一种利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法

本发明涉及一种利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，属于生物医药制备、化学合成领域。

背景技术：

1、黄酮醇类(flavonole)是各类黄酮化合物中数量最多、分布最广泛的一类，广泛存在自然界中的某些植物和和浆果中，包括杨梅素(myricetin)、黄芩苷(baicalin)、没食子酸(gallic acid)、芦丁(rutin)、木樨草素(luteolin)等。其中，黄酮醇类化合物常含有羰基氧以及多个邻苯酚基团，也称为黄酮类多酚，较为容易与al3+、cu2+、pb2+、mn2+、fe2+等金属离子螯合形成配合物。黄酮类金属配合物与单独的黄酮配体相比较，在对超氧自由基的清除、免疫功能的调节、抗炎抗变态反应等方面都有一定的提升作用。

2、杨梅素、黄芩苷、没食子酸、芦丁、木犀草素都含有一个以上酚羟基，可与过氧自由基结合生成黄酮自由基，进而与其他自由基反应，从而终止自由基链式反应。同时黄酮类多酚化合物可提高机体免疫机能，促进机体健康，可能调节机体对一些化合物的反应性，如过敏原、病毒、致癌物质。换言之，黄酮类多酚化合物具有抗炎症、抗过敏、抗癌性能。

3、但是黄酮类多酚化合物都有水溶性低，稳定性差和膜渗透性有限等缺点，导致其生物利用度低。因而影响其通过口服吸收，并导致口服吸收不规律，限制了其很多相关实际应用。为改善在体内的吸收，大量研究工作者致力于制取水溶性更好的黄酮类多酚，以供应食品和制药领域。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服黄酮类多酚化合物水溶性差的缺点，提供一种利用聚乙二醇（peg）修饰黄酮类多酚化合物增强其水溶性的方法。

2、本发明的技术方案概述如下：

3、一种利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于包括如下步骤：

4、（1）黄酮类多酚化合物乙醇溶液的制备；

5、（2）甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）溶液的制备；

6、（3）水溶性聚乙二醇（peg）化黄酮类多酚化合物的制备。

7、进一步，所述步骤（1）具体为：将黄酮类多酚化合物溶解于无水乙醇中，使其得到最终浓度为2-40mm的黄酮类多酚化合物乙醇溶液；

8、所述步骤（2）具体为：将一定量的甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）溶解于磷酸盐缓冲溶液（pbs）中，至最终浓度为0.2-20mm，得到甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）溶液；

9、所述步骤（3）具体为：将步骤（1）中得到的黄酮类多酚化合物乙醇溶液和步骤（2）中得到的甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）溶液混合均匀，并搅拌反应2-24h；

10、随后将步骤（3）得到的混合后的产物放入透析袋中，并用磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析，直至透析液无颜色，确保未反应黄酮类多酚化合物透析干净；

11、再用纯水透析去除乙醇和磷酸盐，之后冻干得到水溶性聚乙二醇（peg）化黄酮类多酚化合物。

12、进一步，步骤（1）所述的黄酮类多酚化合物为杨梅素、黄芩苷、金丝桃苷、木犀草素、圣草酚、非瑟酮、芦丁、槲皮素、橙皮素、柚皮素、木黄酮、桑色素、橙皮苷、柚皮苷、山奈酚、白杨素中的一种。

13、进一步，步骤（2）所述的甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）的分子量为350da-80kda；所述的磷酸盐缓冲溶液（pbs）的ph 5.5-8.0，浓度为5-100mm。

14、进一步，步骤（3）所述的黄酮类多酚化合物与甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）的摩尔比为2-10，即黄酮类多酚化合物过量，确保甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）反应完全。

15、进一步，步骤（3）所述的用磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析的具体方法为：

16、①先用体积比为1:1磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇混合溶液透析24h；

17、②然后再用体积比为1：1磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇混合溶液，同时再加入磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇混合溶液总体积一倍的纯水进行透析24h；

18、③最后再用体积比为1：1磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇混合溶液，同时再加入磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇混合溶液总体积三倍的纯水进行透析24h；

19、所述的磷酸盐缓冲溶液（pbs）的ph 5.5-8.0，浓度为5-100mm。

20、进一步，步骤（3）所述的用磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析，直至透析液无颜色，确保未反应黄酮类多酚化合物透析干净，之后用纯水透析，保证磷酸盐和乙醇透析干净。

21、进一步，步骤（3）所述的具体冻干的时间为48h。

22、本发明利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法具有如下有益效果：

23、1.本发明利用聚乙二醇peg修饰黄酮类多酚化合物增强其水溶性的方法整个制备过程在室温即可，所需材料安全易得，制备过程简便。

24、2.本发明利用聚乙二醇peg修饰黄酮类多酚化合物增强其水溶性的方法得到的产物与未经修饰的黄酮类多酚化合物相比，将黄酮类多酚化合物接枝到聚乙二醇peg链上，从而达到增强其水溶性的目的。

25、3.本发明利用聚乙二醇peg修饰黄酮类多酚化合物增强其水溶性的方法与未经修饰的黄酮类多酚化合物相比，螯合金属离子能力仍然存在，并且对螯合的金属离子具有选择性。

技术特征：

1.一种利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（1）所述的黄酮类多酚化合物为杨梅素、黄芩苷、金丝桃苷、木犀草素、圣草酚、非瑟酮、芦丁、槲皮素、橙皮素、柚皮素、木黄酮、桑色素、橙皮苷、柚皮苷、山奈酚、白杨素中的一种。

4.权根据权利要求3所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（2）所述的甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）的分子量为350da-80kda；所述的磷酸盐缓冲溶液（pbs）的ph 5.5-8.0，浓度为5-100mm。

5.根据权利要求1或2或4所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的黄酮类多酚化合物与甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）的摩尔比为2-10，即黄酮类多酚化合物过量，确保甲氧基聚乙二醇巯基（mpeg-sh）或甲氧基聚乙二醇氨基（mpeg-nh2）反应完全。

6.根据权利要求2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的用磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析的具体方法为：

7.根据权利要求2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的用磷酸盐缓冲溶液（pbs）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析，直至透析液无颜色，确保未反应黄酮类多酚化合物透析干净，之后用纯水透析，保证磷酸盐和乙醇透析干净。

8.根据权利要求2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的具体冻干的时间为48h。

技术总结
一种利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，包括如下步骤：（1）黄酮类多酚化合物乙醇溶液的制备；（2）甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG‑SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG‑NH<subgt;2</subgt;）溶液的制备；（3）水溶性聚乙二醇（PEG）化黄酮类多酚化合物的制备。本发明利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物增强其水溶性的方法整个制备过程在室温即可，所需材料安全易得，制备过程简便。本发明利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物将黄酮类多酚化合物接枝到聚乙二醇链上，从而达到增强其水溶性的目的。本发明方法制得的产物与未经修饰的黄酮类多酚化合物相比，螯合金属离子能力仍然存在，并且对螯合的金属离子具有选择性。

技术研发人员：马丽,刘利梅,王晓莉,姜艳军,吴伟松
受保护的技术使用者：河北工业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12