本发明属于生物,具体涉及一种应用于制备抗氧化药物中的红托竹荪多肽。
背景技术:
1、竹荪是一种鬼笔科腐生真菌,因其独特的风味和较高的营养价值而受到人们的喜爱。它也被称为“蘑菇王后”有4个常见的可食用品种,分别是红托竹荪、长裙竹荪、短裙竹荪和棘托竹荪。近年来,从竹荪中分离出的许多活性成分被报道具有抗炎、抗氧化、免疫调节和神经保护作用。然而,关于红托竹荪( dictyophora rubrovalvata m.zang)活性肽的提取及其作用的研究较少,其抗氧化方面的潜在机制尚不清楚。因此,研究红托竹荪多肽的结构特征、生物学功能及分子机制具有重要意义。
技术实现思路
1、本发明提供一种应用于制备抗氧化药物中的红托竹荪多肽,旨在研究红托竹荪多肽的特定肽段进行体外羟基自由基清除能力测定、对hepg2细胞的毒性、氧化损伤保护作用等,有利于在细胞水平上对药物作用的分子生物学机理进行深入的研究。为开发新的潜在抗氧化药物/食品提供有效途径,同时为开发红托竹荪菌种资源提供一定的理论基础。
2、本发明是通过以下技术方案实现的:
3、一种多肽,氨基酸序列如seq id no:1所示。
4、一种药物、食品组合物,包括seq id no:1所示的多肽。
5、一种药物、食品组合物,还包括药学上可接受的辅剂或食品上可接受的添加剂。
6、上述多肽或药物、食品组合物在制备抗氧化药物/食品中的用途。
7、多肽的提取方法,包括以下步骤:
8、(1)红托竹荪50℃烘24h,烘干后粉碎;
9、(2)称取20g红托竹荪干粉于烧杯中,按1:20的料液比向烧杯中加入蒸馏水400ml,放到超声波清洗器中超声提取,将提取液5000r/min离心10 min,收集上清液;加入3倍无水乙醇溶液静置过夜,8000 r/min离心15 min,取上清液在40˚c下旋转蒸发浓缩,浓缩后冷冻干燥,得到粗蛋白;
10、(3)将粗蛋白溶于超纯水中,制成蛋白溶液,用 1 m naoh调节ph值至 6.5,加入中性蛋白酶充分震荡后,加酶量 5000 u/g,酶解的温度为 50℃,置水浴中酶解4 h,酶解完成后,置沸水浴中灭活酶 15min,酶解液3500r/min离心8min,收集上清液,利用150g/l的三氯乙酸沉淀上清液中未水解的蛋白质,3500r/min离心8min,收集上清液,得到红托竹荪多肽;
11、(4)将收集到的上清液通过超滤离心管进行分子量分级,得到不同分子量的红托竹荪多肽,将多肽测序得到seq id no:1所示肽段。
12、进一步地,超声提取的条件为:超声功率设置为400w,温度设为50℃,提取时间为20min。
13、有益效果
14、本发明通过将红托竹荪的有效成分多肽进行试验,发现1-3kda的红托竹荪多肽溶液对羟基自由基的清除率最高,进一步进行hepg2细胞的毒性以及对hepg2细胞的氧化损伤保护作用,进而测序iytnsyqkseve对hepg2细胞的毒性以及对hepg2细胞的氧化损伤保护作用。
15、红托竹荪多肽进行细胞增殖实验,不同肽段对于hepg2细胞的毒性以及对hepg2细胞的氧化损伤保护作用具有不同的作用,这一研究对开发和可持续利用我国丰富的自然资源具有重要的科学和现实意义。
1.一种多肽,其特征在于,所述多肽如seq id no:1所示。
2.一种药物、食品组合物,其特征在于,包括权利要求1中所述的多肽。
3.根据权利要求2所述的一种药物、食品组合物,其特征在于,包括药学上可接受的辅剂或食品上可接受的添加剂。
4.权利要求1所述的多肽或权利要求2或3所述的药物、食品组合物在制备抗氧化药物/食品中的用途。
5.一种权利要求1所述的多肽的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的一种红托竹荪多肽的提取方法,其特征在于,超声提取的条件为:超声功率设置为400w,温度设为50℃,提取时间为20min。