一种核酸快速提取方法及组合物与流程

文档序号:33952607发布日期:2023-04-26 12:51阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种组合物,所述组合物包括聚丙烯酰胺、硫酸铝、甜菜碱、tris、edta钠盐或其水合物、peg8000、异硫氰酸胍、月桂醇聚氧乙烯醚、异丙醇和吐温。

2.权利要求1的组合物,所述组合物中硫酸铝质量体积分数为0.1%-10%、聚丙烯酰胺质量体积分数为0.001%-0.1%、甜菜碱浓度为0.05mm-5mm、tris浓度为10mm-1m、edta钠盐或其水合物为edta·2na·2h2o、其浓度为1mm-100mm、peg8000质量体积分数为0.01%-1%、异硫氰酸胍浓度为0.5m-10m、月桂醇聚氧乙烯醚质量体积分数为0.01%-1%、异丙醇体积分数为10%-80%、吐温20体积比为0.001%-0.1%。

3.权利要求2的组合物,所述组合物中硫酸铝质量体积分数为1%、聚丙烯酰胺质量体积分数为0.025%、甜菜碱浓度为0.5mm、tris浓度为100mm、edta·2na·2h2o浓度为25mm、peg8000质量体积分数为0.1%、异硫氰酸胍浓度为5m、月桂醇聚氧乙烯醚质量体积分数为0.1%、异丙醇体积分数为35%、吐温20体积分数为0.01%。

4.权利要求1-3任一项所述的组合物,所述组合物的ph范围为7-9;优选所述组合物的ph为8。

5.一种核酸提取方法,所述方法包括使用权利要求1-4任一项所述组合物裂解核酸样本的步骤;优选所述核酸为病毒dna或病毒rna;更优选所述病毒dna为asfv,所述病毒rna为pedv。

6.权利要求5的核酸提取方法,所述核酸样本选自血液样本、组织样本、口腔样本和粪便样本中的至少一种。

7.权利要求5的核酸提取方法,其中使用磁珠提取样本裂解后的核酸;优选使用磁珠提取样本裂解后的病毒核酸。

8.权利要求5的核酸提取方法,所述核酸提取方法还包括漂洗和洗脱步骤。

9.权利要求8的核酸提取方法,所述漂洗步骤中使用的漂洗液包括5mm-500mm浓度的tris、体积比为10%-80%的异丙醇、100mm-10m浓度的盐酸胍。

10.权利要求9的核酸提取方法,所述漂洗液中的tris浓度为50mm、氯化钠浓度为100mm、异丙醇体积比为60%、盐酸胍浓度为1m。

11.权利要求9或10任一项所述的核酸提取方法,所述漂洗液ph范围为7-9;优选所述漂洗液的ph为7。

12.权利要求8的核酸提取方法,所述洗脱步骤中使用的洗脱液包括0.1mm-5mm浓度的tris-hcl、0.1mm-5mm浓度的edta和无核酸酶的蒸馏水。

13.权利要求12的核酸提取方法,所述洗脱液中的tris-hcl浓度为0.5mm,edta浓度为0.5mm。

14.权利要求12或13任一项所述的核酸提取方法,所述洗脱液ph范围为7-9;优选所述洗脱液的ph为7。

15.一种试剂盒,所述试剂盒包括权利要求1-4任一项所述的组合物。

16.权利要求15的试剂盒,所述试剂盒还包括磁珠;优选所述磁珠为超顺磁性氧化硅羟基纳米微球,所述磁珠的直径为20-1000nm,所述磁珠的浓度为10-100mg/ml。

17.权利要求15或16任一项所述的试剂盒,所述试剂盒还包括漂洗液和洗脱液;所述漂洗液包括浓度为50mm的tris、浓度为100mm的氯化钠、体积比为60%的异丙醇、浓度为1m的盐酸胍,所述漂洗液的ph为7;所述洗脱液包括浓度为0.5mm的tris-hcl、浓度为0.5mm的edta,所述洗脱液的ph为7。

18.权利要求1-4任一项所述组合物作为核酸提取试剂用于核酸提取的用途;优选用于磁珠法核酸提取的用途;更优选用于磁珠法病毒核酸提取的用途。


技术总结
本发明提供一种核酸提取组合物,属于生物技术领域,具体涉及一种磁珠法病毒核酸快速提取的组合物。本发明的组合物可实现对核酸样本的高效裂解,同时能促进核酸与磁珠进行一步的结合,实现DNA/RNA核酸高效提取回收。

技术研发人员:聂俊伟,瞿志鹏,荆彦平
受保护的技术使用者:南京诺唯赞生物科技股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/11
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