一种血栓弹力图肝素酶杯、及制备方法和应用与流程

本发明涉及医疗器械，具体而言，涉及一种血栓弹力图肝素酶杯、及制备方法和应用。

背景技术：

1、1948年德国人hartert发明的一种全血粘弹性检测技术，粘弹性检测的本质是对阻力或摩擦力的记录，通过在模拟人体体内环境中全血标本的血液粘弹性变化来反映血液凝固的动态变化，用物理学原理监测从凝血因子激活到形成血小板-纤维蛋白、血小板聚集、形成稳定的血凝块再到纤维蛋白溶解的过程，以此来反映血凝块形成的速率、强度及稳定性(纤溶水平)，这是对凝血与纤溶的全过程进行功能性评估。可以实时连续反映除血管因素外所有血液成分参与的整个的凝血过程，以此判断患者出血及血栓的风险。能更敏感更全面评估凝血的异常状态，预测患者出血与死亡的风险，有利于临床医生清晰明确的制定输血策略、指导合理用药及抗血栓等临床治疗，可有效控制患者的死亡率。

2、肝素作为一种抗凝剂，在体内外都具有良好的抗凝效果。肝素能够与抗凝血酶(at)结合，催化灭活凝血因子iia，xa，ixa，xia和xiia。在没有肝素存在的情况下，at灭活凝血因子的速度非常缓慢，肝素可以和at的赖氨酸部位结合，使抗凝血酶的精氨酸反应中心构象发生改变，at由慢性凝血酶抑制剂变为快速抑制剂，灭活凝血因子的速度增加1000～2000倍。所以肝素的介入使血栓弹力图中的参数r时间显著延长。肝素酶是一类能够降解肝素类物质的裂解酶，在含有肝素的样本中加入肝素酶便可以将肝素降解，血凝时间r恢复正常。

3、现有技术cn201711158201.4公开了一种肝素酶杯，包括：杯体和肝素酶冻干制剂。还公开了一种肝素酶冻干制剂的方法，包括：将含有预定比例的所述肝素酶、所述保护剂、所述缓冲盐和所述防腐剂的水溶液依次进行预冻处理、升华处理和干燥处理，以便获得所述肝素酶冻干制剂。

4、现有技术cn201811632170.6公开了一种肝素检测试剂盒及其应用，该肝素检测试剂盒包括有肝素检测试剂，肝素检测试剂包括有肝素酶i，长期保存需要进行冻干后固体保存，而在肝素酶i中加入一定量的无水氯化钙、丙三醇以及d-海藻糖能够作为保护剂使检测检测试剂长期稳定地存在，达到可以长期保存的要求。

5、上述现有技术中，肝素酶激活剂，氯化钙分装两个冻存管，分装液体量少，贴壁在冻存管内部，稳定性差，操作复杂；为了解决上述问题，本发明提供了一种血栓弹力图肝素酶杯，该检测操作方便，样本与激活剂混匀更加充分、冻干球保存期限更久，稳定性更强等试剂性能，大大提高了临床样本检测的准确性，同时有效解决了现有同类试剂保质期短、需要冻干操作、试剂复溶不完全、液体试剂干涸等问题。

技术实现思路

1、本发明首先提供了一种血栓弹力图肝素酶杯，其包含试剂卡，所述试剂卡包含样本仓、微流通道、定量室、激活剂通道、检测通道和废液仓，所述样本仓与所述微流通道连通，所述微流通道与所述定量室连通，所述定量室与所述废液仓连通；所述定量室与所述激活剂通道、所述检测通道连通，所述微流通道与所述三个通道连通；

2、所述三个通道分别设置含有激活剂包被的冻干球和氯化钙包被的冻干球；含有肝素酶包被的冻干球和氯化钙包被的冻干球；和空通道；

3、任选地，所述冻干球中包含冻干保护剂，所述保护剂包含甘露醇、peg8000、海藻糖、葡聚糖、牛血清白蛋白、proclin300。

4、优选的，所述试剂卡还包括样品杯。

5、优选的，所述冻干球采用液氮预冷冻的技术，将上述激活剂、肝素酶、氯化钙分别进行冻干，存储在试剂卡芯片中，进行真空铝箔袋双层密封。

6、优选的，所述真空铝箔袋材料为pp、pet、al、cpe、ny中的两种或者三种。

7、优选的，所述冻干球的直径为1-4mm。

8、优选的，所述冻干球分装在芯片中直接进行高温热压焊接，温度为100-150℃，热压焊接时间为1-20s。

9、优选的，所述激活剂包括鞣花酸、高岭土、硅藻土、白陶土中的一种或几种混合；

10、任选地，所述激活剂配制的质量体积终浓度为0.01-0.05mg/ml；

11、任选地，所述肝素酶为肝素酶i，所述肝素酶i配制的质量体积终浓度为0.5-5iu/ml；

12、任选地，氯化钙的摩尔体积比终浓度为0.2m。

13、优选的，所述保护剂包含甘露醇15％、peg8000 3％、海藻糖6％、葡聚糖2％、牛血清白蛋白1％、proclin300 0.05％。

14、本发明还提供了上述的血栓弹力图肝素酶杯的制备方法，包含以下步骤：

15、(1)制备含有激活剂包被的冻干球、氯化钙包被的冻干球、肝素酶包被的冻干球；

16、(2)组装冻干球和试剂卡。

17、本发明还提供了上述的血栓弹力图肝素酶杯的应用，所述应用为a)制备检测试剂或试剂盒；或b)检测血管栓塞性疾病的方法，所述方法任选地用于非诊断目的或者非治疗目的。

18、本发明与现有技术相比，至少具有如下有益效果：

19、1.本发明提供的肝素酶杯冻干球的制备工艺制备的冻干球外观：呈球状，圆润，光滑。

20、2.本发明提供的肝素酶杯冻干球的制备工艺制备的冻干球水分含量低，复溶性好，避免水分高影响冻干球浓度的稳定性，提高冻干球性能的稳定性。

21、3.本发明提供的肝素酶杯冻干球的制备有效解决了现有同类试剂冷链运输和低温保存，储存效期短等问题。

22、4.采用全封闭的配套仪器配合完成检测，期间只需将采集的枸橼酸钠抗凝的静脉全血采血管插入到试剂卡内，即可实现全血直接操作，不需要人工加样等复杂程序，只需等待30min即可显示结果，操作简便，检测快速；

23、5.同时解决了检测过程中血栓弹力图普通检测样品杯中内表面与血块粘附脱落的问题，提高了血栓弹力图普通凝血检测的准确性及稳定性，为临床诊断提供可靠依据。

技术特征：

1.一种血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，其包含试剂卡，所述试剂卡包含样本仓、微流通道、定量室、激活剂通道、检测通道和废液仓，所述样本仓与所述微流通道连通，所述微流通道与所述定量室连通，所述定量室与所述废液仓连通；所述定量室与所述激活剂通道、所述检测通道连通，所述微流通道与所述三个通道连通；

2.根据权利要求1所述的血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，所述试剂卡还包括样品杯。

3.根据权利要求1所述的血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，所述冻干球采用液氮预冷冻的技术，将上述激活剂、肝素酶、氯化钙分别进行冻干，存储在试剂卡芯片中，进行真空铝箔袋双层密封。

4.根据权利要求3所述的血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，所述真空铝箔袋材料为pp、pet、al、cpe、ny中的两种或者三种。

5.根据权利要求3所述的血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，所述冻干球的直径为1-4mm。

6.根据权利要求3所述的血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，所述冻干球分装在芯片中直接进行高温热压焊接，温度为100-150℃，热压焊接时间为1-20s。

7.根据权利要求1所述的血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，所述激活剂包括鞣花酸、高岭土、硅藻土、白陶土中的一种或几种混合；

8.根据权利要求1所述的血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，所述保护剂包含甘露醇15％、peg8000 3％、海藻糖6％、葡聚糖2％、牛血清白蛋白1％、proclin300 0.05％。

9.一种如权利要求1-8任一所述的血栓弹力图肝素酶杯的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)制备含有激活剂包被的冻干球、氯化钙包被的冻干球、肝素酶包被的冻干球；

10.一种如权利要求1-8任一所述的血栓弹力图肝素酶杯的应用，其特征在于，所述应用为a)制备检测试剂或试剂盒；或b)检测血管栓塞性疾病的方法，所述方法任选地用于非诊断目的或者非治疗目的。

技术总结
本发明公开了一种血栓弹力图肝素酶杯，其特征在于，其包含试剂卡，所述试剂卡包含样本仓、微流通道、定量室、激活剂通道、检测通道和废液仓，所述样本仓与所述微流通道连通，所述微流通道与所述定量室连通，所述定量室与所述废液仓连通；所述定量室与所述激活剂通道、所述检测通道连通，所述微流通道与所述三个通道连通；所述三个通道分别设置含有激活剂包被的冻干球和氯化钙包被的冻干球；含有肝素酶包被的冻干球和氯化钙包被的冻干球；和空通道。本发明提供的冻干球有效解决了冷链运输和低温保存，储存效期短等问题。采用全封闭的配套仪器配合完成检测，期间只需将采集的枸橼酸钠抗凝的静脉全血采血管插入到试剂卡内，可直接操作，操作简便，检测快速。

技术研发人员：潘志红,陈永强,余占江,潘冰,孙日桐,高巍巍,辛玉龙
受保护的技术使用者：普迈德（北京）科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24