一种细胞外基质蛋白在修复皮肤的化妆品中的应用的制作方法

本技术涉及生物领域和化妆品领域，具体的涉及一种细胞外基质蛋白在修复皮肤的化妆品中的应用。

背景技术：

1、皮肤衰老包括外源性和内源性两方面的因素。内源性衰老主要跟基因、年龄、激素等有关。而外源性因素主要来源于环境因素的不良影响，如：地域与气候、不良生活习惯、精神压力、污染等。而对皮肤，这个直接跟外界接触的器官来说，日光辐射导致皮肤衰老则成为它最主要致老因素。甚至有专家认为，80-90％的皮肤衰老来自于外源性的光辐射。老年斑(晒斑)就是外源性衰老的代表作。可见，跟身体其他组织、器官的衰老速度相比，皮肤的衰老是超前的，与其他组织器官不同步的。但是无论是内源性还是外源性的致老因素最终基本上都是通过氧离子自由基(ros)和ecm蛋白糖化两条途径，产生对ecm的破坏，而导致皮肤衰老的结果。

2、细胞外基质ecm是由细胞合成并分泌到细胞外，分布在细胞表面或细胞之间的大分子物质，支持并连接组织结构，调节细胞生长和细胞生理活动，在机体发育、组织动态平衡和创面修复中其到重要的作用。成纤维细胞是ecm中最重要的细胞。他们负责生成ecm中所有的成分，如胶原纤维、蛋白聚糖以及上百种蛋白质，包括生长因子及其他生物活性分子。因此，成纤维细胞的行为和状态跟皮肤的青春状态有着直接的关系。

3、众所周知，维持细胞外基质(ecm)的功能对皮肤健康至关重要，它在肌肤中具有四个主要的功能：提供肌肤弹性、紧实、强壮的支撑结构，促进细胞间的沟通，适当的分隔细胞，和促进细胞间的动态变化(包括细胞的移动、生长、分化等)。随着年龄的增长和外界环境因素的影响，细胞外基质结构组成会逐渐分解，导致皮肤松弛，出现皱纹，失去弹性。

4、其中胶原蛋白、纤连蛋白和糖胺聚糖对维护肌肤健康和年轻扮演着举足轻重的角色。胶原蛋白为肌肤提供充足的支撑骨架，避免组织塌陷产生皱纹；纤连蛋白可维持细胞间的粘连，紧致肌肤；糖胺聚糖具有吸引水分子的作用，可以帮助肌肤保留水分，保持肌肤的弹性，而玻尿酸(透明质酸)就是糖胺聚糖的其中一种；若要维持肌肤的平滑、澎润和紧致，在细胞外基质中维持这些蛋白质和基础介质充足的含量非常关键。

5、近年来，科学家们在有关ecm的研究中发现了一个有趣的现象。如果把一个弱小、衰老的成纤维细胞植入青春状态的真皮(ecm)中，这个“衰老”的成纤维细胞会逐渐焕发了青春，并呈现出跟年轻的成纤维细胞相近的活力；相反，如果将一个年轻的成纤维细胞植入衰老的真皮中，这个细胞便很快失去了它的活力，变得萎缩、迟缓，衰退，并失去了再生能力。21世纪以来干细胞应用的兴起，人们也发现，在ecm异常的情况下，直接植入干细胞，不仅成活率低，也没能收获可靠的效果。相反，利用健康的ecm，在类似情况下却体现了较高的疗效。比如说，近些年来利用prp来治疗毛发重生和皮肤抗衰，实际上就是利用自身血浆(ecm)库存的生长因子，来促使皮肤再生(抗老)和毛发的再生。

6、ecm在创伤和慢性伤口愈合方面的应用上，人们还发现，提供健康的ecm可以加速原本有愈合障碍的伤口的愈合，加速和提高皮肤移植的成活率、愈合速度和质量。以上的实例都提醒了我们，皮肤衰老和修复障碍的主要问题很可能不在于成纤维细胞本身，而是跟它们生活的ecm有着直接的关系。

7、cn106794227b提供了使用胎盘组织(例如，人胎盘组织)制备的细胞外基质(ecm)组合物。ecm组合物包含约30％-约60％的胶原蛋白和约10％-约35％的弹性蛋白。cn113164645a一种从罗非鱼(尼罗罗非鱼)的皮肤中获得细胞外基质的方法，该方法包括以下步骤：化学和酶促脱细胞、脱毒、化学消毒、交联、漂白、脱水和通过γ辐射灭菌，更具体地，每个所述程序包括的步骤以及所述细胞外基质在治疗组织破裂；皮炎；急性、慢性和创伤性损伤；战场伤口；坏死性伤口；撕裂伤；擦伤；挫伤；和其他病变和病状中的用途。本发明属于药学、医学和兽医学、牙医学、化学、组织工程学、分子生物学和生物技术领域。

8、cn115634169a提供了一种细胞外基质β-肌聚糖蛋白在修复激素依赖皮肤的化妆品中的应用，涉及保养品技术领域，旨在解决现有技术中易使患者产生激素依赖、延缓肌肤衰老效果不好的问题，采用的技术方案是，通过在β-肌聚糖蛋白中添加β-葡聚糖、弹性蛋白、血清蛋白、酵母β-葡聚糖，应用在化妆品中，能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量，能够延缓肌肤衰老进程，使皮肤内弹性纤维增多、减少弹性纤维分解，令肌肤更加富有弹性，减缓皮肤松弛、下垂、细皱纹的产生进程，使肌肤内的营养增多，使皮肤减少干燥、降低皮肤敏感性并减少色斑产生。虽然现有技术中已有使用细胞外基质制备药物或者化妆品，但是有效的用于皮肤修复的化妆品还有待于进一步的开发和研究。

技术实现思路

1、黄鳝中含有丰富的抗氧化物质,发明人通过研究发现，从黄鳝皮中通过分子对接技术筛选鉴定了具有较好抗氧化特性的多肽，命名为hs-sod，其氨基酸序列如seq id no：1所示。

2、本发明的所述的多肽还可以被保守性取代，同时仍然保持相应的活性。

3、所述的多肽hs-sod能够较好的抗氧化特性，进而促进人表皮角质形成细胞的增殖同时促进人表皮角质形成细胞分泌胶原蛋白和ecm。将所述的多肽与ecm组合使用后能够有效的促进小鼠皮肤抗氧化特性，具有较好的应用前景。

4、一方面，本发明提供一种促进皮肤修复的组合物，所述组合物含有本发明的抗氧化特性的多肽hs-sod以及细胞外基质蛋白ecm。

5、进一步的，本发明还提供了一种促进皮肤抗氧化功效的化妆品，所述化妆品含有本发明的抗氧化特性的多肽hs-sod以及细胞外基质蛋白ecm。

6、进一步的，所述的ecm是通过人表皮角质形成细胞来生长制备的。

7、所述的制备过程是将人表皮角质形成细胞在含有所述的抗氧化多肽的培养基中培养后制备获得的。

8、其中ecm蛋白包含α-1-抗蛋白酶、α-2-hs-糖蛋白、α-2-hs-糖蛋白前体、α-2-巨球蛋白、α-辅肌动蛋白-1、膜联蛋白a2、双糖链蛋白聚糖、陷窝蛋白-1、胶原蛋白α-1(i)、胶原蛋白α-1(ii)、胶原蛋白α-1(iii)、胶原蛋白α-1(vi)、胶原蛋白α-1(xii)、胶原蛋白α-1(xiv)、胶原蛋白α-2(i)、胶原蛋白α-2(v)、胶原蛋白α-2(vi)、胶原蛋白α-3(vi)、i型胶原蛋白、iii型胶原蛋白、iv型胶原蛋白、v型胶原蛋白、vi型胶原蛋白、饰胶蛋白聚糖、延伸因子1-α、emilin-1、内质蛋白、纤维蛋白原、纤连蛋白、纤蛋白-1(fibulin-1)、纤蛋白-2(fibulin-2)、半乳凝素-1-智人(人)、干扰素诱导的gtp结合蛋白、核纤层蛋白-a/c、层粘连蛋白、lim结构域和肌动蛋白结合蛋白1、穿透素相关蛋白、骨膜蛋白(periostin)、骨膜蛋白前体(pn)、串珠蛋白聚糖(perlecan)、纤溶酶原、网蛋白、抑制蛋白-1、橡胶延伸因子蛋白、丝氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶抑制蛋白h1、血清白蛋白、黏结蛋白聚糖-1、腱生蛋白前体(tn)(人)、血小板应答蛋白-1、转化生长因子-β诱导蛋白、转凝蛋白、波形蛋白中的一种或多于一种。实施方案18是实施方案1或5的ecm蛋白提取物，其中原本存在于ecm中的全部或部分已去除的可溶性蛋白质包括α-1-抗蛋白酶、α-2-hs-糖蛋白、α-2-hs-糖蛋白前体、α-2-巨球蛋白、α-辅肌动蛋白-1、膜联蛋白a2、双糖链蛋白聚糖、陷窝蛋白-1、胶原蛋白α-1(i)、胶原蛋白α-1(ii)、胶原蛋白α-1(iii)、胶原蛋白α-1(vi)、胶原蛋白α-1(xii)、胶原蛋白α-1(xiv)、胶原蛋白α-2(i)、胶原蛋白α-2(v)、胶原蛋白α-2(vi)、胶原蛋白α-3(vi)、i型胶原蛋白、iii型胶原蛋白、iv型胶原蛋白、v型胶原蛋白、vi型胶原蛋白、饰胶蛋白聚糖、延伸因子1-α、emilin-1、内质蛋白、纤维蛋白原、纤连蛋白、纤蛋白-1、纤蛋白-2、半乳凝素-1-智人(人)、干扰素诱导的gtp结合蛋白、核纤层蛋白-a/c、层粘连蛋白、lim结构域和肌动蛋白结合蛋白1、穿透素相关蛋白、骨膜蛋白、骨膜蛋白前体(pn)、串珠蛋白聚糖、纤溶酶原、网蛋白、抑制蛋白-1、橡胶延伸因子蛋白、丝氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶抑制蛋白h1、血清白蛋白、黏结蛋白聚糖-1、腱生蛋白前体(tn)(人)、血小板应答蛋白-1，转化生长因子-β诱导蛋白、转凝蛋白、波形蛋白等物质。

9、有益效果

10、本发明从黄鳝皮中通过分子对接技术筛选鉴定了具有较好抗氧化特性的多肽hs-sod，所述的多肽hs-sod具有较好的抗氧化特性，进而促进人表皮角质形成细胞的增殖同时促进人表皮角质形成细胞分泌胶原蛋白和ecm。将所述的多肽与ecm组合使用后能够协同有效的促进小鼠皮肤抗氧化特性。所述多肽与ecm组合使用能够制备成为化妆品或者药物，具有较好的应用前景。