技术特征：
1.一种检测黄牛polb基因缺失标记的方法，其特征在于，以黄牛基因组dna为模板，以特异性引物对为引物，通过pcr扩增黄牛个体cds区上游基因部分片段，通过电泳检测pcr扩增产物；然后使用限制性内切酶maei对pcr产物直接进行酶切，对酶切后的产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳检测结果判定黄牛个体的基因型；所述引物对为：f：5
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actccaggttccttttactggc-3’；r：5
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gtcggtgatgcccccgt-3’。2.根据权利要求1所述的检测黄牛polb基因缺失标记的方法，其特征在于，pcr扩增的反应体系为：2
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taq pcr master mix 5.00μl，ddh2o 3.00μl，p-f 0.5μl，p-r 0.5μl，dna模板1.0μl。3.根据权利要求1所述的检测黄牛polb基因缺失标记的方法 ，其特征在于，pcr扩增的反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性15s，63℃退火15s，72℃延伸15s，38个循环；72℃延伸10min；4℃保存。4.根据权利要求1所述的检测黄牛polb基因缺失标记的方法，其特征在于，酶切反应体系为：bfal 0.4μl，buffer 2μl，pcr产物 2μl，ddh2o 15.6μl，反应温度37℃，反应时间8h。5.根据权利要求1所述的检测黄牛polb基因缺失标记的方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶电泳采用质量浓度为3％的琼脂糖凝胶。6.根据权利要求1所述的检测黄牛polb基因缺失标记的方法，其特征在于，野生基因型表现为93bp和267bp两个条带；缺失基因型表现为360bp条带；杂合基因型表现为93bp、267bp和360bp三个条带。7.一种黄牛polb基因缺失多态性的检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括用于pcr扩增牛polb基因nc_037354.1 cds区上游c.-221_-210del位12bp 缺失突变位点的引物对，所述引物对为：f：5
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gtcggtgatgcccccgt-3’。8.一种如权利要求1-4任一项所述的检测黄牛polb基因缺失标记的方法在黄牛分子标记辅助选择育种方面的应用。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，在由所述引物对扩增的缺失标记位点，个体对应的生长优势基因型为野生型。
技术总结
本发明属于家畜分子遗传学育种技术领域，具体涉及一种检测黄牛POLB基因缺失标记的方法。该方法通过以黄牛基因组DNA为模板，以特异性引物对F：5
技术研发人员：吕世杰 李玉龙 张子敬 王二耀 楚秋霞 张格阳 冯亚杰 施巧婷 陈付英 郎丽敏 王红利
受保护的技术使用者：河南省农业科学院畜牧兽医研究所
技术研发日：2022.08.02
技术公布日：2022/11/2