在下，在碱性条件下加热，经过buckwald氨基化偶联反应，得到通式(vi)、(vii)、(viii)或(ix)化合物；其中，所述金属钯催化剂优选pd2(dba)3/binap或pd(dppf)2cl2；所述碱优选cs2co3；加热温度优选100～120℃；x为卤素，优选br；r1、r2、r3a、r3b、r4、m、n、p、q如通式(vi)、(vii)、(viii)或(ix)所定义。本发明另一方面提供一种药物组合物，其含有根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。所述药物组合物还可以进一步含有另一种治疗活性成分，所述另一种治疗活性成分优选为治疗癌症的药物，所述癌症优选直肠癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌、胃癌、血癌、肺癌、脑癌、皮肤癌、头颈癌、卵巢癌、膀胱癌和肾癌，更优选肺癌、乳腺癌、胰腺癌和胃癌。本发明还涉及一种制备上述组合物的方法，其包括将通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、其前药或其可药用盐与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相混合。本发明另一方面提供根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备smo拮抗剂中的用途。本发明另一方面提供根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备治疗与hedgehog信号通路相关的疾病的药物中的用途。所述与hedgehog信号通路相关的疾病选自癌症，所述癌症可以是直肠癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌、胃癌、血癌、肺癌、脑癌、皮肤癌、头颈癌、卵巢癌、膀胱癌或肾癌，优选血癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌和胃癌。本发明另一方面提供根据本发明所述的通式(i)所示的化合物或其内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐与另一种治疗活性成分联合，在制备治疗癌症的药物中的用途，其中所述另一种治疗活性成分与通式(i)所示的化合物同时、分开或相继使用；所述另一种治疗活性成分优选为治疗癌症的药物；所述癌症优选直肠癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌、胃癌、血癌、肺癌、脑癌、皮肤癌、头颈癌、卵巢癌、膀胱癌和肾癌，更优选血癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌和胃癌。按照本发明所属领域的常规方法，本发明通式(i)所示的化合物可以与酸生成药学上可接受的酸式加成盐。所述酸包括无机酸和有机酸，可以接受的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸等，可以接受的有机酸包括甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、三氟乙酸、马来酸、柠檬酸、富马酸、草酸、酒石酸、苯甲酸等。本发明通式(i)所示的化合物可以与碱生成药学上可接受的碱式加成盐。所述碱包括无机碱和有机碱，可接受的有机碱包括二乙醇胺、乙醇胺、n-甲基葡糖胺、三乙醇胺、氨丁三醇等，可接受的无机碱包括氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠和氢氧化钠等。本发明的药物组合物包括任意一种或更多种本发明所述的化合物(或其可药用盐、溶剂化物、水合物、前药或衍生物)以及任选地包括药学上可接受的载体。在某些实施方案中，这些组合物任选地还包括一种或多种其他治疗药物。可选地，本发明的化合物可联合一种或多种其他治疗药物，向有此需求的患者施用。还要理解的是，本发明的某些化合物可以以游离的形式，或适当时，以其可药用盐的形式存在以用于治疗。如上所述，本发明的药物组合物还包括药学上可接受的载体。在本文中，所述载体包括任何或所有溶剂、稀释剂、或其他液体载体、分散或悬浮辅助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等，其调整为所需的特定剂量形式。remington’spharmaceuticalsciences，sixteenthedition,e.w.martin(mackpublishingco.,easton,pa.,1980)公开了各种用于配制药物组合物的载体，以及用于其制备的已知技术。除非任何常规载体介质与本发明的化合物不相容，例如通过产生任何不期望的生物作用或者和药物组合物的任何其他成分以有害的方式相互作用，否则其用途预计属于本发明范围内。可以作为药学上可接受的载体的材料的一些示例包括但不限于：糖例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；粉状西黄蓍胶；麦芽糖；明胶；滑石粉；赋形剂如可可脂和栓剂蜡；油例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二元醇类例如丙二醇；酯例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂例如氢氧化镁和氢氧化铝；褐藻酸；无热原的水；等渗盐水；林格溶液(ringer’ssolution)；乙醇和磷酸盐缓冲溶液；以及其他无毒可相容的润滑剂例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁；以及根据配制者的判断，组合物中还可存在着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。本发明化合物可以通过各种给药途径施用于患者。这些给药途径包括但不限于：口服、舌下含服、皮下注射、静脉注射、滴鼻、表面涂抹、皮渗透、腹腔内给药、肌肉注射、肺部给药等。含活性成分的药物组合物可以为固体、半固体、液体和气雾剂的形式，例如，片剂、颗粒剂、胶囊、粉末剂、液体、混悬剂、栓剂等。也可以缓释的方式例如通过长效注射剂、渗透泵、药丸、贴剂等方式给药。用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在这样的固体剂型中，活性化合物和至少一种惰性可药用赋形剂或载体相混合，例如a)填料或填充剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐/酯、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶，c)保湿剂例如甘油，d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂(solutionretardingagent)，例如石蜡，f)吸收加速剂，例如季铵盐化合物，g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂，例如高岭土和膨润土，以及i)润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁，固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，所述剂型还可包括缓冲剂。相似类型的固体组合物也可作为填充剂用于填充软或硬明胶胶囊，其使用例如乳糖以及高分子量聚乙二醇的赋形剂。可将片剂、糖衣剂(dragee)、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型制备成具有包衣和壳层(shell)(例如肠溶衣以及药物制剂领域公知的其他包衣)。其可任选包含遮光剂(opacifyingagent)，还可以是仅在或优选在肠道中的某些部分释放，任选地以延迟的方式释放所述活性成分的组合物。可用的包埋组合物的示例包括高分子物质和蜡。用于口服施用的液体剂型包括但不限于可药用乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除了活性化合物，液体剂型还可以包含现有技术中常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(尤其是棉籽、落花生(花生)、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻的油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨聚糖脂肪酸酯，及其混合物。除了惰性稀释剂，口服组合物也可包括佐剂(adjuvant)，例如润湿剂、乳化和混悬剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。可注射制剂，例如，根据现有技术可以使用适当的分散或润湿剂和混悬剂配制无菌可注射水性或油性混悬液。所述无菌可注射制剂也可以是在无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、混悬液或乳液，例如，1,3-丁二醇中的溶液。可接受的载体或溶剂包括水、林格溶液、和等渗氯化钠溶液。此外，无菌、固定油常规用作溶剂或混悬基质。出于此目的，可以使用任何温和的固定油，包括制备的单甘油酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸可用于注射物的制备。可注射制剂可以是无菌的，例如，通过细菌-阻留过滤器进行过滤，或通过使用前以无菌固体组合物的形式加入杀菌剂，其可以溶于或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中。用于直肠或阴道施用的组合物优选栓剂，可以通过将本发明化合物和合适的非刺激性赋形剂或载体(例如，可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合来制备，其在环境温度下是固体，在体温下是液体，因此在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物。本领域技术人员熟知，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用特定化合物的活性、病人的年龄、病人的体重、病人的健康状况、病人的行被、病人的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等。另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。还要理解的是，可以配制本发明的化合物或药物组合物，并用于联合治疗，即化合物和药物组合物可以与同一种或多种其他期望的疗法或医疗程序同时、在先或随后配制或施用。以组合方案采用的具体治疗组合(疗法或程序)将考虑到所需的疗法和/或程序的相容性，以及要达到的理想治疗作用。发明的详细说明除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。术语“烯基”指由至少由两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上定义的烷基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。术语“炔基”指由至少由两个碳原子和至少一个碳-碳三键组成的如上定义的烷基，例如乙炔基、丙炔基、丁炔基等。炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-o-o-、-o-s-或-s-s-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；最优选包含3至8个环原子，其中1～3个是杂原子；最优选包含5至7个环原子，其中1～2或1～3个是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基等，优选1、2、5-噁二唑基、吡喃基或吗啉基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：等。杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。更优选苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，含1至3个杂原子；更优选为5元或6元，含1至2个杂原子；优选例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为咪唑基、噻唑基、吡唑基或嘧啶基、噻唑基；更有选吡唑基或噻唑基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。术语“烷氧基”指-o-(烷基)和-o-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。术语“卤代烷基”指被一个或多个卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。术语“卤代烷氧基”指被一个或多个卤素取代的烷氧基，其中烷氧基如上所定义。术语“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。术语“羟基”指-oh基团。术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。术语“氨基”指-nh2。术语“氰基”指-cn。术语“硝基”指-no2。术语“氧代基”指＝o。术语“羧基”指-c(o)oh。术语“巯基”指-sh。术语“酯基”指-c(o)o(烷基)或-c(o)o(环烷基)，其中烷基和环烷基如上所定义。术语“酰基”指含有-c(o)r基团的化合物，其中r为烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基。术语“磺酸基”指-s(o)2oh。术语“磺酸酯基”指-s(o)2o(烷基)或-s(o)2o(环烷基)，其中烷基和环烷基如上所定义。“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。本发明化合物的合成方法为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案。本发明具体化合物的制备方法如下。对于通式(vi)的化合物可以按照如下方案1的方法制备：方案1步骤1：将化合物via与化合物vib在碱性条件下，在缩合剂作用下发生缩合反应，得到化合物vic；提供碱性条件的试剂可以为有机碱如tea或dipea，优选dipea；所述缩合剂可以为hatu、hbtu或edci/hobt，优选hatu；步骤2：将化合物vic在酸的催化下进行环化反应，得到化合物vid；所述酸可以为各种有机酸，优选醋酸；步骤3：将化合物vie在催化剂的存在下，在酸性介质中还原，得到化合物vif；所述催化剂可以为金属钯和铂，优选二氧化铂，所述酸性介质可以为盐酸、硫酸、甲酸、醋酸等，优选醋酸；步骤4：将化合物vid与化合物vif在buckwald条件下进行氨化偶联反应，得到通式(vi)化合物，所述buckwald条件为金属钯(pd2(dba)3/binap或pd(dppf)2cl2)作为催化剂，cs2co3作为碱，反应温度为100～120℃。对于通式(vii)的化合物可以按照如下方案2的方法制备：方案2步骤1：以取代的邻乙酰苯胺化合物viia为起始原料，通过sandmeyer反应，得到化合物viib；所述sandmeyer反应用t-buono作为优选的重氮化试剂，用tmsn3提供亲核叠氮源；反应温度为0℃至室温。步骤2：将化合物viib与化合物viic在lewis酸的催化下进行缩合反应，得到化合物viid；所述lewis酸可以为ti(oipr)4、ticl(oipr)3,优选ticl4；步骤3：化合物viid在催化剂的存在下进行环化反应，得到化合物viie；所述催化剂可以为cu2o或cucl，优选cui；步骤4：将化合物viie与化合物vif在buckwald条件下进行氨化偶联反应，得到通式(vi)化合物，所述buckwald条件为使用金属钯(pd2(dba)3/binap或pd(dppf)2cl2)作为催化剂，cs2co3作为碱，反应温度为100～120℃。对于通式(viii)的化合物可以按照如下方案3的方法制备：方案3步骤1：以苯甲醛化合物viiia为起始原料，与硝基化合物缩合，得到化合物viiib；反应温度为80～100℃；步骤2：将化合物viiib与化合物viiid在还原剂作用下反应，得到化合物viiic；所述还原剂可以为fecl2、sncl2、cu(oac)，优选fecl2；步骤3：将化合物viiic与化合物vif在buckwald条件下进行氨化偶联反应，得到通式(vi)化合物，所述buckwald条件为条件为金属钯(pd2(dba)3/binap或pd(dppf)2cl2)作为催化剂，cs2co3作为碱，反应温度为100～120℃。对于通式(ix)的化合物可以按照如下方案4的方法制备：方案4步骤1：化合物viiib与化合物ixa在室温搅拌，通过空气氧化发生缩合环化反应，得到化合物ixb；步骤2：将化合物ixb与化合物vif在buckwald条件下进行氨化偶联反应，得到通式(vi)化合物，所述buckwald条件为条件为金属钯(pd2(dba)3/binap或pd(dppf)2cl2)作为催化剂，cs2co3作为碱，反应温度为100～120℃。具体实施方式进一步通过实施例来理解本发明的化合物及其制备，这些实施例说明了一些制备或使用所述化合物的方法。然而，要理解的是，这些实施例不限制本发明。现在已知的或进一步开发的本发明的变化被认为落入本文中描述的和要求保护的本发明范围之内。本发明化合物是利用便利的起始原料和通用的制备步骤来完成制备的。本发明给出了典型的或倾向性的反应条件，诸如反应温度、时间、溶剂、压力、反应物的摩尔比。但是除非特殊说明，其他反应条件也能采纳。优化条件可能随着具体的反应物或溶剂的使用而改变，但在通常情况下，反应优化步骤和条件都能得到确定。另外，本发明中可能用到了一些保护基团来保护某些官能团避免不必要的反应。适宜于各种官能团的保护基以及它们的保护或脱保护条件已经为本领域技术人员广泛熟知。例如t.w.greene和g.m.wuts的《有机制备中的保护基团》(第3版,wiley,newyork,1999和书中的引用文献)详细描述了大量的保护基团的保护或脱保护。化合物和中间体的分离和纯化依据具体的需求采取适当的方法和步骤，例如过滤、萃取、蒸馏、结晶、柱层析、制备薄层板色谱、制备高效液相色谱或上述方法的混合使用。其具体使用方法可参阅本发明描述的实例。当然，其他类似的分离和纯化手段也是可以采用的。可以使用常规方法(包括物理常数和波谱数据)对其进行表征。化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定的。nmr位移以10-6(ppm)的单位给出。nmr的测定是用brukerdps300型核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)，氘代氯仿(cdcl3)，氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。ms的测定用acquityh-classuplc质谱仪(qdadetector)(生产商：waters)。制备液相使用waters2545高效液相色谱仪(waters2489uv/visibledetector,2767samplemgr,unitaryc18,5μm20mmx250mm)(生产商：waters)。微波反应使用initiator+eu型微波反应器(生产商：biotage)。薄层层析硅胶板使用青岛海洋化工gf254硅胶板，薄层色谱法(tlc)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析一般使用青岛海洋硅胶100～200目、200～300目硅胶为载体。本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自网化商城、北京偶合、sigma、百灵威、易世明、上海书亚、上海伊诺凯、安耐吉化学，上海毕得等公司。实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氩气或氮气气球。反应溶剂，有机溶剂或惰性溶剂各自表述为使用的该溶剂在所描述的反应条件下不参与反应，包括，如苯、甲苯、乙腈、四氢呋喃(thf)、二甲基甲酰胺(dmf)、氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、氮-甲基吡咯碄酮(nmp)、吡啶等。实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。本发明中所描述的化学反应一般在常压下进行。反应温度在-78℃至200℃之间。反应时间和条件为，例如，一个大气压下，-78℃至200℃之间，大约1至24小时内完成。如果反应过夜，则反应时间一般为16小时。实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(tlc)，反应所使用的展开剂的体系有：a：二氯甲烷和甲醇体系，b：正己烷和乙酸乙酯体系，c：石油醚和乙酸乙酯体系，d：丙酮，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：a：二氯甲烷和甲醇体系，b：正己烷和乙酸乙酯体系，c：石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。缩略语μl＝微升；μm＝微摩尔；nmr＝核磁共振；boc＝叔丁氧基羰基br＝宽峰d＝双峰δ＝化学位移℃＝摄氏度dd＝双双峰dmf＝n,n-二甲基甲酰胺dmso＝二甲亚砜dcm＝二氯甲烷ea＝乙酸乙酯hplc＝高效液相hz＝赫兹ic50＝抑制50％活性的浓度j＝偶合常数(hz)m＝多重峰m+h+＝母体化合物质量+一质子mg＝毫克ml＝毫升mmol＝毫摩尔ms＝质谱nm＝纳摩尔pe＝石油醚ppm＝每百万分s＝单峰t＝三重峰tfa＝三氟乙酸thf＝四氢呋喃制备实施例1：2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基-2h-吲唑(中间体1a)的制备步骤1：1-(2-叠氮基苯基)乙烷-1-酮的制备在含有乙腈(20ml)的反应瓶中加入1-(2-氨基苯基)乙烷-1-酮(2.0g，14.8mmol)。将反应液冷却至0℃，搅拌下依次滴加叠氮基三甲基硅烷(2.05g，17.76mmol)和亚硝酸叔丁酯(1.68g，16.28mmol)，加毕升至室温并继续搅拌1小时。待反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液pe:ea＝10:1)，得到1-(2-叠氮基苯基)乙烷-1-酮(2.1g，黄色液体，收率：87.5％)。lc-ms(esi)：m/z162.2[m+h+]。步骤2：(e)-1-(2-叠氮基苯基)-n-(5-溴-2-氯苯基)乙-1-亚胺的制备在氮气保护下，在含有二氯甲烷(20ml)的反应瓶中加入1-(2-叠氮基苯基)乙烷-1-酮(500mg，3.1mmol)和5-溴-2-氯苯胺(578mg，2.8mmol)。将反应混合物冷却至0℃，搅拌下依次滴加三乙胺(858mg，8.5mmol)和四氯化钛(323mg，1.7mmol)。加毕，于该温度继续搅拌1小时。待反应完全后，用冰水(5ml)淬灭，反应液用二氯甲烷萃取(10mlx3)，合并有机相。将有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得到粗产品(e)-1-(2-叠氮基苯基)-n-(5-溴-2-氯苯基)乙-1-亚胺(1.2g，红色固体)。其未经纯化直接用于下一步反应。lc-ms(esi)：m/z349.0/351.0[m+h+]。步骤3：2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基-2h-吲唑的制备在含有四氢呋喃(15ml)的反应瓶中加入(e)-1-(2-叠氮基苯基)-n-(5-溴-2-氯苯基)乙-1-亚胺(1.2g，3.44mmol)、碘化亚铜(650mg，3.44mmol)和三乙胺(444mg，3.44mmol)，于室温搅拌4小时。待反应完全后，将反应液过滤，并减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝5:1)，得到2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基-2h-吲唑(120mg，白色固体，收率：10.8％)。lc-ms(esi)：m/z321.0/323.0[m+h+]。制备实施例2：2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(中间体3a)的制备步骤1：(e)-4-溴-1-氯-2-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯的制备在含有硝基乙烷(25ml)的反应瓶中加入5-溴-2-氯苯甲醛(上海苏亚，3.0g，13.66mmol)和醋酸胺(1.36g，17.77mmol)。将反应混合物于85℃搅拌2小时，然后冷却至室温，加入乙酸乙酯稀释(50ml)。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝20:1)，得到(e)-4-溴-1-氯-2-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯(2.9g，黄色固体，收率69.8％)。步骤2：2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶的制备在含有dmf(20ml)的反应瓶中加入(e)-4-溴-1-氯-2-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯(1.13g，4.3mmol)、吡啶-2-胺(311mg，3.3mmol)和四水氯化亚铁(65.7mg，0.33mmol)。将反应混合物于150℃搅拌5小时，待反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯稀释(50ml)。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝10:1)，得到2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(790mg，黄色固体，收率74.5％)。lc-ms(esi)：m/z320.9/322.9[m+h+]。制备实施例3：2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体5a)的制备在含有n-甲基吡咯烷酮(10ml)的反应瓶中加入(z)-2-(2-硝基丙-1-烯-1-基)-4-溴-1-氯-苯(300mg，1.08mmol)和1-氨基吡啶-1-碘化物(200mg，0.9mmol)。于室温搅拌72小时后，加入乙酸乙酯(30ml)稀释。有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝3:1)，得到2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(90mg，淡黄色液体，收率：26％)。lc-ms(esi)：m/z320.9/322.6[m+h+]。制备实施例4：2-(3-溴-6-氯-2-氟苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(中间体7a)的制备步骤1：3-溴-6-氯-2-氟苯甲酸的制备在氮气保护下，将1-溴-4-氯-2-氟苯(5.68g，27.11mmol)溶于含有无水四氢呋喃(60ml)的反应瓶中。将反应液冷却至-78℃，搅拌下缓慢滴加lda(11.44ml，2m四氢呋喃溶液)。加毕继续搅拌1小时后，通入干燥的二氧化碳气体，并缓慢升至室温。反应完全后，再次冷至0℃，加入饱和的nahco3水溶液(100ml)淬灭，用乙醚(80ml)萃取一次，弃去有机相。水相用3n的盐酸调节ph值为2～3后，用乙酸乙酯萃取(100mlx3)，合并的有机相用饱和的食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到3-溴-6-氯-2-氟苯甲酸(3.4g，黄色固体，收率49.4％)。lc-ms(esi)：m/z253.0/255.0[m+h+]。步骤2：3-溴-6-氯-2-氟-n-(2-(甲基氨基)苯基)苯甲酰胺在含有二氯甲烷(20ml)的反应瓶中加入3-溴-6-氯-2-氟苯甲酸(1.05g，4.14mmol)、单甲基邻苯二胺(506mg，4.14mmol)、dipea(1.06g，8.28mmol)和hatu(1.88g，4.96mmol)。反应混合液于室温搅拌2小时，然后加入饱和的碳酸氢钠水溶液淬灭，用二氯甲烷萃取(60mlx3)。合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝1:1)得到3-溴-6-氯-2-氟-n-(2-(甲基氨基)苯基)苯甲酰胺(1.06g，黄色固体，收率：71.6％)。lc-ms(esi)：m/z357.0/359.1[m+h+]。步骤3：2-(3-溴-6-氯-2-氟苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑的制备(中间体7a)在含有乙酸(15ml)的反应瓶中加入3-溴-6-氯-2-氟-n-(2-(甲基氨基)苯基)苯甲酰胺(1.16g，3.24mmol)。将反应液加热至100℃搅拌1小时，减压浓缩除去乙酸，所得固体再加入100ml乙酸乙酯溶解，用饱和nahco3溶液洗涤直至碱性。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝2:1)得到2-(2-溴-5-氯吡啶-4-基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(652mg，白色固体，收率62.6％)。lc-ms(esi)：m/z339.1/341.1[m+h+]。制备实施例5：2-(2-溴-5-氯吡啶-4-基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(中间体9a)的制备步骤1：2-溴-5-氯异烟酸的制备在氮气保护下，在含有无水thf(45ml)的反应瓶中加入二异丙胺(4ml)，冷却至-5℃，缓慢滴加正丁基锂溶液(12.5ml，23％的正己烷溶液)。加毕继续搅拌0.5小时后冷却至-78℃，再缓慢滴加2-溴-5-氯吡啶(5.0g，26.00mmol)的四氢呋喃(45ml)溶液。加毕继续搅拌15分钟后，再通入干燥的二氧化碳气体，搅拌30分钟后，将反应液升至室温，缓慢滴加到饱和的碳酸氢钠溶液(100ml)中，所得混合液用乙醚萃取(50ml)，弃去有机相，水相用1n的盐酸调节ph至2～3，将析出的白色固体过滤，干燥，得到2-溴-5-氯异烟酸(4.3g，收率：73％)。lc-ms(esi)：m/z235.8/237.9[m+h+]。步骤2：2-溴-5-氯-n-(2-(甲基氨基)苯基)异烟酰胺的制备在含有二氯甲烷(50ml)的反应瓶中加入2-溴-5-氯异烟酸(1.9g，8.18mmol)、n-1-甲基苯-1,2-二胺(1.0g，8.18mmol)、n,n-二异丙基乙胺(dipea)(3.2g，25.0mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯(hatu)(4.7g，12.27mmol)。于室温将反应混合物搅拌2小时，用饱和碳酸氢钠溶液(10ml)淬灭，乙酸乙酯萃取(50mlx3)。合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品2-溴-5-氯-n-(2-(甲基氨基)苯基)异烟酰胺(3.2g，黑色固体)。其未经纯化而直接用于下一步。lc-ms(esi：m/z340.1/342.1[m+h+]。步骤3：2-(2-溴-5-氯吡啶-4-基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑的制备(中间体9a)2-溴-5-氯-n-(2-(甲基氨基)苯基)异烟酰胺(3.2g，9.412mmol)在乙酸(100ml)中加热至回流1小时，减压浓缩除去乙酸。所得固体溶于100ml乙酸乙酯，再分别用饱和nahco3和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝2:1)得到2-(2-溴-5-氯吡啶-4-基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(1.2g，白色固体，收率：40％)。lc-ms(esi)：m/z322.0/324.0[m+h+]。制备实施例6：2-(5-溴-2-氯苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(中间体11a)的制备步骤1：5-溴-2-氯-n-(2-(甲基氨基)苯基)苯甲酰胺的制备于室温，在含有100ml二氯甲烷的反应瓶中依次加入5-溴-2-氯苯甲酸(9.6g，40.80mmol)、n-甲基苯-1,2-二胺(5g，40.80mmol)、hatu(23.34g，61.38mmol)和dipea(21ml，122.40mmol)。将反应混合物搅拌2小时后，用饱和nahco3溶液淬灭，二氯甲烷萃取(50ml×3)。合并的有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得到5-溴-2-氯-n-(2-(甲基氨基)苯基)苯甲酰胺粗品。其未经纯化直接用于下一步反应。lc-ms(esi)：m/z338.9/340.9[m+h+]。步骤2：2-(5-溴-2-氯苯基)-1-甲基-1h-苯并咪唑的制备在含有100mlacoh的的反应瓶中加入步骤1制得的5-溴-2-氯-n-(2-(甲基氨基)苯基)苯甲酰胺。于100℃搅拌1小时后，减压浓缩除去acoh。所得固体再加入100ml乙酸乙酯溶解，饱和nahco3溶液洗涤直至碱性，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝5:1)，得到2-(5-溴-2-氯苯基)-1-甲基-1h-苯并咪唑(10g，白色固体，两步收率：76.6％)。lc-ms(esi)：m/z320.9/322.9[m+h+]。实施例1：2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1)的制备步骤1：6-(甲基磺酰基)异喹啉(1c)的制备在含有50ml二甲基亚砜的圆底烧瓶中加入6-溴异喹啉(3.0g,14.4mmol)、甲基亚磺酸钠(2.2g,30mmol)和碘化亚铜(270mg,1.4mmol)。在氮气保护下，于120℃搅拌过夜。待反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯(100ml)稀释，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱剂为ea:pe＝1:4)，得到6-(甲基磺酰基)异喹啉(1.5g，黄色油状物，收率50％)。lc-ms(esi)：m/z208.0[m+h+]。步骤2：6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1d)的制备在含有20ml甲醇的圆底烧瓶中加入6-(甲基磺酰基)异喹啉(1.5g,7.2mmol)、pto2(0.1g，10％)和10ml乙酸。密封，氢气置换三次，反应液在氢气氛围下室温搅拌4小时后，过滤。滤液减压浓缩，得到6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.1g，黄色油状物，收率72％)。lc-ms(esi)：m/z212.1[m+h+]。步骤3：2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1)的制备于室温，在含有5ml的圆底烧瓶中加入6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(27mg,0.13mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基-2h-吲唑(1a)(45mg,0.14mmol)、碳酸铯(208mg,0.65mmol)、binap(16mg,0.030mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(23mg,0.030mmol)。密封，氮气置换三次，加热至100℃搅拌4小时。待反应液冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)：20％～100％)，得到2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(8mg，白色固体，收率：14％)。lc-ms(esi)：m/z452.1/454.1[m+h+]。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.75(dd,j＝14.8,8.1hz,3h),7.57(dd,j＝17.2,8.9hz,2h),7.48(d,j＝8.1hz,1h),7.34–7.23(m,2h),7.21(d,j＝2.9hz,1h),7.09–7.03(m,1h),4.58(s,2h),3.66(t,j＝5.8hz,2h),3.19(s,3h),3.03(t,j＝5.5hz,2h),2.45(s,3h)。实施例2：2-(2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(2)的制备步骤1：2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯的(2b)制备于室温，在含有5ml的圆底烧瓶中加入1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(根据专利文献wo2016023511中公开的方法制得)(25mg,0.13mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基-2h-吲唑(1a)(45mg,0.14mmol)、碳酸铯(170mg,0.42mmol)、binap(15mg,0.03mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(25mg,0.03mmol)。密封，氮气置换三次，加热至100℃搅拌4小时。反应液冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱剂为ea:pe＝1:5)，得到2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(40mg，黄色油状物，收率27％)。lc-ms(esi)：m/z432.4/434.5[m+h+]。步骤2：2-(2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(2)的制备在氮气保护下，将2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(40mg,0.09mmol)和2ml无水四氢呋喃加入25ml圆底烧瓶中。将反应混合物冷却至0℃后，在搅拌下缓慢滴加甲基溴化镁(0.30ml，3m乙醚溶液)。滴加完毕后，将反应液于室温继续搅拌1小时。然后，加水淬灭反应，用二氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)：40％～100％)，得到2-(2-(4-氯-3-(3-甲基-2h-吲唑-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(9mg，白色固体，收率23％)。lc-ms(esi)：m/z432.2/434.2[m+h+]。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77(d,j＝8.4hz,1h),7.59(d,j＝8.8hz,1h),7.52(d,j＝9.0hz,1h),7.33–7.18(m,4h),7.17–7.10(m,2h),7.09–7.03(m,1h),4.93(s,1h),4.43(s,2h),3.60(t,j＝5.8hz,2h),2.91(d,j＝5.7hz,2h),2.45(s,3h),1.40(s,6h)。实施例3：2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(3)的制备于室温，在含有25ml甲苯的圆底烧瓶中加入将6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1d)(30mg,0.14mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(3a)(50mg,0.16mmol)、碳酸铯(341mg,0.7mmol)、binap(18mg,0.03mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(26mg,0.03mmol)。密封，氮气置换三次，加热至100℃搅拌4小时。反应液冷却至室温后，过滤，滤液浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)：30％～100％)，得到2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(12mg，白色固体，收率：20％)。lc-ms(esi)，m/z452.1/454.1[m+h+]。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.32(d,j＝7.0hz,1h),7.73(dd,j＝14.2,6.2hz,2h),7.59(d,j＝9.0hz,1h),7.51(d,j＝8.2hz,1h),7.40(d,j＝8.8hz,1h),7.31–7.25(m,1h),7.11(dt,j＝7.1,3.0hz,2h),6.99(td,j＝6.8,1.1hz,1h),4.53(s,2h),3.62(t,j＝5.9hz,2h),3.18(s,3h),3.03(t,j＝5.7hz,2h),2.39(s,3h)。实施例4：2-(2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(4)的制备步骤1：2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(4a)的制备于室温，在含有5ml甲苯的圆底烧瓶中加入1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(2a)(50mg,0.26mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶(3a)(93mg,0.29mmol)、碳酸铯(341mg,1.04mmol)、binap(30mg,0.05mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(50mg,0.05mmol)。密封，氮气置换三次，加热至100℃搅拌4小时。反应液冷却到室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱剂为ea:pe＝1:5)，得到2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(30mg，黄色油状物，收率：27％)。lc-ms(esi)：m/z432.4/434.4[m+h+]。步骤2：2-(2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(4)的制备在氮气保护下，将2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(30mg，0.07mmol)和2ml无水四氢呋喃加入25ml圆底烧瓶中，于0℃缓慢滴加甲基溴化镁(0.35ml，3m乙醚溶液)。滴加完毕后，于室温继续搅拌2小时。然后，加水淬灭反应，用二氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)：20％～100％)，得到2-(2-(4-氯-3-(3-甲基咪唑并[1.2-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(18mg，白色固体，收率60％)。lc-ms(esi)：m/z432.2/434.2[m+h+]。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.85(d,j＝6.8hz,1h),7.60(d,j＝9.0hz,1h),7.29(d,j＝8.8hz,1h),7.22(d,j＝5.3hz,2h),7.16–7.11(m,1h),7.06(dd,j＝10.3,5.8hz,2h),6.88(dd,j＝8.9,3.1hz,1h),6.82(t,j＝6.2hz,1h),4.35(s,2h),3.51(t,j＝5.9hz,2h),2.92(t,j＝5.7hz,2h),2.38(s,3h),1.51(s,6h)。实施例5：2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-苯基)-6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(5)的制备于室温，在含有5ml甲苯的圆底烧瓶中加入6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1d)(50mg,0.24mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(5a)(60mg,0.24mmol)、碳酸铯(310mg,1.2mmol)、binap(18mg,0.050mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(26mg,0.050mmol)。密封，氮气置换三次，加热至100℃搅拌4小时。反应液冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)：30％～100％)，得到2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-苯基)-6-(甲基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(15mg，白色固体，收率14％)。lc-ms(esi)：m/z452.1/454.1[m+h+]。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.63(d,j＝7.0hz,1h),7.76(s,1h),7.74–7.70(m,1h),7.66(d,j＝8.8hz,1h),7.50(d,j＝8.2hz,1h),7.42(d,j＝8.9hz,1h),7.24–7.18(m,1h),7.14(dd,j＝9.0,3.1hz,1h),7.05(d,j＝3.1hz,1h),6.88(td,j＝6.9,1.3hz,1h),4.53(s,2h),3.62(t,j＝5.9hz,2h),3.18(s,3h),3.02(t,j＝5.8hz,2h),2.16(s,3h)。实施例6：2-(2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(6)制备步骤1：2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(6a)的制备于室温下，在含有5ml甲苯的圆底烧瓶中加入1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(6a)(21mg,0.11mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(5a)(35mg,0.12mmol)、碳酸铯(142mg,0.44mmol)、binap(14mg,0.02mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(20mg,0.02mmol)。密封，氮气置换三次，加热至100℃搅拌4小时。反应液冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱剂为ea:pe＝1:5)，得到2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(20mg，黄色油状物，收率42％)。lc-ms(esi)：m/z432.4/434.4[m+h+]。步骤2：2-(2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-苯基)-1，2，3，4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(6)的制备在氮气保护下，将2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸甲酯(20mg,0.05mmol)和2ml无水四氢呋喃加入25ml圆底烧瓶中。于0℃缓慢滴加甲基溴化镁(0.30ml，3m乙醚溶液)。滴加完毕后，于室温继续搅拌2小时。然后，加水淬灭反应，用二氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)：30％～100％)，得到2-(2-(4-氯-3-(3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6基)-2-丙醇(4mg，白色固体，收率18％)。lc-ms(esi)：m/z432.2/434.2[m+h+]。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.37(d,j＝7.1hz,1h),7.39(d,j＝8.9hz,1h),7.30(d,j＝8.8hz,1h),7.23(s,2h),7.07–6.99(m,2h),6.96(d,j＝3.1hz,1h),6.89(dd,j＝8.9,3.1hz,1h),6.67(d,j＝6.8hz,1h),4.34(s,2h),3.50(d,j＝5.9hz,2h),2.92(s,2h),2.17(s,3h),1.51～1.48(m,6h)。实施例7：2-(4-氯-2-氟-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-6-((3s,5r)-3,5-二甲基-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(7)的制备步骤1：6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(7c)的制备在含有二氯甲烷(20ml)的反应瓶中加入6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.4g，6.60mmol)和二叔丁基二碳酸酯(2.16g，9.90mmol)。于室温搅拌30分钟，然后将反应液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea/10:1)，得到6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(2.0g，无色的油状物，收率：97％)。lc-ms(esi)：m/z312.1/314.3[m+h+]。步骤2：6–((3s,5r)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(7d)的制备于室温，将6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(300mg，0.96mmol)、(2s,6r)-2,6-二甲基哌嗪(131mg，1.15mmol)、binap(119mg，0.19mmol)、叔丁醇钠(276mg，2.88mmol)、pd2(dba)3(87.9mg，0.10mmol)和甲苯(6ml)加入到反应瓶中。密封，氮气置换3次，加热至100℃反应4小时。待反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯稀释(50ml)，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为dcm:meoh/10:1)，得到6-((3s,5r)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(330mg，黄色固体，收率：99.69％)。lc-ms(esi)：m/z346.2[m+h+]。步骤3：6–((3s,5r)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的制备在含有二氯甲烷(5ml)的反应瓶中加入6-((3s,5r)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(330mg，0.95mmol)和盐酸二氧六环(0.5ml，4m)。室温搅拌30分钟后，将反应液减压浓缩，得到6-((3s,5r)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(213mg，白色固体，收率：91％)。lc-ms(esi)：m/z246.2[m+h+]。步骤4：2-(4-氯-2-氟-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-6–((3s,5r)-3,5-二甲基-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备于室温，将2-(3-溴-6-氯-2-氟苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(7a)(50mg，0.15mmol)、6-((3s,5r)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(50.5mg，0.20mmol)、binap(18.3mg，0.03mmol)、碳酸铯(143mg，0.44mmol)、pd2(dba)3(13.4mg，0.01mmol)和甲苯(4ml)加入到反应瓶中。密封，氮气置换3次，加热到100℃搅拌4小时。反应液冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)，10％～100％)，得到2-(4-氯-2-氟-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-6–((3s,5r)-3,5-二甲基-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(23.7mg，白色固体，收率：31.9％)。lc-ms(esi)：m/z504.3/506.4[m+h+]。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.70(dd,j＝21.0,8.0hz,2h),7.46(d,j＝8.9hz,1h),7.40–7.24(m,3h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),6.81(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),6.71(d,j＝2.4hz,1h),4.24(q,j＝15.1hz,2h),3.66(s,3h),3.53(dd,j＝11.6,2.7hz,2h),3.42(t,j＝5.9hz,2h),3.09–2.72(m,3h),2.16(t,j＝11.0hz,2h),1.06(d,j＝6.2hz,6h)。实施例8：(2s,6r)-4-(2-(4-氯-2-氟-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-2,6-二甲基吗啉(8)的制备步骤1：6-((2s,6r)-2,6-二甲基吗啉代)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(8a)的制备于室温，将6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(7c)(200mg，0.64mmol)、(2s,6r)-2,6-二甲基吗啉(88.5mg，0.77mmol)、binap(79.7mg，0.13mmol)、pd2(dba)3(58.6mg，0.06mmol)、叔丁醇钠(184mg，1.92mmol)和甲苯(4ml)加入到反应瓶中。密封，氮气置换3次，搅拌加热至100℃反应4小时。待反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯稀释(50ml)，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析纯化(洗脱液为pe:ea/5:1)，得到6-((2s,6r)-2,6-二甲基吗啉代)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(190mg，黄色的油状物，收率：90.4％)。lc-ms(esi)：m/z347.2[m+h+]。步骤2：(2s,6r)-2,6-二甲基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)吗啉(8b)的制备在含有二氯甲烷(4ml)的反应瓶中加入6-((2s,6r)-2,6-二甲基吗啉代)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(190mg，0.55mmol)和盐酸二氧六环(0.5ml，4m)。室温搅拌30分钟后，减压浓缩，并用乙酸乙酯(30ml)悬浮，用饱和nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea/1:1)，得到(2s,6r)-2,6-二甲基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)吗啉(130mg，黄色固体，收率：96.2％)。lc-ms(esi)：m/z247.2[m+h+]。步骤3：(2s,6r)-4-(2-(4-氯-2-氟-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-2,6-二甲基吗啉(8)的制备于室温，将2-(3-溴-6-氯-2-氟苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(7a)(30mg，0.08mmol)、(2s,6r)-2,6-二甲基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)吗啉(30mg，0.12mmol)、binap(10mg，0.02mmol)和碳酸铯(78mg，0.24mmol)、pd2(dba)3(7.3mg，0.008mmol)和甲苯(2ml)加入到反应瓶中。密封，用氮气置换3次后，加热到100℃搅拌4小时。待反应液冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)，10％～100％)，得到(2s,6r)-4-(2-(4-氯-2-氟-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-2,6-二甲基吗啉(6.8mg，黄色固体，收率：11％)。lc-ms(esi)：m/z505.4/507.3[m+h+]。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.70(dd,j＝20.6,8.0hz,2h),7.46(d,j＝8.8hz,1h),7.41–7.24(m,3h),7.04(d,j＝8.5hz,1h),6.82(dd,j＝8.4,2.5hz,1h),6.72(d,j＝2.4hz,1h),4.30–4.16(m,2h),3.66(s,3h),3.60–3.49(m,2h),3.42(t,j＝5.9hz,2h),3.33(s,2h),2.87(t,j＝6.0hz,2h),2.20(t,j＝11.1hz,2h),1.15(d,j＝6.2hz,6h)。实施例9：2-(5-氯-4-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-基)-6-((3s，5r)-3,5-二甲基-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(9)的制备在含有甲苯(4ml)的反应瓶中加入2-(2-溴-5-氯吡啶-4-基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(9a)(77mg，0.24mmol)、6-((3s，5r)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(7e)(50mg，0.20mmol)、binap(25mg，0.04mmol)、碳酸铯(195mg，0.60mmol)和pd2(dba)3(37mg，0.04mmol)。密封，氮气置换3次，加热至100℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)，1％～100％)，得到2-(5-氯-4-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-基)-6-((3s,5r)-3,5-二甲基-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(26mg，白色固体，收率：27％)。lc-ms(esi)：m/z488.2/490.2[m+h+]。1hnmr(400mhz,chcl3-d)δ8.23(s,1h),7.79(d,j＝7.0hz,1h),7.37(d,j＝7.2hz,1h),7.34–7.24(m,2h),7.00(d,j＝8.4hz,1h),6.79(s,1h),6.73(d,j＝8.3hz,1h),6.66(s,1h),4.57(s,2h),3.78(t,j＝5.9hz,2h),3.66(s,3h),3.46(d,j＝10.3hz,2h),3.16(s,2h),2.63–2.54(m,2h),1.23(d,j＝6.5hz,6h)。实施例10：(2s,6r)-4-(2-(5-氯-4-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-2,6-二甲基吗啉(10)的制备在含有甲苯(4ml)的反应瓶中加入2-(2-溴-5-氯吡啶-4-基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(9a)(65mg，0.20mmol)、(2s,6r)-2,6-二甲基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)吗啉(8b)(50mg，0.20mmol)、binap(25mg，0.04mmol)、碳酸铯(195mg，0.60mmol)和pd2(dba)3(37mg，0.04mmol)。密封，氮气置换3次，加热至100℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)，10％～100％)，得到(2s，6r)-4-(2-(5-氯-4-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-2,6-二甲基吗啉(4mg，白色固体，收率：5％)。lc-ms(esi)：m/z487.2/489.2[m+h+]。1hnmr(400mhz,chcl3-d)δ8.23(s,1h),7.78(s,1h),7.29(s,2h),6.99(s,1h),6.79(s,1h),6.65(s,1h),4.56(s,2h),3.78(s,2h),3.66(s,3h),3.35(s,2h),2.86(s,2h),2.33(s,2h),1.19(d,j＝6.2hz,6h)。实施例11：2-(2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)丙-2-醇(11)的制备步骤1：异喹啉-6-甲腈(11c)的制备于室温，将6-溴异喹啉(2g，9.61mmol)、氰化锌(2.25g，19.22mmol)、pd(pph3)4(1.2g，1.44mmol)和dmf(30ml)加入到100ml反应瓶中。密封，氮气置换三次，加热到100℃搅拌1小时。待反应液冷却至室温后，加入100(ml)乙酸乙酯稀释，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea/5:1)得到异喹啉-6-甲腈(1.0g，黄色固体，收率:67.1％)。lc-ms(esi)：m/z155.2[m+h+]。步骤2：异喹啉-6-羧酸(11d)的制备将异喹啉-6-甲腈(1g，6.49mmol)在10ml浓盐酸中加热回流4小时，待反应液冷却至室温后，用饱和nahco3溶液调节ph值到～6，产生的白色沉淀过滤收集，干燥，得到异喹啉-6-羧酸(1.2g，白色固体)。lc-ms(esi),m/z174.1[m+h+]。步骤3：甲基异喹啉-6-羧酸酯(11e)的制备在含有10ml甲醇的反应瓶中，加入异喹啉-6-羧酸(1.2g，6.92mmol)和浓硫酸(5ml)。反应液回流过夜，待冷却至室温后，用饱和的nahco3水溶液中和，二氯甲烷萃取(50mlx3)，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到甲基异喹啉-6-羧酸酯(900mg，黄色固体，收率69.4％)。lc-ms(esi),m/z188.2[m+h+]。步骤4：甲基1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸乙酯(11f)的制备在含有20ml甲醇的圆底烧瓶中加入甲基异喹啉-6-羧酸酯(900mg，4.8mmol)、乙酸(1ml)和二氧化铂(200mg，0.86mmol)。反应体系用氢气置换3次，然后加热至40℃反应4小时。待反应液冷却至室温后过滤，滤液减压浓缩。在残余物中加入100ml乙酸乙酯，再分别用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为dcm:meoh/10:1)，得到甲基1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸乙酯(800mg，黄色固体，收率：78.4％)。lc-ms(esi),m/z192.3[m+h+]。步骤5：2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸甲酯(11g)的制备于室温，向20ml圆底烧瓶中加入2-(5-溴-2-氯苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(11a)(170mg，0.53mmol)、甲基1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸乙酯(101mg，0.53mmol)、binap(65.8mg，0.11mmol)、碳酸铯(516mg，1.58mmol)、pd2(dba)3(48.3mg，0.05mmol)和甲苯(5ml)。密封，反应悬浮液用氮气置换3次，加热至100℃搅拌过夜。待反应液冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea/1:1)，得到2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸甲酯(140mg,白色固体，收率74.4％)。lc-ms(esi),(m/z)432.2[m+1]。步骤6：2-(2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)丙-2-醇的制备在氮气保护下，向20ml圆底烧瓶中加入2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸甲酯(45mg，0.10mmol)和无水thf(2ml)。待反应液冷却至0℃后，缓慢滴加甲基溴化镁(0.17ml，3m乙醚溶液)。滴加完毕后，将反应液升至室温，继续搅拌30分钟后，用饱和的氯化铵水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取(10mlx3)，合并的有机相用饱和的食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)，10％～100％)，得到2-(2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)丙-2-基醇(15mg，白色固体，收率33.3％)。lc-ms(esi)：m/z432.2/434.2[m+h+]。1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ7.70(d，j＝7.8hz，1h)，7.63(d，j＝7.9hz，1h)，7.48(d，j＝9.0hz，1h)，7.36–7.23(m，4h)，7.21(dd，j＝9.0，3.1hz，1h)，7.16–7.10(m，2h)，4.96(s，1h)，4.43(s，2h)，3.63(d，j＝17.2hz，5h)，2.92(t，j＝5.9hz，2h)，1.41(s，6h)。实施例12：2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-6-(环戊氧基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(12)的制备步骤1：6-羟基-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(12b)的制备在含有甲醇(3ml)的反应瓶中加入1,2,3,4-四氢异喹啉-6-醇(200mg，1.34mmol)、三乙胺(339mg，3.35mmol)和boc酸酐(467mg，2.14mmol)，于室温搅拌过夜。反应完毕后，将反应液减压浓缩，残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝5:1)，得到白色固体6-羟基-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(220mg，白色固体，收率：66％)。lc-ms(esi)，m/z250.7[m+h+]。步骤2：6-(环戊氧基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(12c)的制备在含有dmf(15ml)的反应瓶中加入6-羟基-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(220mg，0.88mmol)、溴代环戊烷(145mg，0.97mmol)和碳酸钾(120mg，0.88mmol)。将反应混合物于100℃搅拌100小时。待反应混合液冷却至室温后，加入乙酸乙酯(10ml)稀释，用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝5:1)，得到白色固体6-(环戊氧基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(60mg，白色固体，收率：21％)。lc-ms(esi)，m/z318.6[m+h+]。步骤3：6-(环戊基氧基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(12d)的制备在含有二氯甲烷(2ml)的反应瓶中加入6-(环戊氧基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁酯(60mg，0.188mmol)，滴加盐酸二氧六环溶液(2ml，4m)，于室温搅拌0.5小时。然后，将反应液减压浓缩，得到粗产品6-(环戊基氧基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐，其未经纯化而直接用于下一步反应。lc-ms(esi)，m/z218.6[m+h+]。步骤4：2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-6-(环戊氧基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(12)的制备在含有甲苯(6ml)的反应瓶中加入6-(环戊基氧基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(60mg，0.28mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(11a)(74mg，0.23mmol)、binap(29mg，0.046mmol)、碳酸铯(224mg，0.69mmol)和pd2(dba)3(42mg，0.046mmol)。密封，氮气置换3次，加热至100℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)，20％～100％)，得到2-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)-6-(环戊氧基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(8mg，白色固体，收率：7.4％)。lc-ms(esi)：m/z458.3/460.3[m+h+]。1hnmr(400mhz,chcl3-d)δ7.88(d,j＝7.3hz,1h),7.40(dd,j＝18.8,9.7hz,5h),7.12(s,1h),7.05(d,j＝7.9hz,2h),6.76(s,1h),6.70(s,1h),4.76(s,1h),4.39(s,2h),3.73(s,3h),3.58(t,j＝5.8hz,2h),2.96(s,2h),1.89–1.51(m,8h)。实施例13：n-(5-(4-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)哌嗪-1-基)嘧啶-2-基)新戊酰胺(13)的制备步骤1：(z)-3-((二甲基氨基)亚甲基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(13b)的制备在含有n,n-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(40ml)的反应瓶中加入4-叔丁氧羰基哌啶酮(4.0g，20.0mmol)，加热至90℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后，加入乙酸乙酯(50ml)稀释，用水和饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品(z)-3-((二甲基氨基)亚甲基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(6.1g，黄色固体)。lc-ms(esi)，m/z255.8[m+h+]。步骤2：2-氨基-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5h)-羧酸叔丁酯(13c)的制备于室温，在含有乙醇(20ml)的反应瓶中加入盐酸胍(1.92g，20.1mmol)、乙醇钠(1.37g，20.1mmol)。于室温搅拌0.5小时后，加入(z)-3-((二甲基氨基)亚甲基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.1g，12.2mmol)，加毕加热至回流过夜。待反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50ml)稀释，用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝1:2)，得到2-氨基-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5h)-羧酸叔丁酯(750mg，橙色液体，收率：25％)。lc-ms(esi)，m/z251.4[m+h+]。步骤3：2-新戊酰氨基-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5h)-羧酸叔丁酯(13d)的制备在含有二氯甲烷(4ml)的反应瓶中加入2-氨基-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5h)-羧酸叔丁酯(200mg，0.80mmol)和三乙胺(162mg，0.96mmol)，冷却至0℃，缓慢滴加新戊酰氯(116mg，0.96mmol)。加毕升至室温，继续搅拌过夜。待反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物通过硅胶柱层析色谱法纯化(洗脱液为pe:ea＝2:1)，得到2-新戊酰氨基-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5h)-羧酸叔丁酯(200mg，无色液体，收率：75％)。lc-ms(esi)，m/z335.6[m+h+]。步骤4：n-(5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)新戊酰胺盐酸盐(13e)的制备在含有二氯甲烷(2ml)的反应瓶中加入2-新戊酰氨基-7,8-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-6(5h)-羧酸叔丁酯(200mg，0.595mmol)，滴加盐酸二氧六环溶液(2ml)，于室温搅拌0.5小时后，将反应液减压浓缩，得到粗产品n-(5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)新戊酰胺盐酸盐(200mg，白色固体)。其未经纯化直接用于下一步反应。lc-ms(esi)：m/z235.9[m+h+]。步骤5：n-(5-(4-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)哌嗪-1-基)嘧啶-2-基)新戊酰胺(13)的制备在含有甲苯(4ml)的反应瓶中加入n-(5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)新戊酰胺(50mg，0.213mmol)、2-(5-溴-2-氯苯基)-1-甲基-1h-苯并[d]咪唑(11a)(54mg，0.178mmol)、binap(22mg，0.036mmol)、碳酸铯(174mg，0.534mmol)和pd2(dba)3(33mg，0.036mmol)。密封，氮气置换3次，加热至100℃搅拌过夜。待反应混合物冷却至室温后，过滤，滤液减压浓缩。残余物通过制备hplc纯化(c18，乙腈/水(0.1％甲酸)，20％～100％)，得到n-(5-(4-(4-氯-3-(1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)哌嗪-1-基)嘧啶-2-基)新戊酰胺(8mg，白色固体，收率：10％)。lc-ms(esi)：m/z475.2/477.3[m+h+]。1hnmr(400mhz,chcl3-d)δ8.34(s,1h),7.99(s,1h),7.78(s,1h),7.35(d,j＝8.8hz,2h),7.29(s,2h),7.11(s,1h),7.02(s,1h),4.32(s,2h),3.62(d,j＝18.1hz,5h),3.00(s,2h),1.26(s,9h)。生物学评价测试例1本发明化合物体外细胞hedgehog信号通路(smo)抑制活性测试实验使用转录因子gli生物荧光素酶报告基因系统(luciferasereportassaysystem)检测smo被抑制后gli基因的转录调控和表达，用以检测、评估化合物对gli基因转录调控的激动或抑制作用。本实验以化合物的ic50值为指标评价化合物对hedgehog信号通路(smo)抑制作用。1.1试验材料及仪器1.2细胞株shh-light2(上海辉源生物)，成纤维细胞株shh-light2是基于小鼠成纤维细胞nih3t3分化改造形成。通过在nih3t3细胞上稳定构建gli相关萤火虫荧光素酶(gli-dependentfireflyluciferase)和内参海肾荧光素酶(renillaluciferase)，shh-light2细胞株拥有双生物荧光素报告基因系统，是理想的药物筛选细胞平台。1.3试验试剂1.4细胞培养液生长培养液：dmem：invitrogen,cat#3105303610％fbs：invitrogen,cat#10099-1411％penstrep：invitrogen,cat#15140-1221％丙酮酸钠：invitrogen,cat#113600701％glutamax：invitrogen,cat#35050061完全培养液dmem：invitrogen,cat#3105303610％fbs：invitrogen,cat#10099-1411％penstrep：invitrogen,cat#15140-1221％丙酮酸钠：invitrogen,cat#113600701％glutamax：invitrogen,cat#350500610.4mg/mlg418：gibco,cat#10131-0270.15mg/ml抗霉素：invitrogen,cat#r250051.5细胞培养方案a)细胞复苏1)将shh-light2细胞冻存管从液氮罐中取出并放置于37℃水浴锅中，持续晃动细胞冻存管直至细胞化冻，整个化冻流程控制在30秒至1分钟内完成；2)准备一支15ml离心管，加入10ml预热的生长培养液中(不含筛选抗生素g418和抗霉素)，将细胞从冻存管中转移至该离心管中，随后以1000rpm离心5分钟；3)移除上清液，在离心管中加入10ml预热的生长培养液，混匀后将细胞转移至10cm培养皿中，放置于37℃和5％co2的培养箱中培养；4)24小时培养后，移除生长培养液，加入10ml完全培养液(含有筛选抗生素g418和抗霉素)，放置于37℃和5％co2的培养箱中培养。b)细胞传代1)每日观察细胞，当10cm培养皿85％的面积长满细胞后，进行细胞传代；2)移除培养液，使用pbs清洗细胞表面，移除pbs；使用1ml0.25％胰蛋白酶-edta消化细胞1-3分钟后，加入2ml培养液终止消化；使用移液枪轻柔吹打细胞直至细胞从培养皿表面脱落；3)根据1:3的比例将1ml细胞悬液转移至新的培养皿中，加入9ml完全培养液，混匀培养皿，放置于37℃和5％co2的培养箱中培养。c)细胞冻存1)多余的细胞培养皿可进行细胞冻存以备后用；消化细胞并进行细胞计数，将细胞收集在15ml离心管中，以1000rpm离心5分钟，离心同时，准备细胞冻存液(90％fbs+10％dmso)；2)移除上清液，加入细胞冻存液，使细胞浓度维持在2×106细胞/ml，重悬细胞，取出1ml细胞液置于细胞冻存管；3)将细胞冻存管置于细胞冻存盒中，放置于-80℃冰箱过夜，第二天转移至液氮罐中(-196℃)长期贮存。1.6荧光素酶报告基因系统检测活性步骤步骤1：准备细胞培养板a)配制细胞培养液生长培养液：dmem：invitrogen，cat#3105303610％fbs：invitrogen，cat#10099-1411％penstrep：invitrogen，cat#15140-1221％丙酮酸钠：invitrogen，cat#113600701％glutamax：invitrogen，cat#35050061检测培养液：dmem：invitrogen，cat#310530362％fbs：invitrogen，cat#10099-1411％penstrep：invitrogen，cat#15140-1221％丙酮酸钠：invitrogen，cat#113600701％glutamax：invitrogen，cat#35050061b)种植细胞1)消化细胞并进行细胞计数；2)使用生长培养液调整细胞密度至3.2*105细胞/ml，将细胞种植至384孔细胞培养板(corning#3570)，每孔：8k细胞/25μl；3)细胞培养板放置于37℃和5％co2的培养箱中培养，至80％密度。步骤2：准备待测化合物，分别进行激动剂模式和抑制剂模式的检测a)激动剂模式样品准备1)待测化合物和2,6,9-三元取代嘌呤溶解于分析研究用dmso中并储存于-20℃；2)取出待测化合物和2,6,9-三元取代嘌呤，完全解冻；3)准备待测化合物浓度(起始浓度100μm，根据3倍比例稀释浓度9次，一共10个待测浓度)；4)准备2,6,9-三元取代嘌呤作为阳性对照药(起始浓度10μm，根据3倍比例稀释浓度9次，一共10个待测浓度)；5)配制试验全阳性参考组(hpe)和试验全阴性参考组(zpe)；hpe的配制方法：4μm2,6,9-三元取代嘌呤；zpe的配制方法：0.5％的分析研究用dmso。6)所有待测化合物、2,6,9-三元取代嘌呤、hpe、zpe按每孔35μl配制，铺于384孔板(药物板)上(corning#3656)。b)激动剂模式下添加样品至细胞培养板上1)将细胞培养板从培养箱中取出；2)将细培养板中的细胞液手动甩去，动作轻柔；3)将细胞培养板倒置于离心机低速(200rpm)离心30秒彻底去除培养液；4)使用bravo仪器从药物板上精确转移25μl样品至细胞培养板中；5)将细胞培养板放置于37℃和5％co2的培养箱中培养28小时，等待荧光素酶报告基因测试。c)抑制剂模式样品准备1)将待测化合物、gdc-0449、gant61、和2,6,9-三元取代嘌呤溶解于分析研究用dmso中并储存于-20℃；2)取出待测化合物、gdc-0449、gant61、2,6,9-三元取代嘌呤，充分解冻；3)准备待测化合物浓度(起始浓度1μm，根据3倍比例稀释浓度9次，一共10个待测浓度)；4)准备gdc-0449、gant61作为阳性对照药(gdc-0449起始浓度1μm，根据3倍比例稀释浓度9次，一共10个待测浓度；gant61起始浓度100μm，根据3倍比例稀释浓度9次，一共10个待测浓度)；5)配制试验全阳性参考组(hpe)和试验全阴性参考组(zpe)；hpe的配制方法：100μmgant61；zpe的配制方法：0.5％的分析研究用dmso。6)所有待测化合物、gdc-0449、gant61、hpe、zpe按每孔35μl配制，铺在384孔板(抑制剂药物板)上(corning#3656)；7)准备2,6,9-三元取代嘌呤作为激动剂(浓度9μm)；8)2,6,9-三元取代嘌呤按每孔20μl配制，铺在384孔板(激动剂药物板)上(corning#3656)。d)抑制剂模式下添加样品至细胞培养板上1)将细胞培养板从培养箱中取出；2)将细培养板中的细胞液手动甩去，动作轻柔；3)将细胞培养板倒置于离心机低速(200rpm)离心30秒彻底去除培养液；4)使用bravo仪器从抑制剂药物板上精确转移25μl待测化合物、gdc-0449、gant61、hpe、zpe至细胞培养板中；5)细胞培养板放置于37℃和5％co2的培养箱中培养30分钟；6)将细胞培养板从培养箱中取出，使用bravo仪器从激动剂药物板上精确转移5μl2,6,9-三元取代嘌呤至细胞培养板中(此时2,6,9-三元取代嘌呤终浓度1.5μm)；7)细胞培养板放置于37℃和5％co2的培养箱中培养28小时，等待荧光素酶报告基因测试。步骤3：荧光素酶报告基因测试1)将dual-glo荧光素酶试剂(promega)在室温解冻并按照说明书配制；2)取出细胞培养板放置于室温30分钟；3)使用multidropcombi仪器添加25μldual-glo荧光素酶试剂于细胞培养板中，低速离心(1000rpm)1分钟；使用bravo仪器混匀细胞板上每孔的液体；4)于室温下静置30分钟，使用viewlux检测萤火虫荧光素酶数值；5)于室温下配制dual-glostop&glo试剂(promega)，使用multidropcombi仪器添加25μldual-glostop&glo试剂于细胞培养板中，低速离心(1000rpm)1分钟；使用bravo仪器混匀细胞培养板上每孔的液体；6)于室温下静置30分钟，使用viewlux检测海肾荧光素梅数值；7)使用matlab4对检测数值结果进行运算与分析，获得本发明化合物的ic50(nm)值。结果如下表1所示。表1本发明化合物体外细胞hedgehog信号通路(smo)抑制活性ic50值实施例ic50(nm)实施例114.1实施例223.8实施例35.5实施例46.0实施例526.2实施例627.2实施例726.6实施例814.2实施例931.7实施例1041.7实施例115.0实施例1210.3实施例136.1gdc-044954.7gant614160.0由上表1可知，本发明化合物能够有效地抑制细胞hedgehog信号通路中转录因子gli的调控和表达。与阳性对照药物gdc-0449、gant61相比，展现出更强的抑制能力。当前第1页12