人肠癌原代细胞及其培养方法、应用与流程

文档序号:26758078发布日期:2021-09-25 04:50阅读:来源:国知局

技术特征:
1.人肠癌原代细胞,其特征在于,命名为人肠癌细胞hcoc

685,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.21097。2.培养权利要求1所述人肠癌原代细胞的方法,其特征在于,包括:步骤1,用样本保存液保存收集的新鲜人肠癌组织;其中,所述样本保存液包括胎牛血清、抗生素和df培养基,所述抗生素包括青霉素、硫酸卡那霉素、两性霉素b和万古霉素;步骤2,用清洗液清洗步骤1保存的肠癌组织;其中,所述清洗液包括含所述抗生素的生理盐水;步骤3,取步骤2清洗处理后的肠癌组织,用含血清培养基进行原代分离培养;其中,所述含血清培养基包括胎牛血清、所述抗生素和df培养基;步骤4,取步骤3原代分离培养出的细胞,用无血清培养基进行纯化及传代培养,得到人肠癌原代细胞;其中,所述无血清培养基包括添加物、所述抗生素和df培养基;所述添加物包括谷氨酰胺、胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、表皮生长因子egf、烟酰胺nicotinamide和b27。3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述无血清培养基包括:1

5mm谷氨酰胺、5

30mg/l胰岛素、5

20mg/l转铁蛋白、5

20μg/l亚硒酸钠、5

20μg/l egf、5

30mm nicotinamide、1

3%b27、10

60μg/ml青霉素、10

60μg/ml硫酸卡那霉素、0.15

0.5μg/ml两性霉素b、0.5

5μg/ml万古霉素。4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述含血清培养基包括:10

60μg/ml青霉素、10

60μg/ml硫酸卡那霉素、0.15

0.5μg/ml两性霉素b、0.5

5μg/ml万古霉素。5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述清洗液包括:0.1

0.8mg/ml青霉素、0.1

0.8mg/ml硫酸卡那霉素、1.5

5μg/ml两性霉素b、1

5μg/ml万古霉素。6.权利要求1所述的人肠癌原代细胞在药物敏感性研究及检测中的应用。7.权利要求1所述的人肠癌原代细胞在构建肠癌动物模型中的应用。8.权利要求1所述的人肠癌原代细胞在开发抑制肠癌药物中的应用。9.权利要求1所述的人肠癌原代细胞在肠癌体外研究中的应用。

技术总结
本公开提供了人肠癌原代细胞及其培养方法和应用,该人肠癌原代细胞命名为人肠癌细胞HCOC


技术研发人员:李春凤 智慧芳 倪君君
受保护的技术使用者:北京和合医学诊断技术股份有限公司
技术研发日:2021.06.03
技术公布日:2021/9/24
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