一株枯草芽孢杆菌ZF504及其在防治西葫芦根腐病中的应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及一株枯草芽孢杆菌zf504及其在防治西葫芦根腐病中的应用。

背景技术：

1、西葫芦(cucurbita pepo l.)为葫芦科南瓜属的一年生草本植物，同时也是南瓜属重要蔬菜作物。近年来，随着西葫芦在我国种植面积和产量的逐年增加，其在极大程度上增加了农民收入的同时对农业结构调整也具有重大意义。但随着连作、种植时间的延长，土传病害的发生率逐年上升，其中，西葫芦根腐病成为西葫芦常见和毁灭性病害，表现在根部症状初呈水渍状，随后变为浅褐色湿腐状，后期病部往往变褐，韧皮部腐烂，组织破碎，仅留下维管束。近年来，该病更表现出发病早、蔓延速度快、为害大等特征，严重影响了西葫芦的生产和效益，是急需解决的问题之一。

2、目前，对于西葫芦根腐病的防治主要是采用化学农药以及利用抗病品种进行防治，但抗病种植资源有限、选育抗病品种周期长，化学防治主要是通过化学杀菌剂来杀死或抑制病原菌生长达到防治效果，西葫芦镰孢菌根腐病在苗床和大田期均可发生，因此需要多次施用才能达到一定的防治效果，但长期使用化学药剂会造成环境污染、农药残留、病原菌产生抗药性等问题以及长期大量使用化学农药还可加速病菌群体遗传结构生理分化和变异。近年来，利用有益微生物防控植物病害具有作用良好、生态安全性高及经济效益显著等优点，符合绿色、安全的植物保护理念，是目前降低化学农药使用、提高农业生产可持续性的一种理想替代手段，因此，选择生物防治逐渐成为了热点。但是挖掘具有生防潜质的微生物资源成为了目前植物保护领域的重要研究方向。因此，迫切需要筛选出可用于防治西葫芦根腐病的生防菌，为西葫芦根腐病生物制剂的开发提供优质生防菌源，为蔬菜病害生物防控奠定理论基础。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是如何提高植物抗病能力、抑制或防治植物的侵染性病害。

2、为解决上述技术问题，本发明首先提供了一株枯草芽孢杆菌。

3、本发明提供的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)zf504，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为cgmcc no.24584。

4、本发明还提供了一种菌剂，所述菌剂含有前文所述的枯草芽孢杆菌和/或所述枯草芽孢杆菌的代谢物；

5、上述菌剂可为菌剂为病原菌抑制剂或病害抑制剂，所述病原菌可为茄病镰孢菌(fusarinm solani)；所述病害为西葫芦根腐病。

6、本发明还提供了培养前文所述枯草芽孢杆菌的方法，包括将所述枯草芽孢杆菌在用于培养枯草芽孢杆菌的培养基中培养的步骤。

7、本发明还提供了前文所述菌剂的制备方法，包括如下步骤：将前文所述的枯草芽孢杆菌作为活性成分，得到所述菌剂。

8、上述菌剂的活性成分可为上述枯草芽孢杆菌和/或上述枯草芽孢杆菌的代谢物，上述菌剂的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分，上述菌剂的其他活性成分本领域技术人员可根据对病害的抑制效果确定。

9、上文中，所述代谢物可从所述枯草芽孢杆菌的发酵液中获得。所述代谢物可为所述枯草芽孢杆菌的无菌代谢物或所述枯草芽孢杆菌的含菌代谢物。所述枯草芽孢杆菌的无菌代谢物(无菌发酵滤液)具体可按照如下方法制备：在液体培养基中培养所述枯草芽孢杆菌，过滤除去液体培养物(发酵液)中的所述枯草芽孢杆菌即得到所述枯草芽孢杆菌的无菌代谢物。所述枯草芽孢杆菌的含菌代谢物具体可按照如下方法制备：在液体发酵培养基中培养所述枯草芽孢杆菌，收集发酵液，该发酵液即为所述枯草芽孢杆菌的含菌代谢物。

10、上述菌剂中，除所述活性成分外，还含有载体。所述载体可为农药或肥料领域常用的且在生物学上是惰性的载体。所述载体可为固体载体或液体载体；所述固体载体可为矿物材料、植物材料或高分子化合物；所述矿物材料可为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述植物材料可为玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一种；所述高分子化合物可为聚乙烯醇和/或聚二醇；所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水；所述有机溶剂可为癸烷和/或十二烷。

11、上述菌剂可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。

12、根据需要，上述菌剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、ph调节剂等。

13、本发明还提供了前文所述的枯草芽孢杆菌在制备下述任一种产品中的应用：

14、1)用于防治植物病害的菌剂，所述病害为西葫芦根腐病；

15、2)病原菌抑制剂，所述病原菌为茄病镰孢菌(fusarinm solani)。

16、本发明还提供了生物有机肥，所述生物有机肥含有前文所述枯草芽孢杆菌或所述含有前文所述的枯草芽孢杆菌和/或所述枯草芽孢杆菌的代谢物的菌剂。

17、本发明还提供了前文所述枯草芽孢杆菌或所述含有前文所述的枯草芽孢杆菌和/或所述枯草芽孢杆菌的代谢物的菌剂在西葫芦根腐病防治中的应用。

18、本发明还提供了前文所述枯草芽孢杆菌或所述含有前文所述的枯草芽孢杆菌和/或所述枯草芽孢杆菌的代谢物的菌剂在提高西葫芦产量中的应用。

19、本发明还提供了一种防治西葫芦根腐病的方法，包括在西葫芦苗期灌注前文所述枯草芽孢杆菌或所述含有前文所述的枯草芽孢杆菌和/或所述枯草芽孢杆菌的代谢物的菌剂。

20、本文中，所述防治西葫芦根腐病具体可为防治西葫芦茄病镰孢根腐病。

21、本发明所筛选的枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)zf504菌悬液对西葫芦根腐病具有很好的防效作用，无论是室内活体盆栽试验、还是田间活体试验，对西葫芦根腐病都具有稳定的防治效果。

22、选择菌株zf504与已经登记的对西葫芦根腐病有稳定防效的商品芽孢杆菌制剂进行比较，结果显示：本发明的枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)zf504具有对西葫芦根腐病稳定的防治作用，且防效远远高于已登记的商品制剂。因此该枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)zf504在农业防治方面具有极大的应用价值，为扩大生防菌制剂奠定基础；作为一种选择性强、无污染、对环境友好的生防菌株，病原菌不易产生抗药性，对非靶标生物及人畜安全，能够保证农产品的高品质，符合可持续发展的要求，其研究和市场应用前景广阔。

技术特征：

1.枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)zf504，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为cgmcc no.24584。

2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌和/或所述枯草芽孢杆菌的代谢物；

3.培养权利要求1所述枯草芽孢杆菌的方法，包括将所述枯草芽孢杆菌在用于培养枯草芽孢杆菌的培养基中培养的步骤。

4.权利要求2所述菌剂的制备方法，包括如下步骤：将权利要求1所述的枯草芽孢杆菌作为活性成分，得到所述菌剂。

5.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在制备下述1)或2)的产品中的应用：

6.生物有机肥，其特征在于：所述生物有机肥含有权利要求1所述枯草芽孢杆菌或权利要求2所述的菌剂。

7.权利要求1所述枯草芽孢杆菌或权利要求2所述的菌剂在西葫芦根腐病防治中的应用。

8.权利要求1所述枯草芽孢杆菌或权利要求2所述的菌剂在提高西葫芦产量中的应用。

9.一种防治西葫芦根腐病的方法，包括在西葫芦苗期灌注权利要求1所述枯草芽孢杆菌或权利要求2所述的菌剂。

技术总结
本发明公开了一株枯草芽孢杆菌ZF504及其在防治西葫芦根腐病中的应用。本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株枯草芽孢杆菌ZF504及其在防治西葫芦根腐病中的应用。本发明的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZF504，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.24584。与对照药剂40％多菌灵悬浮剂对西葫芦根腐病的防效为31.34％相比，ZF504对西葫芦根腐病防治效果最好，防效高达89.55％，菌株ZF504对西葫芦根腐病的防效远远高于商品药剂，具有开发为商品制剂的潜质，具有极大的应用价值。

技术研发人员：谢学文,李宝聚,闫丽霞,李磊,高素芹,杨静静,石延霞,柴阿丽,范腾飞
受保护的技术使用者：中蔬生物科技（寿光）有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/27