一种鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒不同流行毒株的引物及试剂盒

文档序号:37337208发布日期:2024-03-18 18:03阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株的引物,其特征在于,包括核苷酸序列如seq id no:1所示的正向引物和核苷酸序列如seq id no:2所示的反向引物。

2.权利要求1所述引物在制备鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株中的试剂盒中的应用。

3.根据权利要求2所述应用,其特征在于,所述鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株的pcr反应体系为20μl,包括以下组分:2×pcr mastermix 10μl、10μmol/ml上下游引物各1.6μl、cdna2μl和ddh2o 4.8μl。

4.根据权利要求2所述应用,其特征在于,所述鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株的pcr反应程序为95℃预变性3min;94℃变性30s,56℃退火30s,72℃延伸1min 15s,40个循环;72℃延伸5min。

5.根据权利要求2所述应用,其特征在于,所述引物扩增prrsv经典毒株的目标片段长度为1072bp;

6.根据权利要求5所述应用,其特征在于,所述引物扩增prrsv经典毒株的目标片段的核苷酸序列如seq id no:5所示;

7.一种鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述引物和pcr检测试剂。

8.根据权利要求7所述试剂盒,其特征在于,所述pcr检测试剂包括2×pcr mastermix。

9.根据权利要求8所述试剂盒,其特征在于,还包括反转录试剂和阳性标准品。

10.根据权利要求9所述试剂盒,其特征在于,所述阳性标准品包括以下至少一种:含所述引物扩增prrsv经典毒株的目标片段的重组质粒、包含有所述引物扩增高致病毒株的目标片段的重组质粒、包含所述引物扩增类nadc30毒株的目标片段的重组质粒、包含所述引物扩增类nadc34毒株的目标片段的重组质粒;


技术总结
本发明提供了一种鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒不同流行毒株的引物及试剂盒,属于基因检测技术领域。本发明提供了一种鉴别PRRSV经典毒株、高致病毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株的引物,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的反向引物,实现一对引物即可鉴别4类毒株的目的,极大地提高基层兽医实验室的检测效率,并进行了临床样品检测的应用评价,以期为PRRSV不同毒株的快速鉴别诊断和PRRS的防控提供技术支撑。

技术研发人员:王金涛,师源,蹇艳银,倪民婷,张耕馨,张佳怡,卢淳
受保护的技术使用者:黑龙江八一农垦大学
技术研发日:
技术公布日:2024/3/17
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