一种多菌种微生物和小球藻复合饮料制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食品饮料领域，特别涉及一种多菌种微生物和小球藻复合饮料制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]目前，食品饮料可分为果汁及其饮料、蔬菜汁及其饮料、植物蛋白质饮料、植物抽提液饮料、乳饮料、碳酸饮料、矿泉水、固体饮料和其他饮料。饮料种类繁多，市场巨大，而有关纯微生物饮料的研究报道较少。
【发明内容】
[0003]本发明是针对现有技术的不足，提供一种多菌种微生物和小球藻复合饮料制剂及其制备方法。本发明解决上述技术问题的技术方案为:
[0004]1.—种多菌种微生物和小球藻复合饮料制剂，先将小球藻(Chlorella Chlorellapyrenoi do sa)FACHB_5在培养液中进行培养、灭活处理后，将纳豆菌(Bacillus nattoSwamura ) ACCC 10614、乳酸杆菌(Lactococcus lactis ) ACCC 11092、双岐杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus Orla-Jensen)CGMCC 1.1855和保加利亚杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus(crla-Jensen)ffeiss et al)CGMCC 1.1480分别放在养液体中，进行单菌种培养得到的种子培养液，将其接种于小球藻基础培养液中，在发酵罐内分别培养至培养液的pH为3?3.5得到该制剂。
[0005]所述各菌种培养液的重量百分数为:纳豆菌25%?35%，乳酸杆菌10%?15%，双岐杆菌15%?25%，嗜热链球菌15%?25%，保加利亚杆菌10%?15% ；
[0006]所述培养液为(mg/L):NaN0375mg;NaH2Po4.H20 5mg；Na2Si03.9H2020mg；Na2EDTA4.36mg；FeC13.6H20 3.16mg；CuS04.5H20 0.0lmg；ZnS04.7H20 0.023mg；CoCL2.6H20
0.012mg；MnCL.4H20 0.18mg；Na2Mo042H20 0.07mg;温度保持在25?30°C^pH保持在6?8，通气量为1.5mL/min，光照强度为36?90μπιο 1/(m2.s)，时间72小时，得到小球藻的种子培养液。
[0007]所述多菌种微生物和小球藻复合饮料制剂中纳豆菌(Bacillus natto Swamura)ACCC 10614的菌数 2 5.0X 109cfu/ml，乳酸杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092的菌数> 5.0X 109cfu/ml，双岐杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054的菌数 > 5.0 X 109cfu/ml，嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus Orla-Jensen)CGMCC 1.1855的菌数 2 5.0 X109cfu/ml，保力口利亚杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus(crla-Jensen)ffeiss et al)CGMCC 1.1480的菌数 2 5.0 X 109cfu/ml。
[0008]2.多菌种微生物和小球藻复合饮料制剂的制备方法，包括以下步骤:
[0009]1)菌种子的制备
[0010](1)小球藻(Chlorella Chlorella pyrenoidosa)FACHB_5种子培养液的制备:
[0011]将小球藻种子在液体中培养，在无菌条件下接入灭菌的培养液中，接种量为培养液量的20 %，灭活处理后所述的培养液为(mg/L): NaN0375mg/L ； NaH2Po4.H20 5mg/L ；Na2Si03.9H20 20mg/L；Na2EDTA 4.36mg/L；FeC13.6H20 3.16mg/L；CuS04.5H20 0.0lmg/L；ZnS04.7H20 0.023mg/L；CoCL2.6H20 0.012mg/L；MnCL.4H20 0.18mg/L；Na2Mo042H20
0.07mg/L ；温度保持在25?30°C 保持在6?8，通气量为1.5mL/min，光照强度为36?90μmo l/m2.s，时间72小时，得到小球藻的种子培养液；
[0012](2)小球藻(Chlorella Chlorella pyrenoidosa)FACHB_5基础培养液的制备:
[0013]将小球藻(ChlorellaChlorella pyrenoidosa)FACHB_5种子液在无菌条件下接入灭菌的培养液内，接种量为培养液的20%，所述的培养液为维生素B10.15mg/L;维生素B120.2mg/L ；生物素0.5mg/L ；温度保持在25?30°C <φΗ保持在6?8，通气量为1.5mL/min，光照强度为36?90ymO l/(m2.s)时间72小时后灭菌，得到小球藻的基础培养液；
[0014](3)种子培养液的制备:
[0015]将纳豆菌(Baci1 lus natto Swamura)ACCC 10614、乳酸杆菌(Lactococcuslactis )ACCC 11092、双岐杆菌(Bifidobacterium sp ) ACCC 11054、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus Orla-Jensen) CGMCC 1.1855 和保加利亚杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus(crla-Jensen)ffeiss et al)CGMCC1.1480分别接在养液体中，进行单菌种培养得到的种子培养液，将其接种于小球藻基础培养液中，在发酵罐内分别培养至培养液的pH为3?3.5，得到多菌种微生物和小球藻复合饮料制剂;各种子培养液的重量百分数为:纳豆菌25%?35%，乳酸杆菌10%?15%，双岐杆菌15%?25%，嗜热链球菌15%?25%，保加利亚杆菌10%?15%。
[0016]3.多菌种微生物复合饮料制剂的制备方法，包括以下步骤:
[0017]1)种子培养液的制备:
[0018](1)纳豆菌(Bacillus natto Swamura)ACCC 10614种子培养液的制备:将纳豆菌(Bacillus natto Swamura)ACCC 10614在无菌条件下接种于液体培养基中，所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:蛋白胨10.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g，pH值调至7.0，28°C?32°C培养48小时，得到纳豆菌菌数2 5.0 X 109cfu/ml的种子培养液；
[0019](2)双岐杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus Orla-Jensen)CGMCC 1.1855、乳酸杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092的种子培养液的制备:分别将双歧杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus Orla-Jensen)CGMCC 1.1855、乳酸杆菌(Lactococcuslactis)ACCC 11092在无菌条件下接种到液体培养基中，所述的液体培养基中各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:蛋白胨10.1 g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g，28°C?32°C单菌种培养24?48小时，分别得到双岐杆菌菌数2 5.0 X 109cfu/ml的种子培养液，嗜热链球菌菌数2 5.0X 109cfu/ml的种子培养液，乳酸杆菌菌数2 5.0X 109cfu/ml的种子培养液。
[0020](3)保加利亚杆菌(Lactobaci 1 lus delbrueckii subsp.bulgaricus(crla-Jensen)ffeiss et al)CGMCC 1.1480种子培养液的制备:将保加利亚杆菌(Lactobacillusdelbrueckii subsp.bulgaricus(crla-Jensen)ffeiss et al)CGMCC 1.1480在无菌条件下接种到液体培养基中，所述的液体培养基中各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:脱脂奶粉lOOg，自然pH值，28°C?32°C培养24?48小时，得到保加利亚杆菌菌数2 5.Ο X 109cfu/ml的种子培养液；
[0021 ] 2)多菌种微生物复合饮料制剂的制备:
[0022]分别将步骤1)制备得到的纳豆菌(Bacillus natto Swamura)ACCC 10614、乳酸杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092、双岐杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054、嗜热链球菌(Streptococcus thermophi lus Or la-Jen sen) CGMCC 1.185 5和保加利亚杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus(crla-Jensen)ffeiss et al)CGMCC1.1480的种子培养液按其重量百分数为:纳豆菌的种子培养液25%?35%，乳酸杆菌的种子培养液10%?15%，双岐杆菌的种子培养液15%?5%，嗜热链球菌的种子培养液15%?25%，保加利亚杆菌的种子培养液10%?15%，在无菌条件下分别接种到小球藻础培养液中，接种量为培养基重量的1 %?2%，所述的小球藻础培养液中各组分在1.0L中的含量为:灭菌红糖50.0g、灭菌蜂蜜10.0g，在溶氧度为5 %即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下，28°C?32°C密闭静置培养10?15天，使pH值降到3.0?3.5，得到多菌种微生物复合饮料制剂。
[0023]本发明所使用的菌种功能如下:
[0024](1)乳酸杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092，促进蛋白质、单糖及|丐、镁等营养物质的吸收，产生维生素B族等大量有益物质；使肠道菌群的构成发生有益变化，改善人体胃肠道功能，恢复人体肠道内菌群平衡，形成抗菌生物屏障，维护人体健康;抑制腐败菌的繁殖，消解腐败菌产生的毒素，清除肠道垃圾。抑制胆固醇吸收，降血脂、降血压作用;免疫调节作用，增强人体免疫力和抵抗力;抗肿瘤、预防癌症作用；提高S0D酶活力，消除人体自由基，具抗衰老、延年益寿作用;有效预防女性泌尿生殖系统细菌感染。控制人体内毒素水平，保护肝脏并增强肝脏的解毒、排毒功能。
[0025](2)双岐杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054，维护肠道正常细菌菌群平衡，抑制病原菌的生长，在肠道内合成维生素、氨基酸和提高机体对钙离子的吸收，产生维生素B1、B2、B6、B12及丙氨酸、缬氨酸、天冬氨酸和苏氨酸等。具有降低血