一种用于盐碱地改良的微生物复合菌剂及其制备方法

本发明涉及微生物菌肥，具体涉及一种用于盐碱地改良的微生物复合菌剂及其制备方法。

背景技术：

1、土壤盐渍化指易溶性盐分在土壤表层积累的现象或过程，世界范围内约20％的耕地受到盐渍化的影响，且呈现逐年增加趋势，预计21世纪中期盐碱土面积将占可耕作土壤面积的50％以上。中国盐渍土壤面积大、分布广，同时还有大面积的潜在盐渍化土壤，而作物在盐渍化土壤上生长会表现出不良状态，比如抑制生长、破坏光合作用、从而使植物细胞膜受到伤害、营养失衡等，严重时可能会造成作物绝产等。“18亿亩耕地红线要守住，5亿亩盐碱地也要充分开发利用。”基于此目的，结合当前土壤盐渍化问题，需要积极挖掘有潜力的盐碱地以扩充耕地面积。

2、近年来，在对植物抗逆性研究过程中发现，生物措施是近些年来迅速发展的最具生态和经济效益且切实可行的盐渍土改良技术。植物根际促生菌(plant growthpromoting rhizobacteria，pgpr)是指能够在植物根际大量定殖并能促进植物生长的微生物。pgpr作为战略性微生物资源，利用其制作的微生物菌剂目前已得到广泛应用，对于种植业发展、土地改良具有重大意义。菌剂中的微生物能在土壤中繁殖，从而改善土壤养分状况、提高土壤酶活性、增加微生物多样性，为作物生长提供一个良好的生活环境。施用微生物菌剂具有良好的生态效益，能有效增强植物抗逆性，改善盐碱土生态环境，促进土壤脱盐、抑制返盐，减轻高盐浓度的毒性并改善植物生长，同时修复退化的盐渍土。可见，微生物菌剂必将在我国农业绿色发展中发挥越来越重要的作用，是开发并修复盐碱地、提高农业生态系统生产力的可持续方法。

3、因此，针对我国当前土壤盐渍化的现状，研究开发用于盐碱地改良的微生物复合菌剂具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明提供一种用于盐碱地改良的微生物复合菌剂及其制备方法，通过添加有益微生物，改善根际微生态环境，减轻盐碱胁迫对植物造成的损伤，促进植物生长。

2、本发明提供的技术方案如下：

3、一种用于盐碱地改良的微生物复合菌剂，所述的微生物复合菌剂包括：耐盐促生菌枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)gau-00667、莫海威芽孢杆菌(bacillusmojavensis)gau-00660和产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668的菌株培养液。

4、进一步地，所述耐盐促生菌枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)gau-00667，2023年保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no:m20231824；所述莫海威芽孢杆菌(bacillus mojavensis)gau-00660，2023年保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no:m20231823；所述产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668，2023年保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no:m20231825。

5、进一步地，所述的微生物复合菌剂在缓解植物所受盐胁迫损伤、改善盐碱地土壤中的应用。

6、同时，本发明还提供一种用于盐碱地改良的微生物复合菌剂的制备方法，用于制备上述的微生物复合菌剂，包括如下步骤：

7、步骤(1)菌株选择：筛选具有溶磷、固氮、解钾、分泌植物激素、拮抗病原菌功效的耐盐促生菌枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)gau-00667、莫海威芽孢杆菌(bacillusmojavensis)gau-00660以及产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668；

8、步骤(2)制备菌株培养液：将所述枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)gau-00667、所述莫海威芽孢杆菌(bacillus mojavensis)gau-00660以及所述产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668进行液体培养，分别得到单一菌株培养液；

9、步骤(3)制备微生物复合菌剂：将不同所述单一菌株培养液按照一定配比混合，接种至高密度混合发酵专用培养基中，进行培养得到所述微生物复合菌剂。

10、进一步地，步骤(1)中，筛选所述枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)gau-00667、所述莫海威芽孢杆菌(bacillus mojavensis)gau-00660以及所述产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668采用平板对峙法，确定菌株间无拮抗作用。

11、进一步地，步骤(2)中，所述单一菌株培养液的制备方法具体为：挑取所述枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)gau-00667、所述莫海威芽孢杆菌(bacillus mojavensis)gau-00660以及所述产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668的单菌落分别接种于装有100ml lb液体培养基的250ml三角瓶中，于28℃、210r/min摇床培养48h，使得所述液体菌剂活菌浓度大于108cfu/ml，用无菌水调节单一菌株培养液od600值为1.0。

12、进一步地，步骤(3)中，将所述枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)gau-00667、所述莫海威芽孢杆菌(bacillus mojavensis)gau-00660以及所述产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668的单一菌株培养液以体积比2:4:1的比例混合，以接种量为5％～10％，接种至高密度混合发酵专用培养基中，于30℃、210r/min条件下培养48h后，得到所述微生物复合菌剂，所述微生物复合菌剂中的有效活菌数均≥109cfu/ml。

13、进一步地，所述高密度混合发酵专用培养基中包括以下组分：甘油1.0％-1.5％、蛋白胨0.8％-1.0％、酵母浸粉0.4％-0.6％、碳酸钙0.4％-0.6％，磷酸二氢钾0.2％-0.3％，其余为水，配制培养基用水需满足ph值为6.5-7.5。

14、进一步地，步骤(3)中，制备得到的所述微生物复合菌剂的应用方法为：拌种、滴灌或直接喷施，使用量为5.0kg-6.0kg/亩。

15、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

16、本发明提供的微生物复合菌剂包括耐盐促生菌枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)gau-00667、莫海威芽孢杆菌(bacillus mojavensis)gau-00660和产黄假单胞菌(pseudomonas synxantha)gau-00668，该微生物复合菌剂具有固氮、溶磷、分泌植物激素等促生能力，不会引起植物病害，具有良好的生态适应性，同时对土壤结构具有改善作用，而且使用安全，经济效益高，不会对生态环境造成威胁。利用本发明制备的微生物复合菌剂能够提高植物产量，提高土壤有机质含量及土壤酶活性，改善土壤质量及根际微生态环境，减轻盐碱胁迫对植物造成的损伤。