1.一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:包括捕获探针、k+、exoiii和tht;其中,
捕获探针,其5’端具有一第一序列,其3’端具有与aac-(6’)-ib-cr基因完全互补的一第二序列,第一序列与第二序列通过一缓冲序列相连;第一序列与第二序列形成部分间断互补双链,以使得捕获探针呈发卡结构,且在游离情况下,第一序列能够在k+的作用下形成g-四链体;
其反应具体包括:反应的ph为7.3-7.5,当检测样品中存在aac-(6’)-ib-cr基因时,aac-(6’)-ib-cr基因竞争结合第二序列形成双链结构,第一序列脱离捕获探针的3’端,该双链结构被exoiii剪切以释放aac-(6’)-ib-cr基因,缓冲序列防止exoiii剪切第一序列,第一序列处于游离状态,并在k+的作用下形成g-四链体,该g-四链体与tht结合后,增强tht的荧光。
2.如权利要求1所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述第一序列如seqidno.01所示。
3.如权利要求1所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述第二序列如seqidno.02所示。
4.如权利要求1所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述缓冲序列如seqidno.03所示。
5.如权利要求1所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述捕获探针的序列如seqidno.04所示。
6.如权利要求1至5中任一权利要求所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述反应的温度为25-41℃。
7.如权利要求1至5中任一权利要求所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述反应的时间为10-40min。
8.如权利要求1至5中任一权利要求所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述tht在所述反应的体系中的浓度为2-6μm。
9.如权利要求1至5中任一权利要求所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述exoiii在20μl的所述反应的体系中的用量为1-2.5u。
10.如权利要求1至5中任一权利要求所述的一种aac-(6’)-ib-cr基因检测试剂盒,其特征在于:所述反应的温度为37℃,时间为30min,tht在所述反应的体系中的浓度为5μm,exoiii在20μl的所述反应的体系中的用量为2u。