抗CD30单克隆抗体和嵌合抗原受体的制作方法

本发明的领域是靶特异性结合分子，特别是涉及具有针对cd30的结合特异性的抗体和嵌合抗原受体及其衍生物。

背景技术：

1、背景描述包括可用于理解本发明的信息。并不承认本文提供的任何信息是现有技术或与当前要求保护的发明相关，也不承认具体地或隐含地引用的任何出版物是现有技术。

2、本文中的所有出版物和专利申请都通过引用并入，其程度如同每个单独的出版物或专利申请被具体地且单独地指明通过引用并入一样。在并入的参考文献中的术语的定义或用法与本文提供的该术语的定义不一致或相反时，适用本文提供的该术语的定义，而不适用该术语在该参考文献中的定义。

3、cd30(分化簇30，ki-1，tnfrsf8)属于肿瘤坏死因子受体超家族，并且在人中以相对低的水平在淋巴组织中的毛囊内和毛囊周t和b细胞母细胞上瞬时表达。值得注意的是，cd30的表达随特定的造血恶性肿瘤(包括间变性大细胞淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤)显著增加。因此，cd30是霍奇金病(hd)和非霍奇金(nhl)淋巴瘤亚组(诸如间变性大细胞淋巴瘤(alcl))中恶性细胞的常见诊断标志物。最近，cd30也已成为治疗各种血液疾病的治疗靶标，并且已经开发出许多特异性cd30结合分子。

4、例如，某些cd30结合部分和嵌合抗体示出于wo 2020/135559中，并且已被提议用于表达cd30的癌症或肿瘤的治疗中的过继性t细胞疗法。类似地，在us10,815,301中教导了具有针对cd30的结合活性的特异性嵌合抗原受体(car)以及这些car的各种用途，并且在仍另一实例中，构建了结合cd30的双特异性抗体，如wo 2020/068774中所示。

5、在另外的实例中，wo 2020/072519中教导了使用某些抗cd30抗体-药物缀合物与第二药物的组合治疗t细胞淋巴瘤的方法，并且在又另一组合治疗中，将特异性抗cd30抗体与检查点抑制剂一起施用以治疗霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤，如us2019/0218293中所披露。wo 2018/027022和us 7,790,160中披露了仍另外的使用抗cd30抗体和蛋白酶体抑制剂的组合治疗，并且wo 03/043583中描述了用抗cd30抗体治疗除癌症以外的免疫障碍。尽管许多已知的抗cd30结合物将展现出至少一些诊断或治疗潜力，但仍然存在多种缺点。最明显的是，至少一些抗cd30抗体或抗cd30 car的结合亲和力和/或结合特异性低于期望或具有低于期望的治疗功效。

6、因此，即使本领域已知抗cd30抗体和car的各种系统和方法，但所有或几乎所有的这些系统和方法都存在若干缺点。因此，仍然需要用于改善的抗cd30抗体和car的组合物和方法及其用途。

技术实现思路

1、本发明的主题涉及cd30特异性治疗和诊断分子的各种组合物和方法以及它们在个体并且特别是癌细胞表达或过表达cd30的癌症的诊断和治疗中的用途。

2、在本发明主题的一个方面，诸位发明人考虑了分离的抗体或其片段，其中该抗体或其片段结合cd30并且包括可变重链(vh)结构域和可变轻链(vl)结构域，其中该vh结构域选自由seq id no:1、seq id no:3和seq id no:5组成的组，并且其中该vl结构域选自由seq id no:2、seq id no:4和seq id no:6组成的组。

3、在一个实施例中，该抗体或片段包含vh52-2(seq id no:1)和vl52-2(seq id no:2)，任选地通过接头偶联在一起以形成scfv。在另一实施例中，该抗体或片段包含vh52-5(seq id no:3)和vl52-5(seq id no:4)，任选地通过接头偶联在一起以形成scfv。在另外的实施例中，该抗体或片段包含vh52-38(seq id no:5)和vl52-38(seq id no:6)，任选地通过接头偶联在一起以形成scfv。

4、最典型地，但不是必须地，抗体是igg1抗体或scfv，和/或可以进一步包含治疗剂(例如，化疗药物、放射性核素，或免疫刺激剂诸如细胞因子、细胞因子类似物、趋化因子或检查点抑制剂)。替代性地，或另外，该抗体或片段也可以包含可检测标记。

5、在其他实施例中，诸位发明人还考虑了包含本文提供的抗体或片段的嵌合蛋白。例如，该嵌合蛋白可以形成嵌合抗原受体(car)，其可以具有cd3zeta(cd3ζ)或fc受体ε(fcεriγ)信号传导结构域，或者可以具有cd28信号传导结构域、4-1bb信号传导结构域和cd3zeta(cd3ζ)信号传导结构域中的一种或多种。最典型地，该car可以具有cd8铰链结构域和cd28跨膜结构域。将容易理解的是，该car将是在nk细胞或细胞毒性t细胞中表达并呈递在其表面的重组car。在其他实例中，嵌合蛋白可形成双特异性融合蛋白(例如，包含igg fc部分，并且任选地进一步包含il15α受体部分、il15部分和il15超激动剂部分中的至少一种)，或可形成双特异性杀伤细胞衔接子(bike)或三特异性杀伤细胞衔接子(trike)。

6、因此，诸位发明人还考虑了编码本文提供的分离的抗体或片段或嵌合蛋白的重组核酸。例如，该核酸可以是表达载体的一部分或重组病毒基因组的一部分或可以呈线性dna的形式。另一方面，该重组核酸也可以是rna。

7、从不同的角度看，诸位发明人还考虑了一种药物组合物，该药物组合物包含与如本文所提供的分离的抗体或片段或嵌合蛋白组合的药学上可接受的载剂。类似地，诸位发明人还考虑了一种药物组合物，该药物组合物包含与如本文所提供的重组核酸组合的药学上可接受的载剂。

8、在本发明主题的另一方面，诸位发明人还提供了一种治疗个体的方法，其中将本文提供的药物组合物施用给该个体，典型地由此降低该个体的免疫抑制。最典型地，用癌症疫苗和/或检查点抑制剂治疗该个体。因此，诸位发明人还考虑了如本文所提供的药物组合物在治疗个体的血液癌症中的用途。

9、根据优选实施例的以下详细描述以及附图(其中相同的数字代表相同的组分)，本发明主题的各种目的、特征、方面和优点将变得更加清楚。

技术特征：

1.一种分离的抗体或其片段，其中该抗体或其片段结合至cd30，该分离的抗体或其片段包含：

2.如权利要求1所述的抗体或片段，其包含vh52-2(seq id no:1)和vl52-2(seq id no:2)，任选地通过接头偶联在一起以形成scfv。

3.如权利要求1所述的抗体或片段，其包含vh52-5(seq id no:3)和vl52-5(seq id no:4)，任选地通过接头偶联在一起以形成scfv。

4.如权利要求1所述的抗体或片段，其包含vh52-38(seq id no:5)和vl52-38(seq id no:6)，任选地通过接头偶联在一起以形成scfv。

5.如权利要求1所述的抗体或片段，其中该抗体是igg1抗体或scfv。

6.如前述权利要求1中任一项所述的抗体或片段，其进一步包含治疗剂。

7.如权利要求6所述的抗体或片段，其中该治疗剂是化疗药物、放射性核素或免疫刺激剂。

8.如权利要求7所述的抗体或片段，其中该免疫刺激剂是细胞因子、细胞因子类似物、趋化因子或检查点抑制剂。

9.如前述权利要求中任一项所述的抗体或片段，其进一步包含可检测标记。

10.一种嵌合蛋白，其包含如权利要求1所述的抗体或片段。

11.如权利要求10所述的嵌合蛋白，其中该嵌合蛋白是嵌合抗原受体(car)。

12.如权利要求11所述的嵌合蛋白，其中该car具有cd3zeta(cd3ζ)或fc受体ε(fcεriγ)信号传导结构域。

13.如权利要求11所述的嵌合蛋白，其中该car具有cd28信号传导结构域、4-1bb信号传导结构域和cd3zeta(cd3ζ)信号传导结构域中的至少一种。

14.如权利要求11所述的嵌合蛋白，其中该car具有cd8铰链结构域和cd28跨膜结构域。

15.如权利要求11所述的嵌合蛋白，其中该car是在nk细胞或细胞毒性t细胞中表达并偶联到其表面的重组car。

16.如权利要求10所述的嵌合蛋白，其被构造为双特异性融合蛋白。

17.如权利要求16所述的嵌合蛋白，其中该双特异性融合蛋白包含igg fc部分，并且任选地进一步包含il15α受体部分、il15部分和il15超激动剂部分中的至少一种。

18.如权利要求16所述的嵌合蛋白，其被构造为双特异性杀伤细胞衔接子(bike)或三特异性杀伤细胞衔接子(trike)。

19.一种重组核酸，其编码如权利要求1-9中任一项所述的分离的抗体或片段或如权利要求10-18中任一项所述的嵌合蛋白。

20.如权利要求19所述的重组核酸，其中该核酸在表达载体中或在重组病毒基因组中，或呈线性dna的形式。

21.如权利要求19所述的重组核酸，其中该核酸是rna。

22.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载剂与如权利要求1-9中任一项所述的分离的抗体或片段或如权利要求10-18中任一项所述的嵌合蛋白的组合。

23.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载剂与如权利要求19-21中任一项所述的重组核酸的组合。

24.一种治疗个体的方法，其包括施用如权利要求22-23中任一项所述的药物组合物。

25.如权利要求24所述的方法，其中将该药物组合物施用于该个体，由此降低该个体的免疫抑制。

26.如权利要求24所述的方法，其中用癌症疫苗和/或检查点抑制剂治疗该个体。

27.如权利要求22-23中任一项所述的药物组合物在治疗个体的血液癌症中的用途。

技术总结
本发明提供了具有针对CD30的特异性结合活性的抗体、其片段和包含这些抗体、其片段的嵌合蛋白。有利地，所考虑的分子可用于药物组合物中，这些药物组合物用于特别是经诊断患有造血恶性肿瘤，包括霍奇金淋巴瘤、CD30阳性B细胞淋巴瘤、CD30阳性T细胞淋巴瘤、CD30阳性NK细胞淋巴瘤，的个体的免疫疗法。

技术研发人员：C·A·奥尔森,K·尼亚齐,H·阿迪塞蒂约,H·J·加尔班,M·吉多,H·麦克法兰,T·郑,S·塔纳卡
受保护的技术使用者：南特生物公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15