一种CD103抗体及其应用的制作方法

本发明涉及抗体，具体涉及一种抗cd103抗体及其在疾病的诊断、预后、检测和治疗中应用。

背景技术：

1、整合素αe亚单位即cd103，与整合素β7组成αeβ7。整合素αeβ7高表达在肠道黏膜中的白细胞上，包含上皮内淋巴细胞、树突状细胞、肥大细胞和t调节细胞。整合素αeβ7通过与钙粘蛋白的相互作用介导淋巴细胞与肠道上皮细胞的黏附，使得淋巴细胞可以驻留在肠道内，而这种黏附主要依赖于整合素αe亚基内的α-i域的金属离子依赖的黏附位点。

2、cd103被用来作为组织驻留记忆(trm)状态的分子标志，而cd103在t细胞上的表达，预示了其在肿瘤组织中的归巢和驻留的能力。肿瘤中cd8+t细胞、vδ1t细胞和vδ2t细胞多为cd103+trm表型。值得注意的是，正常肺组织中也有许多cd8+t细胞、部分vδ1t和cd4+t细胞表现为cd103+trm表型。

3、本领域需要一种抗cd103的抗体，其能够用于检测cd103并且对疾病，特别地，对癌症特异性淋巴细胞的表达特征的了解，和对应癌症靶标的治疗和预防。

技术实现思路

1、有鉴于此，第一方面，本发明提供了本发明的目的之一是提供一种抗cd103抗体。本发明的另一目的是提供该抗体的应用及其相关产品。

2、为实现上述目的，本发明通过杂交瘤技术筛选到一株抗cd103特异性的杂交瘤，制备小鼠腹水并纯化抗体，得到能够特异性结合cd103的鼠源性单克隆抗体(mab)，该抗体对cd103具有较高的亲和力，同时具有靶向cd103的能力。

3、具体地，本发明提供以下技术方案：

4、本发明提供抗cd103抗体或其抗原结合片段，其重链可变区的互补决定区cdr1具有如seq id no.1所示的氨基酸序列，cdr2具有如seq id no.2所示的氨基酸序列，cdr3具有如seq id no.3所示的氨基酸序列。轻链可变区的互补决定区cdr1具有如seq id no.4所示的氨基酸序列，cdr2具有如seq id no.5所示的氨基酸序列，cdr3具有如seq id no.6所示的氨基酸序列。

5、优选地，所述抗cd103抗体或其抗原结合片段的重链可变区具有如seq id no.7所示的氨基酸序列。轻链可变区具有如seq id no.8所示的氨基酸序列。

6、进一步优选地，所述抗cd103抗体为鼠源单克隆抗体。

7、本发明中，所述抗原结合片段可选自fab、fab'、f(ab')2、fd、fv、dab、互补决定区片段、单链抗体、人源化抗体、嵌合抗体、双特异抗体或多特异抗体。

8、本发明提供含有所述抗cd103抗体或其抗原结合片段的双特异抗体或多特异抗体。

9、基于上述抗体，本发明提供一种核酸分子，其编码所述抗cd103抗体或其抗原结合片段。

10、根据上述提供的抗cd103抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列，本领域技术人员可以确定编码所述抗cd103抗体或其抗原结合片段的核酸分子的核苷酸序列，并根据宿主细胞的密码子偏好性选择不同的核酸分子的核苷酸序列。

11、本发明还提供一种生物材料，其含有编码所述抗cd103抗体或其抗原结合片段的核酸分子，所述生物材料为表达盒、载体或宿主细胞。

12、以上所述的表达盒是指将所述核酸分子的上游或下游连接用于转录、翻译的调控元件得到的重组核酸分子。

13、以上所述的载体是指可将核酸分子插入其中的一种核酸运载工具，包括但不限于质粒、人工染色体、噬菌体、动物病毒等，可以为表达载体，也可以为克隆载体或非复制型载体。

14、以上所述的宿主细胞可以为微生物细胞(如：大肠杆菌、酵母细胞等)或动物细胞(如：昆虫细胞、cho细胞、bhk细胞，hek293细胞等用于表达、制备抗体的细胞)，其中，动物细胞为不能够繁殖成为动物个体的细胞。

15、基于上述抗cd103抗体或其抗原结合片段的功能，本发明提供所述抗cd103抗体或其抗原结合片段、所述核酸分子或所述生物材料的如下任一种应用：

16、(1)在制备用于检测cd103的试剂或试剂盒中的应用；

17、(2)在制备用于预防或治疗癌症的药物中的应用；

18、以上(1)中所述的检测cd103包括检测cd103的存在或其水平。

19、在一个具体的实施方案中，所述存在或其水平可以是机体内的成像。

20、以上(2)中所述的癌症包括毛细胞白血病、hclv、肠和肠外淋巴瘤、肠病相关t细胞淋巴瘤、t淋巴细胞白血病/淋巴瘤、t细胞幼淋巴细胞白血病、成人t细胞白血病/淋巴瘤、蕈样肉芽肿、间变性大细胞淋巴瘤alcl、皮肤t细胞淋巴瘤，和母细胞浆细胞样树突状细胞肿瘤。

21、基于上述抗cd103抗体或其抗原结合片段，本发明提供一种抗体偶联物，其为由所述抗cd103抗体或其抗原结合片段与载体或药物偶联得到，或者由所述抗cd103抗体或其抗原结合片段与经化学或生物标记得到。

22、以上所述的载体可为任意可与蛋白质偶联的载体或药物载体。

23、以上所述的化学标记包括同位素、胶体金、荧光素、生物素标记等。

24、以上所述的生物标记包括蛋白标记、酶标记等。

25、本发明提供一种检测试剂，其含有所述抗cd103抗体或其抗原结合片段或含有所述抗体偶联物。

26、以上所述的试剂盒还可包含免疫学检测、流式细胞检测等所需的其它试剂。

27、本发明提供一种药物组合物，其含有所述抗cd103抗体或其抗原结合片段或含有所述抗体偶联物。

28、以上所述的药物组合物还可包含药学上可接受的载体或赋形剂。所用载体或赋形剂的类型可根据药物组合物的剂型和给药方式进行选择。所述药物组合物还可包含具有其它功效的抗体或药物活性成分。

29、本发明的有益效果在于：本发明提供一种针对cd103的单克隆抗体，该抗体能够与cd103特异性结合，具有高度特异性和高结合能力，可用于抗cd103的免疫荧光染色和流式细胞染色等检测，即使在较高稀释度时，仍然具有较好的检测效果。同时，该抗体还能为cd103阳性的肿瘤的治疗都提供了有效的潜在选择的工具。

技术特征：

1.一种抗cd103抗体，其特征在于，其重链可变区的互补决定区cdr1的氨基酸序列如seq id no.1所示，cdr2的氨基酸序列如seq id no.2所示，cdr3的氨基酸序列如seq idno.3所示；轻链可变区的互补决定区cdr1的氨基酸序列如seq id no.4所示，cdr2的氨基酸序列如seq id no.5所示，cdr3的氨基酸序列如seq id no.6所示。

2.根据权利要求1所述的抗cd103抗体，其特征在于，其重链可变区的氨基酸序列如seqid no.7所示；轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.8所示。

3.核酸分子，其特征在于，其编码权利要求1或2所述的抗cd103抗体。

4.生物材料，其特征在于，其含有权利要求3所述的核酸分子，所述生物材料为表达盒、载体或宿主细胞。

5.权利要求1或2所述的抗cd103抗体或权利要求3所述的核酸分子或权利要求4所述的生物材料的如下任一种应用：

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述(2)中所述的癌症包括毛细胞白血病、hclv、肠和肠外淋巴瘤、肠病相关t细胞淋巴瘤、t淋巴细胞白血病/淋巴瘤、t细胞幼淋巴细胞白血病、成人t细胞白血病/淋巴瘤、蕈样肉芽肿、间变性大细胞淋巴瘤alcl、皮肤t细胞淋巴瘤，和母细胞浆细胞样树突状细胞肿瘤。

7.一种抗体偶联物，其特征在于，其为由权利要求1或2所述的抗cd103抗体与载体或药物偶联得到，或者由权利要求1或2所述的抗cd103抗体与经化学或生物标记得到。

8.一种检测试剂，其特征在于，其含有权利要求1或2所述的抗cd103抗体或权利要求7所述的抗体偶联物。

9.一种药物组合物，其特征在于，其含有权利要求1或2所述的抗cd103抗体或权利要求7所述的抗体偶联物，以及药学上可接受的载剂。

技术总结
本发明涉及抗体技术领域，具体涉及一种抗CD103抗体及其应用。提供一种抗CD103抗体，其重链可变区的互补决定区CDR1具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。轻链可变区的互补决定区CDR1具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。

技术研发人员：黄启宽,朱国振,刘国卿
受保护的技术使用者：上海精翰生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13