含嘧啶并二氢吡唑啉酮类衍生物、其药学上可接受的盐及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于药物合成领域。具体涉及含嘧啶并二氢吡唑啉酮类衍生物、其药学上可接受的盐及其制备方法，以及其作为生物抑制剂在制备治疗癌症的药物中的应用。


背景技术：

2.wee1样蛋白激酶1(wee1-like protein kinase 1,wee1)是人类wee蛋白激酶家族成员之一，它在进化上高度保守并大量存在各类真核生物中。wee1激酶是dna复制、组蛋白转录和染色体浓缩中一个关键的调控枢纽，而这些生物学过程的异常必将影响染色质的完整性、遗传物质的传递和表观遗传学特征，组蛋白结构的改变、染色体丢失、染色质的结构改变和恶性肿瘤发生发展都密切相关。
3.wee蛋白激酶家族包括wee1-a，wee1-b和myt1三种蛋白激酶。wee1-a主要存在于体细胞中，wee1-b主要存在于胚胎细胞中，myt1在体细胞和胚胎细胞中都存在。wee1激酶最初的研究源于酵母，wee1是一种细胞分裂周期的突变体，在酵母中呈低表达。人类wee1激酶是调控细胞周期g2期到m期的关键靶点。在细胞周期进入有丝分裂前，wee1激酶促进其完成dna复制和dna损伤修复。wee1在细胞周期的s期和g2期非常活跃，可磷酸化抑制细胞分裂控制蛋白2(cell division control protein2,cdc2)的酪氨酸(tyr)15位点继而降低cdc2激酶的生物活性最后可特异地调控细胞周期和有丝分裂。单细胞真核生物如芽殖或裂殖酵母基因敲除wee1后可以存活，wee1基因敲除的小鼠胚胎在囊胚阶段即死亡，其原因是细胞不能继续增殖。染色体浓缩也受wee1激酶调控，fasulo等使用s期特异性抑制剂和拓扑异构酶抑制剂干扰dna复制，发现wee1和细胞周期检测点激酶1(checkpoint kinase 1,chk1)的同源基因grp在果蝇染色体浓缩延迟中起到关键作用。
4.wee1激酶是参与细胞周期g2/m检查点和dna损伤修复过程的关键激酶。超过50％的肿瘤存在p53基因缺失或突变，导致细胞周期g1/s检查点的缺陷，使得肿瘤细胞dna的复制及损伤修复过程更依赖于g2/m检查点。抑制wee1激酶活性后，肿瘤细胞的dna损伤不能及时修复便进入m期，造成基因组不稳定性和染色体缺失，引发有丝分裂灾难，导致肿瘤细胞凋亡。在很多种癌变细胞中weel激酶高表达，通过对weel激酶的抑制，可以使肿瘤细胞直接跳过g2期的dna修复，提前进入有丝分裂，致肿瘤细胞死亡，达到治疗癌症的目的。
5.polo样激酶1(polo-like kinase 1,plk1)主要在细胞周期g2和m期表达——协助纺锤体的形成、染色单体分离和胞质分裂。同时，plk1在细胞周期各个时相起至关重要作用，例如控制细胞进入有丝分裂的细胞周期蛋白b(cyclin b)/细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase 1,cdk1)复合物。此外，plk1也可以使抗细胞凋亡蛋白bcl-xl磷酸化，抑制plk1可以降低p-bcl-xl基因的表达，从而促进细胞凋亡。目前发现plk1抑制剂能够带来包括骨髓抑制等副作用。近期研究发现，成年哺乳动物的动脉壁细胞对plk1抑制剂更加敏感。长期使用plk1抑制剂不仅能导致高血压，还会引起血管破裂等严重心血管问题。
6.目前尚未有wee1抑制剂药物上市，现有在研wee1抑制剂如azd1775，正处于临床ii期，除抑制对wee1有抑制作用外，对plk1也有一定的抑制作用。因此，开发具有plk1选择性的wee1抑制剂能够给临床开发带来新的选择。


技术实现要素：

7.本发明所要解决的技术问题是现有的wee1抑制剂对plk1选择性偏低，为此，本发明提供了一种含嘧啶并二氢吡唑啉酮类衍生物、其药学上可接受的盐及其制备方法和应用。该化合物能够抑制wee1，且对plk1具有较佳的选择性，可治疗癌症。
8.本发明的目的在于提供一种如通式(ia)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
[0009][0010]
其中，
[0011]
x为ch或n；
[0012]
y为c或n；
[0013]
环a选自c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0014]
环b选自c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0015]
环c选自c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0016]
r选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c6-14
芳基、5-14元杂芳基、-(ch2)nra、-(ch2)nora、-(ch2)nsra、-(ch2)nnrbra、-o(ch2)nnrdrc、-(ch2)nc(o)ra、-(ch2)nc(o)nrbra、-(ch2)nnrbc(o)ra、-(ch2)ns(o)mra、-(ch2)ns(o)mnrbra、-(ch2)ns(o)(＝nrb)ra、-(ch2)nn＝s(＝o)rbra或-(ch2)nnrbs(o)mra，所述的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0017]
ra和rb各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0018]
l为连接基团，选自l1、l
1-l2、l
1-l
2-l3或l
1-l
2-l
3-l4；
[0019]
l1、l2、l3和l4各自独立地选自键、-o-、-s-、-nr
e-、-c(o)-、-s(o)
m1-、-(crcrd)
n1-、-(chrc＝chrd)
n1-、-c≡c-、-nre(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
o(crfrg)
n2-、-s(crcrd)
n1
s(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
o(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
nre(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
nre(crfrg)
n2
o-、-(crcrd)
n1
s(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
(crfrg)
n2-、-(chrc＝chrd)
n1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
(c≡c)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
c(o)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
s(o)
m1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
nrec(o)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
nres(o)
m1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
c(o)nre(rfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
s(o)(＝nre)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
n＝s(＝o)re(crfrg)
n2-或-(crcrd)
n1
s(o)
m1
nre(crfrg)
n2-；
[0020]
rc、rd、re、rf和rg各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0021]
或者，rc、rd、re、rf和rg任意两个以及它们所在的原子链接形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0022]
r1各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基、5-14元杂芳基氧基或c(＝o)nr
1-1r1-，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基、5-14元杂芳基氧基、被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基和被一个或多个氰基取代的c
1-6
烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0023]
或者，任意两个r1以及它们所在的原子一起形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0024]
r2选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基、5-14元杂芳基氧基或-n＝s(＝o)r
2-1r2-2
，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0025]r2-1
和r
2-2
各自独立地为c
1-6
烷基；
[0026]
或者，任意两个r2以及它们所在的原子一起链接形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；且
[0027]
x、y和z各自独立地为0～10的整数；
[0028]
n、n1和n2各自独立地为0～10的整数；
[0029]
m和m1各自独立地为0、1或2。
[0030]
本发明的目的在于提供一种通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中通式(i)所示的结构如下：
[0031][0032]
其中，
[0033]
x为ch或n；
[0034]
环a选自c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0035]
环b选自c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0036]
r选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、-(ch2)nra、-(ch2)nora、-(ch2)nsra、-(ch2)nnrbra、-o(ch2)nnrdrc、-(ch2)nc(o)ra、-(ch2)nc(o)nrbra、-(ch2)nnrbc(o)ra、-(ch2)ns(o)mra、-(ch2)ns(o)mnrbra、-(ch2)ns(o)(＝nrb)ra、-(ch2)nn＝s(＝o)rbra或-(ch2)nnrbs(o)mra，所述的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0037]
ra和rb各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一
步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0038]
l为连接基团，选自l1、l
1-l2、l
1-l
2-l3或l
1-l
2-l
3-l4；
[0039]
l1、l2、l3和l4各自独立地选自键、-o-、-s-、-nr
e-、-c(o)-、-s(o)
m1-、-(crcrd)
n1-、-(chrc＝chrd)
n1-、-c≡c-、-nre(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
o(crfrg)
n2-、-s(crcrd)
n1
s(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
o(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
nre(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
nre(crfrg)
n2
o-、-(crcrd)
n1
s(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
(crfrg)
n2-、-(chrc＝chrd)
n1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
(c≡c)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
c(o)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
s(o)
m1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
nrec(o)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
nres(o)
m1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
c(o)nre(rfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
s(o)(＝nre)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
n＝s(＝o)re(crfrg)
n2-或-(crcrd)
n1
s(o)
m1
nre(crfrg)
n2-；
[0040]
rc、rd、re、rf和rg各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0041]
或者，rc、rd、re、rf和rg任意两个以及它们所在的原子链接形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0042]
r1各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基、5-14元杂芳基氧基或c(＝o)nr
1-1r1-2
，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基、5-14元杂芳基氧基、被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基和被一个或多个氰基取代的c
1-6
烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0043]r1-1
和r
1-2
各自独立地选自氢、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基；
[0044]
或者，任意两个r1以及它们所在的原子一起形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基和中的一个或多个取代基所取代；
[0045]
r2选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基、5-14元杂芳基氧基或-n＝s(＝o)r
2-1r2-2
，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0046]r2-1
和r
2-2
各自独立地为c
1-6
烷基；
[0047]
或者，任意两个r2以及它们所在的原子一起链接形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；且
[0048]
x和y各自独立地为0～10的整数；
[0049]
n、n1和n2各自独立地为0～10的整数；
[0050]
m和m1各自独立地为0、1或2。
[0051]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐里，部分基团基于如下所述的定义，其余基团的定义如其他任一优选实施方式所述(以下简称为“在本发明的一个优选实施方式中”)：
[0052]
x为ch或n；
[0053]
r为c
1-6
烷基或c
2-6
烯基，所述的c
1-6
烷基和c
2-6
烯基，任选地，进一步被氘、卤素和c
3-12
环烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0054]
环b为c
6-14
芳基或5-14元杂芳基；
[0055]
y为0、1或2；
[0056]
r2为氘、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或-n＝s(＝o)r
2-1r2-2
，所述的c
1-6
烷基和3-12元杂环基，任选地，进一步被氘、羟基和氰基中的一个或多个取代基所取代；
[0057]r2-1
和r
2-2
各自独立地为c
1-6
烷基；
[0058]
l为l
1-l
2-l3；
[0059]
l1为-(crcrd)
n1
o-或-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1各自独立地为1或2；
[0060]
l2为-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1为1或2；
[0061]
l3为-o-、-(crcrd)
n1-或-nrec(o)-；rc和rd各自独立地为氢或氘；re为氢或氘；n1为1；
[0062]
环a为c
6-14
芳基或5-14元杂芳基；
[0063]
x为1或2；
[0064]
r1各自独立地为氘、卤素、氰基、3-12元杂环基或-c(＝o)nr
1-1r1-2
，所述的3-12元杂环基，任选地，进一步被羟基、氧代基、c
1-6
烷基、c
1-6
氘代烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、被一个或多个氰基取代的c
1-6
烷基和被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基中的一个或多个取代基所取代；
[0065]r1-1
和r
1-2
各自独立地为氢、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基。
[0066]
在本发明的一个优选实施方式中：
[0067]
x为ch或n；
[0068]
r为c
1-6
烷基或c
2-6
烯基，所述的c
1-6
烷基和c
2-6
烯基，任选地，进一步被氘、卤素和c
3-12
环烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0069]
环b为c
6-14
芳基或5-14元杂芳基；
[0070]
y为0、1或2；
[0071]
r2为氘、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或-n＝s(＝o)r
2-1r2-2
，所述的c
1-6
烷基和3-12元杂环基，任选地，进一步被氘、羟基和氰基中的一个或多个取代基所取代；
[0072]r2-1
和r
2-2
各自独立地为c
1-6
烷基；
[0073]
l为l
1-l
2-l3；所述的l1与所述的环a连接；
[0074]
l1为-(crcrd)
n1
o-或-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1各自独立地为1或2；所述的(crcrd)
n1
o-中的o与所述的环a或所述的l2连接；
[0075]
l2为-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1为1或2；
[0076]
l3为-o-、-(crcrd)
n1-或-nrec(o)-；rc和rd各自独立地为氢或氘；re为氢或氘；n1为1；所述的-nrec(o)-中的c(o)与所述的环b连接；
[0077]
环a为c
6-14
芳基或5-14元杂芳基；
[0078]
x为2；
[0079]
其中一个r1为氢、氘、卤素或氰基；
[0080]
另一个r1为3-12元杂环基或-c(＝o)nr
1-1r1-2
，所述的3-12元杂环基，任选地，进一步被羟基、氧代基、c
1-6
烷基、c
1-6
氘代烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、被一个或多个氰基取代的c
1-6
烷基和被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基中的一个或多个取代基所取代；
[0081]r1-1
和r
1-2
各自独立地为氢、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基。
[0082]
在本发明的一个优选实施方式中，x为ch或n。
[0083]
在本发明的一个优选实施方式中，r为c
1-6
烷基或c
2-6
烯基，所述的c
1-6
烷基和c
2-6
烯基，任选地，进一步被氘、卤素和c
3-12
环烷基中的一个或多个取代基所取代。
[0084]
在本发明的一个优选实施方式中，环b为c
6-14
芳基或5-14元杂芳基；
[0085]
y为0、1或2；
[0086]
r2为氘、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或-n＝s(＝o)r
2-1r2-2
，所述的c
1-6
烷基和3-12元杂环基，任选地，进一步被氘、羟基和氰基中的一个或多个取代基所取代；
[0087]r2-1
和r
2-2
各自独立地为c
1-6
烷基。
[0088]
在本发明的一个优选实施方式中，l为l
1-l
2-l3；
[0089]
l1为-(crcrd)
n1
o-或-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1各自独立地为1或2；
[0090]
l2为-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1为1或2；
[0091]
l3为-o-、-(crcrd)
n1-或-nrec(o)-；rc和rd各自独立地为氢或氘；re为氢或氘；n1为1。
[0092]
在本发明的一个优选实施方式中，l为l
1-l
2-l3；所述的l
1-与所述的环a连接；
[0093]
l1为-(crcrd)
n1
o-或-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1各自独立地为1或2；所述的(crcrd)
n1
o-中的o与所述的环a或所述的l2连接；
[0094]
l2为-(crcrd)
n1-；rc和rd各自独立地为氢或氘；n1为1或2；
[0095]
l3为-o-、-(crcrd)
n1-或-nrec(o)-；rc和rd各自独立地为氢或氘；re为氢或氘；n1为1；所述的-nrec(o)-中的c(o)与所述的环b连接。
[0096]
在本发明的一个优选实施方式中，环a为c
6-14
芳基或5-14元杂芳基；
[0097]
x为1或2；
[0098]
r1各自独立地为氘、卤素、氰基、3-12元杂环基或-c(＝o)nr
1-1r1-2
，所述的3-12元杂环基，任选地，进一步被羟基、氧代基、c
1-6
烷基、c
1-6
氘代烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、被一个或多个氰基取代的c
1-6
烷基和被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基中的一个或多个取代基所取代；
[0099]r1-1
和r
1-2
各自独立地为氢、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基。
[0100]
在本发明的一个优选实施方式中，环a为c
6-14
芳基或5-14元杂芳基；
[0101]
x为2；
[0102]
其中一个r1为氢、氘、卤素或氰基；
[0103]
另一个r1为3-12元杂环基或-c(＝o)nr
1-1r1-2
，所述的3-12元杂环基，任选地，进一步被羟基、氧代基、c
1-6
烷基、c
1-6
氘代烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、被一个或多个氰基取代的c
1-6
烷基和被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基中的一个或多个取代基所取代；
[0104]r1-1
和r
1-2
各自独立地为氢、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基。
[0105]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r里，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为甲基、乙基或异丙基。
[0106]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r里，所述的c
2-6
烯基可为c
2-4
烯基，又可
为乙烯基、丙烯基或烯丙基。
[0107]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r里，所述的c
1-6
烷基和c
2-6
烯基进一步被卤素所取代时，所述的卤素可为氟、氯、溴或碘，又可为氟。
[0108]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r里，所述的c
1-6
烷基和c
2-6
烯基进一步被c
3-12
环烷基所取代时，所述的c
3-12
环烷基可为c
3-6
环烷基，又可为环丙基。
[0109]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r里，所述的c
1-6
烷基和c
2-6
烯基进一步被c
3-12
环烷基所取代时，所述的c
3-12
环烷基可为饱和单环。
[0110]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r可为，所述r可为
[0111]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r可为
[0112]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环b里，所述的c
6-14
芳基可为苯基。
[0113]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环b里，所述的5-14元杂芳基可为5-6元杂芳基。
[0114]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环b里，所述的5-14元杂芳基中的杂原子数可为1个或2个。
[0115]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环b里，所述的5-14元杂芳基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为n。
[0116]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环b里，所述的5-14元杂芳基可为吡啶基、嘧啶基或吡嗪基。
[0117]
在本发明的一个优选实施方式中，所述环b为其中，x4为n或ch。
[0118]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r2里，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为异丙基。
[0119]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r2里，所述的3-12元杂环基可为3-6元杂环基。
[0120]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r2里，所述的3-12元杂环基中的杂原子数可为1个或2个。
[0121]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r2里，所述的3-12元杂环基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为o。
[0122]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r2里，所述的3-12元杂环基可为氧杂环丁基。
[0123]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
2-1
里，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为异丙基。
[0124]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
2-2
里，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为异丙基。
[0125]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r2为为
[0126]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的l可为-(ch2)
2-o-、-o-(ch2)
2-o-、-(ch2)
4-、-(ch2)
3-o-、-(ch2)
4-o-、-(ch2)-o-(ch2)
2-o-或-(ch2)
2-nh-(c＝o)-，其左端与所述的环a连接。
[0127]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环a里，所述的c
6-14
芳基可为苯基。
[0128]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环a里，所述的5-14元杂芳基可为5-6元杂芳基。
[0129]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环a里，所述的5-14元杂芳基中的杂原子数可为1个或2个。
[0130]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环a里，所述的5-14元杂芳基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为n。
[0131]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的环a里，所述的5-14元杂芳基可为吡啶基、嘧啶基或吡嗪基。
[0132]
在本发明的一个优选实施方式中，所述环a为其中，x1、x2和x3各自独立地为n或cr1；r1各自独立地为-cn、f或h。
[0133]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的卤素可为氟、氯、溴或碘，又可为氟或溴。
[0134]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基可为单环杂环基、螺环杂环基、稠环杂环基或桥环杂环基。
[0135]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基可为6元单环杂环基。
[0136]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基可为8-11元螺环杂环基。
[0137]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基可为8-9元稠环杂环基。
[0138]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基可为8-9元桥环杂环基。
[0139]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基中的杂原子数可为1个或2个。
[0140]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为n。
[0141]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被c
1-6
烷基所取代时，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为甲基。
[0142]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被c
1-6
氘代烷基所取代时，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为甲基。
[0143]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被c
1-6
氘代烷基所取代时，所述的c
1-6
氘代烷基可为三氘代甲基。
[0144]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被c
3-12
环烷基所取代时，所述的c
3-12
环烷基可为c
3-6
环烷基，又可为环丙基。
[0145]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被c
3-12
环烷基所取代时，所述的c
3-12
环烷基可为饱和单环。
[0146]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被3-12元杂环基所取代时，所述的3-12元杂环基可为6元单环杂环基。
[0147]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被3-12元杂环基所取代时，所述的3-12元杂环基中的杂原子数可为1个或2个。
[0148]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被3-12元杂环基所取代时，所述的3-12元杂环基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为n。
[0149]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被被一个或多个c
1-6
烷基所取代的3-12元杂环基所取代时，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为甲基。
[0150]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被被一个或多个c
1-6
烷基所取代的3-12元杂环基所取代时，所述的3-12元杂环基可为6元单环杂环基。
[0151]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被被一个或多个c
1-6
烷基所取代的3-12元杂环基所取代时，所述的3-12元杂环基中的杂原子数可为1个或2个。
[0152]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r1里，所述的3-12元杂环基进一步被被一个或多个c
1-6
烷基所取代的3-12元杂环基所取代时，所述的3-12元杂环基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为n。
[0153]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
1-1
和r
1-2
里，所述的c
1-6
烷基可为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基，又可为甲基。
[0154]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
1-1
和r
1-2
里，所述的3-12元杂环基可为6元单环杂环基。
[0155]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
1-1
和r
1-2
里，所述的3-12元杂环基中的杂原子数可为1个或2个。
[0156]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
1-1
和r
1-2
里，所述的3-12元杂环基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为n。
[0157]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
1-1
和r
1-2
里，所述的被一个或多个c
1-6
烷
基取代的3-12元杂环基可为6元单环杂环基。
[0158]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
1-1
和r
1-2
里，所述的被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基中的杂原子数可为1个或2个。
[0159]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的r
1-1
和r
1-2
里，所述的被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基中的杂原子可为n、o和s中的一种或多种，又可为n。
[0160]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r1可为f、cl、br、可为f、cl、br、
[0161]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r1可为可为
[0162]
在本发明的一个优选实施方式中，x为2；
[0163]
其中一个r1为氢、氘、卤素或氰基；
[0164]
另一个r1为
[0165]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的通式(i)所示的化合物不含有氘，其中的氢均为自然丰度下的氢。
[0166]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的通式(i)所示的化合物里的杂环基为饱和杂环。
[0167]
本发明还提供了一种优选方案，所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如通式(v)所示：
[0168][0169]
其中：
[0170]
x2为n或cr1；
[0171]
l1选自-o-、-ch
2-、-och
2-、-ch2o-、-ch2ch
2-或-och2ch
2-；
[0172]
r、r1和r2如通式(i)所定义。
[0173]
本发明还提供了一种优选方案，所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如通式(vi)所示：
[0174][0175]
其中：
[0176]
环a、环b、l、x、r、r1、r2、x和y如通式(i)所定义；z为0～10的整数。
[0177]
本发明还提供了一种优选方案，所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如通式(vii)所示：
[0178][0179]
其中：
[0180]
环a、环b、l、x、y、r、r1、r2、x和y如通式(i)所定义；z为0～10的整数。
[0181]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l为l
1-l
2-l
3-l4；其中，l4选自键、-o-、-ch
2-、-och
2-、-c(＝o)nh-或-och2ch
2-；l1～l3如通式(i)所定义。
[0182]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l1选自-o-、-ch
2-、-och
2-、-ch2o-、-ch2ch
2-或-och2ch
2-。
[0183]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l2为-o-或-ch
2-。
[0184]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l3为-ch
2-。
[0185]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l1选自-o-、-ch
2-、-och
2-、-ch2o-、-ch2ch
2-或-och2ch
2-；所述l2为-o-或-ch
2-；所述l3为-ch
2-。
[0186]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l4选自键、-o-、-ch
2-、-och
2-、-c(＝o)nh-、-nhc(＝o)-或-och2ch
2-。
[0187]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x1为n、ch或cf。
[0188]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x2为n、ch、cf或ccn。
[0189]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x3为n、ch或cf。
[0190]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x4为n或ch。
[0191]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x1为n、ch或cf；所述x2为n、ch、cf或ccn；所述x3为n、ch或cf；所述x4为n或ch。
[0192]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r选自甲基、乙基、异丙基、环丙基或烯丙基，所述的甲基、乙基、异丙基、环丙基和烯丙基，任选地，进一步被氟、甲基、乙基和环丙基中的一个或多个取代基所取代。
[0193]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r选自，所述r选自
[0194]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基或c(＝o)nr
1-1r1-2
，所述的氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基、5-10元杂芳基氧基、被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基和被一个或多个氰基取代的c
1-6
烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0195]r1-1
和r
1-2
各自独立地选自氢、c
1-6
烷基、3-12元杂环基或被一个或多个c
1-6
烷基取代的3-12元杂环基；
[0196]
或者，任意两个r1以及它们所在的原子一起形成c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基，所述的c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、任选取代的3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代。
[0197]
在本发明的进一步优选实施方式中，所述r1选自卤素、6-10元含氮杂环基、c(＝o)nh-6-10元含氮杂环基或c(＝o)n(ch3)-6-10元含氮杂环基，所述的6-10元杂环基，任选地，进一步被羟基、氧代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
羟烷基、氰基取代的c
1-3
烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基和c
1-3
烷基取代的3-8元杂环基中的一个或多个取代基所取代。
[0198]
在本发明的进一步优选实施方式中，所述r1选自卤素、6-10元含氮杂环基、c(＝o)nh-6-10元含氮杂环基或c(＝o)n(ch3)-6-10元含氮杂环基，所述的6-10元含氮杂环基，任选地，进一步被羟基、氧代基、甲基、氘代甲基、环丙基、氧杂环丁烷基和n-甲基哌嗪基中的一个或多个取代基所取代。
[0199]
在本发明的进一步优选实施方式中，所述r1选自f、cl、br、
[0200]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r2选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基、5-10元杂芳基氧基或-n＝s(＝o)(ch3)2，所述的氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基，任选地，进一步被氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0201]
或者，任意两个r2以及它们所在的原子一起形成c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基，所述的c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代。
[0202]
在本发明的进一步优选实施方式中，所述r2选自氢、异丙基、氧杂环丁烷基或-n＝s(＝o)(ch3)2，所述的异丙基和氧杂环丁烷基，任选地进一步被羟基或氰基中的一个或多个取代基所取代。
[0203]
在本发明的进一步优选实施方式中，所述r2选自h、选自h、
[0204]
本发明的目的在于提供一种通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中通式(i)所示的结构如下：
[0205][0206]
其中，
[0207]
x为ch或n；
[0208]
环a选自c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0209]
环b选自c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0210]
r选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、-(ch2)nra、-(ch2)nora、-(ch2)nsra、-(ch2)nnrbra、-o(ch2)nnrdrc、-(ch2)nc(o)ra、-(ch2)nc(o)nrbra、-(ch2)nnrbc(o)ra、-(ch2)ns(o)mra、-(ch2)ns(o)mnrbra、-(ch2)ns(o)(＝nrb)ra、-(ch2)nn＝s(＝o)rbra或-(ch2)nnrbs(o)mra，所述的c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0211]
ra和rb各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳
基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0212]
l为连接基团，选自l1、l
1-l2、l
1-l
2-l3或l
1-l
2-l
3-l4；
[0213]
l1、l2、l3和l4各自独立地选自键、-o-、-s-、-nr
e-、-c(o)、-s(o)
m1-、-(crcrd)
n1-、-(chrc＝chrd)
n1-、-c≡c-、-nre(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
o(crfrg)
n2-、-s(crcrd)
n1
s(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
o(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
nre(crfrg)
n2-、-o(crcrd)
n1
nre(crfrg)
n2
o-、-(crcrd)
n1
s(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
(crfrg)
n2-、-(chrc＝chrd)
n1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
(c≡c)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
c(o)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
s(o)
m1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
nrec(o)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
nres(o)
m1
(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
c(o)nre(rfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
s(o)(＝nre)(crfrg)
n2-、-(crcrd)
n1
n＝s(＝o)re(crfrg)
n2-或-(crcrd)
n1
s(o)
m1
nre(crfrg)
n2-；
[0214]
rc、rd、re、rf和rg各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0215]
或者，rc、rd、re、rf和rg任意两个以及它们所在的原子链接形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0216]
r1各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0217]
或者，任意两个r1以及它们所在的原子一起形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12
元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0218]
r2选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基或5-14元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0219]
或者，任意两个r2以及它们所在的原子一起链接形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
羟烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基、c
3-12
环烷基氧基、3-12元杂环基氧基、c
6-14
芳基氧基和5-14元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；且
[0220]
x和y各自独立地为0～10的整数；
[0221]
n、n1和n2各自独立地为0～10的整数；
[0222]
m和m1各自独立地为0、1或2。
[0223]
在本发明的一个优选实施方式中，所述环a苯基、5-6元单环杂芳基、c
5-10
双环稠环烷基、5-10元双环稠杂环基或8-10元双稠环杂芳基。
[0224]
本发明还提供了一种优选方案，所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如通式(ii)所示：
[0225][0226]
其中：
[0227]
x1、x2和x3各自独立地选自n或cr1；
[0228]
x4为n或cr2；
[0229]
l、x、r、r1和r2如通式(i)所定义。
[0230]
本发明还提供了一种优选方案，所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如通式(iii)所示：
[0231][0232]
其中：
[0233]
x1、x2和x3各自独立地选自n或cr1；
[0234]
x4为n或cr2；
[0235]
l1～l3、r、r1和r2如通式(i)所定义。
[0236]
本发明还提供了一种优选方案，所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如通式(iv)所示：
[0237][0238]
其中：
[0239]
x1、x2和x3各自独立地选自n或cr1；
[0240]
x4为n或cr2；
[0241]
r、r1和r2如通式(i)所定义。
[0242]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l1选自-o-、-ch
2-、-och
2-、-ch2o-、-ch2ch
2-或-och2ch
2-。
[0243]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l2为-o-或-ch
2-。
[0244]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l3为-ch
2-。
[0245]
在本发明的一个优选实施方式中，所述l4选自键、-o-、-ch
2-、-och
2-、-c(＝o)nh-、-nhc(＝o)-或-och2ch
2-。
[0246]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x1为n、ch或cf。
[0247]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x2为n、ch、cf或ccn。
[0248]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x3为n、ch或cf。
[0249]
在本发明的一个优选实施方式中，所述x4为n或ch。
[0250]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基或-ch2ra，所述的氨基、c
1-3
烷
基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0251]
ra选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基，所述的氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代。
[0252]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基，所述的氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0253]
或者，任意两个r1以及它们所在的原子一起形成c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基，所述的c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代。
[0254]
在本发明的一个优选实施方式中，所述r2选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基或5-10元杂芳基氧基，所述的氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基，任选地，进一步被氢、氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代；
[0255]
或者，任意两个r2以及它们所在的原子一起形成c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基，所述的c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选地，进一步被氘、卤素、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、氧代基、硫代基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
氘代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷硫基、c
1-3
羟烷基、c
2-3
烯基、c
2-3
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、c
3-8
环烷基氧基、3-8元杂环基氧基、c
6-10
芳基氧基和5-10元杂芳基氧基中的一个或多个取代基所取代。
[0256]
本发明还提供了一种优选方案，如上所示的各通式化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，所述的如上所示的各通式化合物具体选自如下化合物：
[0257]
[0258]
[0259]
[0260]
[0261]
[0262][0263]
本发明还涉及一种制备通式(iii)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐的方法，包含以下步骤：
[0264][0265]
式(iiia)所示化合物经由分子内反应，包括但不限于mitsunobu反应得到式(iii)所示化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐；
[0266]
r、r1、r2、x1、x2、x3、x4、l1、l2和l3如通式(iii)所定义。
[0267]
本发明还涉及一种式(iiia)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如下：
[0268][0269]
r、r1、r2、x1、x2、x3、x4、l1、l2和l3如通式(iii)所定义。
[0270]
本发明还提供了一种优选方案，如上所示的式(iiia)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，所述的如上所示的通式化合物具体选自如下化合物：
[0271]
[0272]
[0273]
[0274]
[0275]
[0276][0277]
本发明还涉及一种式(iiia)所示的中间体化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其具体结构如下：
[0278][0279]
r、r1、r2、x1、x2、x3、x4、l1、l2和l3如通式(iii)所定义。
[0280]
本发明还涉及一种通式(iiia)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，包含以下步骤，
[0281]
[0282]
式(iiia-1)所示的化合物与式(iiia-2)所示化合物经亲核取代反应或碳-氮偶联反应得到式(iiia-3)所示化合物；优选的，所述的碳-氮偶联反应选自ullmann偶联反应、buchwald-hartwig偶联反应或chan-lam偶联反应等；
[0283]
式(iiia-3)所示化合物与式(iiia-4)所示化合物直接或其中的一个经进一步氧化反应转化为可离去基团后，再经亲核取代反应到式(iiia-5)所示化合物；或者，式(iiia-3)所示化合物与式(iiia-4)所示化合物经碳-氮偶联反应得到式(iiia-5)所示化合物；优选的，所述的碳-氮偶联反应选自ullmann偶联反应、buchwald-hartwig偶联反应或chan-lam偶联反应等；
[0284]
式(iiia-5)所示化合物经脱除保护基后得到式(iiia)所示化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐；
[0285]
其中：
[0286]
z1选自氨基、卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；优选氨基、氟、氯、溴、甲硫基、甲磺酰基、亚甲基磺酰基、硼酸或频呐醇硼酸酯等；
[0287]
z2选自卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；优选氟、氯、溴、甲硫基、甲磺酰基、亚甲基磺酰基、硼酸或频呐醇硼酸酯等；
[0288]
z3选自氨基、卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；优选氨基、氟、氯、溴、甲硫基、甲磺酰基、亚甲基磺酰基、硼酸或频呐醇硼酸酯等；
[0289]
pg1和pg2为羟基保护基，各自独立地选自甲氧甲基(mom)、四氢-2h-吡喃-2-基(thp)、对甲氧基苄基(pmb)或叔丁基二苯基硅基(tbdps)等；
[0290]
z1和z3中至少一个为氨基，其中一个为氨基时，另一个为卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；
[0291]
r、r1、r2、x1、x2、x3、x4、l1、l2和l3如通式(iii)所定义。
[0292]
本发明还涉及一种通式(iiia)所示的中间体化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，包含以下步骤，
[0293][0294]
式(iiia-1)所示的化合物与式(iiia-2)所示化合物经亲核取代反应或碳-氮偶联
反应得到式(iiia-3)所示化合物；优选的，所述的碳-氮偶联反应选自ullmann偶联反应、buchwald-hartwig偶联反应或chan-lam偶联反应等；
[0295]
式(iiia-3)所示化合物与式(iiia-4)所示化合物直接或其中的一个经进一步氧化反应转化为可离去基团后，再经亲核取代反应到式(iiia-5)所示化合物；或者，式(iiia-3)所示化合物与式(iiia-4)所示化合物经碳-氮偶联反应得到式(iiia-5)所示化合物；优选的，所述的碳-氮偶联反应选自ullmann偶联反应、buchwald-hartwig偶联反应或chan-lam偶联反应等；
[0296]
式(iiia-5)所示化合物经脱除保护基后得到式(iiia)所示化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐；
[0297]
其中：
[0298]
z1选自氨基、卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；优选氨基、氟、氯、溴、甲硫基、甲磺酰基、亚甲基磺酰基、硼酸或频呐醇硼酸酯等；
[0299]
z2选自卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；优选氟、氯、溴、甲硫基、甲磺酰基、亚甲基磺酰基、硼酸或频呐醇硼酸酯等；
[0300]
z3选自氨基、卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；优选氨基、氟、氯、溴、甲硫基、甲磺酰基、亚甲基磺酰基、硼酸或频呐醇硼酸酯等；
[0301]
pg1和pg2为羟基保护基，各自独立地选自甲氧甲基(mom)、四氢-2h-吡喃-2-基(thp)、对甲氧基苄基(pmb)或叔丁基二苯基硅基(tbdps)等；
[0302]
z1和z3中至少一个为氨基，其中一个为氨基时，另一个为卤素、c
1-6
烷硫基、磺酰基、亚磺酰基、硼酸或硼酸酯；
[0303]
r、r1、r2、x1、x2、x3、x4、l1、l2和l3如通式(iii)所定义。
[0304]
本发明还涉及一种药物组合物，其包含如上所述各通式化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
[0305]
本发明还涉及一种药物组合物，其包含有治疗疾病效剂量的如上所述各通式化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
[0306]
本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或，上述药物组合物在制备治疗由wee1介导的疾病的药物中的用途。
[0307]
本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或，上述药物组合物在制备治疗细胞异常生长的药物中的用途。
[0308]
本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或，上述药物组合物在制备治疗肿瘤或癌症的药物中的用途。
[0309]
本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或，上述药物组合物在制备wee1抑制剂中的用途。
[0310]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的wee1抑制剂对plk1具有选择性。
[0311]
在本发明的一个优选实施方式中，所述的wee1抑制剂在体外使用。
[0312]
另一方面，本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物治疗由wee1介导的疾病的方法。
[0313]
另一方面，本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物治疗细胞异常生长的方法。
[0314]
另一方面，本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物治疗肿瘤或癌症的用途。
[0315]
另一方面，本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物治疗由wee1介导的疾病的用途。
[0316]
另一方面，本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物治疗细胞异常生长的用途。
[0317]
另一方面，本发明进一步涉及如上所述通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物治疗肿瘤或癌症的用途。
[0318]
发明的详细说明
[0319]
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的技术术语有下述含义。
[0320]
术语“烷基”指饱和脂肪链烃中缺少一个氢的烃基，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至8个碳原子的烷基，更优选1至6个碳原子的烷基，最优选1至3个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基，本发明优选甲基、乙基、异丙基、叔丁基、卤代烷基、氘代烷基、烷氧基取代的烷基和羟基取代的烷基。
[0321]
术语“亚烷基”是指烷基的一个氢进一步被取代的基团，即饱和脂肪链烃中缺少两个氢的烃基，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至8个碳原子的亚烷基，更优选1至6个碳原子的亚烷基，最优选1至3个碳原子的亚烷基。非限制性实例包括“亚甲基”(-ch
2-)、“亚乙基”(-(ch2)
2-)、“亚正丙基”(-(ch2)
3-)、“亚异丙基”(-(ch)(ch3)(ch2)-)、“亚正丁基”(-(ch2)
4-)等。
[0322]
术语“烯基”指至少含有两个碳原子和至少包含一个碳-碳双键组成的不饱和脂肪族烃基团，其为包含2至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有2至8个碳原子的烯基，更
优选2至6个碳原子的烯基，最优选2至4个碳原子的烯基。例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。
[0323]
术语“炔基”指至少含有两个碳原子和至少包含一个碳-碳三键组成的不饱和脂肪族炔基团，其为包含2至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有2至8个碳原子的炔基，更优选2至6个碳原子的炔基，最优选2至4个碳原子的炔基。例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等。炔基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。
[0324]
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环非芳香环状烃取代基，环烷基环原子包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等，优选环丙基、环丁基、环己基、环戊基和环庚基；多环环烷基包括螺环烷基、稠环烷基和桥环烷基等。
[0325]
术语“螺环烷基”指含有5至20个碳原子，单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，其整体不具有芳香性(即整体不能形成共轭的π电子系统)，但可以有一个环或多个环具有共轭的π电子系统。螺环烷基环原子优选为6至14个碳原子，更优选为7至10个碳原子。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
[0326]
等；
[0327]
术语“稠环烷基”指含有5至20个碳原子，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，其整体不具有芳香性(即整体不能形成共轭的π电子系统)，但可以有一个环或多个环具有共轭的π电子系统。稠环烷基环原子优选为6至14个碳原子，更优选为7至10个碳原子。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
[0328][0329]
等。
[0330]
术语“桥环烷基”指含有5至20个碳原子，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，其整体不具有芳香性(即整体不能形成共轭的π电子系统)，但可以有一个环或多个环具有共轭的π电子系统。桥环烷基环原子优选为
6至14元个碳原子，更优选为7至10个碳原子。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
[0331]
等。
[0332]
所述环烷基环可以稠合于环烷基或芳基环上，其中与母体结构连接在一起的环可以为环烷基或芳基环，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
[0333]
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环非芳香环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、磷、硼或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-o-o-、-o-s-或-s-s-的环部分，其余环原子为碳。杂环基优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；更优选包含3至8个环原子；最优选包含3至8个环原子。单环杂环基的非限制性实例包括氧杂环丁烷、四氢吡喃基、氮杂环庚烷基、吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、吡啶酮基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基等，优选氧杂环丁烷、四氢呋喃基、四氢吡喃基、氮杂环庚烷基、哌啶基、吡啶酮基和哌嗪基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基等；其中涉及到的螺环、稠环和桥环的杂环基任选与其他基团通过单键相连接，或者通过环上的任意两个或者两个以上的原子与其他环烷基、杂环基、芳基和杂芳基进一步并环连接。
[0334]
术语“螺杂环基”指含有5至20个环原子，单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子选自氮、氧、磷、硼或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，其整体不具有芳香性(即整体不能形成共轭的π电子系统)，但可以有一个环或多个环具有共轭的π电子系统。螺杂环基环原子优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
[0335][0336]
等。
[0337]
术语“稠杂环基”指含有5至20个环原子，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，其中一个或多个环原子选自氮、氧、磷、硼或s(o)m(其中m
是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其一个或多个环可以含有一个或多个双键，其整体不具有芳香性(即整体不能形成共轭的π电子系统)，但可以有一个环或多个环具有共轭的π电子系统。稠杂环基环原子优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
[0338][0339]
等。
[0340]
术语“桥杂环基”指含有5至20个环原子，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、磷、硼或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，其整体不具有芳香性(即整体不能形成共轭的π电子系统)，但可以有一个环或多个环具有共轭的π电子系统。桥杂环基环原子优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
[0341][0341]
等。
[0342]
所述杂环基环可以稠合于环烷基、杂环基、芳基或杂芳基环上，其中与母体结构连接在一起的环可以为环烷基、杂环基、芳基环或杂芳基环，其非限制性实例包括：
[0343]
等。
[0344]
杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自氧代基(＝o)、硫代基(＝s)、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0345]
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至20元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，芳基环原子优选为6至14元，更优选为6至10元，例如苯基和萘基。更优选苯基。
[0346]
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0347]
术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至20个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫或氮等。杂芳基分为单环杂芳基和多环杂芳基；杂芳基环原子优选为5至14元，更优选为5至10元；单环杂芳基环原子优选为5元或6元，例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、吡咯基、三唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基、哒嗪基、噁二唑基等，优选吡啶基、噁唑基、异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、噻二唑基和噁二唑基。多环杂芳基一般指所述杂芳基环稠合于芳基或杂芳基形成多环稠杂芳基，其中与母体结构连接在一起的环可以为芳基环或杂芳基环，多环稠杂芳基优选双环稠杂芳基，双环稠杂芳基非限制性实例包括：
[0348][0348]
等。
[0349]
杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0350]
术语“卤代烷基”指烷基中的氢被一个或多个卤素取代的基团，其中烷基的定义如
上所述。卤代烷基的非限制性实例包括：一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、1-氟乙基、2-氟乙基、1,1-二氟乙基、1,2-二氟乙基等，卤代烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0351]“羟烷基”指烷基中的氢被一个或多个羟基取代的基团，其中烷基如上所定义。羟烷基的非限制性实例包括：羟甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、1,2-二羟基乙基、1-羟基丙基、1-羟基丁基等，羟烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0352]
术语“烷氧基”指-o-(烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基，烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0353]
术语“烷硫基”指-s-(烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷硫基的非限制性实例包括：甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基，烷硫基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0354]“羟基”指-oh。
[0355]“卤素”指氟(f)、氯(cl)、溴(br)或碘(i)。
[0356]“氨基”指-nh2。
[0357]“氰基”指-cn。
[0358]“硝基”指-no2。
[0359]“羧基”指-c(o)oh。
[0360]“thf”指四氢呋喃。
[0361]“ea”指乙酸乙酯。
[0362]“meoh”指甲醇。
[0363]“dmf”指n,n-二甲基甲酰胺。
[0364]“dipea”指二异丙基乙胺。
[0365]“dead”指偶氮二甲酸二乙酯。
[0366]“m-cpba”指间氯过氧苯甲酸。
[0367]“tfa”指三氟乙酸。
[0368]“mecn”指乙晴。
[0369]“dma”指n,n-二甲基乙酰胺。
[0370]“et2o”指乙醚。
[0371]“dce”指1,2二氯乙烷。
[0372]“dipea”指n,n-二异丙基乙胺。
[0373]“nbs”指n-溴代琥珀酰亚胺。
[0374]“nis”指n-碘代丁二酰亚胺。
[0375]“cbz-cl”指氯甲酸苄酯。
[0376]“pd2(dba)
3”指三(二亚苄基丙酮)二钯。
[0377]“pd/c”指钯炭。
[0378]“dppf”指1,1
’‑
双二苯基膦二茂铁。
[0379]“hatu”指2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲六氟磷酸酯。
[0380]“khmds”指六甲基二硅基胺基钾。
[0381]“lihmds”指双三甲基硅基胺基锂。
[0382]“meli”指甲基锂。
[0383]“n-buli”指正丁基锂。
[0384]“nabh(oac)
3”指三乙酰氧基硼氢化钠。
[0385]“x选自a、b、或c”、“x选自a、b和c”、“x为a、b或c”、“x为a、b和c”等不同用语均表达了相同的意义，即表示x可以是a、b、c中的任意一种或几种。
[0386]
本发明所述的氢均可被其同位素氘所取代，本发明涉及的实施例化合物中的任一氢也均可被氘取代。
[0387]
本发明的所有化合物，如所示化合物结构与名称有冲突，以结构表示为准。
[0388]“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
[0389]“取代的”指基团中的一个或多个氢，优选为5个，更优选为1～3个氢彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
[0390]“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
[0391]“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。
具体实施方式
[0392]
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0393]
化学合成方法:
[0394]
在此描述的化合物可以利用商业化可获得的或者由已知实验方法可制备的起始原料，通过有机合成领域技术人员掌握的多种方法进行合成。本发明的化合物可以采用下述方法，或合成有机化学领域中已知的合成方法，结合本领域技术人员所掌握的方法变化
来合成。优选的合成方法包括但不限于以下描述。有关各个反应步骤的更详细说明，请参阅下面的“实施例”部分。
[0395]
如无特殊说明，合成步骤中的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自西格玛奥德里奇(sigma-aldrich co.ltd)、毕得医药(bide pharmatech ltd.)、韶远化学(accela chembio co.ltd)等公司。
[0396]
在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气氛下进行，溶剂为干燥溶剂，反应温度单位为摄氏度。
[0397]
分析方法和仪器设备：
[0398]
用于实施例表征的lcms数据是通过带有dad检测器的agilent 1260-6120/6125msd系统获得的。测试方法包括：
[0399]
lcms方法a：
[0400]
柱子：halo c18 4.6
×
30mm,2.7μm
[0401]
柱温：45℃
[0402]
流动相：溶剂a为0.025％三氟乙酸+99.975％水；溶剂b为0.025％三氟乙酸+99.975％乙腈
[0403]
流速：1.8ml/min
[0404]
梯度：在0.8分钟内，溶剂b由5％至95％线性递增，然后在95％下保持0.8分钟，最后溶剂b在5％下保持到2.0分钟
[0405]
lcms方法b：
[0406]
柱子：halo c18 4.6
×
30mm,2.7μm
[0407]
柱温：45℃
[0408]
流动相：溶剂a为0.1％甲酸+99.9％水；溶剂b为0.1％甲酸+99.9％乙腈
[0409]
流速：1.8ml/min
[0410]
梯度：在0.8分钟内，溶剂b由5％至95％线性递增，然后在95％下保持0.8分钟，最后溶剂b在5％下保持到2.0分钟
[0411]
lcms方法c：
[0412]
柱子：c18 4.6
×
50mm,2.5μm
[0413]
柱温：40℃
[0414]
流动相：溶剂a为0.05％氨水+99.5％水；溶剂b为100％乙腈
[0415]
流速：1.8ml/min
[0416]
梯度：在2.5分钟内，溶剂b由5％至95％线性递增到1分钟，然后在95％下保持到2分钟，最后溶剂b从2.05分钟开始保持5％到2.5分钟
[0417]
用于实施例表征的nmr数据是通过bruker傅立叶变换光谱仪(1h nmr:400mhz)获得的。数据以化学位移(多重性、氢原子数目)的形式给出。化学位移以内标四甲基硅烷(δ
四甲基硅烷
＝0ppm)和/或参考溶剂峰来进行指定，所述参考溶剂峰在1h nmr光谱中对于氘代二甲基亚砜(dmso-d6)为2.49ppm，对于氘代甲醇(cd3od)为3.30ppm，对于氘代乙腈(cd3cn)为1.94，对于氘代氯仿(cdcl3)为7.24ppm。
[0418]
纯化方法：
[0419]
实施例和中间体的纯化通过硅胶色谱法、反相硅胶色谱法和/或超临界流体色谱
法(sfc)进行。硅胶色谱法一般是以硅胶或预装硅胶柱为载体、石油醚/乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇等体系为洗脱剂；反相硅胶色谱法一般是以c18硅胶柱为载体，使用uv检测器(214nm和254nm)和制备型lcms进行检测，流动相包括乙腈/水(0.1％甲酸)、乙腈/水(0.1％三氟乙酸)和乙腈/水(0.1％氨水)等体系。超临界流体色谱法(sfc)一般是采用不同类型的柱子作为载体，以co2/含0.2％nh3的甲醇(7m氨甲醇溶液)等体系为流动相。
[0420]
实施例1
[0421]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-7-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环七蕃-2
3-酮
[0422][0423]
步骤1：2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-硝基苯基)-乙基-1-醇(1a)
[0424]
室温下，向2-(2-氟-5-硝基苯基)乙酸(2.00g,10.0mmol)的乙腈(20ml)溶液中依次加入1-甲基哌嗪(2.01g,20.1mmol)和碳酸钾(2.77g,20.1mmol)，所得混合物在60℃下搅拌16小时。待反应结束后，反应液过滤，滤液减压浓缩后，残余物用1m盐酸调ph至6-7并减压浓缩。所得残余物溶于四氢呋喃(15ml)中，室温下加入硼烷二甲硫醚的四氢呋喃溶液(32ml,64.0mmol,2m)，所得混合物在60℃下搅拌2小时。待反应结束后，用饱和碳酸钠溶液(15ml)淬灭，然后用乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取。合并的有机相用饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(dcm:meoh＝100:1-10:1)得到化合物1a(600mg,产率：18％)。
[0425]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝266.0.
[0426]
步骤2：1-甲基-4-(4-硝基-2-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙基)苯基)哌嗪(1b)
[0427]
室温下，向化合物1a(400mg,1.50mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中依次加入3,4-二氢-2h-吡喃(253mg,3.01mmol)和对甲苯磺酸吡啶盐(378mg,1.50mmol)，所得混合物在回流下搅拌16小时。待反应结束后，反应液减压浓缩并用水(15ml)稀释，乙酸乙酯(15ml
×
3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(dcm:meoh＝100:1-10:1)纯化得到化合物1b(150mg,产率：28％)。
[0428]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝349.9.
[0429]
步骤3：4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙基)苯胺(1c)
[0430]
室温下，向化合物1b(140mg,0.40mmol)的甲醇(5ml)溶液中加入钯碳(14mg)，所得混合物在氢气氛围中于室温下搅拌16小时。待反应结束后，反应液过滤并浓缩，所得粗产物经硅胶色谱法(dcm:meoh＝100:1-10:1,含1％三乙胺)纯化后得到化合物1c(100mg,产率：78％)。
[0431]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝319.9.
[0432]
步骤4：2,6-二溴-4-(甲氧甲氧基)吡啶(1d)
[0433]
在0℃下，向2,6-二溴-4-羟基吡啶(500mg,1.97mmol)的四氢呋喃(5ml)溶液中加入氢化钠(79mg,1.97mmol,60％wt)，所得混合物在0℃下搅拌1小时后，加入溴甲基甲基醚(371mg,2.97mmol)并在0℃下继续搅拌1小时。待反应结束后，加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭反应，乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取。合并的有机相用饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:dcm＝20:1-3:1)纯化得到化合物1d(500mg,产率：77％)。
[0434]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝297.7.
[0435]
步骤5：1-(6-溴-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)乙基-1-酮(1e)
[0436]
室温下，向化合物1d(3.00g,10.10mmol)的1,4-二氧六环(15ml)溶液中依次加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(3.44g,9.52mmol)、二(三苯基膦)氯化钯(ii)(709mg,1.01mol)和三乙基胺(2.41g,23.80mmol)，然后混合物在氮气保护中于80℃下搅拌12小时。待反应结束后，将反应液冷却至室温，加入1m稀盐酸(20ml)并在室温下搅拌2小时。反应结束后加入饱和氟化钾溶液(20ml)淬灭，乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并的有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝10:3)纯化得到化合物1e(1.40g,产率：53％)。
[0437]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝259.9.
[0438]
步骤6：2-(6-溴-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)丙基-2-醇(1f)
[0439]
在0℃下，向化合物1e(300mg,2.69mmol)的四氢呋喃(10ml)溶液中缓慢滴加甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(2.7ml,8.07mmol,3mol/l)，所得混合物在0℃下搅拌2小时。待反应完全后，加入冰水(20ml)淬灭反应并用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并的有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝20:1-5:1)纯化得到化合物1f(480mg,产率：58％)。
[0440]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝275.8.
[0441]
步骤7：2-烯丙基-6-甲硫基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(1g)
[0442]
室温下，向4-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(64.00g,0.28mol)和1-烯丙基肼-1-羧酸叔丁酯(50.00g,0.29mol)的四氢呋喃(500ml)溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(89.00g,
0.29mol)，所得混合物在氮气保护中于75℃下搅拌72小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得残余物分散于乙酸乙酯(500ml)中，过滤并将滤液减压浓缩。所得残余物溶于三氟乙酸(150ml)并在70℃下搅拌1小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得残余物在0℃下溶于乙醇(300ml)中并加入6m氢氧化钠溶液(550ml)，所得混合物在25℃下搅拌15分钟。待反应结束后，反应液ph值用1m盐酸溶液调至6后用二氯甲烷(500ml
×
3)萃取，合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗产物分散于二氯甲烷(64ml)和石油醚(640ml)的混合溶剂中并搅拌30分钟，过滤，所得滤饼经干燥得到化合物1g(40.00g,产率：66％)。
[0443]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝222.9.
[0444]
步骤8：2-烯丙基-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-甲硫基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(1h)
[0445]
室温下，向化合物1g(402mg,1.81mmol)和化合物1f(500mg,1.81mmol)的1,4-二氧六环(20ml)溶液中加入碳酸钾(625mg,4.52mmol)、碘化亚铜(344mg,1.81mmol)和n,n'-二甲基-1,2-乙二胺(239mg,2.72mmol)。所得混合物于95℃下在氮气氛围中搅拌16小时。待反应结束后，反应液降至室温，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝3:7)纯化得到化合物1h(400mg,产率：55％)。
[0446]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝417.8.
[0447]
步骤9：2-烯丙基-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(1i)
[0448]
室温下，向化合物1h(130mg,0.31mmol)的甲苯(3ml)溶液中加入间氯过氧苯甲酸(65mg,0.38mmol)，所得混合物在25℃下搅拌1小时。然后加入化合物1c(100mg,0.31mmol)和n,n-二异丙基乙胺(309mg,2.39mmol)，所得混合物在45℃下继续搅拌16小时。待反应完全后，反应液减压浓缩，所得残余物通过硅胶色谱法(dcm:meoh＝100:1-10:1,含1％三乙胺)纯化得到化合物1i(150mg,产率：49％)。
[0449]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝688.9.
[0450]
步骤10：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(2-羟乙基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(1j)
[0451]
将化合物1i(150mg,0.21mmol)溶于三氟乙酸和水(5ml,10/1)混合溶液中，所得混合物在25℃下反应0.5小时。待反应完全后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过制备hplc(色谱柱：gemini c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸)；梯度：15-50％；流速：20ml/min)纯化并冻干后得到化合物1j(45mg,产率：35％)。
[0452]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝560.7.
[0453]
步骤11：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-7-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯并环庚烷-2
3-酮(实施例1)
[0454]
室温下，向三丁基膦(163mg,0.80mmol)的甲苯(5ml)溶液中依次加入偶氮二甲酸二叔丁酯(185mg,0.80mmol)的甲苯(2ml)溶液和化合物1j(45mg,0.080mmol)，所得混合物在微波100℃下反应2小时。待反应完全后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过制备hplc(色谱柱：gemini c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸)；梯度：15-45％；流
速：20ml/min)纯化并冻干得到实施例1(9mg,产率：20％)。
[0455]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝542.8.
[0456]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.66(s,1h),8.92(s,1h),8.45(s,1h),8.19(s,1h),7.86(d,j＝9.0hz,1h),7.69(s,1h),7.08(s,1h),7.03(s,1h),5.63-5.71(m,1h),5.02(d,j＝10.3hz,1h),4.85(dd,j＝17.1,1.2hz,1h),4.69(d,j＝5.6hz,2h),4.22(t,j＝6.4hz,2h),3.81(s,2h),3.57(d,j＝10.7hz,2h),3.39(t,j＝8.0hz,2h),2.94-3.00(m,2h),2.64(t,j＝12.6hz,2h),2.32(s,3h),1.39(s,6h).
[0457]
实施例2
[0458]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮
[0459][0460]
步骤1：2-(2-(2-氟-5-硝基苯氧基)乙氧基)四氢-2h-吡喃(2a)
[0461]
在0℃下，向2-氟-5-硝基苯酚(1.00g,6.37mmol)、2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙基-1-醇(0.94mg,6.44mmol)和三苯基膦(2.23g,8.50mmol)的四氢呋喃(20ml)溶液中滴加偶氮二甲酸二乙酯(3.36g,19.3mmol)，所得混合物在60℃下搅拌2小时。待反应完全后，反应液直接减压浓缩，所得粗产物通过制备hplc(柱子：c18 spherical 40-60μm,100a,80g；流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸)，0-100％,30min；流速：50ml/min)纯化并冻干得到化合物2a(1.60g,产率：78％)。
[0462]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝286.3.
[0463]
步骤2：1-甲基-4-(4-硝基-2-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(2b)
[0464]
室温下，向化合物2a(1.30g,4.56mmol)的二甲基亚砜(20ml)溶液中加入1-甲基哌嗪(0.92g,9.19mmol)和碳酸钾(1.27g,9.19mmol)，所得混合物在120℃下搅拌2小时。待反应结束后，反应体系降到室温，加入水(100ml)稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。合并的有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过制备hplc(柱子：c18 spherical 40-60μm,100a,120g；流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸)，0-100％,
30min；流速：50ml/min)纯化并冻干后得到化合物2b(1.40g,产率：74％)。
[0465]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝365.9.
[0466]
步骤3：4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)苯胺(2c)
[0467]
室温下，向化合物2b(1.30g,3.88mmol)的四氢呋喃和水混合溶液(5.5ml,10/1)中加入钯碳(1.27g)，所得混合物在氢气氛围中于室温下搅拌16小时。待反应结束后，反应液过滤并浓缩，所得粗产物经硅胶色谱法(dcm:meoh＝10:1)纯化后得到化合物2c(700mg,产率：59％)。
[0468]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝335.9.
[0469]
步骤4：1-(6-溴-4-羟基吡啶-2-基)乙基-1-酮(2d)
[0470]
室温下，向2,6-二溴-4-羟基吡啶(2.50g,9.95mmol)的1,4-二氧六环(40ml)溶液中依次加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(3.00g,8.29mmol)、二(三苯基膦)氯化钯(ii)(582mg,0.83mmol)和三乙基胺(2.09g,20.7mmol)，然后混合物在氮气保护中于80℃下搅拌12小时。待反应结束后，将反应液冷却至室温，加入1m稀盐酸(20ml)并在室温下搅拌2小时。反应结束后加入饱和氟化钾溶液(20ml)淬灭，反应液减压浓缩，加入水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。合并的有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝2:1)纯化得到化合物2d(1.23g,产率：69％)。
[0471]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝216.0.
[0472]
步骤5：2-溴-4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶(2e)
[0473]
在氮气保护下，将化合物2d(1.20g,5.60mmol)的四氢呋喃(15ml)溶液降温到-78℃后，加入甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(3.7ml,8.88mmol,2.4mol/l)并在-78℃下搅拌1小时。待反应完全后，加入水淬灭反应并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。合并的有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝1:1)纯化得到化合物2e(0.40g,产率：31％)。
[0474]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝232.4.
[0475]
步骤6：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-(甲硫基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(2f)
[0476]
室温下，向化合物2e(350mg,1.56mmol)和化合物1g(365mg,1.64mmol)的1,4-二氧六环(5ml)溶液中加入碳酸钾(522mg,3.78mmol)、碘化亚铜(300mg,1.58mmol)和n,n'-二甲基-1,2-乙二胺(208mg,2.36mmol)。所得混合物于95℃下在氮气氛围中搅拌16小时。待反应结束后，反应液降至室温，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过硅胶色谱法(dcm:meoh＝20:1)纯化得到化合物2f(210mg,产率：29％)。
[0477]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝374.1.
[0478]
步骤7：2-烯丙基-1-(4-(叔丁基二苯基硅氧基)-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-甲硫基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(2g)
[0479]
室温下，向化合物2f(100mg,0.27mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中依次加入三乙基胺(108mg,1.07mmol)、4-二甲氨基吡啶(6.54mg,0.05mmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(294mg,1.07mmol)。所得混合物于30℃下搅拌16小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝5:1)纯化得到化合物2g(150mg,产率：82％)。
[0480]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝611.7.
[0481]
步骤8：2-烯丙基-1-(4-(叔丁基二苯基硅氧基)-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-甲基亚硫酰基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(2h)
[0482]
室温下，向化合物2g(45mg,0.074mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中加入间氯过氧苯甲酸(26mg,0.15mmol)。所得混合物于室温下搅拌16小时。反应结束后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝1:99)纯化得到化合物2h(35mg,产率：68％)。
[0483]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝627.6.
[0484]
步骤9：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(2-羟基乙氧基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(2i)
[0485]
室温下，向化合物2h(55mg,0.088mmol)和化合物2c(88mg,0.26mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(57mg,0.44mmol)，所得混合物于40℃下搅拌16小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得残余物溶于盐酸的乙醇溶液(5ml,2m)中，所得混合物于25℃下搅拌30分钟。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过制备hplc(柱子：c18 spherical 40-60μm,100a,40g；流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸),0-100％,30min；流速：30ml/min)纯化并冻干后得到化合物2i(40mg,产率：80％)。
[0486]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝577.4.
[0487]
步骤10：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮(实施例2)
[0488]
在0℃下，向化合物2i(22mg,0.038mmol)和三苯基膦(201mg,0.77mmol)的四氢呋喃(20ml)溶液中滴加偶氮二甲酸二乙酯(13mg,0.075mmol)，所得混合物于60℃下搅拌16小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过制备hplc(柱子：c18 spherical 40-60μm,100a,20g；流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸)，0-100％,30min；流速：20ml/min)纯化并冻干后得到实施例2(2mg,产率：9％)。
[0489]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝559.3.
[0490]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.39(s,1h),8.84(s,1h),8.28(s,1h),8.18(s,1h),7.78(d,j＝2.1hz,1h),7.03(d,j＝2.1hz,1h),6.88(d,j＝0.8hz,2h),5.61(dd,j＝17.0,10.2hz,1h),4.97(dd,j＝10.2,1.3hz,1h),4.82(dd,j＝17.1,1.4hz,1h),4.77(d,j＝6.0hz,2h),4.51(dd,j＝9.4,3.6hz,2h),4.32(dd,j＝9.8,3.5hz,2h),2.94
–
2.86(m,4h),2.44
–
2.41(m,4h),2.19(s,3h),1.42(s,6h).
[0491]
实施例3
[0492]22-异丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮
[0493][0494]
步骤1：(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯(3a)
[0495]
室温下，向(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)氨基甲酸叔丁酯(9.00g,34.2mmol)和异丙醇(6.16g,103mmol)的四氢呋喃(100ml)溶液中依次加入三苯基膦(13.4g,51.3mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(8.93g,51.3mmol)，所得混合物在50℃下搅拌12个小时。待反应完全后，反应液用水(100ml)稀释，乙酸乙酯(200ml
×
2)萃取，合并的有机相经饱和食盐水洗涤，过滤，滤液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝1:1)纯化得到化合物3a(4.50g,产率：43％)。
[0496]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝305.1.
[0497]
步骤2：1-(异丙基)肼-1-基甲酸叔丁酯(3b)
[0498]
室温下，向化合物3a(4.50g,14.8mmol)的乙醇(100ml)溶液中加入水合肼(3.40g,69.0mmol)，所得混合物在80℃下搅拌2小时。待反应完全后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝3:1)纯化得到化合物3b(2.00g,产率：68％)。
[0499]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝175.1.
[0500]
步骤3：4-(2-(叔丁氧羰基)-2-异丙基肼基)-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(3c)
[0501]
室温下，向4-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(3.98g,11.4mmol)和化合物3b(2.0g,11.4mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(3.68g,28.5mmol)，所得混合物在氮气保护中于75℃下搅拌12小时。待反应完全后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝1:1)纯化得到化合物3c(3.00g,产率：70％)。
[0502]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝370.9.
[0503]
步骤4：2-异丙基-6-甲硫基-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(3d)
[0504]
室温下，将化合物3c(3.00g,8.11mmol)溶于三氟乙酸和二氯甲烷(30ml,1/2)的混合溶液中，所得混合物在室温下搅拌4小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得残余物在0℃下溶于乙醇和水(20ml,2/1)的混合溶液中，然后加入氢氧化钠(1.36g,33.6mmol)，所得
混合物在室温下搅拌30分钟。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(dcm:meoh＝10:1)纯化得到化合物3d(1.00g,产率：55％)。
[0505]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝225.0.
[0506]
步骤5：2-异丙基-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-甲硫基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(3e)
[0507]
化合物3e(600mg,产率：52％)的合成步骤参见实施例1的步骤8。其中以化合物3d替代化合物1g。
[0508]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝419.9.
[0509]
步骤6：2-异丙基-1-[6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基]-6-甲基亚硫酰基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(3f)
[0510]
化合物3f(300mg,产率：69％)的合成步骤参见实施例2的步骤8。其中以化合物3e替代化合物2g。
[0511]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝436.1.
[0512]
步骤7：2-异丙基-1-[6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基]-6-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(2-(四氢-2h-吡喃-2-基)氧基乙氧基)苯基)氨基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(3g)
[0513]
室温下，向化合物3f(200mg,0.46mmol)和化合物2c(462mg,1.38mmol)的二氯甲烷(4ml)溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(178mg,1.38mmol)，所得混合物于室温下搅拌12小时。待反应结束后，加入水(5ml)稀释，二氯甲烷(10ml
×
2)萃取。合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝3:1)纯化得到化合物3g(150mg,产率：44％)。
[0514]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝707.3.
[0515]
步骤8：2-异丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(2-羟基乙氧基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(3h)
[0516]
室温下，将化合物3g(150mg,0.21mmol)溶于盐酸的乙醇溶液(5ml,2m)中，所得混合物于25℃下搅拌3小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得粗产物通过制备型hplc(柱子：c18 spherical40-60μm,100a,40g；流动相：乙腈/水(含0.1％甲酸),0-100％,30min；流速：40ml/min)纯化，冻干后得到化合物3h(100mg,产率：80％)。
[0517]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝578.8.
[0518]
步骤9：2
2-异丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮(实施例3)
[0519]
实施例3(20mg,产率：41％)的合成步骤参见实施例2的步骤10。其中以化合物3h替代化合物2i。
[0520]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝560.9.
[0521]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.37(s,1h),8.79(s,1h),8.25(s,1h),8.13(s,1h),7.79(s,1h),7.09(d,j＝1.9hz,1h),6.91(s,1h),5.32(s,1h),4.57
–
4.53(m,2h),4.39
–
4.35(m,2h),4.23
–
4.15(m,1h),2.96(s,4h),2.50
–
2.46(s,4h),2.24(s,3h),1.45(s,12h).
[0522]
实施例4
[0523]22-(2,2-二氟乙基)-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮
[0524][0525]
步骤1：(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)(2,2-二氟乙基)氨基甲酸叔丁酯(4a)
[0526]
室温下，向(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)氨基甲酸叔丁酯(4.50g,17.0mmol)和2-溴-1,1-二氟乙烷(3.72g,26.0mmol)的乙腈(50ml)溶液中依次加入四丁基碘化铵(1.26g,30.0mmol)和碳酸钾(4.71g,34.0mmol)，所得混合物在50℃下搅拌14小时。待反应完全后，反应液用水(50ml)稀释，乙酸乙酯(100ml
×
2)萃取，合并的有机相经饱和食盐水洗涤，过滤，滤液减压浓缩，所得粗产物通过硅胶色谱法(pe:ea＝1:1)纯化得到化合物4a(4.50g,产率：79％)。
[0527]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝326.1.
[0528]
步骤2：1-(2,2-二氟乙基)肼-1-羧酸叔丁酯(4b)
[0529]
化合物4b(1.80g,产率：65％)的合成步骤参见实施例3的步骤2。其中以化合物4a替代化合物3a。
[0530]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝196.1.
[0531]
步骤3：4-(2-(叔丁氧羰基)-2-(2,2-二氟乙基)肼基)-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(4c)
[0532]
化合物4c(3.00g,产率：82％)的合成步骤参见实施例3的步骤3。其中以化合物4b替代化合物3b。
[0533]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝392.1.
[0534]
步骤4：2-(2,2-二氟乙基)-6-甲硫基-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(4d)
[0535]
化合物4d(1.00g,产率：59％)的合成步骤参见实施例3的步骤4。其中以化合物4c
替代化合物3c。
[0536]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝246.9.
[0537]
步骤5：2-(2,2-二氟乙基)-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-甲硫基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(4e)
[0538]
化合物4e(800mg,产率：55％)的合成步骤参见实施例1的步骤8。其中以化合物4d替代化合物1g。
[0539]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝441.9.
[0540]
步骤6：2-(2,2-二氟乙基)-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-甲基亚硫酰基-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(4f)
[0541]
化合物4f(300mg,产率：70％)的合成步骤参见实施例2的步骤8。其中以化合物4e替代化合物2g。
[0542]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝457.8.
[0543]
步骤7：2-(2,2-二氟乙基)-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(4g)
[0544]
化合物4g(200mg,产率：40％)的合成步骤参见实施例3的步骤7。其中以化合物4f替代化合物3f。
[0545]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝729.3.
[0546]
步骤8：2-(2,2-二氟乙基)-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(2-羟基乙氧基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(4h)
[0547]
化合物4h(100mg,产率：58％)的合成步骤参见实施例3的步骤8。其中以化合物4g替代化合物3g。
[0548]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝600.9.
[0549]
步骤9：2
2-(2,2-二氟乙基)-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮(实施例4)
[0550]
实施例4(16.8mg,产率：17％)的合成步骤参见实施例2的步骤10。其中以化合物4h替代化合物2i。
[0551]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝582.8.
[0552]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.49(s,1h),8.92(s,1h),8.18(s,2h),7.85(s,1h),7.08(s,1h),6.93(s,1h),6.40
–
6.13(m,1h),5.32(s,1h),4.65(t,j＝15.2hz,2h),4.55(s,2h),4.39(s,2h),2.97(s,4h),2.50(s,4h),2.26(s,3h),1.43(s,6h).
[0553]
实施例5
[0554]22-环丙基甲基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮
2-基)氧基)乙氧基)苯胺(6c)
[0569]
化合物6c(300mg,产率：68％)的合成步骤参见实施例1的步骤3。其中以化合物3b替代化合物1b。
[0570]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝361.9.
[0571]
步骤4：2-烯丙基-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(8-甲基-3,8-二氮杂二环(3.2.1)辛烷-3-基)-3-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(6d)
[0572]
化合物6d(160mg,产率：43％)的合成步骤参见实施例1的步骤9。其中以化合物6c替代化合物1c。
[0573]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝730.7.
[0574]
步骤5：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(2-羟基乙氧基)-4-(8-甲基-3,8-二氮杂二环(3.2.1)辛烷-3-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并(3,4-d)嘧啶-3-酮(6e)
[0575]
化合物6e(50mg,产率：20％)的合成步骤参见实施例1的步骤10。其中以化合物6d替代化合物1i。
[0576]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝602.8.
[0577]
步骤6：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(8-甲基-3,8-二氮杂二环(3.2.1)辛烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-7-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮(实施例6)
[0578]
实施例6(12.9mg,产率：33％)的合成步骤参见实施例1的步骤11。其中以化合物6e替代化合物1j。
[0579]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝584.7.
[0580]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.06(s,1h),8.79
–
8.75(m,1h),8.12(t,j＝2.4hz,1h),7.79
–
7.78(m,1h),7.06(d,j＝2.0hz,1h),6.87
–
6.79(m,2h),5.72
–
5.58(m,1h),4.99(d,j＝10.3hz,1h),4.89(d,j＝17.2hz,1h),4.78(d,j＝6.0hz,2h),4.50(t,j＝6.3hz,2h),4.30(m,2h),4.05(s,1h),3.65(d,j＝10.2hz,0.5h),3.52(s,0.5h),3.16(dd,j＝10.1,2.2hz,1h),2.94
–
2.89(m,0.5h),2.78(dd,j＝10.1,2.3hz,0.5h),2.63(s,1h),2.56(dd,j＝10.5,2.6hz,1h),2.32(m,2.6h),2.14(s,1.4h),1.95(m,1h),1.84
–
1.73(m,2h),1.63(m,1h),1.44(s,6h).
[0581]
实施例7
[0582]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(9-甲基-3,9-二氮螺环[5.5]十一烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯杂环八蕃-2
3-酮23-酮
[0595][0596]
实施例9(3.2mg)的合成步骤参见实施例6步骤2-6。其中以(r)-1,3-二甲基哌嗪替代化合物6a。
[0597]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝572.7.
[0598]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.46(s,1h),8.89(s,1h),8.21(d,j＝2.2hz,1h),8.14(s,1h),7.83(d,j＝2.0hz,1h),7.07(d,j＝2.1hz,1h),7.01(d,j＝8.7hz,1h),6.91(dd,j＝8.6,2.2hz,1h),5.59
–
5.69(m,1h),5.30(s,1h),5.01(d,j＝11.4hz,1h),4.88(s,1h),4.84(s,1h),4.75
–
4.79(m,1h),4.65
–
4.62(m,1h),4.43
–
4.35(m,3h),3.47(s,1h),3.06(s,1h),2.68(s,1h),2.54(s,1h),2.42(s,1h),2.24(s,3h),2.13(s,1h),1.45(d,j＝1.8hz,6h),0.83(d,j＝6.3hz,3h).
[0599]
实施例10
[0600]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
6-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并(3,4-d)嘧啶-1(2,4),4(3,5)-二吡啶杂环八蕃-2
3-酮
[0601][0602]
步骤1：1-(3-甲氧基-5-硝基吡啶-2-基)-4-甲基哌嗪(10a)
[0603]
室温下，向2-氯-3-甲氧基-5-硝基吡啶(1.00g,5.31mmol)的四氢呋喃(150ml)中加入1-甲基哌嗪(542mg,5.42mmol)和三乙胺(1.07g,10.63mmol)，所得混合物在氮气保护中于60℃下搅拌5小时。待反应结束后，反应液减压浓缩，所得残余物经硅胶色谱法(dcm:meoh＝10:1)纯化得到化合物10a(1.20g,产率：90％)。
[0604]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝252.9.
[0605]
步骤2：2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-硝基-3-羟基吡啶(10b)
[0606]
室温下，将化合物10a(1.20g,4.76mmol)和吡啶盐酸盐(5g)混合，所得混合物在180℃下搅拌16小时。待反应体系冷却后，于0℃下分批加入饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)中，调节ph至8。然后混合液用乙酸乙酯(30ml
×
2)萃取，合并的有机相经无水硫酸钠干燥、过滤，滤液减压浓缩。所得残余物用硅胶色谱法(流动相：二氯甲烷/甲醇；梯度：0％-30％,30min；流速：30ml/min)纯化得到化合物10b(1.00g,产率：88％)。
[0607]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝238.9.
[0608]
步骤3：1-甲基-4-(5-硝基-3-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)吡啶-2-基)哌嗪(10c)
[0609]
室温下，向化合物10b(700mg,2.94mmol)的四氢呋喃(30ml)中依次加入2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙基-1-醇(1.28g,8.82mmol)和三正丁基膦(1.19g,5.88mmol)，之后将体系降温至0℃。在0℃下缓慢向体系中滴加偶氮二甲酸二叔丁基酯(1.35g,5.88mmol)，然后将体系用氮气置换保护并于60℃下反应6小时。待反应完全后，反应液用饱和食盐水(30ml)稀释并用乙酸乙酯(30ml
×
2)萃取，合并的有机相用无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩。所得残余物用硅胶色谱法(流动相：二氯甲烷/甲醇；梯度：0％-20％,30min；流速：30ml/min)纯化得到化合物10c(500mg,产率：46％)。
[0610]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝366.9.
[0611]
步骤4：6-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)吡啶-3-胺(10d)
[0612]
化合物10d(336mg,产率：74％)的合成步骤参见实施例1的步骤3。其中以化合物10c替代化合物1b。
[0613]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝336.9.
[0614]
步骤5：2-烯丙基-1-(6-(2-羟基丙烷-2-基)-4-(甲氧甲氧基)吡啶-2-基)-6-((6-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)吡啶-3-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并(3,4-d)嘧啶-3-酮(10e)
[0615]
化合物10e(270mg,产率：48％)的合成步骤参见实施例1的步骤9。其中以化合物10d替代化合物1c。
[0616]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝706.0.
[0617]
步骤6：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-6-((5-(2-羟基乙氧基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并(3,4-d)嘧啶-3-酮(10f)
[0618]
化合物10f(80mg,产率：36％)的合成步骤参见实施例1的步骤10。其中以化合物10e替代化合物1i。
[0619]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝578.2.
[0620]
步骤7：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
6-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并(3,4-d)嘧啶-1(2,4),4(3,5)-二吡啶杂环八蕃-2
3-酮(实施例10)
[0621]
实施例10(2.1mg,产率：9％)的合成步骤参见实施例1的步骤11。其中以化合物10f
替代化合物1j。
[0622]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝559.7.
[0623]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.61(s,1h),8.92(s,1h),8.58(s,1h),7.93(d,j＝2.1hz,1h),7.81(d,j＝2.0hz,1h),7.07(d,j＝2.1hz,1h),5.64
–
5.62(m,1h),5.32(s,1h),5.00(d,j＝10.1hz,1h),4.92
–
4.76(m,3h),4.66
–
4.51(m,2h),4.44
–
4.32(m,2h),3.21
–
2.83(m,4h),2.65
–
2.55(m,4h),2.53(s,3h),1.45(s,6h).
[0624]
实施例11-13的合成参考实施例6，表征数据如下表所示：
[0625][0626]
实施例17
[0627]
(s)-2
2-烯丙基-4
4-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-4
5-氟-1
6-(2-羟基丙-2-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0628][0629]
步骤1：2-(2-(2,3-二氟-5-硝基苯氧基)乙氧基)四氢-2h-吡喃(17a)
[0630]
在氮气保护下，向三苯基膦(1.00g,0.038mol)的四氢呋喃(35ml)溶液中依次加入偶氮二甲酸二乙酯(6.64g,0.038mol)、2,3-二氟-5-硝基苯酚(2.00g,0.011mol)和2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙-1-醇(1.67g,0.014mol)。反应混合物在60℃下搅拌2小时。待反应完成后，浓缩反应混合物。所得残余物通过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝100：16)纯化得到化合物17a(1.50g,产率：42％)。
[0631]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.83(s,1h),7.73(s,1h),4.73
–
4.69(m,1h),4.40
–
4.37(m,2h),4.19
–
4.11(m,1h),3.92
–
3.88(m,2h),3.59
–
3.52(m,1h),1.85
–
1.41(m,6h).
[0632]
步骤2：(2s)-1-(2-氟-4-硝基-6-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)苯基)-2,4-二甲基哌嗪(17b)
[0633]
在氮气保护下，向n,n-二甲基乙酰胺(40ml)中依次加入化合物17a(1500mg,4.95mmol)、(s)-1,3-二甲基哌嗪(827mg,4.95mmol)和碳酸钾(1367mg,13.95mmol)。将反应混合物在120℃下搅拌3小时。待反应结束后，将反应混合物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取。合并后的有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩后所得残余物通过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)纯化得到化合物17b(800mg,产率：50％)。
[0634]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝398.1
[0635]
步骤3：4-((s)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)-3-氟-5-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)苯胺(17c)
[0636]
在氢气氛围下，向化合物17b(800mg,2.01mmol)的甲醇(20ml)溶液中加入pd/c(800mg)。将该反应混合物在0℃下搅拌1.5小时。待反应结束后，将反应混合物过滤，浓缩后得到化合物17c(650mg,产率：88％)。
[0637]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝368.2
[0638]
步骤4：2-烯丙基-6-((4-((s)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)-3-氟-5-(2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)苯基)氨基)-1-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(17d)
[0639]
在室温下，向化合物1h(0.40g,0.96mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入3-氯氧基苯甲酸(181mg,1.05mmol)。将反应混合物在25℃搅拌1小时后，加入化合物17c(352mg,0.96mmol)和n,n-二异丙基乙胺(309mg,2.39mmol)。将反应混合物在45℃下搅拌16小时。待反应结束后，将反应混合物浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝100：8)纯化得到化合物17d(150mg,产率：21％)。
[0640]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝737.3
[0641]
步骤5：(s)-2-烯丙基-6-((4-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-3-氟-5-(2-羟基乙氧基)苯基)氨基)-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(17e)
[0642]
在室温下，将化合物17d(150mg,0.20mmol)溶于盐酸的乙醇溶液(10ml)中，并将反应液在25℃下搅拌1小时。待反应结束后，将反应混合物浓缩，所得残余物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：40％-50％；流速：20ml/min)纯化得到化合物17e(20mg,产率：16％)。
[0643]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝609.2
[0644]
步骤6：(s)-2
2-烯丙基-4
4-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-4
5-氟-1
6-(2-羟丙-2-基)-22,2
3-二氢-21h-5,8-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并(3,4-d)嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例17)
[0645]
向化合物17e(20mg,0.033mmol)的四氢呋喃(2ml)溶液中，依次加入三苯基膦(51mg,0.19mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(34mg,0.20mmol)。将反应混合物在50℃下反应5小时。待反应完全后，浓缩混合液。所得残余物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：5％-50％；流速：20ml/min)纯化得到实施例17(4.6mg,产率：33％)。
[0646]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝591.2
[0647]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.57(s,1h),8.94(s,1h),8.12(s,1h),7.87(s,1h),7.07(s,1h),6.77(d,j＝12.4hz,1h),5.65
–
5.59(m,1h),5.34(s,1h),5.04(d,j＝10.2hz,1h),4.88
–
4.80(m,3h),4.57(t,2h),4.35(t,2h),2.79
–
2.63(m,4h),2.12(s,3h),2.10
–
2.08(m,1h),1.79(t,j＝10.2hz,1h)1.45(s,6h),0.73(d,j＝6.2hz,3h).
[0648]
实施例18的合成参考实施例17，实施例26-31的合成参考实施例6，表征数据如下表所示：
[0649]
[0650]
[0651][0652][0653]
实施例32
[0654]
(s)-4
4-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2
2-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-22,23-二氢-21h-8-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0655][0656]
步骤1：2-氟丙基-2-烯-1-醇(32a)
[0657]
在0℃下，向含有氢化铝锂(19.97g,0.53mol)乙醚(10ml)中加入三氯化铝(23.38g,0.18mol)，并将该反应混合物搅拌30分钟。向上述反应体系中加入2-氟丙-2-烯酸甲酯(18.24g,0.18mol)，并将反应混合物在0℃氩气氛围下搅拌2小时。待反应完成后，向反应混合物中加入水(100ml)和氢氧化钠水溶液(15％,100ml)。将所得混合物使用布氏漏斗过滤，并用乙醚(100ml)洗涤滤饼。收集滤液并用无水硫酸钠干燥，过滤除去固体，将所得滤液在0℃下减压浓缩得到化合物32a(6.0g,产率：75％)。
[0658]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝77.0
[0659]
步骤2：((1,3-二氧亚基-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)(2-氟丙-2-烯基)氨基)甲烷酸-2-甲基丙-2-基酯(32b)
[0660]
在0℃下，将化合物32a(3.00g,0.039mol)和((1,3-二氧亚基-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)氨基)甲烷酸-2-甲基丙-2-基酯(5.19g,0.020mol)的四氢呋喃(30ml)溶液中加入dead(6.86g,0.039mol)和三苯基膦(10.33g,0.039mol)。将反应混合物在室温搅拌12小时。待反应完成后，向反应体系中加入水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(100ml
×
2)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤除去固体。将合并后的滤液减压浓缩，所得残留物经过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝5：2)得到化合物32b(6.2g,产率：46％)。
[0661]
lc-ms(esi),m/z:[m+na]
+
＝343.1
[0662]
步骤3：(1-(2-氟丙-2-烯基)乙氮基)甲烷酸-2-甲基丙-2-基酯(32c)
[0663]
将化合物32b(1.70g,5.31mmol)和水合肼(575mg,6.90mmol)溶于乙醇(10ml)，并将该反应混合物在70℃下搅拌1小时。待反应结束后，将反应混合物过滤，并将滤液减压浓缩。将所的残留物溶解于石油醚-四氢呋喃(石油醚：四氢呋喃＝1：1)的混合溶剂并再次过滤。所得滤液经过减压浓缩得到化合物32c(600mg,59％)。
[0664]
lc-ms(esi),m/z:[m
–
t-bu+h]
+
＝135.1
[0665]
步骤4：4-(2-(2-氟丙-1-烯-3-基)-2-(((2-甲基丙-2-基)氧基)羰基)乙氮基)-2-(甲基硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(32d)
[0666]
在0℃下，将化合物32c(130mg,0.68mmol)、三乙基胺(137mg,1.36mmol)和4-氯-2-(甲基巯基)嘧啶-5-羧酸乙酯(474mg,2.04mmol)的乙醇(1.5ml)溶液搅拌12小时。待反应结束后，向反应体系中加入水(15ml)，并用乙酸乙酯(15ml
×
2)萃取。合并有机相后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤除去固体。将合并后的滤液减压浓缩，所得残留物经过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝100％至0％)得到化合物32d(160mg,产率：56％)。
[0667]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝387.1
[0668]
步骤5：2-(2-氟丙-2-烯-1-基)-6-(甲基巯基)-1h-吡唑[3,4-d]嘧啶-3-酮(32e)
[0669]
将化合物32d(90mg,0.23mmol)的三氟乙酸/二氯甲烷溶液(v/v＝1/1)在室温下搅拌1小时。待反应完成后，将反应液减压浓缩，并将所的残留物加入氢氧化钠溶液(6mol/l，乙醇：水＝1：1)中室温搅拌1小时。向反应混合物中加入水(15ml)稀释，并用乙酸乙酯(15ml
×
2)萃取。合并有机相后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤除去固体。将合并后的滤液减压浓缩，所得残留物经过硅胶柱色谱(二氯甲烷：甲醇＝0％～20％)得到化合物32e(45mg,产率：79％)。
[0670]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝241.0
[0671]
步骤6：2-(2-氟丙-2-烯-1-基)-1-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-6-(甲基巯基)吡唑[3,4-d]嘧啶-3-酮(32f)
[0672]
向化合物32e(50mg,0.21mmol)的甲苯溶液(0.5ml)中加入2-(6-溴-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)丙-2-醇(57mg,0.21mmol)、n,n-二甲基-1,2-乙二胺(36mg,0.42mmol)、碘化亚铜(40mg,0.21mmol)和碳酸铯(135mg,0.42mmol)，并将该反应混合物在90℃氩气氛围下搅拌12小时。向反应混合物中加入水(1.5ml)稀释，并用乙酸乙酯(1.5ml
×
2)萃取。合并有机相后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤除去固体。将合并后的滤液减压浓缩，所得残留物经过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝100％～90％)得到化合物32f(8mg,产率：9％)。
[0673]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝436.1
[0674]
步骤7：3-(5-氨基-2-((2s)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烷-1-醇(32g)
[0675]
在氢气氛围下，向3-(2-((2s)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)-5-硝基苯基)丙烷-1-醇(300mg,1.02mmol)的四氢呋喃/水(10ml)中加入pd/c(50mg)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。待反应完成后，将反应混合物浓缩得到化合物32g(200mg,产率:74％)。
[0676]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝264.1
[0677]
步骤8：6-((4-((2s)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)-3-(3-羟丙基)苯基)氨基)-2-(2-氟丙基-2-烯-1-基)-1-(6-(2-羟丙基-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)吡唑[3,4-d]嘧啶-3-酮(32h)
[0678]
在室温下，向化合物32f(100mg,0.23mmol)的甲苯(5ml)溶液中加入3-氯氧基苯甲酸(44mg,0.25mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时后加入32g(121mg,0.46mmol)和n,n-二异丙基乙胺(89mg,0.69mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌16小时。待反应完成后，浓缩反应液。所得残余物通过硅胶柱色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：8)纯化得到化合物32h(120mg,
产率:80％)。
[0679]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝651.2
[0680]
步骤9：6-((4-((2s)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)-3-(3-羟丙基)苯基)氨基)-2-(2-氟丙基-2-烯-1-基)-1-(6-(2-羟丙基-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)吡唑[3,4-d]嘧啶-3-酮(32i)
[0681]
室温下，将化合物32h(140mg,0.22mmol)溶于盐酸的乙醇溶液(10ml)中，并将反应混合物在25℃下搅拌1小时。待反应完成后，浓缩反应混合物。所得残余物通过制备hplc(色谱柱：gemini-c18150
×
21.2mm，5μm；流动相：乙腈-水(0.05％氨水)；梯度：10
–
50％；流速：20ml/min)纯化得到化合物32i(90mg,产率:69％).
[0682]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝607.3
[0683]
步骤10：(s)-4
4-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2
2-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-22,2
3-二氢-21h-8-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-苯并环八烷-2
3-酮(实施例32)
[0684]
向化合物32i(80mg,0.13mmol)的四氢呋喃(8ml)溶液中，依次加入三苯基膦(277mg,1.06mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(184mg,1.06mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌2小时。待反应完全后，减压浓缩反应混合物。所得残余物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(10ml
×
3)萃取。合并有机相后减压浓缩，所得残余物通过制备hplc(色谱柱型号：gemini-c18 150
×
21.2mm，5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：10-50％；流速：20ml/min)纯化得到实施例32(13.6mg,产率:17％)。
[0685]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝589.2
[0686]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.10(s,1h),8.83(s,1h),8.19(s,1h),7.52
–
7.34(m,2h),7.16(s,1h),6.94(s,1h),6.73(d,j＝8.6hz,2h),5.86(d,j＝0.8hz,1h),5.31(s,1h),4.81(d,j＝16.0hz,2h),4.64(dd,j＝16.9,3.5hz,1h),4.23(dd,j＝50.0,3.5hz,1h),2.78
–
2.72(m,1h),2.68
–
2.60(m,1h),2.41
–
2.30(m,2h),2.21
–
2.03(m,11h),1.84(m,1h),1.71
–
1.58(m,2h),0.92(d,j＝6.1hz,3h).
[0687]
实施例33
[0688]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0689]
[0690][0691]
步骤1：4-(5-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丁基-1-醇(33a)
[0692]
在氢气氛围下，向4-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-硝基苯基)丁-3-炔-1-醇(300mg,1.04mmol)的四氢呋喃(5ml)和水(0.5ml)的溶液中加入pd/c(10wt％,100mg)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。待反应完成后，过滤反应液并收集滤液。将滤液减压浓缩得到化合物33a(200mg，产率：73％)。
[0693]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝264.1
[0694]
步骤2：2-烯丙基-6-((3-(4-羟基丁基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)氨基)-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)-吡啶-2-基)-1,2-二氢-3h-吡唑[3,4-d]嘧啶-3-酮(33b)
[0695]
向化合物1h(158mg,0.379mmol)的甲苯溶液中(5ml)加入m-cpba(73mg,0.42mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时。然后在反应体系中加入化合物33a(100mg,0.38mmol)和二异丙基胺(98mg,0.76mmol)，并将反应混合物在40℃搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物浓缩，所得残余物经过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝93：7)纯化得到产物33b(120mg，产率：50％)。
[0696]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝633.3
[0697]
步骤3：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(4-羟基丁基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[3,4-d]嘧啶-3-酮(33c)
[0698]
将化合物33b(120mg,0.19mmol)的盐酸-乙醇溶液(2ml)在室温下搅拌1小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经过制备hplc(色谱柱：gemini-c18 150
×
21.2mm，5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：25
–
40％；流速：20ml/min)纯化得到化合物33c(40mg，产率：36％)。
[0699]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝589.2
[0700]
步骤4：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例33)
[0701]
在氮气氛围下，将化合物33c(40mg,0.068mmol)和三苯基膦(89mg,0.34mmol)的四氢呋喃溶液(3ml)中冷却至0℃，随后加入dead(59mg,0.34mmol)。将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经过制备hplc(色谱柱：gemini-c18 150
×
21.2mm，5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：10
–
40％；流速：20ml/min)纯化得到实施例33(17.5mg，产率：45％)。
[0702]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝571.2
[0703]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.13(s,1h),8.81(s,1h),8.14(s,0.6h),8.05(d,j＝2.5hz,1h),7.26(d,j＝2.1hz,1h),7.10(d,j＝2.1hz,1h),7.05(d,j＝8.6hz,1h),6.97
(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),5.65(ddt,j＝16.2,10.3,6.0hz,1h),5.26(s,1h),4.98(dd,j＝10.2,1.3hz,1h),4.81(dd,j＝17.1,1.4hz,1h),4.58(d,j＝5.9hz,2h),4.27(t,j＝6.3hz,2h),2.73(t,j＝4.6hz,4h),2.65
–
2.62(m,2h),2.54(s,3h),2.48
–
2.42(m,4h),2.24(s,3h),1.83
–
1.65(m,4h),1.37(s,6h).
[0704]
实施例34
[0705]22-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-6，9-双氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0706][0707]
步骤1：2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-硝基苯甲醛(34a)
[0708]
向2-氯-5-硝基苯甲醛(7.6g,0.041mmol)和碳酸钾(11g,0.082mol)的n,n-二甲基乙酰胺溶液(70ml)中加入1-甲基哌嗪(8.2g,0.082mol)，并将该反应混合物在90℃搅拌4小时。待反应完成后，将反应混合物用水(300ml)稀释，乙酸乙酯萃取(200ml
×
3)。将合并后的有机相用水(200ml)和饱和食盐水(200ml)洗涤，无水硫酸钠干燥后过滤。将滤液减压浓缩，所得固体用石油醚和乙酸乙酯的混合溶液(石油醚：乙酸乙酯＝4：1，20ml)洗涤后得到化合物34a(9.2g，产率：90％)。
[0709]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝250.1
[0710]
步骤2：(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-硝基苯基)甲醇(34b)
[0711]
在0℃下，向化合物34a(5.0g,0.020mol)的甲醇溶液(40ml)中加入硼氢化钠(3.0g,0.080mol)。将该反应混合物在室温下搅拌2小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝100：5)纯化得到化合物34b(4.5g，产率：89％)。
[0712]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝252.1
[0713]
步骤3：1-甲基-4-(4-硝基-2-((2-(吡喃-2-基氧基)乙氧基)甲基)苯基)哌嗪(34c)
[0714]
在0℃下，向化合物34b(4400mg,17.51mol)的n,n-二甲基甲酰胺溶液(60ml)中加入氢化钠(60％wt,1050mg,26.26mol)。将该反应混合物在0℃搅拌2小时。向反应体系中加入2-(2-氯乙氧基)吡喃(5765mg,35.02mmol)。将该反应混合物在30℃搅拌16小时。待反应结束后，将反应混合物用水(50ml)稀释，乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。有机相合并后经过水(20ml)稀释，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥后过滤。将滤液减压浓缩，所得残留物经过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝100：3)纯化得到化合物34c(2200mg，产率：28％)。
[0715]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝350.1
[0716]
步骤4：4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-((2-(吡喃-2-基)乙氧基)甲基)苯胺(34d)
[0717]
在0℃下，向化合物34c(1000mg,2.86mmol)和氯化镍(1366mg,10.54mmol)的乙醇溶液(40ml)中加入硼氢化钠(399mg,10.51mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物过滤，并将滤液减压浓缩。所得残留物经硅胶柱色谱(二氯甲烷：甲醇＝10：1)纯化得到化合物34d(520mg,产率：56％)。
[0718]
步骤5：2-(2-氟丙基-2-烯-1-基)-1-(6-(-2-羟基丙基-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(4-甲基吡啶-1-基)-3-((2-吡喃-2-基氧基)乙氧基)甲基)苯基)氨基)吡唑基[3,4-d]嘧啶-3-酮(34e)
[0719]
在0℃下，向化合物32f(236mg,0.52mmol)的甲苯溶液(10ml)中加入3-氯过氧苯甲酸(113mg,0.65mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。在反应体系中加入化合物34d(190mg,0.54mmol)和二异丙基胺(211mg,1.63mmol)。将该反应混合物在50℃搅拌16小时。待反应结束后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)淬灭，乙酸乙酯(10ml
×
3)萃取。有机相合并后经过水(10ml)稀释，饱和食盐水(10ml)洗涤，无水硫酸钠干燥后过滤。将滤液减压浓缩，所得残留物经过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝100：6)纯化得到化合物34e(300mg，产率：67％)。
[0720]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝737.1
[0721]
步骤6：2-(2-氟丙基-2-烯-1-基)-1-(4-羟基-6-(-2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-((2-羟基乙氧基)甲基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)吡唑基[3,4-d]嘧啶-3-酮(34f)
[0722]
将化合物34e(250mg,0.34mmol)的盐酸-乙醇(10ml)溶液在室温下搅拌2小时。待反应结束后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经过制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：5％-60％；流速：20ml/min)纯化得到化合物34f(170mg,产率：82％)。
[0723]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝609.1
[0724]
步骤7：2
2-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙烷-2-基)-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-双氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例34)
[0725]
在氮气氛围下，将化合物34f(75mg,0.12mmol)、偶氮二甲酸二乙酯(128mg,0.74mmol)和三苯基膦(194mg,0.74mmol)加入四氢呋喃(12ml)中。将该反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应结束后，将反应混合物用水(10ml)稀释，乙酸乙酯(10ml
×
3)萃取。将有机相合并后减压浓缩，所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.05％甲酸)；梯度：10％-40％；流速：20ml/min)纯化得到实施例34(20mg,
酮(实施例35)
[0738]
向化合物35b(120mg,0.20mmol)的四氢呋喃溶液(20ml)中，加入三苯基膦(319mg,1.22mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(212mg,1.22mmol)。将反应混合物在50℃搅拌1小时。待反应完成后，反应混合物用水(10ml)稀释，乙酸乙酯(10ml
×
3)萃取。有机相合并后减压浓缩，所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.01％甲酸)；梯度：10％-50％；流速：20ml/min)纯化得到实施例35(22mg,产率：19％)。
[0739]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝573.1
[0740]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.25(s,1h),8.85(s,1h),8.52(d,j＝2.5hz,1h),8.33(s,1h),7.37(d,j＝2.2hz,1h),7.13
–
7.09(m,2h),7.07
–
7.04(m,1h),5.74
–
5.64(m,1h),5.02(dq,j＝10.2,1.3hz,1h),4.84(dq,j＝17.1,1.5hz,1h),4.57(s,4h),4.48(d,j＝5.8hz,2h),3.88(t,j＝3.8hz,2h),2.77(t,j＝4.6hz,4h),2.46(s,4h),2.23(s,3h),1.38(s,6h).
[0741]
实施例36
[0742]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基-3-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0743][0744]
步骤1：(9-(2-甲酰基-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲酸叔丁酯(36a)
[0745]
在室温下，向2-氯-5-硝基苯甲醛(2000mg,10.77mmol)的n,n-二甲基乙酰胺(40ml)溶液中加入(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲酸叔丁酯(2752mg,10.77mmol)和无水碳酸钾(4468mg,32.33mmol)。将反应混合物在80℃搅拌16小时。减压浓缩反应混合物除去溶剂后，将残留物加水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。将过滤所得滤液减压浓缩，得到化合物36a(4000mg，产率：90％)。
[0746]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝404.1
[0747]
步骤2：(9-(2-(羟基甲基)-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲酸叔丁酯(36b)
[0748]
在0℃下，向化合物36a(2.0g,4.9mmol)的乙醇溶液(50ml)中，缓慢加入硼氢化钠(0.74g,19mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。待反应完成后，将混合物减压浓缩，所得残留物经过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝100：4)纯化，得到化合物36b(1.8g，产率：82％)。
[0749]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝406.1
[0750]
步骤3：(2-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-5-硝基苯基)甲醇(36c)
[0751]
在室温下，向化合物36b(1.8g,4.4mmol)的二氯甲烷溶液(30ml)中加入盐酸-1,4-二氧六环溶液(15ml)。将反应混合物在25℃搅拌1小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，得到粗品化合物36c(1.8g)。该产物被直接应用于下一步反应。
[0752]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝306.1
[0753]
步骤4：(2-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-5-硝基苯基)甲醇(36d)
[0754]
在室温下，向化合物36c(1300mg,4.25mmol)的1,2-二氯乙烷溶液(100ml)中加入醋酸(5ml)和40％甲醛水溶液(20ml,25mmol)。将反应混合物在30℃搅拌1小时后，加入氰基硼氢化钠(3609mg,17.03mmol)。将反应混合物在30℃继续搅拌16小时后，使用氢氧化钠水溶液(浓度1mol/l)调节混合物的ph＝10。将所得混合物用二氯甲烷(100ml
×
3)萃取，合并有机相，减压浓缩，所得残留物经硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝100：12到100：15)纯化得到化合物36d(1.0g，产率：66％)。
[0755]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝320.1
[0756]
步骤5：3-甲基-9-(4-硝基-2-((2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)甲基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷(36e)
[0757]
在0℃下，向化合物36d(700mg,2.19mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(10ml)溶液中加入氢化钠(79mg,3.3mmol)，并将反应混合物在0℃下搅拌1小时。向反应体系中加入2-(2-氯乙氧基)吡喃(722mg,4.38mmol)，并将反应混合物在30℃搅拌15小时。待反应结束后，将反应混合物加水(30ml)稀释，乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)，减压浓缩后，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：10)纯化，得到化合物36e(300mg，产率：28％)。
[0758]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝448.1
[0759]
步骤6：4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-3-((2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)甲基)苯胺(36f)
[0760]
在0℃下，向化合物36e(300mg,0.67mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入氯化镍(347mg,2.68mmol)和硼氢化钠(203mg,5.36mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：10到100：15)纯化，得到产物36f(150mg，产率：48％)。
[0761]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝418.1
[0762]
步骤7：2-烯丙基-1-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5])十一烷-3-基)-3-((2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)甲基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(36g)
[0763]
在0℃下，向化合物1h(150mg,0.36mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲
酸(68mg,0.40mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将化合物36f(225mg,0.54mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(186.5mg,1.44mmol)的二氯甲烷溶液(1ml)加入反应体系，并将反应混合物在室温搅拌16小时。待反应完成后，减压浓缩除去溶剂，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝97：3)纯化得到化合物36g(200mg，产率：51％)。
[0764]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝787.4
[0765]
步骤8：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-((2-羟基乙氧基)甲基)-4-(9-甲基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(36h)
[0766]
将化合物36g(200mg,0.25mmol)的盐酸-乙醇溶液(4mol/l,5ml)在室温下搅拌0.5小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：40％-50％；流速：20ml/min)纯化得到化合物36h(80mg，产率：45％)。
[0767]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝659.1
[0768]
步骤9：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基-3-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例36)
[0769]
在室温下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物36h(80mg,0.12mmol)的四氢呋喃溶液(15ml)。将该混合物冷却至0℃，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(106mg,0.61mmol)和三苯基膦(159mg,0.61mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应体系用饱和柠檬酸水溶液调节ph＝3到4，乙酸乙酯(30ml)洗涤。收集水相并用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8到9后用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：25％-30％；流速：20ml/min)纯化得实施例36(13mg，产率：17％)。
[0770]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝641.2
[0771]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.19(s,1h),8.81(s,1h),8.46(s,1h),8.21(s,1h),7.32(d,j＝2.2hz,1h),7.08(d,j＝2.2hz,1h),7.04(d,j＝1.3hz,2h),5.69
–
5.59(m,1h),4.97(dq,j＝10.2,1.4hz,1h),4.78(dq,j＝17.1,1.4hz,1h),4.54
–
4.48(m,4h),4.43(d,j＝5.7hz,2h),3.84(t,j＝3.8hz,2h),2.67(t,j＝3.8hz,4h),2.35(s,4h),2.18(s,3h),1.53
–
1.44(m,8h),1.34(s,6h).
[0772]
实施例37
[0773]22-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
6-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4),4(3,5)-双吡啶-杂环八蕃-2
3-酮
[0774]
[0775][0776]
步骤1：2-(2-氟-烯丙基)-6-((5-(4-羟基丁基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-3-基)氨基)-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(37a)
[0777]
在0℃下，向化合物32f(296mg,0.68mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(141mg,0.82mmol)，并将混合物在25℃搅拌1小时。在室温下，向反应体系中加入4-(5-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-3-基)丁-1-醇(180mg,0.68mmol)的n,n-二甲酯甲酰胺(1ml)溶液和n,n-二异丙基乙基胺(264mg,2.04mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌16小时。待反应完成后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)。有机相合并后用饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：20)纯化得到化合物37a(210mg，产率：42％)。
[0778]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝652.1
[0779]
步骤2：2-(2-氟烯丙基)-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-6-((5-(4-羟基丁基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(37b)
[0780]
将化合物37a(210mg,0.32mmol)的盐酸-乙醇溶液(4mol/l,5ml)在室温下搅拌0.5小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：20％-30％；流速：20ml/min)纯化得到化合物37b(130mg，产率：66％)。
[0781]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝608.2
[0782]
步骤3：2
2-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
6-(4-甲基哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4),4(3,5)-双吡啶-杂环八蕃-2
3-酮(实施例37)
[0783]
在室温下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物37b(130mg,0.21mmol)的四氢呋喃溶液(30ml)。将该混合物冷却至0℃，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(187mg,1.07mmol)和三苯基膦(280mg,1.07mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应体系用饱和柠檬酸水溶液调节ph＝3到4，乙酸乙酯(30ml)洗涤。收集水相并用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8到9后用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：20％-40％；流速：20ml/min)纯化得实施例37(30mg，产率：24％)。
[0784]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝590.3
[0785]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.32(s,1h),8.90(s,1h),8.32(d,j＝2.7hz,1h),8.19
(s,1h),8.04(d,j＝2.6hz,1h),7.31(d,j＝2.1hz,1h),7.10(d,j＝2.1hz,1h),5.28(s,1h),4.80(d,j＝15.9hz,1h),4.65(dd,j＝16.7,3.5hz,1h),4.28(t,j＝6.8hz,1h),4.16(dd,j＝49.8,3.6hz,1h),2.98
–
2.93(m,4h),2.78
–
2.58(m,2h),2.46(s,4h),2.23(s,3h),1.84
–
1.82(m,2h),1.73
–
1.67(m,2h),1.40(s,6h).
[0786]
实施例38
[0787]22-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
4-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(3,5)-杂环八蕃-2
3-酮
[0788][0789]
步骤1：8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷(38a)
[0790]
氮气氛围下，在0℃向(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)甲酸叔丁酯(3.0g,0.014mol)的四氢呋喃(50ml)溶液中加入四氢铝锂(1.07g,0.028mol)。将反应混合物在60℃搅拌16小时。待反应结束后，将反应混合物过滤。将滤液减压浓缩得到化合物38a(1.2g，产率：99％)。
[0791]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝127.1
[0792]
步骤2：2-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-5-硝基苯甲醛(38b)
[0793]
氮气氛围下，将2-氯-5硝基苯甲醛(1.7g,9.2mmol)、化合物38a(1.2g,9.1mmol)和碳酸钾(3.8g,27mmol)加入n,n-二甲基乙酰胺(30ml)。将该反应混合物在100℃搅拌16小时。待反应结束后，将反应混合物用水(30ml)稀释，乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并后的有机相经过水(30ml)和饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：3)得到化合物38b(800mg，产率：28％)。
[0794]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝276.0
[0795]
步骤3：(2-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-5-硝基苯基)甲醇(38c)
[0796]
氮气氛围下，在0℃向化合物38b(800mg,2.91mmol)的甲醇溶液(15ml)中加入硼氢化钠(439mg,11.6mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。待反应完成后，减压浓缩反
应混合物，所的残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：3)纯化得到化合物38c(600mg，产率：67％)
[0797]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝278.1
[0798]
步骤4：8-甲基-3-(4-硝基-2-((2-吡喃-2-氧基)乙氧基)甲基)苯基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷(38d)
[0799]
氮气氛围下，在0℃向化合物38c(600mg,2.16mmol)和氢化钠(77mg,3.2mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(15ml)的悬浊液中加入2-(2-氯乙氧基)吡喃(712mg,4.33mmol)。将该反应混合物在30℃搅拌16小时。待反应结束后，将反应混合物用水(60ml)稀释，乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并后的有机相经过水(30ml)和饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：6)得到化合物38d(330mg，产率：34％)。
[0800]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝406.0
[0801]
步骤5：4-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-3-((2-(吡喃-2-氧基)乙氧基)甲基)苯胺(38e)
[0802]
氮气氛围下，在0℃向化合物38d(330mg,0.81mmol)的乙醇溶液(10ml)中加入硼氢化钠(123mg,3.25mmol)和氯化镍(422mg,3.25mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：4)纯化得到化合物38e(200mg，产率：59％)。
[0803]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝376.1
[0804]
步骤6：2-(2-氟-丙-2-烯-1-基)-1-(6-2(-羟基丙-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-3-((2-(吡喃-2-氧基)乙氧基)甲基)氨基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(38f)
[0805]
在室温下，将化合物32f(104mg,0.24mmol)和3-氯过氧苯甲酸(50mg,0.29mmol)的甲苯溶液(10ml)在室温搅拌1小时。之后，向反应体系中加入化合物38e(90mg,0.24mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(155mg,1.20mmol)，并将该反应混合物在50℃搅拌16小时。待反应完成后，用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(10ml
×
3)萃取淬灭后的混合物。合并后的有机相经过水(10ml)和饱和食盐水(10ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到化合物38f(110mg，产率：54％)。
[0806]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝763.1
[0807]
步骤7：2-(2-氟-丙-2-烯-1-基)-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)-吡啶-2-基)-6-((3-((2-羟基乙氧基)甲基)-4-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基)氨基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(38g)
[0808]
在室温下，将化合物38f(110mg,0.14mmol)的盐酸-乙醇溶液(10ml)搅拌1小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：10％-50％；流速：20ml/min)纯化得到化合物38g(80mg，产率：79％)。
[0809]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝635.1
[0810]
步骤8：2
2-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
4-(8-甲基-3,8-二氮杂双环
[3.2.1]辛烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(3,5)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例38)
[0811]
氮气氛围下，化合物38g(64mg,0.10mmol)、偶氮二甲酸二乙酯(105mg,0.61mmol)和三苯基膦(159mg,0.61mmol)的二氯甲烷溶液(14ml)在40℃搅拌1小时。待反应完成后，将反应混合物用水(10ml)稀释，乙酸乙酯(10ml
×
3)萃取。将有机相合并后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.05％甲酸)；梯度：10％-40％；流速：20ml/min)纯化得实施例38(11mg，产率：17％)。
[0812]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝617.1
[0813]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.25(s,1h),8.86(s,1h),8.48(d,j＝2.5hz,1h),8.29(s,1h),7.38(d,j＝2.1hz,1h),7.13(d,j＝2.1hz,1h),7.03(dd,j＝8.7,2.6hz,1h),6.84(d,j＝8.7hz,1h),5.27(s,1h),4.70
–
4.61(m,3h),4.59(s,2h),4.55(t,j＝4.3hz,1h),4.17(dd,j＝49.8,3.6hz,2h),3.89(t,j＝4.4hz,2h),3.59(s,2h),2.65(dd,j＝10.1,2.6hz,2h),2.31(d,j＝9.6hz,2h),2.20(s,3h),1.80-1.78(m,4h),1.40(s,6h).
[0814]
实施例39
[0815]22-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0816][0817]
步骤1：(4-(2-溴-4-硝基苯基)哌嗪-1-基)甲酸叔丁酯(39a)
[0818]
在室温下，向2-溴-1-氟-4-硝基苯(5000mg,22.73mmol)的n,n-二甲基乙酰胺(50ml)溶液中加入哌嗪-1-基甲酸叔丁酯(6384mg,34.09mmol)和无水碳酸钾(9424mg,68.18mmol)。将该反应混合物在80℃搅拌16小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所
得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：1)得到化合物39a(6000mg，产率：61％)
[0819]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝385.9
[0820]
步骤2：(4-(2-(4-羟基-丁-炔基)-4-硝基苯基)哌嗪-1-基)甲酸叔丁酯(39b)
[0821]
氮气氛围下，向化合物39a(1000mg,2.60mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(10ml)溶液中依次加入3-丁炔-1-醇(362mg,5.17mmol)、碘化亚铜(98mg,0.52mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(181mg,0.26mmol)和n,n-二异丙基乙胺(1001mg,7.75mmol)。将反应混合物在80℃16小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(100ml)，并用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并后的有机相经过水(30ml)和饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：3)得到化合物39b(300mg，产率：28％)。
[0822]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝376.1
[0823]
步骤3：(4-(4-氨基-2-(4-羟基丁基)苯基]哌嗪-1-基)甲酸叔丁酯(39c)
[0824]
氢气氛围下，向化合物39b(300mg,0.80mmol)的四氢呋喃(10ml)溶液中加入水(1ml)和钯碳(60mg)。将反应混合物在氢气氛围下室温搅拌4小时。待反应完成后，过滤反应混合物并减压浓缩滤液，得到化合物39c(250mg，产率：81％)。
[0825]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝350.3
[0826]
步骤4：4-(4-((2-(2-氟烯丙基)-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-3-氧杂-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基)氨基)-2-(4-羟基丁基)苯基)哌嗪-1-基)甲酸叔丁基酯(39d)
[0827]
在冰浴冷却下，向化合物32f(311mg,0.72mmol)的甲苯(5ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(148mg,0.86mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。随后，向反应体系中加入化合物39c(248mg,0.71mmol)和n,n-二异丙基乙胺(369mg,2.85mmol)，并将该反应混合物在室温下搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭(30ml)，并用乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)。合并后的有机相经过饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：7)得到化合物39d(200mg，产率：34％)。
[0828]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝737.1
[0829]
步骤5：2-(2-氟烯丙基)-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(4-羟基丁基)-4-(哌嗪-1-基)苯基)氨基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(39e)
[0830]
将化合物39d(200mg,0.27mmol)溶于盐酸-乙醇溶液中(4mol/l,5ml)并将该混合物在室温下搅拌0.5小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所得残留物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：25％-35％；流速：20ml/min)纯化得化合物39e(70mg，产率：41％)。
[0831]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝593.1
[0832]
步骤6：2
2-(2-氟烯丙基)-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例39)
[0833]
在室温下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物39e(70mg,0.12mmol)的四氢呋喃溶液(10ml)。将该混合物冷却至0℃，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(187mg,
1.07mmol)和三苯基膦(280mg,1.07mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应体系用饱和柠檬酸水溶液调节ph＝3到4，乙酸乙酯(30ml)洗涤。收集水相并用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8到9后用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：20％-40％；流速：20ml/min)纯化得实施例39(4.8mg，产率：12％)。
[0834]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝575.3
[0835]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.25(s,1h),8.88(s,1h),8.21(s,1h),8.10(d,j＝2.4hz,1h),7.35(d,j＝2.1hz,1h),7.13(d,j＝2.1hz,1h),7.10-7.06(m,1h),7.06
–
7.02(m,1h),5.28(s,1h),4.82(d,j＝15.9hz,2h),4.66(dd,j＝16.8,3.5hz,1h),4.64(d,j＝3.5hz,0.5h),4.30(t,j＝6.4hz,2h),4.19(dd,j＝49.8,3.5hz,1h),3.05-3.01(m,4h),2.84-2.78(m,4h),2.70-2.65(m,2h),1.89
–
1.67(m,4h),1.41(s,6h).
[0836]
实施例40
[0837]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0838][0839]
步骤1：1-(1-(2-溴-4-硝基苯基)哌啶-4-基)-4-甲基哌嗪(40a)
[0840]
氮气氛围下，向2-溴-1-氟-4-硝基苯(3000mg,13.66mmol)的n,n-二甲基乙酰胺(40ml)溶液中加入1-甲基-4-(哌啶-4-基)哌嗪(2999mg,16.36mmol)和无水碳酸钾(5654mg,40.91mmol)。将该反应混合物在80℃搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(300ml)，并用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并后的有机相经过水(50ml)和饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，得到化合物40a(500mg，产率：96％)。
[0841]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝382.9
[0842]
步骤2：4-(2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-5-硝基苯基)丁-3-炔-1-醇(40b)
[0843]
氮气氛围下，向化合物40a(1000mg,2.618mmol)的1,4-二氧六环(20ml)溶液中依
次加入3-丁炔-1-醇(237mg,3.39mmol)、碘化亚铜(98mg,0.52mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(181mg,0.26mmol)和n,n-二异丙基乙胺(1001mg,7.75mmol)。将反应混合物在80℃搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(100ml)，并用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并后的有机相经过水(30ml)和饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：20)得到化合物40b(450mg，产率：46％)。
[0844]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝373.1
[0845]
步骤3：4-(5-氨基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)丁-1-醇(40c)
[0846]
氢气氛围下，向化合物40b(450mg,1.21mmol)的甲醇(20ml)溶液中加入钯碳(257mg,2.42mmol)。将反应混合物在氢气氛围下室温搅拌2小时。待反应完成后，过滤反应混合物并减压浓缩滤液，得到化合物40c(300mg，产率：76％)。
[0847]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝347.1
[0848]
步骤4：6-((3-(4-羟基丁基)-4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)氨基)-1-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-2-(丙基-2-烯-1-基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(40d)
[0849]
向化合物32f(192mg,0.44mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(95mg,0.55mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。随后，向反应体系中加入化合物40d(160mg,0.46mmol)和n,n-二异丙基乙胺(179mg,1.39mmol)，并将该反应混合物在室温下搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭(30ml)，并用乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)。合并后的有机相经过饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，得到粗品化合物40d(400mg)。
[0850]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝716.1
[0851]
步骤5：1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(4-羟基丁基)-4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)氨基)-2-(丙基-2-烯-1-基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(40e)
[0852]
将化合物40d(300mg,0.42mmol)溶于盐酸-乙醇溶液中(4mol/l,20ml)并将该混合物在室温下搅拌1小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所得残留物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：5％-60％；流速：20ml/min)纯化得化合物40e(90mg，产率：30％)。
[0853]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝672.2
[0854]
步骤6：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例40)
[0855]
在室温下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物40e(64mg,0.095mmol)的1,2-二氯乙烷溶液(14ml)，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(100mg,0.57mmol)和三苯基膦(150mg,0.57mmol)，并将反应混合物在40℃搅拌1小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(10ml)，并用乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：10％-40％；流速：20ml/min)纯化得实施例40(12mg，产率：18％)。
[0856]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝654.1
[0857]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.14(s,1h),8.84(s,1h),8.20(s,1h),8.08(d,j＝2.4hz,1h),7.30(d,j＝2.1hz,1h),7.14(d,j＝2.1hz,1h),7.08
–
7.04(m,1h),7.02
–
6.97(m,1h),5.75
–
5.63(m,1h),5.28(s,1h),5.02(dd,j＝10.3,1.1hz,1h),4.85(dd,j＝17.1,1.3hz,1h),4.62(d,j＝5.8hz,2h),4.31(t,j＝6.1hz,2h),2.92(d,j＝11.2hz,2h),2.70
–
2.53(m,6h),2.41
–
2.20(m,6h),2.16(s,3h),1.87
–
1.72(mk,6h),1.58
–
1.48(m,2h),1.41(s,6h).
[0858]
实施例41
[0859]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-环八蕃-2
3-酮
[0860][0861]
步骤1：9-(2-溴-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯(41a)
[0862]
氮气氛围下，向2-溴-1-氟-4-硝基苯(1000mg,4.55mmol)的n,n-二甲基乙酰胺(20ml)溶液中加入(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲酸叔丁酯(1.38g,5.43mmol)和无水碳酸钾(1.87g,13.6mmol)。将该反应混合物在80℃搅拌3小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(300ml)，并用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并后的有机相经过水(50ml)和饱和食盐水(50ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(石油醚：乙酸乙酯＝100：5到100：10)得到化合物41a(1.2g，产率：53％)。
[0863]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝454.0
[0864]
步骤2：3-(2-溴-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷(41b)
[0865]
在室温下，向化合物41a(1.2g,2.6mmol)的二氯甲烷溶液(15ml)中加入盐酸-1,4-二氧六环溶液(15ml)。将反应混合物在室温搅拌2小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，得到粗品化合物41b(1.5g)。
[0866]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝354.0
[0867]
步骤3：3-(2-溴-4-硝基苯基)-9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷(41c)
[0868]
在室温下，向化合物41b(1.2g,2.6mmol)的二氯甲烷溶液(100ml)中加入醋酸(5ml)和甲醛水溶液(40％,20ml)。将反应混合物在30℃搅拌1小时后，向反应中加入氰基硼氢化钠(0.82g,13mmol)。将反应混合物在30℃搅拌16小时，使用1mol/l的氢氧化钠水溶液调节ph至10，并用二氯甲烷(100ml
×
3)对淬灭后的混合物萃取。合并有机相，减压浓缩得到化合物41c(1.0g,产率：71％)
[0869]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝367.9
[0870]
步骤4：4-(2-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-5-硝基苯基)3-丁炔-1-醇(41d)
[0871]
氮气氛围下，向化合物41c(600mg,1.63mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(5ml)溶液中依次加入3-丁炔-1-醇(228mg,3.26mmol)、碘化亚铜(62mg,0.33mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(114mg,0.16mmol)和n,n-二异丙基乙胺(631mg,4.89mmol)。将反应混合物在80℃16小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(100ml)，并用乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)。合并后的有机相经过水(30ml)和饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：12到100：15)得到化合物41d(300mg，产率：46％)。
[0872]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝358.1
[0873]
步骤5：4-(5-氨基-2-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)丁-1-醇(41e)
[0874]
氢气氛围下，向化合物41d(300mg,0.84mmol)的四氢呋喃(10ml)溶液中加入水(1ml)和钯碳(63mg)。将反应混合物在氢气氛围下室温搅拌4小时。待反应完成后，过滤反应混合物并减压浓缩滤液，得到化合物41e(200mg，产率：65％)。
[0875]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝332.3
[0876]
步骤6：2-烯丙基-6-((3-(4-羟基丁基)-4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)氨基)-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(41f)
[0877]
向化合物1h(200mg,0.48mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(99mg,0.58mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。随后，向反应体系中加入化合物41e(206mg,0.62mmol)和n,n-二异丙基乙胺(248mg,1.92mmol)，并将该反应混合物在室温下搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭(30ml)，并用乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)。合并后的有机相经过饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：10到100：15)得到化合物41f(120mg，产率：30％)。
[0878]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝701.2
[0879]
步骤7：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-(4-羟基丁基)-4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(41g)
[0880]
将化合物41f(180mg,0.26mmol)溶于盐酸-乙醇溶液中(4mol/l,5ml)并将该混合物在室温下搅拌0.5小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所得残留物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：40％-50％；流
速：20ml/min)纯化得化合物41g(80mg，产率：43％)。
[0881]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝657.2
[0882]
步骤8：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例41)
[0883]
在室温下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物41g(100mg,0.15mmol)的四氢呋喃溶液(20ml)，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(100mg,0.76mmol)和三苯基膦(200mg,0.76mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(30ml)，并用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：20％-30％；流速：20ml/min)纯化得实施例41(23mg，产率：23％)。
[0884]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝639.4
[0885]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.13(s,1h),8.84(s,1h),8.22(s,1h),8.07(d,j＝2.5hz,1h),7.29(d,j＝2.1hz,1h),7.15
–
7.13(m,2h),7.03
–
6.98(m,1h),5.74
–
5.63(m,1h),5.27(s,1h),5.02(dd,j＝10.3,1.2hz,1h),4.85(dd,j＝17.2,1.4hz,1h),4.62(d,j＝5.7hz,2h),4.31(t,j＝6.1hz,2h),2.71(t,j＝5.2hz,4h),2.62(t,j＝6.9hz,2h),2.42(s,4h),2.25(s,3h),1.90
–
1.72(m,4h),1.58
–
1.49(m,8h),1.41(s,6h).
[0886]
实施例42
[0887]
2-(2
2-烯丙基-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-2
3-氧代-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-1
6-基)-2-甲基丙腈
[0888][0889]
步骤1：2-(6-(2-烯丙基-6-(甲硫基)-3-氧代-2,3-二氢-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(42a)
[0890]
氮气氛围下，向2-(6-溴-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(200mg,0.70mmol)的1,4-二氧六环(5ml)溶液中加入2-烯丙基-6-(甲硫基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(156mg,0.70mmol)、碘化亚铜(133mg,0.70mmol)和n,n-二甲基乙二胺(93mg,1.1mmol)。将该混合物在95℃搅拌4小时。待反应完成后，过滤反应液，并将滤液减压浓缩。所得残余物经过硅胶柱层析色谱(石油醚：乙酸乙酯＝100：20到100：40)纯化得到化
合物42a(200mg，产率：60％)。
[0891]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝427.0
[0892]
步骤2：2-(6-(2-烯丙基-6-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-((2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)甲基)苯基)氨基)-3-氧杂-2,3-二氢-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(42b)
[0893]
向化合物42a(200mg,0.47mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(89mg,0.52mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。随后，向反应体系中加入4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-((2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)甲基)苯胺(197mg,0.56mmol)和n,n-二异丙基乙胺(248mg,1.92mmol)，并将该反应混合物在40℃搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：7)得到化合物42b(200mg，产率：53％)。
[0894]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝728.1
[0895]
步骤3：2-(6-(2-烯丙基-6-((3-((2-羟基乙氧基)甲基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-3-氧杂-2,3-二氢-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羟基吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(42c)
[0896]
将化合物42b(200mg,0.28mmol)溶于盐酸-乙醇溶液中(4mol/l,3ml)并将该混合物在室温下搅拌0.5小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所得残留物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：30％-40％；流速：20ml/min)纯化得化合物42c(90mg，产率：49％)。
[0897]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝600.1
[0898]
步骤4：2-(2
2-烯丙基-4
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-2
3-氧代-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-1
6-基)-2-甲基丙腈(实施例42)
[0899]
在冰浴冷却下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物42c(90mg,0.15mmol)的四氢呋喃溶液(20ml)，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(132mg,0.76mmol)和三苯基膦(197mg,0.76mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应体系用饱和柠檬酸水溶液调节ph＝3到4，乙酸乙酯(30ml)洗涤。收集水相并用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8到9后用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：25％-30％；流速：20ml/min)纯化得实施例42(13.5mg，产率：16％)。
[0900]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝582.2
[0901]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.26(s,1h),8.84(s,1h),8.46(d,j＝2.4hz,1h),8.11(d,j＝2.0hz,1h),7.50(d,j＝1.9hz,1h),7.09
–
7.06(m,1h),7.04
–
7.00(m,2h),5.70
–
5.60(m,1h),4.98(dq,j＝10.2,1.4hz,1h),4.82(dq,j＝17.2,1.5hz,1h),4.59(t,j＝3.8hz,2h),4.53(s,2h),4.47(d,j＝5.8hz,2h),3.87
–
3.82(m,2h),2.76(t,j＝4.5hz,5h),2.60
–
2.48(m,4h),2.28(s,3h),1.63(s,6h).
[0902]
实施例43
[0903]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八
蕃-2
3-酮
[0904][0905]
步骤1：4-(2-甲酰基-4-硝基苯基)哌嗪-1-甲酸-2-甲基丙-2-基酯(43a)
[0906]
向2-氯-5-硝基苯甲醛(3000mg,16.22mmol)和n-叔丁氧羰基哌嗪(3620mg,19.46mmol)的n,n-二甲基乙酰胺(50ml)溶液中加入碳酸钾(4477mg,32.44mmol)，并将反应混合物在120℃搅拌16小时。带反应完成后，将反应混合物用水(100ml)稀释，乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)，无水硫酸钠干燥后过滤。将滤液减压浓缩得到化合物43a(3000mg，产率：55％)。
[0907]
lc-ms(esi),m/z:[m+na]
+
＝358.0
[0908]
步骤2：4-(2-(羟基甲基)-4-硝基苯基)哌嗪-1-甲酸-2-甲基丙-2-基酯(43b)
[0909]
在冰水浴冷却下，向化合物43a(3.00g,8.96mmol)的甲醇(40ml)溶液中加入硼氢化钠(1362mg,35.84mmol)。将该反应混合物在25℃搅拌2小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝96：4到90：10)纯化得到化合物43b(2380mg,产率:79％)。
[0910]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝338.0
[0911]
步骤3：(5-硝基-2-(哌嗪-1-基)苯基)甲醇(43c)
[0912]
在冰水浴冷却下，向化合物43b(2380mg,7.06mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(4mol/l,10ml)溶液，并将反应混合物在室温下搅拌2小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，得到化合物43c(1700mg，产率：88％)。
[0913]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝238.0
[0914]
步骤4：(5-硝基-2-(4-(氧杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)苯基)甲醇(43d)
[0915]
在冰水浴冷却下，向化合物43c(1700mg,5.03mmol)的乙醇(40ml)溶液中加入氰基硼氢化钠(1570mg,24.92mmol)、氧杂环丁-3-酮(897mg,12.5mmol)和氯化锌(1694mg,12.46mmol)。将反应混合物在60℃搅拌4小时。待反应完成后，将反应混合物加水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。合并后的有机相用无水硫酸钠干燥后过滤，减压浓缩后所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝96：4到90：10)纯化得到化合物43d
(1560mg，产率：86％)。
[0916]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝294.1
[0917]
步骤5：1-(4-硝基-2-(((2-(3,4,5,6-四氢-2h-吡喃-2-基氧基)乙基)氧基)甲基)苯基)-4-(氧杂环丁-3-基)哌嗪(43e)
[0918]
在冰水浴冷却下，向化合物43d(1400mg,4.76mmol)和2-(2-氯乙氧基)吡喃(2366mg,14.34mmol)的n,n-二甲基甲酰胺溶液(10ml)加入氢化钠(60％wt,1147mg,28.68mol)。将该反应混合物在60℃搅拌24小时。待反应结束后，将反应混合物用水(50ml)稀释，乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。有机相合并后经过水(20ml)稀释，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥后过滤。将滤液减压浓缩，所得残留物经过硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝90:10～85:15)纯化得到化合物43e(600mg，产率：30％)。
[0919]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝422.1
[0920]
步骤6：4-(4-(氧杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(((2-(3,4,5,6-四氢-2h-吡喃-2-基氧基)乙基)氧基)甲基)苯胺(43f)
[0921]
在0℃下，向化合物43e(600mg,1.43mmol)的乙醇(10ml)溶液中加入氯化镍(369mg,2.86mmol)和硼氢化钠(218mg,5.02mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝80：20到75：25)纯化，得到产物43f(300mg，产率：54％)。
[0922]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝392.2
[0923]
步骤7：1-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-((甲氧基甲基)氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(4-(氧杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(((2-(3,4,5,6-四氢-2h-吡喃-2-基氧基)乙基)氧基)甲基)苯基)氨基)-2-(丙-2-烯基)-2,3-二氢-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(43g)
[0924]
向化合物1h(319mg,0.77mmol)的甲苯(5ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(145mg,0.843mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。随后，向反应体系中加入化合物43f(40mg,0.11mmol)和n,n-二异丙基乙胺(28mg,0.21mmol)，并将该反应混合物在室温搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝85：15到80：20)得到化合物43g(370mg，产率：64％)。
[0925]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝761.2
[0926]
步骤8：6-((3-(((2-羟基乙基)氧基)甲基)-4-(4-(氧杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-2-(丙-2-烯基)-2,3-二氢-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(43h)
[0927]
将化合物43g(370mg,0.49mmol)溶于盐酸-乙醇溶液中(4mol/l,10ml)并将该混合物在室温下搅拌0.5小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所得残留物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：25％-40％；流速：20ml/min)纯化得化合物43h(80mg，产率：59％)。
[0928]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝632.9
[0929]
步骤9：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例43)
[0930]
在冰水浴冷却下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物43h(180mg,0.28mmol)
的四氢呋喃溶液(15ml)，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(248mg,1.43mmol)和三苯基膦(375mg,1.43mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应体系用饱和柠檬酸水溶液调节ph＝3到4，乙酸乙酯(30ml)洗涤。收集水相并用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8到9后用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：25％-30％；流速：20ml/min)纯化得实施例43(28mg，产率：16％)。
[0931]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝615.3
[0932]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.28(s,1h),8.86(s,1h),8.55(s,1h),7.37(d,j＝2.0hz,1h),7.17
–
7.07(m,3h),5.74
–
5.64(m,1h),5.26(s,1h),5.02(dd,j＝10.3,1.2hz,1h),4.83(dd,j＝17.1,1.3hz,1h),4.76
–
4.50(m,8h),4.48(d,j＝5.7hz,2h),3.88(t,j＝3.2hz,2h),2.88(s,4h),1.38(s,6h).
[0933]
实施例44
[0934]22-(2-氟代烯丙基)-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺环[5.5]十一烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮
[0935][0936]
步骤1：2-(2-氟烯丙基)-1-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-6-((4-(9-甲基-3,9-)二氮杂螺环[5.5]十一烷-3-基)-3-((2-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)甲基)苯基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(44a)
[0937]
向化合物32f(150mg,0.36mmol)的甲苯(5ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(66mg,0.38mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。随后，向反应体系中加入4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-3-((2-(吡喃-2-甲氧基)乙氧基)甲基)苯胺(216mg,0.52mmol)和n,n-二异丙基乙胺(67mg,0.52mmol)，并将该反应混合物在室温搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：10到100：15)得到化合物44a(120mg，产率：37％)。
[0938]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝805.1
[0939]
步骤2：2-(2-氟烯丙基)-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-((2-羟基乙氧基)甲基)-4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)氨基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(44b)
[0940]
将化合物44a(120mg,0.15mmol)溶于盐酸-乙醇溶液中(4mol/l,5ml)并将该混合物在室温下搅拌0.5小时。待反应完成后，减压浓缩反应混合物，所得残留物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：45％-55％；流速：20ml/min)纯化得化合物44b(80mg，产率：71％)。
[0941]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝677.1
[0942]
步骤3：2
2-(2-氟代烯丙基)-1
6-(2-羟基丙-2-基)-4
4-(9-甲基-3,9-二氮杂螺环[5.5]十一烷-3-基)-22,2
3-二氢-21h-6,9-二氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4)-吡啶-4(1,3)-杂环八蕃-2
3-酮(实施例44)
[0943]
在冰水浴冷却下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物44b(80mg,0.12mmol)的四氢呋喃溶液(15ml)，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(103mg,0.59mmol)和三苯基膦(155mg,0.59mmol)，并将反应混合物在50℃搅拌2小时。待反应完成后，将反应体系用饱和柠檬酸水溶液调节ph＝3到4，乙酸乙酯(30ml)洗涤。收集水相并用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8到9后用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：25％-30％；流速：20ml/min)纯化得实施例44(16mg，产率：22％)。
[0944]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝659.1
[0945]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.26(s,1h),8.83(s,1h),8.46(s,1h),8.18(s,1h),7.33(d,j＝2.1hz,1h),7.08(d,j＝2.1hz,1h),7.06
–
7.04(m,2h),5.22(s,1h),4.68
–
4.57(m,4h),4.53
–
4.47(m,4h),4.12(dd,j＝49.8,3.5hz,1h),3.83(t,j＝4.0hz,2h),2.68(t,j＝5.3hz,4h),2.44
–
2.34(m,4h),2.22(s,3h),1.53
–
1.45(m,8h),1.35(s,6h).
[0946]
实施例45
[0947]22-烯丙基-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
6-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4),4(3,5)-双吡啶杂环八蕃-2
3-酮
[0948]
[0949][0950]
步骤1：1-(1-(3-溴-5-硝基吡啶-2-基)哌啶-4-基)-4-甲基哌嗪(45a)
[0951]
在室温下，向3-溴-2-氯-5-硝基吡啶(2.0g,8.4mol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入1-甲基-4-(哌啶-4-基)哌嗪(1.5g,8.4mol)和三乙胺(2.55g,25.2mol)，并将该反应混合物在室温下搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物加水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取。合并后的有机相使用饱和食盐水(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥并过滤。将所得滤液减压浓缩得到化合物45a(3.3g，产率：92％)。
[0952]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝383.9
[0953]
步骤2：4-(2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-5-硝基吡啶-3-基)-3-丁炔-1-醇(45b)
[0954]
氮气氛围下，向化合物45a(3.3g,8.6mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中依次加入3-丁炔-1-醇(1.21g,17.2mmol)、碘化亚铜(0.33g,1.7mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(0.60g,0.85mmol)和n,n-二异丙基乙胺(3.33g,25.8mmol)。将反应混合物在80℃16小时。待反应完成后，将反应混合物用水稀释(100ml)，并用乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)。合并后的有机相经过水(30ml)和饱和食盐水(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥和过滤后减压浓缩，所得残留物经硅胶柱层析色谱(二氯甲烷：甲醇＝100：15到100：20)得到化合物45b(1.7g，产率：48％)。
[0955]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝374.1
[0956]
步骤3：4-(5-氨基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)丁-1-醇(45c)
[0957]
氢气氛围下，向化合45b(600mg,1.68mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入钯碳(127mg,3.36mmol)。将反应混合物在氢气氛围下室温搅拌4小时。待反应完成后，过滤反应混合物并减压浓缩滤液，得到化合物45c(500mg，产率：81％)。
[0958]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝348.1
[0959]
步骤4：2-烯丙基-6-((5-(4-羟基丁基)-6-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)-1-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡啶-2-基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(45d)
[0960]
向化合物1h(300mg,0.79mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(149mg,0.809mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。随后，向反应体系中加入溶解于二氯甲烷(1ml)和n,n-二甲基甲酰胺(5ml)的化合物45c(375mg,1.08mmol)和n,n-二异丙基乙胺(95mg,1.1mmol)，并将该反应混合物在室温搅拌16小时。待反应完成后，将反应混合物加水(50ml)稀释，并用二氯甲烷(20ml
×
3)萃取。将合并后的有机相用饱和食盐水(100ml)洗涤和无水硫酸钠干燥后，过滤除去固体。将所得滤液减压浓缩，得到粗品化合物45d(350mg，产率：56％)。
[0961]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝717.1
[0962]
步骤5：2-烯丙基-1-(4-羟基-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)-6-((5-(4-羟基丁基)-6-(4-(4-甲基哌嗪)-1-基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮(45e)
[0963]
在室温下，将化合物45d(350mg,0.49mmol)溶于盐酸的乙醇溶液(10ml)中，并将反应液在25℃下搅拌1小时。待反应结束后，将反应混合物浓缩，所得残余物通过制备hplc(色谱柱:gemini-c18150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％氨水)；梯度：45％-55％；流速：20ml/min)纯化得到化合物45e(180mg,产率：49％)。
[0964]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝673.0
[0965]
步骤6：2
2-烯丙基-1
6-(2-羟基丙基-2-基)-4
6-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-22,2
3-二氢-21h-9-氧杂-3-氮杂-2(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1(2,4),4(3,5)-双吡啶杂环八蕃-2
3-酮(实施例45)
[0966]
在冰水浴冷却下，向氮气氛围下的耐压封管中加入化合物45e(180mg,0.27mmol)的二氯甲烷溶液(20ml)，并向反应体系中加入偶氮二甲酸二乙酯(233mg,1.34mmol)和三苯基膦(351mg,1.34mmol)，并将反应混合物在40℃搅拌5小时。待反应完成后，将反应体系用饱和柠檬酸水溶液调节ph＝3到4，乙酸乙酯(30ml)洗涤。收集水相并用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8到9后用乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相后使用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。所得残留物经制备hplc(色谱柱:gemini-c18 150
×
21.2mm,5μm；流动相：乙腈-水(0.1％甲酸)；梯度：25％-30％；流速：20ml/min)纯化得实施例45(11mg，产率：6％)。
[0967]
lc-ms(esi),m/z:[m+h]
+
＝655.1
[0968]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.23(s,1h),8.87(s,1h),8.31(d,j＝2.8hz,2h),8.02(d,j＝2.6hz,1h),7.26(d,j＝2.0hz,1h),7.13(d,j＝2.1hz,1h),5.72
–
5.62(m,1h),5.27(s,1h),5.02(dd,j＝10.3,1.3hz,1h),4.84(dd,j＝17.1,1.4hz,1h),4.60(d,j＝5.9hz,2h),4.31(t,j＝6.6hz,2h),3.21(d,j＝12.0hz,4h),2.73
–
2.61(m,5h),2.36
–
2.21(m,6h),2.14(s,3h),1.87
–
1.76(m,4h),1.76
–
1.65(m,2h),1.59
–
1.47(m,3h),1.40(s,6h).
[0969]
实施例46、50和51的合成参考实施例2；实施例47、48、49、53、54、55、57、59、68、70、71、72和75的合成参考实施例6；实施例52、54、55、60和76的合成参考实施例34；实施例56、58、61和74的合成参考实施例32；实施例69、73和77参考实施例3；实施例62、63、64、65、66、78参考37；实施例67和74的合成参考实施例33。表征数据如下表所示：
[0970]
[0971]
[0972]
[0973]
[0974]
[0975]
[0976]
[0977]
[0978]
[0979]
[0980][0981]
生物评价
[0982]
以下结合测试进一步描述解释本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。
[0983]
一、酶学活性实验
[0984]
1、wee1激酶活性测试
[0985]
1.实验目的：
[0986]
测试本发明实施例化合物对wee1激酶的抑制活性。
[0987]
2.实验仪器和试剂：
[0988]
wee1：carna biosciences；
[0989]
ulight-topo iia，europium-anti-phospho-topo iia antibody来自perkin elmer；
[0990]
fluorescein-poly gat，tb-py20antibody kit来自invitrogen；
[0991]
hepes来自gibco；
[0992]
egta，brij-35溶液，dtt，atp，dmso来自sigma。
[0993]
3.实验方法：
[0994]
化合物配置10mm的dmso母液并根据实验起始浓度在实验中稀释到100x备用，每孔加入100nl化合物溶液(100x)到384孔板，然后加入5μl wee1(终浓度5nm)酶溶液(酶缓冲液为50mm hepes ph 7.5,10mm mgcl2,2mm dtt,0.01％bsa和0.0015％brij-35)混匀室温孵育10分钟加入5μl含有fluorescein-poly gat(终浓度0.2μm)的底物溶液和atp(终浓度0.8μm)，配置在酶缓冲液中，在37℃反应30分钟，终止反应并加入10μl检测液(含有tb-py20抗体，终浓度2nm及终浓度15mm的edta的酶缓冲液)混匀，室温孵育60分钟，使用envision2104 multilable reader检测(激发光340nm，发射光520nm和495nm)，计算在520nm和在495nm下rfu的比率，将比率值转换为抑制百分比值。抑制率＝(最大比率-样品比值)/(最大比率-最小比率)*100。ic
50
使用xlfit计算。
[0995]
4.实验结果：
[0996]
本发明化合物对wee1激酶的抑制活性通过以上试验进行测定，测得的ic
50
值见表1所示。
[0997]
2、plk1激酶活性测试
[0998]
1.实验目的：
[0999]
测试本发明实施例化合物对plk1激酶的抑制活性。
[1000]
2.实验仪器和试剂：
[1001]
plk1：bps biosciences；
[1002]
ulight-topo iia，europium-anti-phospho-topo iia antibody来自perkin elmer；
[1003]
fluorescein-poly gat，tb-py20antibody kit来自invitrogen；
[1004]
hepes来自gibco；
[1005]
egta，brij-35溶液，dtt，atp，dmso来自sigma。
[1006]
3.实验方法：
[1007]
化合物配置10mm的dmso母液并根据实验起始浓度在实验中稀释到100x备用。随后将每个化合物稀释液100nl加入384孔板中，在每个孔中加入5μl含有plk1(终浓度15nm)的1
×
激酶缓冲液(50mm hepes ph 7.5，10mm mgcl2，2m m dtt，1mm egta和0.01％tween-20)中，混合液在室温下孵育10分钟。在每个孔中加入5μl底物溶液，其中含有ulight-topo iia(终浓度50nm)和atp(终浓度5μm)，在1
×
激酶缓冲液中，在室温下孵育30分钟，然后加入10μl检测溶液(europium-anti-phospho-topo iia抗体终浓度2nm，edta终浓度20mm的1
×
检测缓冲液)，混合，并在室温下孵育60分钟。然后用envision2104多功能读取器分析所有样品(激发波长320nm，发射波长665nm和615nm)。计算在665nm和在615nm下rfu的比率，将比率值转换为抑制百分比值。抑制率＝(最大比率-样品比率)/(最大比率-最小比率)*100。然后通过绘制剂量-反应曲线，然后使用excel软件中的xlfit应用程序计算ic
50
值。
[1008]
4.实验结果：
[1009]
本发明化合物对plk1激酶的抑制活性通过以上试验进行测定，测得的ic
50
值见表1所示。
[1010]
表1本发明化合物对wee1和plk1激酶的抑制动活性以及wee1/plk1选择性
[1011]
[1012][1013]
以上表格中“+”、“++”、“+++”、“+++”、“++++”、“+++++”和“++++++”表示含义如下：
[1014]“+”表示ic
50
≤1nm；“++”表示大于1nm＜ic
50
≤10nm；“+++”表示10nm＜ic
50
≤100nm；“++++”表示100nm＜ic
50
≤1μm；“+++++”表示1μm＜ic
50
≤10μm；“++++++”表示ic
50
＞10μm；
[1015]
wee1/plk1选择性倍数(n)为化合物对plk1激酶的抑制活性与化合物对wee1激酶的抑制动活性的比值，即n＝ic
50
(plk1)/ic
50
(wee1)；
[1016]
以上表格中“*”、“**”、“***”和“****”表示含义如下：
[1017]“*”表示20＜n≤100，“**”表示100＜n≤500；“***”表示500＜n≤1000，“****”表
示1000＜n≤2500，“*****”表示n＞2500。
[1018]“na”表示未测试。
[1019]
5.实验结论：
[1020]
以上数据显示，本发明实施例化合物对wee1激酶具有良好的抑制活性，对plk1激酶抑制活性较小；且本发明实施例化合物对wee1/plk1激酶活性具有良好的选择性。
[1021]
二、代谢稳定性测定
[1022]
1.实验目的：
[1023]
测试化合物在肝细胞中的稳定性。
[1024]
使用台盼蓝测定冷冻保存的肝细胞的活力，并用缓冲液将细胞浓度调节至106个细胞/ml。在24孔板中，将400μl阳性对照/测试化合物溶液(培养介质中含2μm化合物)与400μl肝细胞(每毫升200万个细胞)一起培养。在不同时间点(0、15、30、60、90和120分钟)，通过将300μl人硫酸吲哚酚(is)添加到30μl反应混合物中并在4℃以4000rpm离心15分钟，来停止反应。取100μl上清液用lc-ms/ms分析。体外肝细胞清除率是根据化合物从其初始浓度的消除半衰期(t
1/2
)来估计的。计算每种化合物(测试或对照)与is的峰面积比。药物消除速率常数k(min-1)、t1/2(min)和体外内在清除率clint(微升/分钟/百万细胞)根据以下等式计算：
[1025]
k＝-斜率
[1026]
t
1/2
＝0.693/k
[1027]
体外cl
int
＝(0.693/t
1/2
)
×
(培养体积(μl)/细胞数(百万))
[1028]
cl
in
＝体外cl
int
×
(肝重(g)/体重(kg))
×
(细胞数(百万)/肝重(g))
[1029]
cl
hepatic
＝(q
hep
×fu
×
cl
int
)/(q
hep
+fu×
cl
int
)
[1030]
提取率＝cl
hepatic
/q
hep
[1031]
4.实验结果：
[1032]
通过以上方案得出本发明所示的化合物在人肝稳定性试验实验的结果如下表2所示：
[1033]
表2
[1034][1035][1036]
5.实验结论：
[1037]
以上数据显示，本发明实施例化合物在人肝细胞稳定性试验实验中显示出较好的代谢稳定性。