一种提高蛋白表达的核酸分子及其在mRNA疫苗中的应用

本发明涉及mrna疫苗，尤其涉及一种提高蛋白表达的核酸分子及其在mrna疫苗中的应用。

背景技术：

1、mrna疫苗作为新兴的疫苗技术，与传统疫苗相比具有良好免疫原性、无需佐剂、研发周期较短的优点，并且这项技术还在快速发展，近年来，构建的mrna在各方面性质逐渐稳定，递送系统方面的技术日渐成熟，这加速了mrna疫苗的发展。目前个别疫苗在动物模型中观察到了有效、持久和安全的免疫反应，使基于mrna的疫苗接种成为一个可替代传统疫苗的方案。目前对于大多数mrna疫苗研发来说，主要障碍是实现疫苗快速的开发与优化。

2、mrna包括5＇帽、5＇非翻译区(5＇utr)、抗原编码序列、3＇非翻译区(3＇utr)和多聚腺苷化尾；除了抗原编码序列外，其他结构元件对mrna的稳定性和转录效率都是至关重要的。其中，5＇非翻译区和3＇非翻译区与信号肽可以改变mrna翻译时的稳定性与效率，utr与信号肽的设计和选择对于确保抗原的充分生产和有效的疫苗接种至关重要，不同的utr影响蛋白的翻译效率，因此，提供一种utr有助于mrna疫苗的开发。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种提高蛋白表达的核酸分子及其在mrna疫苗中的应用。本发明筛选了能够提高mrna表达效率和稳定性的优势utr，并以此utr制备sars-cov-2病毒疫苗，来提高疫苗的免疫原性，增强机体免疫应答，提高免疫力。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种提高蛋白表达的核酸分子，所述核酸分子包括5＇utr和3＇utr；所述5＇utr的dna序列如seq id no.23所示，所述3＇utr的dna序列如seq id no.24所示。

4、本发明还提供了一种上述核酸分子对应的rna序列，所述5＇utr的rna序列如seqid no.25所示，所述3＇utr的rna序列如seq id no.26所示。

5、本发明还提供了一种包含上述rna序列的mrna，所述mrna的rna序列如seq idno.27所示；对应的dna序列如seq id no.28所示。

6、本发明还提供了一种上述rna序列在制备mrna疫苗中的应用。

7、本发明还提供了一种包含上述rna序列的mrna疫苗，所述疫苗的抗原为sars-cov-2。

8、优选的，所述mrna疫苗的rna序列如seq id no.31所示；对应的dna序列如seq idno.29所示。

9、本发明提供了一种提高蛋白表达的核酸分子及其在mrna疫苗中的应用。本发明利用egfp和gluc报告系统，联合转录组学分析，筛选出能够提高mrna的表达量的优势核酸分子(utr)。利用本发明提供的优势utr，能够提高sars-cov-2病毒rbd基因表达强度和持续性，所制成的疫苗可诱导机体产生更高水平的特异性免疫球蛋白igg，大大提高机体免疫力。

技术特征：

1.一种提高蛋白表达的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括5＇utr和3＇utr；所述5＇utr的dna序列如seq id no.23所示，所述3＇utr的dna序列如seq id no.24所示。

2.一种权利要求1所述的核酸分子对应的rna序列，其特征在于，所述5＇utr的rna序列如seq id no.25所示，所述3＇utr的rna序列如seq id no.26所示。

3.一种包含权利要求2所述rna序列的mrna，其特征在于，所述mrna的rna序列如seq idno.27所示；对应的dna序列如seq id no.28所示。

4.一种权利要求2所述的rna序列在制备mrna疫苗中的应用。

5.一种包含权利要求2所述rna序列的mrna疫苗，其特征在于，所述疫苗的抗原为sars-cov-2。

6.如权利要求5所述的mrna疫苗，其特征在于，所述mrna疫苗的rna序列如seq idno.31所示；对应的dna序列如seq id no.29所示。

技术总结
本发明提供了一种提高蛋白表达的核酸分子及其在mRNA疫苗中的应用，属于mRNA疫苗技术领域。本发明提供的提高蛋白表达的核酸分子，包括5＇UTR和3＇UTR；所述5＇UTR的DNA序列如SEQ ID NO.23所示，所述3＇UTR的DNA序列如SEQ ID NO.24所示。本发明筛选了能够提高mRNA表达效率和稳定性的优势UTR，并以此UTR制备SARS‑CoV‑2病毒疫苗，来提高疫苗的免疫原性，增强机体免疫应答，提高免疫力。

技术研发人员：李晋涛,丁晓艳,周伃欣,何久香
受保护的技术使用者：中国人民解放军陆军军医大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15