一种新型放射性标记抗癌药的合成标记方法与流程

[0001]
本发明涉及一种新型放射性标记抗癌药的合成标记方法。


背景技术：

[0002]
低ph值插入肽phlip能够靶向酸性肿瘤微环境，但其插入区存在能于碘131结合的酪氨酸与色氨酸，用碘131标记可能会影响phlip插入细胞膜的效率。为了便于碘标，对philp(var7)结构进行以下优化：在不改变多肽电荷情况下对插入区个别氨基酸进行调整，非电离的极性氨基酸c和y位置互换；用非极性氨基酸f替换w，结构相似度较高。


技术实现要素：

[0003]
本发明的目的在于提供一种新型放射性标记抗癌药的合成标记方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
[0004]
为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：一种新型放射性标记抗癌药的合成标记方法，具体包括以下步骤：
[0005]
1)通过固相多肽合成法合成多肽序列为ayeeqnpfarcleflfptetlllel的philp(var7)lp；
[0006]
2)对philp(var7)lp进行圆二色检测；
[0007]
3)荧光标记多肽fitc-philp(var7)lp乳腺癌细胞荧光显像：将dmem培养基与1mol/l盐酸溶液混合来模拟7.4/6.0/5.0的梯度ph值的细胞外培养环境；在24孔板中每孔铺5.0
×
104个三阴乳腺癌mda-mb-231细胞，向每个孔中加入含终质量浓度50μg/ml的fitc-philp(var7)lp的梯度ph值培养液0.4ml，设置3个复孔；温育30min后将培养液吸除，并用相同ph值的25mmol/l的pbs清洗5遍以除去未结合的探针；随后，在
×
200荧光显微镜下观察细胞并进行拍摄；
[0008]
4)通过氯胺t法对三阴乳腺癌mda-mb-231细胞进行碘131标记，进行肿瘤模型治疗研究。
[0009]
本发明优点在于：本发明所合成的phlip(var7)lp具有靶向酸性微环境的特点，碘131发生的β射线对肿瘤有杀伤效果，对于癌症肿瘤的治疗具有指导性依据。
附图说明
[0010]
图1是philp(var7)lp的hplc分析曲线图。
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图2是philp(var7)lp的esi-ms分析曲线图。
[0012]
图3是philp(var7)lp在不同ph值下圆二色检测曲线图。
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图4是荧光标记多肽fitc-philp(var7)lp在不同ph值下乳腺癌细胞荧光显微镜显像图像。
具体实施方式
[0014]
下面用具体实施例说明本发明，并不是对本发明的限制。
[0015]
实施例
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一种新型放射性标记抗癌药的合成标记方法，具体包括以下步骤：
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1)通过固相多肽合成法合成多肽序列为ayeeqnpfarcleflfptetlllel的philp(var7)lp；
[0018]
2)对philp(var7)lp进行圆二色检测；
[0019]
3)荧光标记多肽fitc-philp(var7)lp乳腺癌细胞荧光显像：将dmem培养基与1mol/l盐酸溶液混合来模拟7.4/6.0/5.0的梯度ph值的细胞外培养环境；在24孔板中每孔铺5.0
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104个三阴乳腺癌mda-mb-231细胞，向每个孔中加入含终质量浓度50μg/ml的fitc-philp(var7)lp的梯度ph值培养液0.4ml，设置3个复孔；温育30min后将培养液吸除，并用相同ph值的25mmol/l的pbs清洗5遍以除去未结合的探针；随后，在
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200荧光显微镜下观察细胞并进行拍摄；
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4)通过氯胺t法对三阴乳腺癌mda-mb-231细胞进行碘131标记，进行肿瘤模型治疗研究。
[0021]
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。