本发明属于药物化学领域，具体涉及一类新型7-取代氨基-4-甲基香豆素衍生物及它们的制备方法和作为aldh1a1抑制剂在降血糖等方面的医药用途。
背景技术
人体会从外部环境和体内生物分子代谢中接触多种醛类化合物。醛类化合物在人体中以足够多的量存在时会导致细胞毒性和癌变。作为众多酶系统中的一种，醛脱氢酶(aldhs)在体内用来缓解醛压。人类基因组编码了19种醛脱氢酶(aldhs)，这些酶可以把醛代谢为相应的羧酸及其衍生物。
aldhs在体内生物活性和代谢路径的变化与一系列疾病的发生发展有关；特别是最近研究中发现aldh1a1生物活性的改变与糖尿病、炎症、帕金森病和癌症等有关。
aldh1a1共有五种同工酶，分别是：aldh1a1(视黄醛脱氢酶1，raldh1)、aldh1a2、aldh1a3、aldh2和aldh1b1，其中aldh1a1、aldh1a2和aldh1a3是胞质蛋白，aldh2和aldh1b1是线粒体酶。aldh1a1是一个高度保守的胞质同型四聚体(约55kda单体)，它与aldh1a2、aldh1a3有超过70％的序列相同性，与线粒体酶aldh2、aldh1b1有近70％的序列相同性。
aldh1a1同工酶有相同的基础催化机制：nad(p)+通过多个结合位点与酶结合，接着半胱氨酸(aldh2中的cys302)被催化激活并对底物醛的羰基碳进行亲核进攻形成四面中间体。当nad(p)+处于重要的结合位点时，醛上的氢负离子会转移到nad(p)的烟酰胺环上形成nad(p)h。然后该底物与酶形成的复合物构像改变，nad(p)h离开，暴露出催化反应位点让水分子进攻。水分子通过谷氨酸残基(aldh2中的glu268)去除质子并对酰基和酶中间体的羰基碳进行亲核进攻，最后碳硫键被破坏，重新生成游离酶并得到最终的羧酸产物。
由于aldh1a1同工酶序列上相同性较高，并且具有相似的催化机制，使得设计aldh1a1选择性抑制剂较为困难；但是根据底物结合通道上氨基酸残基的不同，aldh1a1的同工酶逐步形成了不同的醛结合位点，这些差异将有助于选择性aldh1a1抑制剂的发现。
目前市售的抑制剂并不能区分aldh1a1和其它高度相似的aldh同工酶。例如，双硫仑(商业名：antabuse)是一种aldh1a1和aldh2抑制剂，可以用来治疗酒精中毒和可卡因成瘾症。二乙基氨基苯甲醛(deab)在aldefluor测定中，对至少三种aldh1a1同工酶有有效抑制作用。因此寻找新结构类型的、成药性好的aldh1a1小分子抑制剂，为aldhs的研究提供认知以及治疗相关疾病等具有重要意义。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一类结构新颖的且具有aldh1a1抑制作用的7-取代氨基-4-甲基香豆素衍生物及其可药用盐。
本发明的另一个目的是提供一种上述7-取代氨基-4-甲基香豆素衍生物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供一种上述7-取代氨基-4-甲基香豆素衍生物在治疗糖尿病方面的应用。
本发明公开了通式i的7-取代氨基-4-甲基香豆素衍生物：
其中r1为非取代或取代的c1-c5碳的直链或支链烷烃、非取代或取代的c3-c6碳的环烷基、非取代或取代的烯丙基、苄基及烷基取代的苄基；r2为(c1-c4)直链或支链烷基、(c3-c6)环烷基、(c1-c4)烷氧基、芳基或杂芳基，其中所述的芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自1-4碳的烷基、1-4碳的烷氧基、氟、氯、溴、碘、羟基、氰基或硝基的取代基所取代；n为1、2、3、4、5或6。
本发明的式i化合物优选r1为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、正戊基、异戊基、异戊烯基、苄基、邻甲基苄基、间甲基苄基、对甲基苄基；优选r2为(c1-c4)直链烷基、(c3-c6)环烷基、(c1-c4)烷氧基、芳基或杂芳基，其中所述的芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自1-3碳的烷基、1-3碳的烷氧基、氟、氯、溴、氰基或硝基的取代基所取代；优选n为1、2、3或4。
本发明的式i化合物更优选r1为氢、甲基、乙基、异丙基、异戊基、异戊烯基、苄基、邻甲基苄基；更优选r2为(c3-c6)环烷基、(c1-c4)烷氧基、芳基或杂芳基，其中所述的芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自1-3碳的烷基、1-3碳的烷氧基、氟、氰基或硝基的取代基所取代；更优选n为1或2。
本发明的式i化合物可与药学上可接受的酸形成酸加成盐，所述酸包括：氯化氢、溴化氢、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸。
本发明优选的式(i)化合物如下：
本发明的另一个目的是提供如式i所示香豆素类衍生物的制备方法，如下反应式：
具体包括以下步骤：
(1)化合物1与碘代烷烃、3，3-二甲基烯丙基溴或各种取代溴苄在碱性条件下得到化合物2；
(2)化合物2与氯乙酰氯或氯丙酰氯在碱性条件下得到化合物3；
(3)化合物3与n-boc哌嗪在碱性条件下反应得到化合物4；
(4)化合物4先在三氟乙酸存在下脱出boc保护基，然后再与各种羧酸在hatu存在下发生缩合反应得到化合物5。
本发明中通式i的部分化合物的药理学实验及结果如下：
实验方法：
将20μl混合物(含5μl浓度为100μm待筛选化合物和15μl超纯水)加入到10μlaldh1a1重组酶(25μg/ml)中于25℃避光预温孵10min，结束后加入20μl底物混合物(4μl1mtrisph＝8.5；2μl2.5mkcl；2μl25mmβ-nad；2μl250mm丙醛；2μl50mmdtt和8μl超纯水)启动反应，温孵反应时间为2min(25℃避光)，温孵反应结束后加入100μl碱化冰乙腈终止反应。以反应体系中生成的nadh量表征酶促反应的程度。
实验操作过程将待测化合物平行测定三次，与不加待测物的正常组比较体系中nadh量来算出待测化合物对aldh1a1的抑制率。
表1部分化合物对aldh1a1的抑制率：
受试化合物i-10在整体动物水平降血糖作用的药理实验研究方法
雄性清洁级sd小鼠，体重20±5g，实验期间环境温度22-24℃，湿度52％-58％，采用高脂饲料喂饲1个月，测定禁食5h血糖，血糖≥8mmol/l者视为高血糖模型成功动物。选高血糖模型成功动物30只，按血糖水平随机分为1个模型对照组和2个模型给药组，模型对照组和给药组动物继续给予高脂饲料喂养。各给药组分别灌胃给予受试化合物i-10(5、10mg/kg)，正常小鼠和模型对照小鼠给药空白溶媒，每天给药1次，30天后，于最后一次给药6h后测空腹血糖值，比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。血糖下降百分率＝(给药实验前血糖值-给药试验后血糖值)/给药实验前血糖值×100％。
表2受试化合物i-10对高血糖模型小鼠空腹血糖的影响
表2中数据是10只小鼠空腹血糖的平均值±标准差，用one-wayanova进行方差分析，从表中可以看出受试化合物i-10能显著降低高血糖小鼠空腹血糖，显著提高给药前后血糖下降百分率(p＜0.01)。
具体实施方式
下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好的阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。
实施例1
4-甲基-7-乙基氨基-2h-苯并吡喃-2-酮的制备
将7-氨基-4-甲基香豆素(5.00g，28.54mmol)与碳酸钾(5.92g，42.81mmol)加入250ml茄型瓶中，然后加入50mldmf作溶剂置于室温下搅拌，再加入碘乙烷(4.90g，31.40mmol)搅拌5min后，加热至60℃反应10h，待反应液冷却后倒入分液漏斗加入500ml水稀释，用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得黄色固体产物3.55g，收率61.21％。mp134-136℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.31(d，j＝8.6hz，1h)，6.51-6.38(m，2h)，5.93(s，1h)，4.22(s，1h)，3.24-3.11(q，j＝7.6hz，2h)，2.31(s，3h)，1.26(t，j＝7.2hz，3h).ms(esi)m/z：204.09[m+h]+。
实施例2
4-(2-(乙基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-1)的制备
将7-(乙基氨基)-4-甲基-2h-苯并吡喃-2-酮(0.50g，2.46mmol)加入100ml茄型瓶用20ml二氯甲烷溶解，加入三乙胺(0.50g，4.92mmol)置于0℃搅拌，缓慢加入氯乙酰氯(0.42g，3.69mmol)加完后在0℃下继续反应2h，用二氯甲烷稀释反应液，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)、3n稀盐酸(30ml)、饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得油状液体中间体0.55g，直接用于投下一步，将中间体与n-boc哌嗪(0.55g，2.95mmol)、碳酸钾(0.54，3.93mmol)和碘化钾(0.03g，0.20mmol)一起加入100ml茄型瓶用20ml乙腈作溶剂，置于室温下搅拌5min，然后加热60℃反应5h，待反应液冷却后，用100ml水稀释，乙酸乙酯(30ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得黄色固体产物0.67g，收率63.76％。mp90-92℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.65(d，j＝8.3hz，1h)，7.20-7.10(m，2h)，6.33(s，1h)，3.78(q，j＝7.0hz，2h)，3.37(t，j＝7.6hz，4h)，2.95(s，2h)，2.46(s，3h)，2.37(t，j＝6.8hz，4h)，1.42(s，9h)，1.13(t，j＝7.1hz，3h).ms(esi)m/z：430.22[m+h]+。
实施例3
n-乙基-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-2-(4-(呋喃-2-甲酰基)哌嗪-1-基)乙酰胺(i-2)的制备
将4-(2-(乙基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-1)(100.00mg，0.23mmol)加入到50ml茄型瓶用10ml二氯甲烷溶解，置于室温下搅拌，在搅拌状态下加入(132.73mg，1.16mmol)三氟乙酸继续反应1h，然后减压蒸除溶剂，得到脱除boe保护的三氟乙酸盐，直接用来投下步反应，向上步瓶中加入hatu(132.80mg，0.35mmol)、2-呋喃甲酸(26.10mg，0.23mmol)和10mldmf置于室温下搅拌，在搅动下加入三乙胺(70.68mg，0.70mmol)继续反应3h，将反应液倒入分液漏斗加入100ml水稀释，用乙酸乙酯(20ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得白色固体产物50.18mg，收率50.89％。mp71-73℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.69(d，j＝8.2hz，1h)，7.48(s，1h)，7.25-7.13(m，2h)，6.98(s，1h)，6.48(s，1h)，6.37(s，1h)，3.81(m，j＝6.3hz，6h)，3.02(s，2h)，2.53(t，j＝6.7hz，4h)，2.49(s，3h)，1.16(t，j＝6.9hz，3h).ms(esi)m/z：424.17[m+h]+。
实施例4
4-(3-(乙基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-3-氧代丙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-3)的制备
将7-(乙基氨基)-4-甲基-2h-苯并吡喃-2-酮(0.70g，3，44mmol)加入100ml茄型瓶用30ml二氯甲烷溶解，加入三乙胺(0.70g，6.89mmol)置于0℃搅拌，缓慢加入氯丙酰氯(0.66g，5.17mmol)加完后在0℃下继续反应2h，用二氯甲烷稀释反应液，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)、3n稀盐酸(30ml)、饱和食盐水(40ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得油状液体中间体0.82g，直接用于投下一步，将中间体与n-boc哌嗪(0.78g，4.19mmol)、碳酸钾(0.77，5.58mmol)和碘化钾(0.05g，0.28mmol)一起加入100ml茄型瓶用30ml乙腈作溶剂，置于室温下搅拌5min，然后加热回流反应12h，待反应液冷却后，用100ml水稀释，乙酸乙酯(40ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得黄色固体产物0.97g，收率63.44％。mp96-98℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.77(d，j＝8.4hz，1h)，7.28(d，j＝3.1hz，2h)，6.36(s，1h)，3.86-3.77(m，2h)，3.72(t，j＝7.6hz，4h)，3.29(t，j＝7.3hz，2h)，3.03(t，j＝7.6hz，4h)，2.69(t，j＝7.1hz，2h)，2.50(s，3h)，1.46(s，9h)，1.16(t，j＝6.8hz，3h).ms(esi)m/z：444.24[m+h]+。
实施例5
n-乙基-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(呋喃-2-甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-4)的制备
将4-(3-(乙基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-3-氧代丙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-3)(200.00mg，0.45mmol)加入到50ml茄型瓶用15ml二氯甲烷溶解，置于室温下搅拌，在搅拌状态下加入(257.07mg，2.25mmol)三氟乙酸继续反应1h，然后减压蒸除溶剂，得到脱除boc保护的三氟乙酸盐，直接用来投下步反应，向上步瓶中加入hatu(257.18mg，0.68mmol)、2-呋喃甲酸(50.54mg，0.45mmol)和15mldmf置于室温下搅拌，在搅动下加入三乙胺(182.52mg，1.80mmol)继续反应3h，将反应液倒入分液漏斗加入150ml水稀释，用乙酸乙酯(30ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得白色固体产物120.52mg，收率61.09％。mp81-83℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.69(d，j＝8.2hz，1h)，7.48(s，1h)，7.20-7.13(m，2h)，6.99(d，j＝2.8hz，1h)，6.51-6.46(m，1h)，6.37(s，1h)，3.81(dd，j＝14.3，7.1hz，6h)，2.77(t，j＝7.3hz，2h)，2.50(s，3h)，2.44(t，j＝4.5hz，4h)，2.32(t，j＝7.6hz2h)，1.15(t，j＝7.1hz，3h).ms(esi)m/z：438.19[m+h]+。
实施例6
4-甲基-7-(3-甲基丁-2-烯-1-基氨基)-2h-吡喃-2-酮的制备
将7-氨基-4-甲基香豆素(4.00g，22.83mmol)与碳酸钾(4.73g，34.25mmol)加入250ml茄型瓶中，然后加入50mldmf作溶剂置于室温下搅拌，再加入3，3-二甲基烯丙基溴(3.74g，25.12mmol)室温反应6h，将反应液倒入分液漏斗加入500ml水稀释，用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得黄色固体3.17g，收率57.01％。mp134-136℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.35(d，j＝8.6hz，1h)，6.50(d，j＝8.7hz，1h)，6.43(s，1h)，5.97(s，1h)，5.29(s，1h)，4.21(s，1h)，3.73(s，2h)，2.34(s，3h)，1.76(s，3h)，1.73(s，3h).ms(esi)m/z：244.13[m+h]+。
实施例7
4-(2-(3-甲基丁-2-烯-1-基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-5)的制备
将4-甲基-7-(3-甲基丁-2-烯-1-基氨基)-2h-吡喃-2-酮(1.00g，4.11mmol)加入到100ml茄型瓶中用25ml二氯甲烷溶解，加入三乙胺(0.83g，8.22mmol)置于0℃搅拌，缓慢加入氯乙酰氯(0.70g，6.17mmol)加完后在0℃下继续反应2h，用二氯甲烷稀释反应液，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)、3n稀盐酸(50ml)、饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得油状液体中间体1.05g，直接用于投下一步，将中间体与n-boc哌嗪(0.92g，4.93mmol)、碳酸钾(0.91，6.57mmol)和碘化钾(0.05g，0.33mmol)一起加入100ml茄型瓶用30ml乙腈作溶剂，置于室温下搅拌5min，然后加热60℃反应5h，待反应液冷却后，用150ml水稀释，乙酸乙酯(40ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得黄色固体产物1.08g，收率55.86％。mp93-95℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.62(d，j＝8.3hz，1h)，7.16dd，j＝10.4，5.0hz，2h)，6.33(s，1h)，5.22(t，j＝7.0hz，1h)，4.33(d，j＝7.0hz，2h)，3.43-3.36(t，j＝7.6hz，4h)，2.99(s，2h)，2.47(s，3h)，2.44-2.37(t，j＝6.4hz4h)，1.68(s，3h)，1.49(s，3h)，1.44(s，9h).ms(esi)m/z：470.26[m+h]+。
实施例8
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-2-(4-(呋喃-2-甲酰基)哌嗪-1-基)乙酰胺(i-6)的制备
将4-(2-(3-甲基丁-2-烯-1-基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-5)(150.00mg，0.32mmol)加入到50ml茄型瓶用10ml二氯甲烷溶解，置于室温下搅拌，在搅拌状态下加入(182.1lmg，1.60mmol)三氟乙酸继续反应lh，然后减压蒸除溶剂，得到脱除boc保护的三氟乙酸盐，直接用来投下步反应，向上步瓶中加入hatu(182.19mg，0.48mmol)、2-呋喃甲酸(35.80mg，0.32mmol)和10mldmf置于室温下搅拌，在搅动下加入三乙胺(129.30mg，1.28mmol)继续反应3h，将反应液倒入分液漏斗加入100ml水稀释，用乙酸乙酯(30ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得白色固体产物90.35mg，收率61.02％。mp74-76℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.68(t，j＝7.2hz，1h)，7.47(s，1h)，7.17(d，j＝8.8hz，2h)，6.96(d，j＝2.9hz，1h)，6.47(d，j＝1.4hz，1h)，6.35(s，1h)，5.23(t，j＝6.5hz，1h)，4.35(d，j＝6.9hz，2h)，3.80(t，j＝7.6hz，4h)，3.03(s，2h)，2.54(t，j＝6.3hz，4h)，2.49(s，3h)，1.69(s，3h)，1.49(s，3h).ms(esi)m/z：464.22[m+h]+。
实施例9
4-(3-(3-甲基丁-2-烯-1-基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-3-氧代丙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-7)的制备
将4-甲基-7-(3-甲基丁-2-烯-1-基氨基)-2h-吡喃-2-酮(1.50g，6.17mmol)加入到100ml茄型瓶中用30ml二氯甲烷溶解，加入三乙胺(1.25g，12.33mmol)置于0℃搅拌，缓慢加入氯丙酰氯(0.70g，6.17mmol)加完后在0℃下继续反应2h，用二氯甲烷稀释反应液，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)、3n稀盐酸(50ml)、饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得油状液体中间体1.75g，直接用于投下一步，将中间体与n-boc哌嗪(1.46g，7.86mmol)、碳酸钾(1.45，10.48mmol)和碘化钾(0.09g，0.52mmol)一起加入100ml茄型瓶用30ml乙腈作溶剂，置于室温下搅拌5min，然后加热回流反应12h，待反应液冷却后，用150ml水稀释，乙酸乙酯(40ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得黄色固体产物1.72g，收率57.75％。mp104-106℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.70(d，j＝8.4hz，1h)，7.32-7.20(m，2h)，6.32(d，j＝9.5hz，1h)，5.21(t，j＝6.8hz，1h)，4.32(d，j＝7.1hz，2h)，3.76(t，j＝7.6hz，4h)，3.22(t，j＝6.5hz，2h)，2.93(t，j＝2.3hz，4h)，2.76(t，j＝2.7hz，2h)，2.47(s，3h)，1.69(s，3h)，1.49(s，3h)，1.45(s，9h).ms(esi)m/z：484.28[m+h]+。
实施例10
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(3-甲基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-8)的制备
将4-(3-(3-甲基丁-2-烯-1-基(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基)-3-氧代丙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(i-7)(120.00mg，0.25mmol)加入到50ml茄型瓶用10ml二氯甲烷溶解，置于室温下搅拌，在搅拌状态下加入(141.47mg，1.24mmol)三氟乙酸继续反应1h，然后减压蒸除溶剂，得到脱除boc保护的三氟乙酸盐，直接用来投下步反应，向上步瓶中加入hatu(141.53mg，0.37mmol)、3-甲基苯甲酸(33.78mg，0.25mmol)和10mldmf置于室温下搅拌，在搅动下加入三乙胺(100.44mg，0.99mmol)继续反应3h，将反应液倒入分液漏斗加入100ml水稀释，用乙酸乙酯(30ml×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化得白色固体产物77.38mg，收率62.17％。mp82-84℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.72-7.58(m，1h)，7.32-7.09(m，6h)，6.34(s，1h)，5.22(s，1h)，4.33(d，j＝6.2hz，2h)，3.72(t，j＝7.6hz，2h)，3.39(t，j＝6.8hz，2h)，2.73(d，j＝6.7hz，2h)，2.47(s，3h)，2.36(t，j＝2.4hz，4h)，2.33-2.25(t，j＝7.3hz，2h)，1.68(s，3h)，1.49(s，3h).ms(esi)m/z：502.26[m+h]+。
实施例11
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(4-甲基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-9)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、4-甲基苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-9，投入i-7100mg，得到白色固体63mg，收率60.73％。mp94-97℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.56(d，j＝8.2hz，1h)，7.22(s，1h)，7.16-7.01(m，5h)，6.27(s，1h)，5.15(s，1h)，4.26(d，j＝6.9hz，2h)，3.61(t，j＝7.6hz，2h)，3.38(t，j＝6.4hz2h)，2.67(t，j＝7.1hz，2h)，2.40(s，3h)，2.30(t，j＝2.8hz，4h)，2.25(t，j＝2.3hz，2h)，1.62(s，3h)，1.43(s，3h).ms(esi)m/z：502.27[m+h]+。
实施例12
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(4-异丙基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-10)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、4-异丙基苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-10，投入i-7150mg，得到白色固体94mg，收率57.22％。mp105-108℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.56(d，j＝8.2hz，1h)，7.22(d，j＝7.6hz，2h)，7.16(d，j＝7.9hz，2h)，7.05(d，j＝12.3hz，2h)，6.26(s，1h)，5.14(s，1h)，4.25(d，j＝6.8hz，2h)，3.60(t，j＝7.6hz，2h)，3.36(t，j＝7.1hz，2h)，2.90-2.78(m，1h)，2.66(t，j＝7.0hz，2h)，2.39(s，3h)，2.29(t，j＝6.7hz，4h)，2.23(t，j＝2.8hz，2h)，1.60(s，3h)，1.41(s，3h)，1.18(s，3h)，1.15(s，3h).ms(esi)m/z：530.28[m+h]+。
实施例13
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-11)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、4-甲氧基苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-11，投入i-790mg，得到白色固体47mg，收率48.79％。mp87-90℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.63(d，j＝8.3hz，1h)，7.35(d，j＝8.6hz，2h)，7.19-7.09(m，2h)，6.89(d，j＝8.6hz，2h)，6.34(s，1h)，5.21(s，1h)，4.33(d，j＝7.0hz，2h)，3.82(s，3h)，3.56(t，j＝7.6hz，4h)，2.72(t，j＝7.2hz，2h)，2.47(s，3h)，2.36(t，j＝6.8hz，4h)，2.30(t，j＝3.4hz，2h)，1.68(s，3h)，1.49(s，3h).ms(esi)m/z：518.26[m+h]+。
实施例14
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(3-硝基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-12)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、3-硝基苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-12，投入i-7140mg，得到白色固体86mg，收率55.78％。mp124-127℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：8.25(d，j＝13.5hz，2h)，7.70(s，1h)，7.62(d，j＝8.0hz，2h)，7.12(d，j＝11.8hz，2h)，6.33(s，1h)，5.19(s，1h)，4.32(s，2h)，3.73(t，j＝7.6hz，2h)，3.36(t，j＝6.5hz，2h)，2.73(t，j＝7.0hz，2h)，2.46(s，3h)，2.43-2.38(t，j＝6.7hz，2h)，2.29(\t，j＝7.6hz，4h)，1.67(s，3h)，1.48(s，3h).ms(esi)m/z：533.23[m+h]+。
实施例15
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(4-硝基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-13)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-13，投入i-7100mg，得到白色固体56mg，收率50.85％。mp132-135℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：8.22(d，j＝8.7hz，2h)，7.58(d，j＝8.3hz，1h)，7.50(d，j＝8.7hz，2h)，7.13-7.02(m，2h)，6.29(s，1h)，5.15(s，1h)，4.27(d，j＝6.7hz，2h)，3.69(t，j＝7.6hz，2h)，3.27(t，j＝6.5hz2h)，2.68(t，j＝7.0hz，2h)，2.41(s，3h)，2.40-2.33(t，j＝7.5hz，2h)，2.26(t，j＝6.7hz，4h)，1.63(s，3h)，1.43(s，3h).ms(esi)m/z：533.24[m+h]+。
实施例16
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(2-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-14)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、2-氟苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-14，投入i-7110mg，得到白色固体52mg，收率45.22％。mp106-109℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.61(d，j＝8.2hz，1h)，7.41-7.29(m，2h)，7.20-7.01(m，4h)，6.31(s，1h)，5.18(t，j＝6.4hz，1h)，4.30(d，j＝7.1hz，2h)，3.72(t，j＝7.7hz，2h)，3.26(t，j＝6.8hz，2h)，2.71(t，j＝7.1hz，2h)，2.44(s，3h)，2.40(t，j＝6.2hz，2h)，2.30(t，j＝6.5hz，4h)，1.65(s，3h)，1.46(s，3h).ms(esi)m/z：506.23[m+h]+。
实施例17
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(4-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-15)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、4-氟苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-15，投入i-780mg，得到白色固体43mg，收率51.41％。mp114-117℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.61(d，j＝8.2hz，1h)，7.36(dd，j＝8.4，5.4hz，2h)，7.17-6.98(m，4h)，6.31(s，1h)，5.18(s，1h)，4.29(d，j＝6.9hz，2h)，3.65(t，j＝7.6hz，2h)，3.37(t，j＝6.8hz，2h)，2.70(t，j＝7.1hz，2h)，2.44(s，3h)，2.34(t，j＝7.4hz，4h)，2.27(t，j＝6.7hz，2h)，1.65(s，3h)，1.45(s，3h).ms(esi)m/z：506.24[m+h]+。
实施例18
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(4-氰基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-16)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、4-氰基苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-16，投入i-7120mg，得到白色固体77mg，收率60.53％。mp122-125℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.70(d，j＝8.1hz，2h)，7.62(d，j＝8.1hz，1h)，7.48(d，j＝7.7hz，2h)，7.18-7.06(m，3h)，6.34(s，1h)，5.20(s，1h)，4.31(d，j＝7.1hz，2h)，3.71(t，j＝7.6hz，2h)，3.31(t，j＝6.9hz，2h)，2.70(t，j＝6.8hz，2h)，2.46(s，3h)，2.43-2.37(t，j＝7.2hz，2h)，2.30(t，j＝6.8hz，4h)，1.67(s，3h)，1.48(s，3h).ms(esi)m/z：513.24[m+h]+。
实施例19
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(4-三氟甲基苯甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-17)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、4-三氟甲基苯甲酸、hatu、三乙胺等制得i-17，投入i-7100mg，得到白色固体66mg，收率57.45％。mp145-148℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.67(d，j＝7.8hz，2h)，7.63(s，1h)，7.50(d，j＝8.0hz，2h)，7.18-7.09(m，2h)，6.34(s，1h)，5.21(t，j＝6.9hz，1h)，4.33(d，j＝7.0hz，2h)，3.74(t，j＝7.5hz，2h)，3.34(t，j＝7.3hz，2h)，2.74(t，j＝7.2hz，2h)，2.47(s，3h)，2.45-2.39(t，j＝6.8hz，2h)，2.32(t，j＝7.1hz，4h)，1.68(s，3h)，1.49(s，3h).ms(esi)m/z：556.23[m+h]+。
实施例20
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-异烟酰基哌嗪-1-基)丙酰胺(i-18)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、异烟酸、hatu、三乙胺等制得i-18，投入i-7150mg，得到白色固体74mg，收率48.83％。mp78-81℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：8.61(d，j＝4.3hz，2h)，7.57(d，j＝8.3hz，1h)，7.22-7.16(m，2h)，7.10-7.02(m，2h)，6.27(s，1h)，5.14(s，1h)，4.26(d，j＝6.8hz，2h)，3.66(s，2h)，3.25(s，2h)，2.66(t，j＝6.9hz，2h)，2.40(s，3h)，2.38-2.31(m，2h)，2.25(s，4h)，1.62(s，3h)，1.42(s，3h).ms(esi)m/z：489.24[m+h]+。
实施例21
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-烟酰基哌嗪-1-基)丙酰胺(i-19)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、烟酸、hatu、三乙胺等制得i-19，投入i-7130mg，得到白色固体69mg，收率52.54％。mp87-90℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：8.68-8.60(m，2h)，7.74(d，j＝7.8hz，1h)，7.64(d，j＝8.2hz，1h)，7.36(dd，j＝7.7，5.0hz，1h)，7.18-7.08(m，2h)，6.34(s，1h)，5.21(t，j＝6.9hz，1h)，4.33(d，j＝7.0hz，2h)，3.73(t，j＝7.1hz，2h)，3.39(t，j＝7.4hz，2h)，2.74(t，j＝7.2hz，2h)，2.47(s，3h)，2.41-2.29(t，j＝7.8hz，4h)，1.98(t，j＝6.7hz，2h)，1.68(s，3h)，1.49(s，3h).ms(esi)m/z：489.25[m+h]+。
实施例22
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(呋喃-2-甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-20)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、2-呋喃甲酸、hatu、三乙胺等制得i-20，投入i-790mg，得到白色固体46mg，收率51.76％。mp103-106℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.54(s，1h)，7.35(s，1h)，7.05(s，2h)，6.86-6.80(m，1h)，6.34(dd，j＝3.3，1.7hz，1h)，6.22(s，1h)，5.09(d，j＝6.8hz，1h)，4.21(d，j＝6.9hz，2h)，3.62(t，j＝7.3hz，4h)，2.62(t，j＝7.0hz，2h)，2.36(s，3h)，2.29(t，j＝6.7hz，4h)，2.20(t，j＝6.9hz，2h)，1.56(s，3h)，1.37(s，3h).ms(esi)m/z：478.22[m+h]+。
实施例23
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯-5-甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-21)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、胡椒酸、hatu、三乙胺等制得i-21，投入i-7100mg，得到白色固体51mg，收率46.39％。mp118-121℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.57(d，j＝8.3hz，1h)，7.12-7.02(m，2h)，6.83(d，j＝9.8hz，2h)，6.75(d，j＝7.8hz，1h)，6.28(s，1h)，5.93(s，2h)，5.16(s，1h)，4.27(d，j＝7.0hz，2h)，3.49(t，j＝7.6hz，4h)，2.67(t，j＝7.2hz，2h)，2.41(s，3h)，2.31(t，j＝6.8hz，4h)，2.25(t，j＝7.1hz，2h)，1.63(s，3h)，1.43(s，3h).ms(esi)m/z：532.23[m+h]+。
实施例24
n-(3-甲基丁-2-烯-1-基)-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-环丙烷甲酰基哌嗪-1-基)丙酰胺(i-22)的制备
参照i-8的合成方法，由i-7和三氟乙酸、胡椒酸、hatu、三乙胺等制得i-22，投入i-7150mg，得到白色固体76mg，收率54.26％。mp94-97℃；1hnmr(300mhz，cdcl3)δ(ppm)：7.58(d，j＝8.3hz，1h)，7.14-7.02(m，2h)，6.29(s，1h)，5.16(s，1h)，4.27(d，j＝7.1hz，2h)，3.53(s，4h)，2.68(t，j＝7.2hz，2h)，2.41(s，3h)，2.39-2.32(m，2h)，2.26(s，4h)，1.63(s，3h)，1.43(s，3h)，0.91(m，2h)，0.72-0.64(m，2h).ms(esi)m/z：452.24[m+h]+。
实施例25
n-乙基-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(呋喃-2-甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺盐酸盐(i-23)的制备
将n-乙基-n-(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)-3-(4-(呋喃-2-甲酰基)哌嗪-1-基)丙酰胺(i-4)200mg加入50ml茄型瓶用5ml乙醚溶解在室温下搅拌，向反应中通入hcl气体，待有固体析出抽滤，得到白色固体160mg，收率74.1％。mp143-146℃；1hnmr(300mhz，meod)δ7.81(dd，j＝8.94，1.8hz，1h)，7.65(d，j＝9.0hz，1h)，7.17(dd，j＝9.0，1.7hz，1h)，7.09-6.95(m，2h)，6.62(t，j＝9.0hz，1h)，6.23(q，j＝1.2hz，1h)，4.45(q，j＝7.6hz，2h)，3.75(t，j＝9.2hz，2h)，3.19(t，j＝6.2hz，4h)，2.55(t，j＝9.2hz，2h)，2.48(t，j＝6.2hz，4h)，2.40(d，j＝1.2hz，3h)，1.43(t，j＝7.6hz，3h).ms(esi)m/z：438.19[m+h]+。