一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法与流程

文档序号:24335779发布日期:2021-03-19 12:16阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,其特征在于,所述包括以下步骤:

s1、待鉴定甘薯材料准备:待鉴定的茎尖菜用甘薯品种或品系材料,种植于广东省农业科学院钟落潭白云基地,经性状观察,生长健康无病,扩繁后备用。

s2、病原菌准备与活化:通过收集新鲜疮痂病病样,采用组织分离法获得具有致病力的疮痂病病原菌、扩繁待用。亦可将保存在广东省农业科学院作物研究所的甘薯疮痂病菌株cj1活化。将新分离的疮痂病病原菌或者菌株cj1接种至pda培养基平板,25℃黑暗条件培养,待pda培养基平板上生长出菌丝体后,用于接种体制备。

s3、接种体的制备:将s2活化病原菌在pda平板上扩繁,生长7d后,加入1-3ml灭菌水,用涂布棒反复涂刮菌落表面,使部分菌丝和孢子溶解于水中,将菌悬液涂布于pda平板上,并在25℃黑暗条件下进行预培养5-7d,再将长出的菌落夹取到含有100μl去离子水的离心管中,震荡培养10h,获得分生孢子悬液并调整浓度为3×104个孢子/ml,加入吐温80使其浓度为2%。

s4、病圃诱发与人工接种:将生长一致健康无病的待鉴定茎尖菜用品种(品系)种植于广东省农业科学院钟落潭白云基地病圃,小区面积5.4m2,每个小区栽插90株,每个品种设3次重复,同时种植感病对照和抗病对照品种,按照茎尖菜用甘薯品种种植常规管理,利用步骤s3、接种体的制备中获得的分生孢子液悬液,对种植在甘薯疮痂病病圃的待鉴定材料,进行人工喷雾接种,接种后每天观察,直至田间感病对照广菜薯5号完全发病后,进行抗病评价。

s5、抗病评价:采用病圃诱发结合人工喷雾方法进行抗病鉴定,直至田间感病对照广菜薯5号完全发病后,开始调查发病情况,每个重复随机选取10株进行发病严重度调查,然后计算每个待鉴定茎尖菜用甘薯材料和品种的病情指数,根据病情指数进行抗性评价;

其中,发病严重度分级标准如下:

0级:无症状;

1级:茎或叶有少数病斑,但叶片能正常展开;

2级:分枝蔓1/3左右叶片受害皱缩;

3级:分枝蔓2/3左右叶片受害皱缩;

4级:新稍畸形,嫩叶皱缩;

5级:顶芽枯死或受损,分枝蔓病斑密布、枯死或叶片变黄脱落;

根据病情分级方法计算病情指数,di=σ(各级病株数×相应级数)/(调查总株数×最高级数)×100:

依据di评价抗病性如下:

抗病r:di≤10.5;

中抗mr:10.6≤di≤30.5;

中感ms:30.6≤di≤50.5;

感病s:di≤50.6。

2.根据权利要求1所述的一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,其特征在于:所述步骤s1、待鉴定甘薯材料准备:待鉴定甘薯材料生长健康无病。

3.根据权利要求1所述的一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,其特征在于:所述步骤s2、病原菌准备与活化:通过收集新鲜的疮痂病病样,采用组织分离法获得具有致病力的疮痂病病原菌,亦可将保存在广东省农业科学院作物研究所的甘薯疮痂病菌株cj1活化。

4.根据权利要求1所述的一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,其特征在于:所述步骤s3、接种体的制备:将s2活化病原菌在pda平板上扩繁,生长7d后,加入1-3ml灭菌水,用涂布棒反复涂刮菌落表面,使部分菌丝和孢子溶解于水中,将菌悬液涂布于pda平板上,并在25℃黑暗条件下进行预培养5-7d,再将长出的菌落夹取到含有100μl去离子水的离心管中,震荡培养10h,获得分生孢子悬液并调整浓度为3×104个孢子/ml,加入吐温80使其浓度为2%。

5.根据权利要求1所述的一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,其特征在于,所述步骤s4、病圃诱发与人工接种:种植感病对照品种广菜薯5号,抗病对照广菜薯16-19,病圃诱发结合人工喷雾接种,直至田间感病对照广菜薯5号完全发病后,进行抗病评价。

6.根据权利要求1所述的一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,其特征在于,所述步骤s5抗病评价:田间中感病对照广菜薯5号完全发病后,开始调查发病情况,每个重复随机选取10株进行发病严重度调查,然后计算病情指数,根据病情指数进行抗性评价。


技术总结
本发明公开了一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,涉及甘薯疮痂病的抗性鉴定技术领域,具体为一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,包括以下步骤:S1、待鉴定甘薯材料准备;S2、病原菌准备与活化;S3、病接种体的制备;S4、病圃诱发与人工接种;S5、抗病评价:感病对照品种广菜薯5号完全发病后,开始调查发病情况,计算病情指数,根据病情指数进行抗性评价。本发明提供了一种茎尖菜用甘薯疮痂病的抗性鉴定方法,本发明方法通过用病圃诱发结合孢子悬液人工接种方法,利用抗感表型稳定的对照品种,建立了一种可靠、结果稳定的适于甘薯疮痂病抗性鉴定评价方法。

技术研发人员:黄立飞;张新新;房伯平;陈景益
受保护的技术使用者:广东省农业科学院作物研究所
技术研发日:2020.12.09
技术公布日:2021.03.19
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