一种植物乳杆菌菌株D5205及其应用

本发明涉及一株植物乳杆菌（ lactobacillus plantarum）d5205及其在制备具有代谢胆固醇能力产品、调节人体胃肠道菌群产品中的应用，属于功能微生物。

背景技术：

1、胆固醇是人体中天然存在的物质，可增强细胞壁的生物合成和荷尔蒙的产生。人体所需的胆固醇来源于两方面，约80%为内源性胆固醇，由肝脏和肠黏膜合成，剩余少量20%为外源性胆固醇，来源于动物性食物如蛋黄、内脏等。然而，当饮食中的胆固醇变高时，可能会导致高胆固醇血症的出现。这将导致胆固醇在血管中进行积累，向心脏和大脑等重要器官供血的动脉阻塞或变窄。虽然通过饮食管理、定期运动和药物治疗可以有效降低机体胆固醇含量，但是这些药物存在价格昂贵并且伴有严重的副作用等问题。

2、益生菌是“活的微生物，在足够数量的情况下对宿主的健康有益”。其主要优点是通过改善人类宿主的肠道菌群，为宿主提供一定预防疾病的能力；改善人体肠道微生物的平衡，并提高摄入营养物质的吸收率。乳酸菌通过发酵产生的有机酸和自身的特殊酶系等物质具有特殊生理功能，例如增强肠粘膜完整性、抗高血压作用、减少过敏症状等。

技术实现思路

1、本发明提供了一株植物乳杆菌d5205，分类命名为 lactobacillus plantarum，于2023年10月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.28615，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

2、本发明另一目的是将上述植物乳杆菌d5205应用在制备具有代谢胆固醇能力产品、调节人体胃肠道功能产品中。

3、本发明目的通过以下技术方案实现：

4、1、采集昆明市寻甸县豆豉作为样品，将其用生理盐水稀释后，用mrs固体培养基涂布培养，挑取平板上的典型菌落，划线纯化培养得到纯菌落，挑取单菌落富集培养，通过沉淀圈法筛选获得1株明显具备胆盐水解酶活性的菌株d5205；

5、2、菌株d5205的鉴定

6、①菌株d5205形态学特征：革兰氏阳性菌，在mrs培养基上呈乳白色，圆形，边缘整齐，不透明，隆起，有粘性；

7、②分子鉴定：采用tiangen dp302-02 细菌基因组dna提取试剂盒 (tiangen, 中国)提取该菌株dna，经检测后送至生工生物工程股份有限公司(上海)进行序列测定，测序结果见seq id no:1所示，将测序结果与ncbi上序列进行比对；结合形态学特征和分子鉴定结果，最终将该菌株鉴定为植物乳杆菌（ lactobacillus plantarum）；

8、3、采用hplc方法检测菌株d5205的胆盐降解率；利用邻苯二甲醛法将纯化后的菌株d5205接种到含有胆固醇的mrs培养基中，分析菌株的去胆固醇能力；结果显示该菌体具备良好的代谢胆固醇潜能；

9、4、通过体外模拟胃肠道消化、耐酸耐胆盐和肠道黏附性测定发现植物乳杆菌d5205具备较好的体外定植和益生能力。

10、本发明所述产品包括药物、化妆品、食品、保健品、发酵剂、饲料中任意一种。

11、与现有技术相比，本发明具有如下优点：

12、1、本发明利用云南特色发酵食品为原料筛选食源性功能植物乳杆菌，原料安全可靠，通过沉淀圈法初步筛选出具有胆盐水解酶活性的植物乳杆菌；通过hplc和邻苯二甲醛法进一步定量分析植物乳杆菌对胆盐和胆固醇的降解能力，并且结合益生和定植特性实验，确定了该菌株具备良好的体外益生和定植特性；

13、2、本发明植物乳杆菌来源于昆明市寻甸县的豆豉，相对于市面上的洛伐他汀类药物具有成本低，来源广泛，安全性高的优点，并且传统上，副作用小，市场前景较为客观，蕴藏着较好的社会和经济效应。

技术特征：

1.一株植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）d5205，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为cgmcc no. 28615。

2.权利要求1所述的植物乳杆菌d5205在制备具有代谢胆固醇能力产品中的应用。

3.权利要求1所述的植物乳杆菌d5205在制备调节人体胃肠道功能产品中的应用。

技术总结
本发明公开了一株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）D5205，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.28615；其对胆盐降解率和胆固醇的去除能力分别达到30%和40%以上，本发明通过体外模拟胃肠道消化、耐酸耐胆盐和肠道黏附性测定发现植物乳杆菌D5205具备较好的定植能力和益生特性，同时，植物乳杆菌D5205筛选于昆明市寻甸县豆豉，作为食源性微生物具有安全性高的优点，植物乳杆菌D5205在降胆固醇方面具有较好的开发利用前景。

技术研发人员：王艳菲,张小希,蔡圣宝,刘志佳,易俊洁
受保护的技术使用者：昆明理工大学
技术研发日：
技术公布日：2024/3/12