长双歧杆菌长亚种THRK-7782及改善便秘、修复肠道黏膜屏障和调节免疫力的应用的制作方法

本发明涉及微生物，具体涉及一株长双歧杆菌长亚种thrk-7782及改善便秘、修复肠道黏膜屏障和调节免疫力的应用。

背景技术：

1、慢性便秘主要表现为排便次数减少、粪便干结和(或)排便困难，是常见的中老年综合征，患病率随着中老年人年龄的增加而逐年增加。另有研究发现，高血糖会导致肠道内的渗透压增高，使得肠道内的水分被吸收，导致粪便含水量下降而难以排出，高血糖还会影响肠道的蠕动和消化功能，延长食物残渣在肠道内的停留时间；高血压会导致血管收缩，影响肠道的血液循环，高血脂会导致肠道内的脂肪堆积，均会导致肠道蠕动减缓；高血压、高血脂还会导致肠道黏膜受损，使得肠道内的细菌数量增多，间接影响肠道的正常蠕动和消化功能。因此，三高(高血糖、高血压、高血脂)人群更易患便秘。而高血糖、高血压、高血脂是中老人的常见慢性代谢性疾病，这进一步增加了中老年出现慢性便秘的风险。慢性便秘不仅严重影响中老年人的生活质量及身心健康，由其带来的各种健康问题还会耗费大量的医疗经费。

2、使用泻药是目前中老年人缓解便秘的主要治疗方式，但泻药仅能在短期内改善症状，长期使用会影响肠道的屏障功能和肠道微生态平衡，并会造成结肠黑变病，进而导致便秘更加严重。因此有必要开发一种温和、健康且有效的方法从根本上改善中老年人的肠道功能，从而缓解其便秘问题。

技术实现思路

1、针对以上技术问题，本发明提供一株长双歧杆菌长亚种thrk-7782菌株其在制备改善便秘、修复肠道黏膜屏障和调节免疫力产品中的应用，该菌株能够减少肠道菌群产生甲烷，且能够促进肠道蠕动，从而能够缓解三高中老年人便秘症状，同时还具有改善肠道屏障和调节免疫的功能。

2、为达到上述发明目的，本发明采用了如下的技术方案：

3、一种长双歧杆菌长亚种thrk-7782菌株，其分类名称为长双歧杆菌长亚种(bifidobacterium longum subsp.longum)，于2023年7月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为cgmcc no.27909；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中科院微生物研究所。

4、相比于其他长双歧杆菌长亚种，本发明提供的保藏编号为cgmcc no.27909的长双歧杆菌长亚种thrk-7782具备以下优势：

5、(1)有研究发现呼气试验中甲烷含量和便秘的严重程度呈正相关，甲烷含量越高，排便次数越少，便秘程度越严重。产甲烷菌可以通过甲烷增加肠道的运输时间，粪便在肠道停留时间过久会导致粪便干硬促进便秘的发生。本发明经研究发现，本发明提供的长双歧杆菌长亚种thrk-7782能够降低肠道菌群产甲烷量，具有通过调控甲烷含量缓解便秘的潜力；

6、(2)动物实验证明，本发明提供的长双歧杆菌长亚种thrk-7782能够降低能提高粪便含水量、促进肠蠕动，保持大便的通畅和滋润，有良好的润肠通便效果；

7、(3)本发明提供的长双歧杆菌长亚种thrk-7782能降低aqp-3的mrna相对表达率，显著提升小鼠肠道黏蛋白muc2和紧密连接蛋白zo-1的mrna相对表达率，改善肠道屏障功能；

8、(4)本发明提供的长双歧杆菌长亚种thrk-7782具备较好的黏附能力，能在肠道中黏附定殖；

9、(5)本发明提供的长双歧杆菌长亚种thrk-7782能够提升抗炎因子il-10的表达，具有免疫调节功能。

10、(6)本发明提供的长双歧杆菌长亚种thrk-7782具有良好的耐酸耐胆盐能力，在经过胃肠道消化后仍能保持较高活性。

11、第二方面，本发明还提供了上述长双歧杆菌长亚种thrk-7782的培养方法：将所述长双歧杆菌长亚种thrk-7782接种到含有黏蛋白的培养基中厌氧培养。

12、本发明提供的长双歧杆菌长亚种thrk-7782能与黏蛋白互作，在含有黏蛋白的培养基中厌氧培养后，其黏附能力和生长性能均能得以明显提升。

13、结合第二方面，所述培养基为改良mrs液体培养基，其成分包括：葡萄糖18.0～22.0g/l，蛋白胨9.0～11.0g/l，牛肉粉6.0～7.0g/l，酵母浸粉4.5～5.5g/l，乙酸钠4.5～5.5g/l，柠檬酸氢二铵1.8～2.2g/l，磷酸氢二钾1.8～2.2g/l，mgso4·7h2o 0.52～0.64g/l，mnso4·h2o 0.23～0.27g/l，l-半胱氨酸盐酸盐0.45～0.55g/l和吐温80 0.9～1.1ml/l。

14、优选地，所述改良mrs液体培养基的成分包括：葡萄糖20.0g/l，蛋白胨10.0g/l，牛肉粉6.5g/l，酵母浸粉5.0g/l，乙酸钠5.0g/l，柠檬酸氢二铵2.0g/l，磷酸氢二钾2.0g/l，mgso4·7h2o 0.58g/l，mnso4·h2o 0.25g/l，l-半胱氨酸盐酸盐0.5g/l和吐温80 1.0ml/l。

15、结合第二方面，所述黏蛋白的添加量为5～15mg/ml。

16、第三方面，本发明还提供了上述长双歧杆菌长亚种thrk-7782在制备改善便秘的产品中的应用。

17、结合第三方面，所述产品包括所述长双歧杆菌长亚种thrk-7782的活菌体或代谢产物中的至少一种。

18、结合第三方面，所述产品为提高粪便含水量的产品。

19、结合第三方面，所述产品为促进肠蠕动的产品。

20、结合第三方面，所述产品包括药品、保健食品或食品。药品、保健食品的剂型包括但不限于粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂或口服液等常规剂型，食品的形式包括但不限于液体饮料、固体饮料、乳制品、冷制糕点等。

21、第四方面，本发明还提供了所述的长双歧杆菌长亚种thrk-7782在制备修复肠道黏膜屏障的产品中的应用。修复肠道黏膜屏障不仅有利于维护正常的肠蠕动和消化，还能阻止机体受内源性微生物及其毒素的侵害。

22、结合第四方面，所述产品包括所述长双歧杆菌长亚种thrk-7782的活菌体或代谢产物中的至少一种。

23、结合第四方面，所述产品为降低水通道蛋白aqp-3表达的产品。

24、结合第四方面，所述产品为提高黏蛋白muc2表达的产品。

25、结合第四方面，所述产品为提高紧密连接蛋白zo-1表达的产品。

26、结合第四方面，所述产品包括药品、保健食品或食品。药品、保健食品的剂型包括但不限于粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂或口服液等常规剂型，食品的形式包括但不限于液体饮料、固体饮料、乳制品、冷制糕点等。

27、第五方面，本发明还提供了所述的长双歧杆菌长亚种thrk-7782在制备调节免疫力的产品中的应用。

28、结合第五方面，所述产品包括所述长双歧杆菌长亚种thrk-7782的活菌体或代谢产物中的至少一种。

29、结合第五方面，所述产品为提高抗炎因子il-10表达的产品。

30、结合第五方面，所述产品包括药品、保健食品或食品。药品、保健食品的剂型包括但不限于粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂或口服液等常规剂型，食品的形式包括但不限于液体饮料、固体饮料、乳制品、冷制糕点等。