本发明属于农业生物
技术领域：
，涉及一种炭基复合菌剂及其应用，具体涉及一种用于土壤修复剂的炭基复合菌剂及其应用。
背景技术：
：根肿病又称根癌病，是目前危害十字花科作物最严重的世界性土传病害，由芸薹根肿菌侵染引起，寄主范围广，可危害白菜、甘蓝、萝卜、荠菜、花椰菜和油菜等100多种栽培和野生十字花科植物。病菌侵染后根部薄壁细胞增生形成肿根，多发生于主根和侧根，初期表面光滑，后期表面龟裂、粗糙，影响根系水分和营养吸收。发病初期地上部症状不明显，发病到一定程度时中午时分叶片萎蔫，严重时植株枯死，平均产量损失达20％-30％，严重的高达60％以上乃至失收。芸薹根肿菌具有严格的专性寄生范围，其休眠孢子在土壤中经过15-20年仍能萌发，并且具备致病能力。因此一旦发病，土壤后续十字花科作物的再植就潜藏着很大的风险。换地种植成本高，化学防治食品安全隐患多。cn101058729b公开了一种防治十字花科作物根肿病的土壤调理剂。该调理剂的原料组成按重量份为：有机物10-50、钙镁磷肥10-60、碳酸盐15-80、钾0.8-5、镁0.8-5、锌0.8-5、硼0.8-5；其中，所述的有机物是以野生或栽培的万寿菊属植物为原料，野生的在盛花期采收，栽培的在花收获后采收，经晒干并粉碎至粉末状。经对油菜、白菜、榨菜、青花、红苔菜、苤蓝、甘蓝、板蓝根、芥菜进行广泛试验，防效达80％-95％。具有经济、安全、高效、使用简便的优势。但其所用有机物料特殊，在应用中不具备普适性和便捷性。cn101416641a公开了一种防治十字花科根肿病的生物制剂及其应用。其利用解淀粉芽孢杆菌xf-1菌株的试管和摇床培养以及发酵培养液制备为生物制剂，然后施用于十字花科作物根际土壤中，有很好的防治和增产效果，易于工厂生产。但单一菌株制剂的地域适应性差和功效发挥不容易稳定。cn107987838a公开了一种防控十字花科蔬菜根肿病的有机制剂及其应用。所述有机制剂由有机原料和促分解的配料组成，其中所述有机物料包括但不限于农作物秸秆、木屑等固体有机物料，糖蜜、酒精发酵液等液体有机物料中的一种或多种；所述促分解配料包括但不限于专用微生物、有机催化物中的一种或多种；所述有机原料与促分解的配料比为(95-100):(5-0)。该有机制剂生态环保，适应各种十字花科蔬菜连茬后根肿病高发的土壤，经处理后能够有效降低土壤中芸薹根肿菌的数量和作物根肿病的发病率，杀菌率和根肿病防控率分别达60-90％。此技术重点关注前期土壤处理，但没有兼顾后期作物病原菌的生物防控。现有技术中关于如何更有效地防治根肿病或修复发生过根肿病的土壤的策略还非常有限，因此开发一种处理原料可就地取材、处理效果不受地域限制、对后续种植作物病原菌具有拮抗抑制功效的绿色无农药引入的根肿病连作土壤修复剂和修复方法具有重要的应用价值。技术实现要素：针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种炭基复合菌剂及其应用，具体提供一种用于土壤修复剂的炭基复合菌剂及其应用。为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：一方面，本发明提供一种炭基复合菌剂，所述炭基复合菌剂包括米曲霉固体发酵物、鲁氏接合酵母液体发酵物、贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物和生物质炭。本发明所涉及的炭基复合菌剂创造性地将三种发酵产物与生物质炭进行复配，其与有机物料混合淹水后，可快速启动田块中的好氧厌氧处理进程。其中，米曲霉固体发酵物和贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物可快速启动有机物料在土壤中的好氧分解，影响处理过程中温度和氧化还原电位状况；鲁氏接合酵母液体发酵物则参与厌氧发酵；贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物还对多种土传及气传植物病原菌有拮抗性，可增强后期作物的抗病性。所述三种功能菌株，在对有机物料进行分解利用的同时，营造了土壤小环境较低的氧化还原电位，对土传病原菌有强烈的杀灭效应；另外有机物料腐解后增加了土壤有机质含量、作物可利用养分及一些能刺激作物生长的小分子酸和低聚糖类物质，可促进作物生长；有机物料在腐解过程中产生了一系列生物化学反应，对土壤ph和盐含量起到了相当程度的调节，利于作物生长；所用贝莱斯芽孢杆菌对多种植物病原菌具有强烈的的拮抗和抑制效应，可降低病原菌对再植作物的浸染和生态占位，增强作物免疫力。三者协同增效，将其用于土壤修复剂中，在无农药引入的情况下，可使连作青菜根肿病的发病率由60％降至10％左右。优选地，所述炭基复合菌剂中米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的总活菌数为1.0×109-3.0×1010，例如1.0×109、3.0×109、5.0×109、8.0×109、1.0×1010或3.0×1010等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述炭基复合菌剂中米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的总活菌数特定选择为1.0×109-3.0×1010范围是因为，若总活菌数过高会增加生产成本，若总活菌数过低会需要延长土壤处理时间，影响土壤处理效果，甚至对后续作物生长产生负面效应。优选地，所述米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:(1-2):(1-2)，例如1:1:1、1:1:2、1:2:1或1:2:2等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:(1-2):(1-2)时，能使三者的协同增效作用发挥最大化，即更显著地调节土壤的ph、增加有机质含量、改善养分供给状况、改良土壤物理结构，更显著地降低农作物根肿病的发病率，更显著地降低土壤和农作物根系中芸薹根肿菌的数量，更显著地增加土壤和农作物根系中微生物群落物种的多样性。优选地，所述生物质炭在所述炭基复合菌剂中的质量百分比为60-80％，例如60％、65％、70％、75％或80％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。优选地，所述米曲霉固体发酵物的发酵培养基配方按重量百分比计包括：麸皮2-8％、稻壳粉2-8％、稻秸25-35％、黄豆粉2-6％和水50-70％。所述麸皮的重量百分比可以为2％、3％、5％、6％或8％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述稻壳粉的重量百分比可以为2％、3％、5％、6％或8％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述稻秸的重量百分比可以为25％、28％、30％、32％或35％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述黄豆粉的重量百分比可以为2％、3％、4％、5％或6％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述水的重量百分比可以为50％、55％、60％、65％或70％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。优选地，所述米曲霉固体发酵物的起始发酵温度为20-40℃，例如20℃、25℃、30℃、35℃或40℃等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。具体地，所述米曲霉固体发酵物的发酵条件为：20-40℃下，静止发酵40min，翻转物料5min，连续2周，至物料完全为丝状体包裹，含水量为30-40％左右，完成发酵。优选地，所述鲁氏接合酵母液体发酵物的发酵培养基配方按重量百分比计包括：酵母膏1-5％、蛋白胨1-3％、葡萄糖1-3％和水90-97％。所述酵母膏的重量百分比可以为1％、2％、3％、4％或5％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述蛋白胨的重量百分比可以为1％、1.5％、2％、2.5％或3％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述葡萄糖的重量百分比可以为1％、1.5％、2％、2.5％或3％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述水的重量百分比可以为90％、92％、94％、95％或97％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。优选地，所述鲁氏接合酵母液体发酵物的发酵温度为25-40℃，例如25℃、28℃、30℃、35℃或40℃等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。具体地，所述鲁氏接合酵母液体发酵物的发酵条件为：25-40℃下，好氧，至菌体含量为1011cfu/ml时结束发酵。优选地，所述贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物的发酵培养基配方按重量百分比计包括：蛋白胨1-3％、牛肉膏0.5-2.5％、氯化钠0.5-2.5％和水93-98％。所述蛋白胨的重量百分比可以为1％、1.5％、2％、2.5％或3％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述牛肉膏的重量百分比可以为0.5％、1.0％、1.5％、2.0％或2.5％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述氯化钠的重量百分比可以为0.5％、1.0％、1.5％、2.0％或2.5％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述水的重量百分比可以为93％、94％、95％、96％、97％或98％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。优选地，所述贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物的发酵温度为25-40℃，例如25℃、28℃、30℃、35℃或40℃等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。具体地，所述贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物的发酵条件为：25-40℃下，好氧，至菌体含量为1011cfu/ml时结束发酵。本发明所涉及的三种发酵物的发酵条件对产品性能有重要影响，如温度过低、溶氧不足则菌株增殖缓慢，导致发酵时间长、菌体浓度达不到要求；温度过高也会出现相似的问题。另一方面，本发明提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂包括如上所述的炭基复合菌剂和有机物料。本发明所涉及的土壤修复剂可调整土壤土壤ph趋向中性，显著降低土壤盐分积累，改善高负荷种植土壤的次生盐渍化、酸化状况，增加土壤有机质含量，可使连作土壤青菜根肿病发病率从60％降至10％左右。使用本发明所涉及土壤修复剂处理后的连作土壤中芸薹根肿菌的数量显著减少，使收获期青菜根系中芸薹根肿菌的数量显著减少。使用本发明土壤修复剂处理后土壤和植物根系中微生物群落物种多样性显著增加。优选地，所述有机物料包括农作物秸秆和/或绿肥。具体实施操作时秸秆或绿肥长度≤3-10cm。优选地，所述农作物秸秆包括稻草秸秆、麦秸秸秆或玉米秸秆中任意一种或至少两种的组合；所述至少两种的组合例如稻草秸秆和麦秸秸秆的组合、麦秸秸秆和玉米秸秆的组合、稻草秸秆和玉米秸秆的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再进行一一赘述。优选地，所述绿肥包括蚕豆、紫云英或苜蓿中任意一种或至少两种的组合；所述至少两种的组合例如蚕豆和紫云英的组合、紫云英和苜蓿的组合、蚕豆和苜蓿的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再进行一一赘述。优选地，所述炭基复合菌剂和有机物料的质量比为1:(1-10)，例如1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。优选地，所述土壤为已发生过根肿病，并打算继续种植十字花科类作物的土壤。再一方面，本发明提供一种如上所述的土壤修复剂的使用方法，所述使用方法包括：向土壤中投加土壤修复剂，均匀撒施于田面，与耕层土壤翻耙均匀后，淹水或保持饱和含水量2-4周，处理结束后排水落干，然后进行常规种植。优选地，所述土壤修复剂占土壤的质量百分比为0.1％-2％，例如0.1％、0.5％、1％或2％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再进行一一赘述。所述土壤修复剂占土壤的质量百分比特定选择为0.1％-2％，因为添加量过高反而会对农作物的生长造成抑制。添加量过高影响后续作物生长的原因有二：一是有机物料在土壤处理结束后残留部分在作物种植期缓慢分解释放的热量和物质会影响作物根系发育，抑制作物早期生长；二是有机物料分解过程中需消耗一定量的氮素和养分，添加量多则会过量争夺作物生长所需土壤养分，从而影响作物早期生长。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明所涉及的炭基复合菌剂创造性地将三种发酵产物与生物质炭进行复配，其与有机物料混合淹水后，可快速启动田块中的好氧厌氧处理进程。其中，米曲霉固体发酵物和贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物可快速启动有机物料在土壤中的好氧分解，影响处理过程中温度和氧化还原电位状况；鲁氏接合酵母液体发酵物则参与厌氧发酵；贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物还对多种土传及气传植物病原菌有拮抗性，可增强后期作物的抗病性。三者协同增效，将其用于土壤修复剂中，在无农药引入的情况下，可调整土壤ph值趋向中性，降低土壤盐含量，增加有机质含量，降低连作土壤青菜根肿病的发病率，可使连作土壤青菜根肿病发病率从60％降至10％左右。使用本发明所涉及的土壤修复剂处理后的连作土壤中芸薹根肿菌的数量显著减少，使收获期青菜根系中芸薹根肿菌的数量显著减少。使用本发明土壤修复剂处理后土壤和植物根系中微生物群落物种多样性显著增加。本发明有效克服了移地种植成本高和化学防治污染重的缺点，操作简单，具有高度的推广利用价值。具体实施方式为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。以下实施例所涉及的米曲霉为保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)的米曲霉(asperigillusoryzae)s1，其保藏编号为cgmccno.16264，保藏日期为2018.8.15，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。以下实施例所涉及的鲁氏接合酵母为保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)的鲁氏接合酵母(zygosaccharomycesrouxii)jy1，其保藏编号为cgmccno.16260，保藏日期为2018.8.15，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。以下实施例所涉及的贝莱斯芽孢杆菌为保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)的贝莱斯芽孢杆菌(bacillusvelezensis)k3，其保藏编号为cgmccno.19256，保藏日期为2019.12.30，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。以下实施例所涉及的米曲霉固体发酵物的制备方法为：将上述米曲霉在30℃下，置于发酵罐中静止发酵40min翻转物料5min；如此连续发酵2周左右，至物料完全为白色菌丝包裹，含水量为40％左右，完成发酵。所用的培养基配方为：麸皮10％、稻壳粉10％、稻秸70％、黄豆粉10％。然后调节含水量为60％。以下实施例所涉及的鲁氏接合酵母液体发酵物的制备方法为：将上述鲁氏接合酵母30℃好氧条件下培养，至菌体含量为1011cfu/ml时结束发酵。所用的培养基配方为：酵母膏1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，水95％。以下实施例所涉及的贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物的制备方法为：将上述贝莱斯芽孢杆菌30℃好氧条件下培养，至菌体含量为1011cfu/ml时结束发酵。所用的培养基配方为：蛋白胨1％，牛肉膏1.5％，氯化钠1.5％，水96％，ph7.2。以下实施例所涉及的生物质炭为时科(上海)生物科技有限公司生产，型号为：organicbamboopowerbbpno.6。实施例1本实施例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物包括米曲霉固体发酵物、鲁氏接合酵母液体发酵物、贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物和生物质炭，炭基复合物中的总活菌数为2.0×1010，所述米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:2:2，其中生物质炭占炭基复合物的质量百分比为70％。本实施例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。实施例2本实施例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物包括米曲霉固体发酵物、鲁氏接合酵母液体发酵物、贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物和生物质炭，炭基复合物中的总活菌数为3.0×1010，所述米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:1:1，其中生物质炭占炭基复合物的质量百分比为60％。本实施例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和麦秸秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:5。实施例3本实施例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物包括米曲霉固体发酵物、鲁氏接合酵母液体发酵物、贝莱斯芽孢杆菌液体发酵物和生物质炭，炭基复合物中的总活菌数为1.0×109，所述米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:1:2，其中生物质炭占炭基复合物的质量百分比为80％。本实施例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和蚕豆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:10。实施例4本实施例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物与实施例1的区别仅在于炭基复合物中的总活菌数为1.0×108，其他均保持一致。本实施例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。实施例5本实施例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物与实施例1的区别仅在于炭基复合物中的总活菌数为1.0×1011，其他均保持一致。本实施例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。实施例6本实施例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物与实施例1的区别仅在于米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为2:1:1，其他均保持一致。本实施例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。实施例7本实施例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物与实施例1的区别仅在于米曲霉、鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:1:4，其他均保持一致。本实施例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。对比例1本对比例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物与实施例1的区别仅在于不含有米曲霉固体发酵物，所述鲁氏接合酵母和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:1，其他均保持一致。本对比例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。对比例2本对比例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物与实施例1的区别仅在于不含有鲁氏接合酵母，所述米曲霉固体发酵物和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数比例为1:2，其他均保持一致。本对比例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。对比例3本对比例提供一种炭基复合物，所述炭基复合物与实施例1的区别仅在于不含有贝莱斯芽孢杆菌，所述米曲霉固体发酵物和鲁氏接合酵母的活菌数比例为1:2，其他均保持一致。本对比例还提供一种土壤修复剂，所述土壤修复剂为上述炭基复合物和稻草秸秆粉的混匀产物，前后者的质量比为1:2。评价试验：利用实施例1-7和对比例1-3制得的土壤修复剂防控再植青菜根肿病的发生，具体过程如下：将上述各组土壤修复剂以1％的量添加入已发生过根肿病的土壤，与耕层土壤混合均匀，淹水，保持浅水层2周。处理结束后排水落干，种植青菜“华王”，同时设置未处理土壤作为对照，栽培过程中所有管理措施均保持一致，探究本发明所涉及的修复剂对再植青菜和连作土壤的影响，评价结果如表1-表4所示。表中的根内芸薹根肿菌数量和表中的土壤芸薹根肿菌数量利用荧光定量pcr方法测定(仪器型号tib8600)，根内细菌、真菌多样性及土壤细菌、真菌多样性分析利用高通量测序技术完成(测序平台illuminanovaseq)。表1组别发病率(％)株高(cm)叶绿素含量(spad)叶片数(片)对照组60a7.6b41a9a实施例110b9.1a42a10a实施例210b9.8a43b11b实施例311b8.8a41a10a实施例415b8.5a42a10a实施例59b10a43b11b实施例612b9.0a42a10a实施例710b8.5a42a10a对比例116b8.5a42a10a对比例212b8.5a42a10a对比例314b8.5a42a10a注：同列不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。由表1数据可知：本发明所涉及的炭基复合菌剂通过三种发酵产物的协同增效，用于土壤修复剂中时，在无农药引入的情况下，可显著降低连作土壤青菜根肿病的发病率。且炭基复合菌剂中的总活菌数满足1.0×109-3.0×1010，活菌数比例满足1:(1-2):(1-2)条件时，效果更加明显。表2注：同列不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。由表2数据可知：本发明所涉及的炭基复合菌剂通过三种发酵产物的协同增效，用于土壤修复剂中时，可显著降低青菜根内芸薹根肿菌数量，显著增加根内细菌多样性和真菌多样性。且炭基复合菌剂中的总活菌数满足1.0×109-3.0×1010，活菌数比例满足1:(1-2):(1-2)条件时，效果更加明显。表3注：同列不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。由表3数据可知：本发明所涉及的炭基复合菌剂通过三种发酵产物的协同增效，用于土壤修复剂中时，可显著调节土壤ph趋向中性，降低土壤盐含量，增加土壤有机质含量。且炭基复合菌剂中的总活菌数满足1.0×109-3.0×1010，活菌数比例满足1:(1-2):(1-2)条件时，效果更加明显。表4注：同列不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。由表4数据可知：本发明所涉及的炭基复合菌剂通过三种发酵产物的协同增效，用于土壤修复剂中时，可显著降低土壤芸薹根肿菌的数量，显著增加土壤细菌多样性和真菌多样性。且炭基复合菌剂中的总活菌数满足1.0×109-3.0×1010，活菌数比例满足1:(1-2):(1-2)条件时，效果更加明显。申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种炭基复合菌剂及其应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属
技术领域：
的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。当前第1页12