抗脂联素抗体、检测脂联素的试剂和试剂盒的制作方法

本发明涉及抗体，具体而言，涉及一种抗脂联素抗体、检测脂联素的试剂和试剂盒。

背景技术：

1、脂联素(adiponectin，apn)，也称为acrp30、gbp28、adipoq或脂连蛋白，是一种主要由脂肪细胞分泌的蛋白质激素。人脂联素单体由244个氨基酸组成，包括有3个区域：氨基末端信号序列、胶原结构域和羧基末端的球形结构域(globular domain of apn，gad)。脂联素以三聚体(65kda)、六聚体(150kda)和高分子量(hmw，18-36个单体，＞280kda)聚合体三种亚型存在于血液中。其在血清中的浓度范围为5～30mg/l，约占人血清蛋白总量0.01％。

2、脂联素的主要生物学作用是调节机体的能量代谢，能促进葡萄糖、脂肪的分解代谢，改善胰岛素的敏感性。近年来越来越多的研究表明，脂联素水平与肥胖、糖尿病、高血压、高脂血症、动脉粥样硬化、胰岛素抵抗等心血管危险因素密切相关，患者血清脂联素水平较健康人明显降低。脂联素具有增强胰岛素敏感性、抗动脉粥样硬化(as)形成、抗炎症和血管损伤后抗内膜增生的作用。因此，检测血中脂联素的含量，对于认识其生理学功能、调控机制及与ii型糖尿病、冠心病、高血压等疾病发生发展的关系有重要意义。

3、目前，脂联素的检测方法主要有荧光免疫层析法，其是基于抗体和抗原的特异性反应，同时利用荧光对被检测信号进行放大和显示的一种免疫学检测方法。类似的免疫学检测方法还有放射免疫法、酶联免疫分析法、化学发光法等。上述免疫学检测方法都需要针对于脂联素的抗体。因此，本领域对于有效且结合脂联素并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。

4、有鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本申请提供一种亲和力和/或活性提高的抗脂联素抗体，以改善脂联素的检测，为脂联素的检测提供重要的原料来源。

2、为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种抗脂联素抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括：

3、a)氨基酸序列如seq id no:1至3所示的hcdr1、hcdr2、hcdr3，和氨基酸序列如seqid no:4所示的lcdr1、氨基酸序列如seq id no:5所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no:6或7所示的lcdr3；或

4、b)氨基酸序列如seq id no:10至11任一所示的重链可变区，和氨基酸序列如seqid no:12至15任一所示的轻链可变区；或

5、c)氨基酸序列与b)所示序列具有80％以上同一性的重链可变区和轻链可变区，且包括a)所示序列的hcdr1至hcdr3和lcdr1至lcdr3；或

6、d)氨基酸序列如seq id no:16至17任一所示的重链，和氨基酸序列如seq id no:18至21任一所示的轻链。

7、为了实现上述目的，根据本发明的第二个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段。

8、为了实现上述目的，根据本发明的第三个方面，提供了一种检测脂联素的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物。

9、为了实现上述目的，根据本发明的第四个方面，提供了一种检测脂联素的方法，包括：使上述抗体或其功能性片段、偶联物或试剂或试剂盒与待检测样品中的脂联素接触形成免疫复合物。

10、为了实现上述目的，本发明还提供了一种载体、一种细胞及一种制备上述抗体或其功能性片段的方法。

技术特征：

1.一种抗脂联素抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括：

2.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，可选地，所述抗体或其功能性片段以kd＜8.71×10-08m的亲和力结合脂联素。

3.根据权利要求1至2任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；

4.根据权利要求1至3任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述功能性片段选自所述抗体的f(ab’)2、fab’、fab、fv和scfv中的任意一种。

5.一种抗体偶联物，其特征在于，所述抗体偶联物包括权利要求1至4任一项所述的抗体或其功能性片段；

6.一种检测脂联素的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括权利要求1至4任一项所述的抗体或其功能性片段或权利要求5所述的抗体偶联物。

7.一种检测脂联素的方法，其特征在于，包括：

8.一种核酸，其特征在于，其编码权利要求1至4任一项所述的抗体或其功能性片段。

9.一种载体，其特征在于，其含有权利要求8所述的核酸。

10.一种细胞，其特征在于，其含有权利要求8所述的核酸或权利要求9所述的载体。

11.一种制备权利要求1至4任一项所述的抗体或其功能性片段的方法，其特征在于，其包括：培养权利要求10所述的细胞。

技术总结
本发明公开了一种抗脂联素抗体、检测脂联素的试剂和试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明公开的抗脂联素抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体为脂联素的检测提供了重要的原料来源，且具有提高的亲和力和活性。

技术研发人员：孟媛,钟冬梅,覃文新,游辉,曹慧方
受保护的技术使用者：东莞市朋志生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/5