1.一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,具体步骤如下:
2.根据权利要求1所述的一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s1中,所述两对sgrna序列分别为grna-a和grna-b。
3.根据权利要求2所述的一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,所述grna-a包括:
4.根据权利要求1所述的一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s2中,所述供体载体包括5’同源臂、flox区域、3’同源臂、用于连接5’同源臂与flox区域的第一loxp元件以及用于连接3’同源臂与flox区域的第二loxp元件,其中flox区域包括与ip6k3基因第3外显子的dna序列同源的序列,5’同源臂为与ip6k3基因上flox区域所对应区域相间隔的一段上游dna序列的同源序列,3’同源臂为与ip6k3基因上flox区域所对应区域相间隔的一段下游dna序列的同源序列。
5.根据权利要求4所述的一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,所述flox区域大小为1276bp。
6.根据权利要求1所述的一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s2中,所述野生型小鼠为c57bl/6j小鼠。
7.根据权利要求1所述的一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s2中,对f0代小鼠进行pcr鉴定和测序验证携带flox位点的阳性f0代小鼠。
8.根据权利要求7所述的一种利用crispr-cas9条件性敲除肝脏ip6k3基因动物模型的构建方法,其特征在于,所述pcr鉴定的特异性引物包括:
9.一种ip6k3基因在制备小脑浦肯野细胞形态改变和突触数量减少动物模型中的应用。
10.一种敲除ip6k3基因在制备治疗脂肪肝引起的糖脂代谢紊乱药物中的应用。