一种冬虫夏草多糖提取物及其制备方法和应用与流程

文档序号:18733835发布日期:2019-09-21 00:54阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种冬虫夏草多糖提取物的制备方法,包括如下步骤:

(1)将冬虫夏草用水加热提取得到提取物,并用水洗脱获得水提物;

(2)向步骤(1)中获得的水提物中加入乙醇进行醇沉得到醇沉粗多糖;

(3)将步骤(2)获得的醇沉粗多糖溶于水中得到粗多糖溶液,之后按照粗多糖溶液与sevag试剂的体积比为3:1~5:1加入sevag试剂进行脱蛋白,得到脱蛋白后的粗多糖;以及

(4)将步骤(3)获得的脱蛋白后的粗多糖用大孔树脂进行脱色素。

2.一种冬虫夏草多糖提取物的制备方法,包括如下步骤:

(1)将冬虫夏草用水在80℃-100℃下加热提取得到提取物,并用水洗脱获得水提物;

(2)向步骤(1)中获得的水提物中加入乙醇进行醇沉得到醇沉粗多糖;

(3)将步骤(2)获得的醇沉粗多糖按照料液比1:18~1:22(g/mL)溶于水中得到粗多糖溶液,之后按照粗多糖溶液与sevag试剂的体积比为3:1~5:1加入sevag试剂进行脱蛋白,得到脱蛋白后的粗多糖;以及

(4)将步骤(3)获得的脱蛋白后的粗多糖用大孔树脂进行脱色素。

3.根据权利要求1或2所述的方法,所述步骤(1)中,加热提取为回流提取,加热提取的料液比为1:8-1:12(kg/L),提取2-4小时;优选地,所述加热提取后的残渣继续按照料液比为1:8-1:12(kg/L)进行回流提取2-3次,每次提取2-4小时,合并提取液;优选地,在步骤(1)得到提取物之后将提取物用大孔树脂吸附并用水洗脱获得水提物。

4.根据权利要求1或2所述的方法,所述步骤(2)中水提物为料液比为1:3-1:6(g/mL)的水提物水溶液;所述步骤(2)中乙醇为无水乙醇,所述无水乙醇与水提物水溶液的体积比为3:1-5:1;优选地,

所述步骤(2)中水提物为料液比为1:5(g/mL)的水提物水溶液;所述步骤(2)中乙醇为无水乙醇,所述无水乙醇与水提物水溶液的体积比为4:1。

5.根据权利要求1或2所述的方法,所述步骤(2)中醇沉在室温下进行,醇沉时间大于8小时。

6.根据权利要求1或2所述的方法,所述步骤(3)中粗多糖溶液与sevag试剂的体积比为4:1。

7.根据权利要求1或2所述的方法,在步骤(4)之前重复进行步骤(3)直至离心后的水相层与有机相间无蛋白层,得到脱蛋白后的水相层溶液作为脱蛋白后的粗多糖;

优选地,所述脱蛋白后的水相层溶液中进一步加入4-5倍体积的无水乙醇,醇沉后离心得脱蛋白后的粗多糖。

8.根据权利要求1或2所述的方法,在所述步骤(4)中,大孔树脂为AB-8大孔树脂,D-941大孔树脂,D-113大孔树脂,或D-101大孔树脂;优选AB-8大孔树脂。

9.根据权利要求1或2所述的方法,其中步骤(4)为:将步骤(3)获得的脱蛋白后的粗多糖加到AB-8大孔树脂柱上,用水洗脱得到洗脱液,浓缩,并用2kDa透析袋纯水透析得到透析后的透析袋内溶液;优选地,所述透析袋内溶液经冷冻干燥得到冬虫夏草多糖提取物(DCCSP)。

10.由权利要求1-9任一项所述方法制备的冬虫夏草多糖提取物。

11.一种冬虫夏草多糖提取物,其总糖含量为85%-90%,包含低分子量多糖和高分子量多糖,所述低分子量多糖为平均分子量为6.5kDa-7.0kDa的多糖,以质量计占总糖的大约75%,所述高分子量多糖的平均分子量大于670kDa,以质量计占总糖的大约25%。

12.根据权利要求11的冬虫夏草多糖提取物,所述低分子量多糖的平均分子量为6.86kDa。

13.根据权利要求11的冬虫夏草多糖提取物,经凝胶色谱分析显示在保留时间9.610分钟,12.225分钟和17.705分钟共显示三个峰,分别对应分子量大于670kDa占3.328%;分子量大于670kDa占21.849%;以及分子量为6.86kDa占74.829%。

14.由权利要求1-9任一项所述方法制备得到的冬虫夏草多糖提取物、或权利要求10-13任一项所述的冬虫夏草多糖提取物在制备用于抗肿瘤的药物中的应用。

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