一种同步检测多种生殖道感染相关的病原体的引物组、探针组及试剂盒的制作方法

文档序号:23817686发布日期:2021-02-03 13:56阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种同步检测多种生殖道感染相关的病原体的引物组合物和探针组,其特征在于,包括所述病原体单纯疱疹病毒1型(hsv1)的上游引物具有如seqidno.1所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.2所示的核苷酸序列,具有如seqidno.3所示的核苷酸序列的单纯疱疹病毒1型探针;病原体单纯疱疹病毒2型(hsv2)的上游引物具有如seqidno.4所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.5所示的核苷酸序列,具有如seqidno.6所示的核苷酸序列的单纯疱疹病毒2型探针;病原体b族链球菌(sag)的上游引物具有如seqidno.7所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.8所示的核苷酸序列,具有如seqidno.9所示的核苷酸序列的b族链球菌探针;病原体阿托波氏菌(av)的上游引物具有如seqidno.10所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.11所示的核苷酸序列,具有如seqidno.12所示的核苷酸序列的阿托波氏菌探针;病原体普雷沃菌(pv)的上游引物具有如seqidno.13所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.14所示的核苷酸序列,具有如seqidno.15所示的核苷酸序列的普雷沃菌探针;病原体巨球形菌(me)的上游引物具有如seqidno.16所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.17所示的核苷酸序列,具有如seqidno.18所示的核苷酸序列的巨球形菌探针;病原体动湾杆菌(mb)的上游引物具有如seqidno.19所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.20所示的核苷酸序列,具有如seqidno.21所示的核苷酸序列的动湾杆菌探针;病原体淋病奈瑟菌(ng)的上游引物具有如seqidno.22所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.23所示的核苷酸序列,具有如seqidno.24所示的核苷酸序列的淋病奈瑟菌探针;病原体加德纳菌(gv)的上游引物具有如seqidno.25所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.26所示的核苷酸序列,具有如seqidno.27所示的核苷酸序列的加德纳菌探针;病原体阴道毛滴虫(tv)的上游引物具有如seqidno.28所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.29所示的核苷酸序列,具有如seqidno.30所示的核苷酸序列的阴道毛滴虫探针;病原体梅毒螺旋体(tp)的上游引物具有如seqidno.31所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.32所示的核苷酸序列,具有如seqidno.33所示的核苷酸序列的梅毒螺旋体探针;病原体白色念珠菌(ca)的上游引物具有如seqidno.34所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.35所示的核苷酸序列,具有如seqidno.36所示的核苷酸序列的白色念珠菌探针;病原体解脲脲原体(uu)的上游引物具有如seqidno.37所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.38所示的核苷酸序列,具有如seqidno.39所示的核苷酸序列的解脲脲原体探针;病原体沙眼衣原体(ct)的上游引物具有如seqidno.40所示的核苷酸序列,下游引物具有如seqidno.41所示的核苷酸序列,具有如seqidno.42所示的核苷酸序列的沙眼衣原体探针;病原体人型支原体(mh)的上游引物具有如seqidno.43所示的核苷酸序列,下游引物具
有如seqidno.44所示的核苷酸序列,具有如seqidno.45所示的核苷酸序列的人型支原体探针。2.根据权利要求1所述的同步检测多种生殖道感染相关的病原体的引物组合物和探针组,其特征在于,所述单纯疱疹病毒1型探针的5’端标记有fam发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述单纯疱疹病毒2型探针的5’端标记有fam发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;b族链球菌探针的5’端标记有rox发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq2;所述阿托波氏菌探针的5’端标记有rox发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq2;所述普雷沃菌探针的5’端标记有hex发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述巨球形菌探针的5’端标记有fam发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述动湾杆菌探针的5’端标记有hex发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述淋病奈瑟菌探针的5’端标记有rox发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq2;所述加德纳菌探针的5’端标记有hex发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述阴道毛滴虫探针的5’端标记有fam发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述梅毒螺旋体探针的5’端标记有fam发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述白色念珠菌探针的5’端标记有rox发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq2;所述解脲脲原体探针的5’端标记有rox发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq2;所述沙眼衣原体探针的5’端标记有hex发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1;所述人型支原体探针的5’端标记有hex发光基团,3’端标记有荧光淬灭基团bhq1。3.一种检测多种生殖道感染相关的病原体的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的15种病原体的上游引物、下游引物及探针、病原体标志物标准品、逆转录酶、缓冲液、dntps、mgcl2、depc水和taq酶。4.根据权利要求3所述的检测多种生殖道感染相关的病原体的试剂盒,其特征在于,各引物在多重荧光定量pcr反应体系中的终浓度为0.12μm,各探针在反应体系中的终浓度为0.052μm。5.根据权利要求3所述的检测多种生殖道感染相关的病原体的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒的检测样本为宫颈阴道分泌物、尿液。6.根据权利要求3所述的检测多种生殖道感染相关的病原体的试剂盒,其特征在于,所述病原体标志物的标准品的浓度为10
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copies/μl。7.根据权利要求3所述的检测多种生殖道感染相关的病原体的试剂盒,其特征在于,病原体标志物为:单纯疱疹病毒1型(hsv1)、单纯疱疹病毒2型(hsv2)、b族链球菌(sag)、阿托波氏菌(av)、普雷沃菌(pv)、巨球形菌(me)、动湾杆菌(mb)、淋病奈瑟菌(ng)、加德纳菌(gv)、阴道毛滴虫(tv)、梅毒螺旋体(tp)、白色念珠菌(ca)、解脲脲原体(uu)、沙眼衣原体(ct)、人型支原体(mh)。
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