抗CD47的单克隆抗体及其用途的制作方法

文档序号:24159735发布日期:2021-03-05 14:52阅读:来源:国知局

技术特征:
id no:23的氨基酸序列,或与seq id no:23所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:23所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其列组成;fr-h2包含seq id no:24的氨基酸序列或与seq id no:24所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:24所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h3包含seq id no:25的氨基酸序列或与seq id no:25所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:25所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h4包含seq id no:26的氨基酸序列,或与seq id no:26所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:26所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成,所述轻链可变区的框架区fr包含fr-l1,fr-l2,fr-l3和fr-l4,其中fr-l1包含seq id no:27的氨基酸序列或与seq id no:27所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:27所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-l2包含seq id no:28的氨基酸序列或与seq id no:28所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:28所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-l3包含seq id no:29的氨基酸序列或与seq id no:29所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:29所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-l4包含seq id no:30的氨基酸序列或与seq id no:30所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:30所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;(2)所述重链可变区的框架区fr包含fr-h1,fr-h2,fr-h3和fr-h4,其中fr-h1包含seq id no:31的氨基酸序列或与seq id no:31所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,
83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:31所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h2包含seq id no:32的氨基酸序列或与seq id no:32所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:32所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h3包含seq id no:33的氨基酸序列或与seq id no:33所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:33所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h4包含seq id no:34的氨基酸序列或与seq id no:34所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:34所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成,所述轻链可变区的框架区fr包含fr-l1,fr-l2,fr-l3和fr-l4,其中fr-l1包含seq id no:35的氨基酸序列或与seqid no:35所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:35所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-l2包含seq id no:36的氨基酸序列或与seq id no:36所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:36所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-l3包含seq id no:37的氨基酸序列或与seq id no:37所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:37所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-l4包含seq id no:38的氨基酸序列或与seq id no:38所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:38所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;(3)所述重链可变区的框架区fr包含fr-h1,fr-h2,fr-h3和fr-h4,其中fr-h1包含seq id no:39的氨基酸序列或与seq id no:39所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,
98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:39所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h2包含seq id no:40的氨基酸序列或与seq id no:40所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:40所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h3包含seq id no:41的氨基酸序列或与seq id no:41所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:41所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成;fr-h4包含seq id no:42的氨基酸序列或与seq id no:42所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:42所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,或由其组成,所述轻链可变区的框架区fr包含fr-l1,fr-l2,fr-l3和fr-l4,其中fr-l1包含seq id no:43的氨基酸序列,或与seq id no:43所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:43所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-l2包含seq id no:44的氨基酸序列,或与seq id no:44所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:44所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-l3包含seq id no:45的氨基酸序列,或与seq id no:45所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:45所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-l4包含seq id no:46的氨基酸序列,或与seq id no:46所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:46所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;(4)所述重链可变区的框架区fr包含fr-h1,fr-h2,fr-h3和fr-h4,其中fr-h1包含seq id no:47的氨基酸序列,或与seq id no:47所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:47所示的氨基酸序列相比具有一个或
多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-h2包含seq id no:48的氨基酸序列,或与seq id no:48所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:48所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-h3包含seq id no:49的氨基酸序列,或与seq id no:49所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:49所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-h4包含seq id no:50的氨基酸序列,或与seq id no:50所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:50所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成,所述轻链可变区的框架区fr包含fr-l1,fr-l2,fr-l3和fr-l4,其中fr-l1包含seq id no:51的氨基酸序列,或与seq id no:51所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seqidno:51所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-l2包含seq id no:52的氨基酸序列,或与seq id no:52所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:52所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-l3包含seq id no:53的氨基酸序列,或与seq id no:53所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:53所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成;fr-l4包含seq id no:54的氨基酸序列,或与seq id no:54所示的序列具有至少80%,优选81%,82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:54所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成。3.权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体包括:(1)重链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:2所示的氨基酸序列,或与seq id no:2所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或
与seq id no:2所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,和轻链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:4所示的氨基酸序列,或与seq id no:4所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:4所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列;(2)重链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:12所示的氨基酸序列,或与seq id no:12所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:12所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,和轻链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:14所示的氨基酸序列,或与seq id no:14所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:14所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列;(3)重链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:16所示的氨基酸序列,或与seq id no:16所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:16所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,和轻链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:18所示的氨基酸序列,或与seq id no:18所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:18所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列;(4)重链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:
seq id no:20所示的氨基酸序列,或与seq id no:20所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:20所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,和轻链可变区,其包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:22所示的氨基酸序列,或与seq id no:22所示的序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与seq id no:22所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列。4.权利要求1-3任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或其抗原结合片段包含如下所示的hcdr1-3和lcdr1-3:重链可变区的3个cdr区的氨基酸序列如下:hcdr1:gytftsyw(seq id no:5),hcdr2:idpsdset(seq id no:6),hcdr3:arlyrwyfdv(seq id no:7);和轻链可变区的3个cdr区的氨基酸序列如下:lcdr1:eivgty(seq id no:8),lcdr2:gas(seq id no:9),lcdr3:gqsynfpyt(seq id no:10)。5.权利要求1-4任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体还包含重链恒定区和轻链恒定区,且所述恒定区来自不是鼠类的物种,例如来自人抗体,优选来自人igg或igm,更优选igg1,优选地,所述重链恒定区为ig gamma-1 chain c region,accession:p01857(seq id no:58)或ig gamma-4 chain c region,accession:p01861.1(seq id no:56);所述轻链恒定区为ig kappa chain c region,accession:p01834(seq id no:57)。6.权利要求1-5任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体包含选自以下组成的组的重链和轻链:(1)seq id no:59表示的重链和seq id no:60表示的轻链;(2)seq id no:61表示的重链和seq id no:62表示的轻链;(3)seq id no:63表示的重链和seq id no:64表示的轻链;(4)seq id no:65表示的重链和seq id no:66表示的轻链;(5)seq id no:67表示的重链和seq id no:68表示的轻链;和(6)seq id no:69表示的重链和seq id no:70表示的轻链。7.权利要求1-6任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体还包含按照eu编号系统在234和/或235位点引入的氨基酸突变。8.权利要求1-7任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体按照eu编号系统
包含突变l234a和/或l235a。9.权利要求8所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体包含选自以下组成的组的重链和轻链:(1)seq id no:59表示的重链和seq id no:60表示的轻链;(2)seq id no:61表示的重链和seq id no:62表示的轻链;和(3)seq id no:63表示的重链和seq id no:64表示的轻链。10.分离的多肽,其包含:(1)seq id no:5,6和7所示的序列,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述抗体还包含seq id no:8,9和10所示的序列;(2)seq id no:8,9和10所示的序列,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述抗体还包含seq id no:5,6和7所示的序列;(3)选自seq id no:2,12,16或20所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述抗体还分别对应包含选自seq id no:4,14,18或22所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与所述序列相比具有个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列;或者(4)选自seq id no:4,14,18或22所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述单克隆抗体还对应包含选自seq id no:2,12,16或20所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列。11.权利要求1-10任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗原结合片段选自fab、fab

、f(ab

)2、fd、fv、dab、fab/c、互补决定区(cdr)片段、单链抗体(例如,scfv)、双价抗体或结构域抗体。12.权利要求1-11任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体是人源化抗体、嵌合抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)。13.权利要求1-12任一项所述的抗原或其抗原结合片段,其中所述抗体以小于大约10-5
m,例如小于大约10-6
m、10-7
m、10-8
m、10-9
m或10-10
m或更小的kd结合人cd47蛋白。14.权利要求1-13任一项所述的抗原或其抗原结合片段,其中所述抗体以小于大约
100nm,例如小于大约10nm、1nm、0.9nm、0.8nm、0.7nm、0.6nm、0.5nm、0.4nm、0.3nm、0.2nm、0.1nm或更小的ec50结合人cd47蛋白。15.编码多肽的分离的多核苷酸,所述多肽选自:(1)包含seq id no:5,6和7所示的序列的多肽,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述抗体还包含seq id no:8,9和10所示的序列;(2)包含seq id no:8,9和10所示的序列的多肽,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述抗体还包含seq id no:5,6和7所示的序列;(3)包含选自seq id no:2,12,16或20所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列的多肽,或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列的多肽,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述抗体还分别对应包含选自seq id no:4,14,18或22所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列;或(4)包含选自seq id no:4,14,18或22所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列的多肽,或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列的多肽,其中所述多肽作为抗人cd47的抗体的一部分,特异性结合人cd47,所述抗体还分别对应包含选自seq id no:2,12,16或20所示的序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列,或与所述序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个)保守氨基酸突变(优选置换,插入或缺失)的氨基酸序列。16.权利要求15所述的分离的多核苷酸,其中(1)所述多核苷酸分子包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:1,seq id no:11,seq id no:15或seq id no:19所示的核苷酸序列,或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列;(2)所述多核苷酸分子包含下述序列或由下述序列组成:seq id no:3,seq id no:13,seq id no:17或seq id no:21所示的核苷酸序列或与所述序列具有至少85%,优选86%,87%,88%,89%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%或99%以上序列同一性的序列。17.载体,其包含权利要求15或16所述的多核苷酸分子。18.宿主细胞,其包含权利要求15或16所述的多核苷酸分子,或者权利要求17所述的载体。
19.制备权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段的方法,其包括在合适的条件下权利要求18的宿主细胞,以及从细胞培养物中回收所述抗体或其抗原结合片段的步骤。20.抗体偶联物,其包括权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段,以及与所述抗体或其抗原结合片段偶联的偶联部分,所述偶联部分为纯化标签(如his标签)、细胞毒性剂,或可检测的标记。优选地,所述偶联部分为放射性同位素、发光物质、有色物质、酶或聚乙二醇。21.多特异性抗体,优选双特异性抗体,其包括权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段,以及针对其他抗原和/或其他抗原表位的抗体或抗原结合片段。22.融合蛋白,其包括权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段。23.试剂盒,其包括权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段,或者包括权利要求20所述的抗体偶联物、权利要求21所述的多特异性抗体或权利要求22所述的融合蛋白。24.权利要求23所述的试剂盒,所述试剂盒还包括第二抗体,其特异性识别所述抗体或其抗原结合片段;任选地,所述第二抗体还包括可检测的标记,例如放射性同位素、发光物质、有色物质、酶或聚乙二醇。25.杂交瘤细胞株以及由其产生的单克隆抗体,所述杂交瘤细胞为杂交瘤细胞株lt012,其保藏编号为cctcc no:2018135。26.权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段,权利要求20所述的抗体偶联物、权利要求21所述的多特异性抗体或权利要求22所述的融合蛋白检测人cd47在样品中的存在或其水平,或在制备检测人cd47在样品中的存在或其水平的试剂盒中的用途。27.药物组合物,其包含权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段,权利要求20所述的抗体偶联物、权利要求21所述的多特异性抗体或权利要求22所述的融合蛋白;可选地,其还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。28.权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段,权利要求20所述的抗体偶联物、权利要求21所述的多特异性抗体或权利要求22所述的融合蛋白在制备如下药物中的用途:阻断人cd47与人sirpα结合的药物,阻断人cd47活性或下调其水平的药物,或者阻断人sirpα与cd47结合所介导的细胞学反应的药物。29.权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段,权利要求20所述的抗体偶联物、权利要求21所述的多特异性抗体或权利要求22所述的融合蛋白在治疗肿瘤中的用途,或在制备治疗肿瘤的药物中的用途,所述肿瘤优选为表达cd47的肿瘤,优选癌症,例如恶性血液肿瘤或实体瘤,更优选淋巴瘤、结肠癌或乳腺癌;更优选非霍奇金淋巴瘤,进一步更优选b细胞淋巴瘤细胞。30.权利要求29的所述的用途,所述药物为适于注射的形式,优选是适于通过皮下注射、皮内注射、静脉内注射、肌内注射或病灶内注射施用的形式。31.体内或体外方法,包括施加包含权利要求1-14任一项所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求20所述的抗体偶联物、权利要求21所述的多特异性抗体或权利要求22所述的
融合蛋白的细胞的步骤,或给予有需求的受试者以有效量的所述抗体或其抗原结合片段,所述抗体偶联物,所述多特异性抗体或所述融合蛋白的步骤,所述方法选自如下各项:阻断cd47与人sirpα的结合的方法,阻断人cd47活性或下调其水平的方法,或者阻断人sirpα与cd47结合所介导的细胞学反应的方法。
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