cdh1基因在鉴别花鲈来源中的应用及其RNA探针和应用

文档序号:33648626发布日期:2023-03-29 06:12阅读:来源:国知局

技术特征:
1.cdh1基因在鉴别花鲈来源中的应用,其特征在于,利用所述花鲈cdh1基因鉴别花鲈是海水来源或淡水来源。2.一种花鲈cdh1基因的rna探针,其特征在于,探针序列如seq id no.7和seq id no.8,所述探针构建来源于权利要求1所述的花鲈cdh1基因。3. 构建权利要求2所述探针的引物,其特征在于,所述引物为f: atgatggacaccagggc ,r: ccagcggttgtgtgaga。4.一种鉴别花鲈来源的方法,其特征在于,利用权利要求2所述花鲈cdh1基因的rna探针进行花鲈鳃组织原位杂交,根据mrna阳性信号分布特征鉴别海水花鲈或淡水花鲈,cdh1基因在海水花鲈的鳃组织中仅分布于鳃小片底部及相邻鳃小片之间的鳃丝上皮,而在淡水花鲈鳃组织中分布于鳃小片上皮的顶部、中部、底部及相邻鳃小片之间的鳃丝上皮。5.一种鉴别花鲈来源的方法,其特征在于,利用权利要求1所述cdh1基因表达cdh1蛋白的分布特征来鉴别花鲈来源于海水或淡水,所述方法为利用免疫组化确定cdh1蛋白的分布特征,cdh1蛋白在海水花鲈的鳃组织中仅分布于鳃小片底部及相邻鳃小片之间的鳃丝上皮,而在淡水花鲈鳃组织中分布于鳃小片上皮的顶部、中部、底部及相邻鳃小片之间的鳃丝上皮。6.一种鉴别花鲈来源的方法,其特征在于,利用实时荧光定量技术检测花鲈鳃cdh1基因相对表达量来鉴定花鲈来源于海水或淡水的方法,所述方法为以花鲈的18s作为内参基因,通过实时荧光定量技术检测花鲈cdh1基因在海淡水中的相对表达水平,来源于淡水的花鲈cdh1基因的mrna表达量显著高于海水花鲈。

技术总结
本发明涉及cdh1基因在鉴别花鲈来源中的应用及其RNA探针和应用,属于生物检测技术领域,本发明提供花鲈cdh1基因在鉴别花鲈海水来源和淡水来源中的应用;本发明首先提供一种花鲈cdh1基因RNA探针,利用所述探针进行花鲈鳃组织原位杂交,根据mRNA阳性信号分布特征区分海、淡水花鲈,还可以通过CDH1蛋白免疫组化技术,从蛋白水平上鉴定两类花鲈,最后还可以通过cdh1基因实时荧光定量PCR技术,从定量的角度区分海淡水花鲈,本发明可以在不损伤可食用肌肉的情况下,有效应用于鉴别市售活体花鲈是否为真正的野生海捕或海水养殖花鲈。否为真正的野生海捕或海水养殖花鲈。否为真正的野生海捕或海水养殖花鲈。


技术研发人员:李昀 陈通 温海深 李金库 齐鑫
受保护的技术使用者:中国海洋大学
技术研发日:2022.09.20
技术公布日:2023/3/28
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