大球盖菇液体菌种培养器和培养方法与流程

本发明属于菌菇培育领域，具体是一种大球盖菇液体菌种培养器和培养方法。

背景技术：

大球盖菇(strophariarugoso-annulata)又名赤松茸、云茸，其菌盖颜色呈酒红色，肉质脆嫩，是国际菇类交易市场上的十大菇类之一，能够消耗多种农林废弃物，栽培方式简易，可采用生料露地或设施栽培，适合解决我国因秸秆禁止焚烧而带来的农业秸秆回收利用问题。

目前大球盖菇二级菌种(原种)分为固体菌种和液体菌种，固体菌种发菌慢，菌种上部活力与下部活力差异大，接种操作慢，接三级种后，菌丝生长速度不一致；液体菌种制作方法普遍采用摇床和发酵罐技术，通过摇床制作二级液体菌种效率较低，而发酵罐则成本高，还不便于运输。大球盖菇三级种培养时间长，菌丝生长速度约2mm/d，夏季制作菌种需要将室温控制在25℃左右，菌丝满袋需要85天左右，培养成本远大于材料和人工成本。

技术实现要素：

本发明针对背景技术中存在的问题，提出了一种大球盖菇液体菌种培养器和培养方法。能缩短菌种培养时间，降低成本，并且能快速运输液体菌种。

本发明首先公开了一种大球盖菇液体菌种培养器，它包括液体原种培养罐、控温磁力转盘和组合搅拌子，其中，液体原种培养罐设置于控温磁力转盘上方，液体原种培养罐中装载含液体母种的原种培养液，组合搅拌子放置于原种培养液中；控温磁力转盘的转动带动组合搅拌子的转动，实现原种培养液的无接触搅拌和加热。

优选的，液体原种培养罐的顶部设置菌种注入口和加液口，菌种注入口上设置橡皮盖实现启闭，加液口上设置胶塞实现启闭；液体原种培养罐的底部设置取液龙头，取液龙头在原种培养液制备过程中以封口膜封口；取液龙头在接种过程中连接橡胶管，橡胶管的出口端为玻璃锥形口，在橡胶管内装置有玻璃珠，玻璃珠的直径略大于橡胶管的直径；所述液体原种培养罐的底部设置环形支脚；所述液体原种培养罐的本体上设置刻度尺和拉手；培养罐的顶部中心下侧设置凹槽，培养罐的底部中心上侧对应设置凹槽，两个凹槽用于限位组合拌子的两端。

优选的，所述控温磁力转盘的顶部设置磁力盘，磁力盘受电机控制转动；控温磁力转盘的本体上设置电源开关、温度调节旋钮、转速调节旋钮、显示屏以及电源线。

优选的，所述搅拌子包括磁力转子和塑料转子，磁力转子和塑料转子通过轴承连接。

优选的，所述塑料转子在轴承的上部纵向可移动，磁力转子固定在轴承的下部。

优选的，所述磁力转子为六边形十字转子，所述塑料转子无棱角，为橄榄型十字转子。

本发明还公开了一种大球盖菇液体菌种培养方法，按重量份数

液体母种培养液：木屑粉4-6份，葡萄糖4-6份，豆粕0.5-1.5份，水986-992份；

原种培养液：玉米粉9-11份，木屑粉3-5份，葡萄糖9-11份，豆粕2-4份，水969-977份；

栽培种养料：3mm杂木屑38-42份，8mm杂木屑38-42份；谷壳7-9份，豆粕4-6份，玉米粉5-7份，轻质碳酸钙0.5-1.5份，水892-908份；

按照以下步骤：

s1、配置液体母种培养液，分装入多个锥形瓶内，用带气孔的硅胶塞塞住瓶口，并放入高压灭菌锅中，灭菌结束后冷却至室温；获得液体母种培养液；

s2、取冰箱内保存的试管母种，使用接种针挑菌丝块接入液体母种培养液内，静置24h；放入摇床，转速190rpm，培养48h；静置24h；继续放入摇床，转速190rpm，培养192h；获得液体母种；

s3、将培养好的液体母种取出，在超净工作台中用匀浆机粉碎菌丝，再用灭过菌的针筒将所有液体母种从橡皮塞注入原种培养液中，所述原种培养液装载于液体原种培养罐中；

s4、将液体原种培养罐静置12h，然后放置于控温磁力转盘上，开启控温磁力转盘，保持温度25℃并提高转速使罐内液体缓慢流动；

s5、按栽培种养料配方配制培养料，并装入聚丙烯菌袋中，用食用菌专用套环封口，用助力锥在套环内插入网格接种棒，盖住套环盖，放入灭菌锅中，采用高压灭菌，121℃灭菌2h，灭菌完成后将菌包放入用异氯二亲尿酸钠熏蒸灭菌过的冷却室内，冷却至室温；

s6、在超净工作台中取下取液龙头上的封口膜，将取液龙头在酒精灯外焰上灼烧，等取液龙头冷却后将灭过菌的橡胶管接在取液龙头上，打开栽培种的套环盖，捏住橡胶管上的玻璃珠，将5ml-10ml液体菌种挤入网格接种棒中，使液体菌种沿网格菌种棒淌至底部，盖上套环盖，将接好的菌包放在25℃环境中培养45天。

优选的，所述s3中，原种培养液通过以下方式获得：

s3-1、配置原种培养液；

s3-2、原种培养液通过加液口(1-7)装入液体原种培养罐(1)，用硅胶塞(1-8)塞住加液口(1-7)，保持液体原种培养罐(1)密闭状态，并放入高压灭菌锅121℃灭菌20min；

s3-3、液体原种培养罐灭菌后放入无菌环境中冷却至室温。

本发明的有益效果

本发明装置简单，成本低，轻便可移动，培养区域不受限制，利用磁力驱动发酵瓶内的转子使培养液在合适的转速下转动，通过该方法可以加速菌种生长速度，增加菌丝生物量，使菌种在较短时间内生长至可利用状态。本装置可统一在发菌室进行发菌，发菌完成后运输至接种地，结合本发明的培养方法，利用网格状接种棒，可在简易条件下快速接种，接种后菌包上下菌丝活力均匀一致，也因袋内通气性强，菌丝满袋时间缩短，可大大降低培养成本。

本申请同时提出了全新的液体母种培养液、原种培养液、栽培种养料配方，以及相应的培育方法。与本发明的装置配合使用，以最大程度的加速菌种生长速度，缩短菌丝培育时间，提高菌丝生物量。

附图说明

图1为本发明的液体原种培养罐结构示意图

图2为本发明的控温磁力转盘结构示意图

图3为本发明的搅拌子结构示意图

图4为本发明的助力锥和接种棒结构示意图

图5为本发明的接种棒使用示意图

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围不限于此：

结合图1-图5，一种大球盖菇液体菌种培养器，它包括液体原种培养罐(1)、控温磁力转盘(2)和组合搅拌子(3)，其中，液体原种培养罐(1)设置于控温磁力转盘(2)上方，液体原种培养罐(1)中装载含液体母种的原种培养液，组合搅拌子(3)放置于原种培养液中；控温磁力转盘(2)的转动带动组合搅拌子(3)的转动，实现原种培养液的无接触搅拌和加热。

优选的，液体原种培养罐(1)的顶部设置菌种注入口(1-1)和加液口(1-7)，菌种注入口(1-1)上设置橡皮盖(1-2)实现启闭，加液口(1-7)上设置胶塞(1-8)实现启闭；液体原种培养罐(1)的底部设置取液龙头(1-3)，取液龙头(1-3)在原种培养液制备过程中以封口膜封口；取液龙头(1-3)在接种过程中连接橡胶管(1-4)，橡胶管(1-4)的出口端为玻璃锥形口(1-5)，在橡胶管(1-4)内装置有玻璃珠(1-6)，玻璃珠(1-6)的直径略大于橡胶管(1-4)的直径；所述液体原种培养罐(1)的底部设置环形支脚(1-9)；所述液体原种培养罐(1)的本体上设置刻度尺(1-10)和拉手(1-11)；培养罐(1)的顶部中心下侧设置凹槽，培养罐(1)的底部中心上侧对应设置凹槽，两个凹槽用于限位组合拌子(3)的两端。

优选的，所述控温磁力转盘(2)的顶部设置磁力盘(2-1)，磁力盘(2-1)受电机控制转动；控温磁力转盘(2)的本体上设置电源开关(2-2)、温度调节旋钮(2-3)、转速调节旋钮(2-4)、显示屏(2-5)以及电源线(2-6)。

优选的，所述搅拌子(3)包括磁力转子(3-1)和塑料转子(3-2)，磁力转子(3-1)和塑料转子(3-2)通过轴承(3-3)连接。

优选的，所述塑料转子(3-2)在轴承(3-3)的上部纵向可移动，磁力转子(3-1)固定在轴承(3-3)的下部。

优选的，所述磁力转子(3-1)为六边形十字转子，所述塑料转子(3-2)无棱角，为橄榄型十字转子。

下面结合具体实施例对如何使用本发明的培养器实现大球盖菇液体菌种的培养进行说明，实施例中所采用的培养器的具体尺寸说明如下：

锥形瓶150ml；液体原种培养罐(1)直径300mm，高450mm，总体积30l；环形支脚(1-9)宽度为9cm，高度3cm；加液口(1-7)宽度为8cm；菌种注入口(1-1)宽度26mm；控温磁力转盘(2)外部直径30cm，总高度为120mm；磁力盘(2-1)盘直径100mm，高度25mm；转速可控范围为0～500rpm，温度可控范围为0～35℃；聚丙烯菌袋(4-1)15mm×28mm；35mm食用菌专用套环(4-2)；网格接种棒(4-5)长150mm，外径21mm，内径20mm，外部光滑；助力锥(4-3)长350mm，外径19.5mm。

实施例1：按重量份数

液体母种培养液：木屑粉4份，葡萄糖4份，豆粕0.5份，水992份；

原种培养液：玉米粉9份，木屑粉3份，葡萄糖9份，豆粕2份，水977份；

栽培种养料：3mm杂木屑38份，8mm杂木屑38份；谷壳7份，豆粕4份，玉米粉5份，轻质碳酸钙0.5份，水908份。

实施例2：按重量份数

液体母种培养液：木屑粉6份，葡萄糖6份，豆粕1.5份，水986份；

原种培养液：玉米粉11份，木屑粉5份，葡萄糖11份，豆粕4份，水969份；

栽培种养料：3mm杂木屑42份，8mm杂木屑42份；谷壳9份，豆粕6份，玉米粉7份，轻质碳酸钙1.5份，水892份。

实施例3：按重量份数

液体母种培养液：木屑粉5份，葡萄糖5份，豆粕1份，水990份；

原种培养液：玉米粉10份，木屑粉4份，葡萄糖10份，豆粕3份，水972份；

栽培种养料：3mm杂木屑40份，8mm杂木屑40份；谷壳8份，豆粕5份，玉米粉6份，轻质碳酸钙1份，水900份。

基于以上3个实施例中的配方，大球盖菇液体菌种的培养按照以下步骤进行：

s1、配置液体母种培养液，分装入多个锥形瓶内，每个瓶内装入70ml培养液，用带气孔的硅胶塞塞住瓶口，并放入高压灭菌锅中，灭菌结束后冷却至室温；获得液体母种培养液；s2、取冰箱内保存的试管母种，使用接种针挑菌丝块接入液体母种培养液内，静置24h；放入摇床，转速190rpm，培养48h；静置24h；继续放入摇床，转速190rpm，培养192h；获得液体母种；

s3、将培养好的液体母种取出，在超净工作台中用匀浆机粉碎菌丝，再用灭过菌的针筒将所有液体母种从橡皮塞注入原种培养液中，所述原种培养液用针筒由橡皮塞(1-2)注射载入液体原种培养罐(1)中；

s4、将液体原种培养罐(1)静置12h，然后放置于控温磁力转盘(2)上，开启控温磁力转盘(2)，保持温度25℃并提高转速使罐内液体缓慢流动；

s5、按栽培种养料配方配制培养料，并装入聚丙烯菌袋(4-1)中，用食用菌专用套环(4-2)封口，用助力锥(4-3)在套环(4-2)内插入网格接种棒(4-5)，盖住套环盖(4-6)，放入灭菌锅中，采用高压灭菌，121℃灭菌2h，灭菌完成后将菌包放入用异氯二亲尿酸钠熏蒸灭菌过的冷却室内，冷却至室温；

s6、在超净工作台中取下取液龙头(1-3)上的封口膜，将取液龙头(1-3)在酒精灯外焰上灼烧，等取液龙头(1-3)冷却后将灭过菌的橡胶管(1-4)接在取液龙头(1-3)上，打开栽培种的套环盖(4-6)，捏住橡胶管(1-4)上的玻璃珠(1-6)，将5ml-10ml液体菌种挤入网格接种棒(4-5)中，使液体菌种沿网格菌种棒(4-5)淌至底部，盖上套环盖(4-6)，将接好的菌包放在25℃环境中培养45天。

所述s3中，原种培养液通过以下方式获得：

s3-1、配置原种培养液；

s3-2、原种培养液通过加液口(1-7)装入液体原种培养罐(1)，每罐装入15l培养液，用硅胶塞(1-8)塞住加液口(1-7)，保持液体原种培养罐(1)密闭状态，并放入高压灭菌锅121℃灭菌20min；

s3-3、液体原种培养罐(1)灭菌后放入无菌环境中冷却至室温。

按照以上三个实施例进行实操，获得菌种性质及培育时间如下：

采用本申请公开的配方、装置进行菌丝培养，能显著缩短菌种培养时间，降低成本。

本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神做举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。