本发明涉及生物磁珠,尤其涉及一种超顺磁性磁珠、其制备方法及应用。
背景技术:
1、磁珠是指具有细小粒径的超顺磁微球。功能化纳米磁珠首先具有超强的顺磁性,在磁场中能够迅速聚集,离开磁场后又能够均匀分散。其次,具有合适的且均一的粒径,保证了足够强的磁响应性和良好的分散性。再次,具有丰富的表面活性基团,以便可以和生化物质偶联,并在外磁场的作用下实现与被待测样品的分离。一般地,功能化纳米磁珠应用于生物、医学及食品领域需要满足几个条件:①具有高磁响应性;②悬浮稳定性要好;③粒径小且均一;④能够与蛋白、核酸等生物大分子特异性结合,生物相容性好。
2、磁珠产品是核酸检测的提取环节的关键物料。与柱提法相比,磁珠法核酸提取试剂更容易适配自动化设备,更能满足大规模核酸检测对高效率和高可靠性的要求。在保证核酸检测准确性和稳定性的基础上,进一步控制核酸检测原料的质量和成本尤其重要。因此,本发明经过不断的研发优化和反复的测试验证,提供一种超顺磁性磁珠,以改善上述缺陷。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的问题,一种超顺磁性磁珠、其制备方法及应用。
2、为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
3、本发明提供了一种超顺磁性磁珠的制备方法,包括如下步骤:
4、1)将氧化铁磁芯纳米粒子、阴离子表面活性剂与水混合后进行表面改性处理,得到反应液i;
5、2)将所述步骤1)中的反应液i与甲基丙烯酸混合后进行交联反应,得到反应液ii
6、3)将所述步骤2)中的反应液ii与k2s2o8混合后进行聚合反应,得到反应液iii;
7、4)将所述步骤3)中的反应液iii依次进行磁分离、除杂、清洗、洗脱后,得到超顺磁性磁珠。
8、优选的,所述步骤1)中氧化铁磁性纳米粒子、阴离子表面活性剂和水的质量体积比为0.8~1.2g:1~1.5g:220~270ml,所述阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠、烷基苯磺酸钠中的一种或多种。
9、优选的,所述步骤1)中表面改性处理的温度为65~75℃,时间为25~35min。
10、优选的,所述步骤2)中甲基丙烯酸与反应液i的体积比为0.8~1.2:220~270。
11、优选的,所述步骤2)中k2s2o8与反应液ii的质量体积比为1.5~2.5g:220~270ml。
12、优选的,所述步骤2)中交联反应的温度为65~75℃,反应时间为40~55min。
13、优选的,所述步骤3)中聚合反应的温度为68~74℃,反应时间为100~145min。
14、优选的,所述步骤4)中的磁分离过程中采用的仪器是强力钕永磁,除杂过程中采用的仪器是磁性微粒集中器,洗脱过程中采用的溶剂为去离子水或ddh2o。
15、本发明还提供了一种所述制备方法制备的超顺磁性磁珠。
16、本发明还提供了一种所述制备方法制备的超顺磁性磁珠、所述的超顺磁性磁珠在制备核酸检测试剂中的应用。
17、与现有技术相比,本发明具有如下的有益效果:
18、本发明将阴离子表面活性剂对氧化铁磁芯纳米粒子表面进行修饰,降低了其表面能,减小了纳米粒子间的相互作用,稳定纳米粒子阻止其团聚。
19、本发明所述超顺磁性磁珠磁响应性快,适用于大规模自动化核酸提取,核酸结合能力好,微量dna/rna捕获效率高,非特异性杂质吸附率低,对下游反应无抑制影响,兼容有醇提取体系和无醇提取体系。
1.一种超顺磁性磁珠的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中氧化铁磁性纳米粒子、阴离子表面活性剂和水的质量体积比为0.8~1.2g:1~1.5g:220~270ml;所述阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠、烷基苯磺酸钠中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中表面改性处理的温度为65~75℃,时间为25~35min。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中甲基丙烯酸与反应液i的体积比为0.8~1.2:220~270。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中k2s2o8与反应液ii的质量体积比为1.5~2.5g:220~270ml。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中交联反应的温度为65~75℃,反应时间为40~55min。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3)中聚合反应的温度为68~74℃,反应时间为100~145min。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤4)中的磁分离过程中采用的仪器是强力钕永磁,除杂过程中采用的仪器是磁性微粒集中器,洗脱过程中采用的溶剂为去离子水或ddh2o。
9.一种权利要求1~8任一项所述制备方法制备的超顺磁性磁珠。
10.一种权利要求1~8任一项所述制备方法制备的超顺磁性磁珠、权利要求9所述的超顺磁性磁珠在制备核酸检测试剂中的应用。