一种单胞菌及其制备方法和应用

本发明涉及微生物，具体涉及一种单胞菌及其制备方法和应用。

背景技术：

1、我国为世界第一农业大国，在农业种植中，化肥是必不可少的一项生产资料，但化肥的使用对于环境的危害也是不言而喻。因此，微生物菌剂应时而生。

2、目前，我国常见的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌，在农业中其主要作用为生物防治，用于防治叶部病害(灰霉病、白粉病)和根部病害(枯萎病、立枯病、腐烂病、根腐病、黑斑病菌)。其原理为枯草芽孢杆菌通过成功定殖至植物根际、体表或体内，与病原菌竞争植物周围的营养，分泌抗菌物质以抑制病原菌生长，同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，从而达到生防的目的。

3、市面上常见的枯草芽孢杆菌菌剂主要应用为生物防治方面，通过生物防治带来的抗病性间接影响其在作物促生及土壤改良领域的效果。但由于其在作物促生和土壤改良领域上主要起到间接效果，不能够直接促进植物的生长水平，对植物的促生作用并不突出。

4、为此，现需要一种能够直接促进经济作物生长的微生物菌剂。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种单胞菌及其制备方法和应用，以解决现有技术中农作物生长难以具有突出性生长的技术问题。

2、为解决上述技术问题，本发明具体提供下述技术方案：

3、本发明提供了一种单胞菌，于2023年07月17日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，菌种保藏编号为cgmcc no.27942，所述单胞菌的基因序列如序列表seq id no.1所示。

4、作为本发明的一种优选方案，所述单胞菌能够在土壤中定殖。

5、作为本发明的一种优选方案，所述单胞菌能够提高土壤中微生物种群的相对丰度。

6、作为本发明的一种优选方案，所述单胞菌能够提高土壤中拟杆菌门，沃氏水单胞菌和硝化螺旋菌门、纤柔菌、嗜热杆菌、木贼镰孢菌的相对丰度。

7、本发明提供了一种单胞菌的制备方法，包括如下步骤：

8、配置第一纯化培养基，将所述第一纯化培养基放入至高压锅中，高压灭菌，温度为121℃，时间为25min；

9、取土壤，将土壤溶于水中，搅拌均匀，沉淀30min后取上层悬浮液加入至所述第一纯化培养基中进行第一次培养，在培养过程中向所述纯化培养基中加入浓度为200μg～2mg/l的稀土溶液作为选择剂，培养72～120小时，温度为10～20℃，ph为5.0～10.0，得到单系菌株；

10、配置第二纯化培养基，进行高压灭菌，将所述单系菌株按照涂布培养法涂在所述第二纯化培养基中上，放入培养箱进行扩繁培养，温度为10～20℃，五天后收取菌种；

11、对所述菌种定量稀释后，进行土壤改良和农作物促生能力测定；

12、对所述菌种进行鉴定并保存，并将所述菌种命名为单胞菌mh002。

13、作为本发明的一种优选方案，所述第一纯化培养基的配方为：包括玉米粉10份、蔗糖10份、琼脂粉20份、蒸馏水1000份；

14、所述第二纯化培养基的配方为：按质量份计，包括玉米粉5份、琼脂粉20份、蒸馏水1000份。

15、本发明提供了一种单胞菌在促进植物生长中的应用。

16、作为本发明的一种优选方案，所述植物为农作物；

17、所述农作物包括小麦、油麦菜、速生白菜、大蒜、小黍、白萝卜、水萝卜。

18、作为本发明的一种优选方案，所述单胞菌在促进植物生长中的应用，通过以下步骤鉴定：

19、按照质量比1:2的比例份将所述菌种稀释入蒸馏水中，得到菌种混合液；

20、将所述菌种混合液在蒸馏水中稀释，得到菌种稀释液，所述菌种稀释液的浓度为0.05-0.4％；

21、取普通土壤至盆栽中，加入所述菌种稀释液，隔天将农作物种子投入至所述盆栽中进行种植，每天向所述盆栽中投入25ml所述菌种稀释液，在人工气候箱中培育农作物二十天，在二十天内每隔五天分别拍照记录所述农作物水生长形态以及根系。

22、本发明与现有技术相比较具有如下有益效果：

23、本发明提供一种从土壤中分离出的单胞菌mh002，原始材料以及培养基材易得，培养方式简单，易于实现；且在高度稀释后可直接添加至种植农作物土壤中以及植物的根系附近，实现菌株在农作物根际土壤上的定殖，通过根际微生物种群和群落多样性，改变优势物种的相对丰度，促进植物根系发育，提高农作物根系的长度，使得农作物的根系更加发达，扎根更深，使得农作物能够汲取更多养分，进而影响整个植株的生理性状，促进农作物后期的生长发育。

技术特征：

1.一种单胞菌，其特征在于，

2.根据权利要求1所述的一种单胞菌，其特征在于，

3.根据权利要求1所述的一种单胞菌，其特征在于，

4.根据权利要求1所述的一种单胞菌，其特征在于，

5.一种如权利要求1-4任意一项所述单胞菌的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

6.根据权利要求5所述的一种单胞菌的制备方法，其特征在于，

7.一种如权利要求1所述的单胞菌在促进植物生长中的应用。

8.根据权利要求7所述的一种单胞菌在促进植物生长中的应用，其特征在于，所述植物为农作物；

9.根据权利要求8所述的一种单胞菌在促进植物生长中的应用，其特征在于，所述单胞菌在促进植物生长中的应用，通过以下步骤鉴定：

技术总结
本发明公开了一种单胞菌及其制备方法和应用，制备方法包括如下步骤：配置第一纯化培养基；取土壤，将土壤溶于水中，搅拌均匀，取上层悬浮液加入至所述第一纯化培养基中进行第一次培养，在培养过程中向所述纯化培养基中加入稀土溶液作为选择剂，得到单系菌株；配置第二纯化培养基，进行高压灭菌，将所述单系菌株按照涂布培养法涂在所述第二纯化培养基中上，放入培养箱进行扩繁培养，收取菌种。该发明实现了菌种在根际土壤上的定殖，通过调节植物根系微生物群落的多样性，增加农作物益生菌的相对丰度，改善农作物根系系统性状如增加根长、根体积，降低根系直径，对于农作物植株性状具有显著的促进作用。

技术研发人员：庄雨楠,牟艳军,张英超,吴颖芊,杨婧,郭天鹏,敖日格乐毕力格,关海波,迟文峰,徐杰,孙兴辉,白秀莲
受保护的技术使用者：内蒙古财经大学
技术研发日：
技术公布日：2024/5/16