1.一种用于mirna检测的dt引物,其特征在于,在5’至3’方向上由4个片段组成,分别为:反转录起始序列、通用短链引物universal pcr primer r序列、28个oligo(dt)序列和识别mirna3’端的2个简并碱基序列。
2.根据权利要求1所述的dt引物,其特征在于,所述dt引物的核苷酸序列如seq id no:1所示。
3.根据权利要求1所述的dt引物,其特征在于,所述反转录特异性的长链dt引物长度为50-60个碱基;所述通用短链检测引物universal pcr primer r的长度为20个碱基,tm值为55-65℃之间。
4.一种用于mirna检测的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1-3任一项所述的dt引物。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,还包括mirna反转录反应混合液,cdna扩增反应混合液。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述mirna反转录反应混合液包括2*mirnabuffer,e.coli poly(a)polymerase酶,reverse transcriptase酶,dntp mix。
7.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述cdna扩增反应混合液包括2*mirnaqpcr buffer,udg酶,taq酶,dntps,sybr green染料,通用短链引物universal pcrprimer r,特异性短链检测引物forward u6 primer f。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述通用短链引物universal pcrprimer r的核苷酸序列如seq id no:2所示;所述特异性短链检测引物forward u6 primerf的长度为18-25个碱基,tm值为55-65℃之间,核苷酸序列如seq id no:3所示。
9.一种mirna的检测方法,其特征在于,采用权利要求4-8任一项所述的试剂盒对样品mirna进行荧光实时定量pcr检测,根据荧光信号判断样品mirna分子表现量。
10.根据权利要求9所述的检测方法,其特征在于,所述pcr扩增程序为: