一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖及其制备方法和应用

本发明属于纳米生物医药，具体涉及一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖及其制备方法和应用。

背景技术：

1、秦艽为龙胆科龙胆属gentiana(tourn.)l.秦艽(sect.cruciata gaudin)多年生草本植物的干燥根，《中国药典》2020年版规定其法定来源为植物秦艽(gentianamacrophylla pall.)、麻花秦艽(g.straminea maxim.)、粗茎秦艽(g.crassicaulisduthie ex burk.)或小秦艽(g.dahurica fisch.)。其中小秦艽又叫达乌里秦艽，在中国分布于四川北部及西北部、西北、华北、东北等地区。生长于海拔870-4500米的田边、路旁、河滩、湖边沙地、水沟边、向阳山坡及干草原等地。秦艽始载于《神农本草经》列为中品，至今已有2000多年的药用历史。秦艽是重要的中药，具有祛风湿、清湿热、止痹痛、退虚热的功效。目前秦艽的抗炎、抗风湿活性成分主要集中在其环烯醚萜类、黄酮类及三萜类等成分，有关秦艽大分子多糖结构及活性研究的报道较为少见。

2、目前关于秦艽多糖的研究多集中在其化学成分组成以及活性方面。例如，陈克克等人运用了hplc方法分析了秦艽多糖的单糖组成，结果表明秦艽多糖含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖七种单糖，其摩尔比为0.06：0.25：0.03：1.00：1.23：0.87：3.52。从麻花秦艽中被分离出来的粗多糖则被认为主要以葡萄糖为主，且具有一定的抗炎作用。zou从粗茎秦艽干燥根茎中分离到两种果胶样多糖，分别含有半乳糖(66.2％和36.1％)、半乳糖醛酸(15.8％和24.0％)和阿拉伯糖(7.8％和32.0％)，分子量分别为627kda和471.3kda，并且具有天然免疫调节作用。然而，秦艽多糖的明确结构至今尚未阐明。因此，为了进一步开发秦艽多糖的应用，需要对其明确的结构和药理活性进行深入系统研究，以开发其药用价值。

技术实现思路

1、本发明目的是提供一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖及其制备方法和应用。

2、本发明的技术方案是：

3、一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖，所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的分子量为23kda、所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖中的单糖组成为阿拉伯糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸，所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的主链以→3,5)-araf-(1→和→3,4)-galpa-(1→为连接，支链有α-araf-(1→、→5)-α-araf-(1→、α-galpa-(1→、→4,6)-β-galp-(1→和→4)-β-glcp-(1→；所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的结构式为：

4、

5、进一步的，所述阿拉伯糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸的摩尔比为50～60：25～35：2～3：5～6：4～5：0.5～1.5：1～2，所述n选自10～30之间。

6、本发明的另一技术方案是：

7、一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的制备方法，该方法包括：

8、(1)粗制：取干燥的小秦艽的根茎，粉碎，获得小秦艽粉末，所述小秦艽粉末经乙醇回流提取，去除小分子后，经热水回流提取得到小秦艽水提液，再加入乙醇沉淀，得到小秦艽粗多糖；

9、(2)精制：将所述小秦艽粗多糖上样到弱阴离子交换树脂，经2倍柱体积水洗脱除杂后，用0.1m的盐溶液洗脱得到多糖溶液，经脱盐、减压浓缩及冷冻干燥，得到阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖。

10、进一步的，在步骤(1)中，所述小秦艽粉末与所述乙醇的重量体积比为1g:7.26ml。

11、进一步的，在步骤(2)中，所述弱阴离子交换树脂的基质为琼脂糖、葡聚糖、聚甲基丙酰胺基质中的任意一种，表面键合相为二乙基氨基乙基。

12、本发明的第三种技术方案是：

13、一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖在制备治疗由氧化损伤引起的疾病的药物中的应用。

14、一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖在制备免疫调节药物中的应用。

15、本发明提供了一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖及其制备方法和应用，有益效果为：通过在秦艽根茎中提取并纯化得到高纯的多糖，并经结构鉴定得出其结构单元和基本组成。通过自由基清除实验、raw264.7氧化损伤和免疫调节模型发现本发明所得的阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖具有良好的抗氧化及免疫调节活性。本发明的方法不仅操作简单，耗时短并且成本低廉。采用该方法制备的小秦艽多糖纯度高，组分清晰，结构明确，具有多种潜在的应用价值，为开发小秦艽多糖的药用价值奠定基础。

技术特征：

1.一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖，其特征在于：所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的分子量为23kda、所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖中的单糖组成为阿拉伯糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸，所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的主链以→3,5)-araf-(1→和→3,4)-galpa-(1→为连接，支链有α-araf-(1→、→5)-α-araf-(1→、α-galpa-(1→、→4,6)-β-galp-(1→和→4)-β-glcp-(1→；所述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的结构式为：

2.根据权利要求1所述的一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖，其特征在于：所述阿拉伯糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸的摩尔比为50～60：25～35：2～3：5～6：4～5：0.5～1.5：1～2，所述n选自10～30之间。

3.一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的制备方法，其特征在于，该方法包括：

4.根据权利要求2所述的一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述小秦艽粉末与所述乙醇的重量体积比为1g:7.26ml。

5.根据权利要求2所述的一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述弱阴离子交换树脂的基质为琼脂糖、葡聚糖、聚甲基丙酰胺基质中的任意一种，表面键合相为二乙基氨基乙基。

6.一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖在制备治疗由氧化损伤引起的疾病的药物中的应用。

7.一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖在制备免疫调节药物中的应用。

技术总结
本发明公开了一种阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖，其多糖结构特征为单糖组成以阿拉伯糖和半乳糖醛酸为主，分子量为23kDa，其连接方式为→3,5)‑α‑Araf‑(1→3,5)‑α‑Araf‑(1→3,4)‑α‑GalpA‑(6‑OMe)‑(1→为其主链，并含有阿拉伯糖支链、HG结构域和末端半乳糖醛酸。其制备方法包括小秦艽粉碎，水提醇沉，除蛋白，除小分子及利用弱阴离子交换树脂吸附，然后用0.1M浓度的盐溶液洗脱，得到高纯的小秦艽多糖。上述阿拉伯糖半乳糖醛酸聚糖具有良好的抗氧化活性以及免疫调节活性，具备多种疾病治疗药物应用价值，而且结构明确、活性良好，为开发小秦艽多糖的药用价值奠定基础。

技术研发人员：李笃信,季雯,李湘,顾天怡,田盛
受保护的技术使用者：苏州大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15